高二生物動(dòng)物細(xì)胞工程5

2.2動(dòng)物細(xì)胞工程單克隆抗體等

動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞融合是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。為什么要進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)如何進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)?2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)

從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織，將它們分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。1.1概念1.2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液10代細(xì)胞50細(xì)胞剪碎胰蛋白酶洗滌、稀釋、分離原代培養(yǎng)用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)適宜的PH為7.2—7.4，此環(huán)境下胃蛋白酶（2.0）沒(méi)有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性較高。比老齡動(dòng)物的組織細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛。分化程度越低，繁殖能力越強(qiáng)，越容易培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體細(xì)胞增殖緩慢，核型可能變化動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。貼壁生長(zhǎng)接觸抑制10代以內(nèi)，保持正常二倍體核型傳代培養(yǎng)細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞無(wú)限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)、細(xì)胞株和細(xì)胞系多數(shù)組織細(xì)胞固定在表面生長(zhǎng)和分裂。隨細(xì)胞增多，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖

多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，思考以下問(wèn)題：1.體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)？

2.體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？

討論充足營(yíng)養(yǎng)適宜溫度、PH和氣體環(huán)境；無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境1.3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件（無(wú)菌處理和添加抗生素、更換培養(yǎng)液）與體內(nèi)相同。合成培養(yǎng)基：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子（血清、血漿）、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等（36~37℃、7.2~7.4）（O2、CO2--維持培養(yǎng)液PH）植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無(wú)病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白1.4動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用2.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體（克隆動(dòng)物）分類胚胎細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易

細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性不容易2.1動(dòng)物細(xì)胞核移植概念：2.2體細(xì)胞核移植的過(guò)程：思考：1.核移植的受體細(xì)胞是什么？處在什么時(shí)期？2.通過(guò)什么手段激活受體細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎？MⅡ中期卵母細(xì)胞誘導(dǎo)方法：物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。討論：1.在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？

為使核移植的胚胎或動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞，在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前，必須將受體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐摹?/p>

培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至10～50代左右時(shí)，部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生突變，而10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細(xì)胞核移植中，為了保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。2.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，想一想，這是為什么？3.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？絕大部分DNA來(lái)自于供體細(xì)胞核，但其核外還有少量的DNA，即線粒體中的DNA是來(lái)自于受體卵母細(xì)胞。此外，即便動(dòng)物的遺傳基礎(chǔ)完全相同，但動(dòng)物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系，核供體動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全相同，其形成的行為、習(xí)性也不可能和核供體動(dòng)物完全相同，從這一角度看，克隆動(dòng)物不會(huì)是核供體動(dòng)物100%的復(fù)制。2.3體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：1、在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進(jìn)程2、保護(hù)瀕危物種3、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官的移植4、了解胚胎發(fā)育和衰老過(guò)程；追蹤研究疾病的發(fā)展過(guò)程和治療疾病2.4體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題：思考與探究2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過(guò)脫分化的過(guò)程嗎？為什么？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程。因高度分化的動(dòng)物細(xì)胞發(fā)育潛能變窄，失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力，所以，動(dòng)物細(xì)胞也就沒(méi)有類似植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的脫分化過(guò)程了。要想使培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞定向分化，通常采用定向誘導(dǎo)動(dòng)物干細(xì)胞，使其分化成所需要的組織或器官。3.1997年，美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)（Lucinda）的奶牛，年產(chǎn)奶量為30.8t，創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛，年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸，而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3～4t。（1）能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎？請(qǐng)說(shuō)明理由?？梢?。盧辛達(dá)的產(chǎn)奶量很高，有高產(chǎn)奶的遺傳基礎(chǔ)，利用盧辛達(dá)的體細(xì)胞克隆的奶牛其遺傳物質(zhì)基本上全部來(lái)自該奶牛，其克隆牛具有高產(chǎn)的遺傳基礎(chǔ)，如果精心培育和飼養(yǎng)，有可能在世界范圍內(nèi)推廣，克隆牛再與高產(chǎn)的公牛自然繁殖，可得到很多高產(chǎn)的后代，從而加快奶牛改良進(jìn)程。該克隆牛不能無(wú)限制地推廣，其數(shù)量不宜過(guò)多，尤其是在小范圍內(nèi)不能無(wú)限的繁殖，以避免奶牛群出現(xiàn)近親繁殖而引起種質(zhì)衰退。（2）如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你，你將如何對(duì)它進(jìn)行克??？從盧辛達(dá)耳朵（也可用別的組織、器官，耳朵在活體上容易?。┥霞羧∫恍K組織，在體外培養(yǎng)獲得該組織（如軟骨組織）的細(xì)胞。從屠宰場(chǎng)取廢棄的牛卵巢，抽取卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟。用顯微針去除卵母細(xì)胞的核，再將耳細(xì)胞注入卵母細(xì)胞，用電刺激方法使卵母細(xì)胞與體細(xì)胞融合，這時(shí)供體核就進(jìn)入了受體卵母細(xì)胞，再用電刺激或化學(xué)物質(zhì)激活注入了體細(xì)胞核的卵母細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育過(guò)程。核移植胚胎在體外短時(shí)間培養(yǎng)后，挑選正常卵裂的胚胎植入經(jīng)同期發(fā)情處理的受體母牛體內(nèi)。4.體細(xì)胞核移植技術(shù)在研究和應(yīng)用上還存在什么問(wèn)題？請(qǐng)你查閱資料，了解這方面的前沿動(dòng)態(tài)。研究方面：克隆動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清楚，克隆技術(shù)效率低，克隆動(dòng)物畸形率高、死亡率高、易出現(xiàn)早衰等問(wèn)題。這些問(wèn)題尚在研究中。應(yīng)用上：生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴，距大規(guī)模應(yīng)用還有一定距離。；/item.htm?id=535464336197群控手機(jī)架mqu91hno碎碎的姜末。八月十五一大早，郭氏就興致勃勃地吩咐兩個(gè)女兒去鎮(zhèn)上張家肉鋪割五斤現(xiàn)宰羊肉、各樣兒的鮮菜、鮮瓜和鮮果子、特大的團(tuán)月餅、六斤普通的小月餅和二斤豆腐干兒?？纯措u蛋還有不少，就沒(méi)有吩咐再買。耿英不解，說(shuō)：“鮮菜、鮮瓜和鮮果子就不要買了哇，俺大娘和嬸兒不是每年的八月十五都會(huì)給咱們送來(lái)不少嘛！”耿蘭也說(shuō)：“就是哇娘，這些東西就不要買了。要不咱們買了，待會(huì)兒秀兒姐和妞兒姐她們又給送來(lái)不少……”郭氏打斷耿蘭的話，只管高興地說(shuō)：“要買，要買，娘想買，咱們今兒個(gè)都吃自己買的。待會(huì)兒秀兒和妞兒送來(lái)多少也不打緊哇，咱家這么多人，還愁吃不了！”看到娘這么高興，姐兒倆也就不再說(shuō)什么了，只管按照娘的吩咐采購(gòu)一通。她們把大多數(shù)的東西置買好后，用兩個(gè)好大的竹籃子裝了，“吭哧吭哧”挎了回來(lái)，把五斤新鮮羊肉、二斤豆腐干兒和所有的月餅放在堂屋的桌子上，各樣兒的鮮菜晾開(kāi)了擺放在檐臺(tái)上，鮮瓜鮮果子放在堂屋一邊的地上。西瓜帶不上了，姐兒倆又專門跑了一趟，用扁擔(dān)和大籮筐合抬回來(lái)放在檐臺(tái)上。匆匆吃過(guò)早飯以后，耿老爹問(wèn)郭氏：“咱倆把八仙桌搬過(guò)來(lái)哇？中午吃飯需要呢！”郭氏說(shuō)：“不光是吃飯需要哇，俺這收拾準(zhǔn)備的，一個(gè)桌子也是放不開(kāi)的呢！”于是，倆人去南房里將八仙桌搬出來(lái)放在堂屋前，耿老爹親自幫妻子擦洗干凈了，倆人再抬起來(lái)擱兌著慢慢搬進(jìn)來(lái)，再和堂屋里原先放的那張桌子并起來(lái)放好。郭氏高興地對(duì)丈夫說(shuō)：“沒(méi)有你的事兒了，去看你的那些寶貝們?nèi)ネ?！”耿老爹笑一笑，像往常一樣又下地看他的水稻去了。為了防止被家雀啄食，耿老爹讓妻子和小女兒幫忙，在稻田的周圍扎了好多草人進(jìn)行守護(hù)。這些草人都穿了衣服，戴了草帽，手里舉著長(zhǎng)長(zhǎng)的小旗兒。風(fēng)一吹，還真能嚇唬走那些偷食者們呢！耿正和耿直則一心只記掛著學(xué)堂和戲臺(tái)那邊的事情，自然不關(guān)心娘和姐姐妹妹的都在準(zhǔn)備些什么過(guò)節(jié)的東西，只是按照娘的吩咐，早在幾天前就開(kāi)始往家里捎帶高腳凳子了。到現(xiàn)在，擱在東西兩屋檐臺(tái)上的高腳凳子，已經(jīng)足夠三大家子的人坐了。那日早飯后，這兄弟倆還和往常一樣，放下飯碗后，就一起出門往小學(xué)堂和大戲臺(tái)那邊的工地上去了。且說(shuō)留在家里的這娘兒