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實(shí)驗(yàn)28家兔呼吸運(yùn)動的調(diào)節(jié)浙江中醫(yī)藥大學(xué)1.摘要目的觀察血液中化學(xué)因素(PCO2、PO2、[H﹢])改變對家兔呼吸頻率、節(jié)律、通氣量的影響及機(jī)制。觀察迷走神經(jīng)在家兔呼吸運(yùn)動調(diào)節(jié)中的作用及機(jī)制。學(xué)習(xí)氣管插管術(shù)和神經(jīng)血管分離術(shù)。方法通過增大CO2分壓,增大無效腔,快速注射2%乳酸,先后切斷兩側(cè)迷走神經(jīng),以及電刺激迷走神經(jīng)中樞端,觀察呼吸運(yùn)動的改變情況。結(jié)果增大無效腔氣量、提高PCO2、注射乳酸均可使家兔呼吸加深加快,而剪斷一側(cè)及兩側(cè)迷走神經(jīng)、電刺激迷走神經(jīng)中樞端則使呼吸變淺、頻率變慢。結(jié)論增加PCO2,增大無效腔,快速注射乳酸后,可使家兔通氣量、呼吸頻率及平均呼吸深度明顯增加;剪斷一側(cè)迷走神經(jīng)對呼吸運(yùn)動影響不大,剪斷雙側(cè)迷走神經(jīng),呼吸變慢變深。2.材料和方法2.1材料家兔;CO2,氨基甲酸乙酯,乳酸;呼吸換能器;微機(jī)生物信號采集處理系統(tǒng)。2.2方法2.2.1實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)連接及參數(shù)設(shè)置用膠管連接流量頭與氣管插管,流量頭連接呼吸流量換能器。呼吸換能器輸出線連接微機(jī)生物信號處理系統(tǒng)。打開RM6240系統(tǒng):點(diǎn)擊“實(shí)驗(yàn)”菜單,選擇“呼吸運(yùn)動調(diào)節(jié)”,儀器參數(shù):通道時間常數(shù)為直流,濾波頻率30Hz,靈敏度10cmH2O(或50ml/s),采樣頻率800Hz,掃描頻率1s/div。連續(xù)單刺激方式,刺激強(qiáng)度5-10V,刺激波寬2ms,刺激頻率30Hz。2.2.2麻醉固定家兔稱重后,按1g/kg體重劑量耳緣靜脈注射200g/L氨基甲酸乙酯。待兔麻醉后,將其仰臥,先后固定四肢及兔頭。2.2.3手術(shù)剪去頸前被毛,頸前正中切開皮膚6-7cm,直至下頜角上1.5cm,用止血鉗鈍性分離組織及頸部肌肉,暴露氣管及與氣管平行的左、右血管神經(jīng)鞘,細(xì)心分離兩側(cè)鞘膜內(nèi)迷走神經(jīng),在迷走神經(jīng)下穿線備用。分離氣管,在氣管下兩根粗棉線備用。2.2.4氣管插管在甲狀軟骨下約1cm處,做倒“T”形剪口,用棉簽將氣管切開及氣管里的血液和分泌物擦凈,氣管插管由剪口處向肺端插入,插時應(yīng)動作輕巧,避免損傷氣管粘膜引起出血,用意粗棉線將插管口結(jié)扎固定,另一棉線在切口的頭端結(jié)扎止血。2.3實(shí)驗(yàn)觀察2.3.1記錄正常呼吸曲線啟動生物信號采集處理系統(tǒng)記錄按鈕,記錄一段正常呼吸運(yùn)動曲線作為對照。辨認(rèn)曲線上吸氣、呼氣的波形方向(呼氣曲線向上、吸氣曲線向下)。2.3.2增加吸入氣中CO2分壓待呼吸曲線恢復(fù)正常,將CO2導(dǎo)管口使氣體沖入氣管插管,是家兔吸入較高濃度CO2的空氣。待家兔呼吸運(yùn)動增強(qiáng)后,立即移去CO2氣體導(dǎo)管。待呼吸正常后再做下一步實(shí)驗(yàn)。2.3.3在氣管插管一個側(cè)管上接一根長50cm膠管(流量法:接通氣口),觀察和記錄呼吸運(yùn)動的變化。2.3.4
增加血液中[H+]
耳緣靜脈緩慢注入3%乳酸溶液2ml,觀察呼吸運(yùn)動的變化。2.3.5
迷走神經(jīng)對呼吸運(yùn)動的調(diào)節(jié)作用分別觀察切斷一側(cè)迷走神經(jīng)和切斷兩側(cè)迷走神經(jīng)以后呼吸運(yùn)動的變化。以5-10V強(qiáng)度,15-30Hz,2ms波寬的連續(xù)電脈沖間斷刺激迷走神經(jīng)中樞端,觀察呼吸運(yùn)動較之切斷前有何改變。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖一正常呼吸曲線圖二增加吸入氣中CO2分壓后的呼吸變化曲線4.2無效腔是指未進(jìn)行氣體交換的一部分肺泡容量,包括解剖無效腔和肺泡無效腔。且肺泡通氣量=(潮氣量﹣無效腔氣量)×呼吸頻率,所以當(dāng)給家兔氣管插管的側(cè)管連接50cm長的膠管時,增大了解剖無效腔,使肺泡通氣量減少,因此家兔通過調(diào)節(jié)增大潮氣量即呼吸加深,增加呼吸頻率是肺泡通氣量保持不變,維持正常呼吸。 4.3動脈血[H﹢]增加,呼吸加深加快,肺通氣量增加;[H﹢]降低,呼吸受到抑制。H﹢對呼吸的調(diào)節(jié)也是通過外周化學(xué)感受器和中樞化學(xué)感受器實(shí)現(xiàn)的。中樞化學(xué)感受器對H﹢的敏感性較外周的高,約為外周的25倍。但是,H﹢通過血液屏障的速度慢,限制了它對中樞化學(xué)感受器的作用。所以以外周化學(xué)感受器的途徑為主。4.4切斷一側(cè)迷走神經(jīng)后,由于這一側(cè)迷走神經(jīng)的神經(jīng)沖動傳遞受阻,使得呼吸運(yùn)動的調(diào)節(jié)受阻;隨后由于迷走神經(jīng)為混合神經(jīng),另一側(cè)迷走神經(jīng)將起到呼吸調(diào)節(jié)作用,此時發(fā)揮負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用,加速吸氣和呼氣活動的交替,即呼吸頻率加快。4.5肺牽張反射的肺擴(kuò)張反射的作用在于阻抑吸氣過長過深,促使吸氣及時轉(zhuǎn)入呼氣。肺擴(kuò)張反射的感受器位于從氣管到細(xì)支氣管的平滑肌中,當(dāng)吸氣時肺擴(kuò)張牽拉呼吸道,感受器興奮,沖動經(jīng)迷走神經(jīng)傳入延髓,在延髓內(nèi)通過一定的神經(jīng)聯(lián)系是吸氣切斷機(jī)制興奮,切斷吸氣,轉(zhuǎn)入呼氣。這樣便加速了吸氣向呼氣轉(zhuǎn)換,使呼吸頻率增加。所以切斷兩側(cè)迷走神經(jīng)后,吸氣延長、加深,呼吸變得深而慢4.6當(dāng)用5V的電脈沖刺激迷走神經(jīng)中樞端時,相當(dāng)于恢復(fù)了迷走神經(jīng)的功能,又由于刺激電壓過大,使呼吸頻率顯著加快,呼吸也由此變
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