DB22-T 3455-2023 分蘗洋蔥中洋蔥黃矮病毒檢測 實時熒光PCR法_第1頁
DB22-T 3455-2023 分蘗洋蔥中洋蔥黃矮病毒檢測 實時熒光PCR法_第2頁
DB22-T 3455-2023 分蘗洋蔥中洋蔥黃矮病毒檢測 實時熒光PCR法_第3頁
DB22-T 3455-2023 分蘗洋蔥中洋蔥黃矮病毒檢測 實時熒光PCR法_第4頁
DB22-T 3455-2023 分蘗洋蔥中洋蔥黃矮病毒檢測 實時熒光PCR法_第5頁
已閱讀5頁，還剩2頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

65.020

05

DB22

22/T

3455—2023分蘗洋蔥中洋蔥黃矮病毒檢測實時熒光PCR

Shallot 吉林省市場監(jiān)督管理廳

DB22/T

2023前言本文件按照

GB/T

XXXX分蘗洋蔥中洋蔥黃矮病毒檢測 實時熒光

法

本文件描述了分蘗洋蔥中洋蔥黃矮病毒實時熒光

PCR

GB/T

6682-2008

RT-PCR

提取分蘗洋蔥總

Taq

PCR擴(kuò)增反應(yīng)（采用

SYBR

Green

GreenⅠ

是一種具有綠色激發(fā)波長的染料，能夠與雙鏈

DNA

SYBR

Green

DNA

結(jié)合后，

5.1

Trizol

實時熒光

PCR

試劑盒。

Pyrocarbonate）。

XXXX

DEPC

5.1.10

DEPC

處理的

DEPC

5.2

引物用水稀釋成

10

保存?zhèn)溆谩?/p>

實時熒光

PCR

儀。

微量移液器：0.1

L～2.5

L，20

L。

冰箱：4

，-20

離心管：DEPC

mL。

L。

7.2

采集新鮮管狀葉為宜，也可采集地下鱗莖。裝入密封袋，置于冰盒中，4

保存不超過12

核苷酸引物dNTP

混合溶液(10

mmol/L)

2.5rnase

ddH5.55×PrimeScriptⅡ

rnase

U/μL)0.5primeScriptⅡ

U/μL)rnase

ddH4.5

XXXX

稱取

0.1

樣品液氮充分研磨（檢測鱗莖時，選擇中部層取樣。），轉(zhuǎn)入

0.1%

DEPC

（焦碳酸

15

min，4

15

0.5

mL

DEPC

處理的

75%乙醇，渦旋震蕩

12000

r/min

DEPC

行下步操作或-80

用核酸蛋白分析儀測定

RNA

濃度。

利用反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成

cDNA

1、表

反應(yīng)體系-1，65

℃溫浴

42

h。

見表3。2×Magic

SYBR

Mixtrue101×

0.60.3

μM

0.60.3

μM10

ng200

ng

XXXX

min，變性95

30

根據(jù)

Ct

值判定檢測結(jié)果，在陽性對照、陰性對照和空白對照檢測結(jié)果與預(yù)期一致的前提下：a)

b) 檢測樣品的

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論