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文檔簡介

《分子生物學(xué)》復(fù)習(xí)資料(一)一、選擇題1.增強子的作用是()A.增強DNA復(fù)制B.增強基因轉(zhuǎn)錄C.增強基因穩(wěn)定性D.增強RNA的穩(wěn)定性2.反式作用因子的激活方式不包括()A.表達(dá)式調(diào)節(jié)B.共價修飾C.蛋白質(zhì)相互作用D.DNA成環(huán)3.以下哪項不是目前使用的研究轉(zhuǎn)錄子組的主要方法()A.基因芯片技術(shù)B.表達(dá)系列分析C.差異顯示PCRD.Westernblot4.無義突變是()A.產(chǎn)生另一種氨基酸序列不同的蛋白質(zhì)B.突變后產(chǎn)生縮短的多肽鏈C.產(chǎn)生的一種氨基酸序列相同的蛋白質(zhì)D.突變毫無意義5.質(zhì)粒是()A.環(huán)狀雙鏈DNAB.線性雙鏈DNAC.環(huán)狀單鏈DNAD.線性單鏈DNA二、判斷題(如正確寫√,錯誤寫×)1.現(xiàn)代分子生物學(xué)的研究幾乎都是圍繞核酸和蛋白質(zhì)進(jìn)行的。()2.原核生物翻譯效率受SD序列順序的影響,與SD序列的位置無關(guān)。()3.重組修復(fù)是先進(jìn)行復(fù)制再進(jìn)行切除修復(fù)。()4.在同樣的環(huán)境條件下,具有不同遺傳背景的人發(fā)病的幾率或病情的進(jìn)展不同。()5.點突變是指一個嘌呤堿基被嘧啶堿基取代或一個嘧啶堿基被嘌呤堿基取代。()三、簡答題1、轉(zhuǎn)座作用的機(jī)制及其遺傳學(xué)效應(yīng)。2、列舉幾種真核基因的順式作用元件。3、說明乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)及其正負(fù)性協(xié)調(diào)調(diào)控原理。四、問答題從多個層次論述真核基因的表達(dá)調(diào)控?!斗肿由飳W(xué)》復(fù)習(xí)資料(一)答案一、選擇題1-5BDDBA二、判斷題(如正確寫√,錯誤寫×)1.√;2.×;3.√;4.√;5.;×6.×;7.√;8.√;9.×;10.×;三、簡答題1、轉(zhuǎn)座作用的機(jī)制及其遺傳學(xué)效應(yīng)。答:轉(zhuǎn)座作用可分為復(fù)制性轉(zhuǎn)座和簡單轉(zhuǎn)座兩種類型。(2)復(fù)制性轉(zhuǎn)座是轉(zhuǎn)座因子復(fù)制出一個新拷貝轉(zhuǎn)移到基因組新的位置,轉(zhuǎn)座可以使供體和受體復(fù)制子融合,形成共整合體,解離后釋放出兩個復(fù)制子,每一個都帶有一個轉(zhuǎn)座子。(1)簡單轉(zhuǎn)座是轉(zhuǎn)座因子從原來位置上切除并轉(zhuǎn)移到基因組新的位置。(1)遺傳學(xué)效應(yīng):引起插入突變,攜帶標(biāo)志基因使受體增添新基因,可形成共整合體,轉(zhuǎn)座的結(jié)果使靶點序列倍增,促使染色體畸變。(2)2、列舉幾種真核基因的順式作用元件。答:(1)啟動子:Hogness盒,CAAT盒;(2)(2)增強子:SV40病毒中,位于早期啟動子5ˊ上游約200bp,內(nèi)含2個72bp的重復(fù)序列,其核心序列為GGTGTGGAAAG;(2)(3)沉默子:SV40中的AGGTTTTTT序列為終止轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件。(2)3、說明乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)及其正負(fù)性協(xié)調(diào)調(diào)控原理。答:(1)編碼β-半乳糖苷酶、半乳糖苷通透酶及硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙?;溉N酶蛋白的結(jié)構(gòu)基因Z、Y、A,加上調(diào)控元件——啟動子(promoter,P)和操縱基因(operator,O)即構(gòu)成乳糖操縱子。(3)(2)有葡萄糖無乳糖時,阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合,lac結(jié)構(gòu)基因不轉(zhuǎn)錄,cAMP處于低水平,CAP蛋白不能與啟動子附近的CAP位點結(jié)合;(1)葡萄糖和乳糖均存在時,阻遏蛋白與乳糖結(jié)合,空間構(gòu)象改變,不再與操縱基因結(jié)合,cAMP處于低水平,CAP蛋白不與CAP位點結(jié)合,結(jié)構(gòu)基因有少量表達(dá);(1)無葡萄糖有乳糖時,阻遏蛋白不與操縱基因結(jié)合,cAMP處于高水平,形成cAMP-CAP復(fù)合物并與CAP位點結(jié)合,結(jié)構(gòu)基因大量表達(dá)。(1)四、問答題從多個層次論述真核基因的表達(dá)調(diào)控。答:(1)基因組DNA水平的調(diào)控:(2)基因組水平的調(diào)控即轉(zhuǎn)錄前調(diào)控,指發(fā)生在基因組水平的基因結(jié)構(gòu)的改變,這種調(diào)控方式較穩(wěn)定持久,有時甚至是不可逆的。真核生物基因表達(dá)在DNA水平的調(diào)控主要方式為:①染色質(zhì)的丟失②基因擴(kuò)增③基因重排④基因的甲基化修飾⑤染色質(zhì)結(jié)構(gòu)對基因表達(dá)的調(diào)控作用(2)轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控:(2)轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控主要是通過反式作用因子與順式作用元件和RNA聚合酶(RNApolymerase,RNApol)的相互作用來完成的。順式作用元件是一些能影響基因表達(dá)但不編碼蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列,按照功能分為啟動子、增強子、沉默子。反式作用因子是指能直接或間接地識別或結(jié)合在各順式作用元件8~12bp核心序列上,參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的一組蛋白質(zhì)。轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制主要為:①反式作用因子的活性調(diào)節(jié)。特定的反式作用因子被激活后,可以啟動特定基因的轉(zhuǎn)錄。激活方式為:表達(dá)式調(diào)節(jié),共價修飾,配體結(jié)合,蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用。②反式作用因子作用方式。反式作用因子與順式元件的結(jié)合位點通常與其所調(diào)控的基因相距較遠(yuǎn),其作用方式模式為:成環(huán),扭曲,滑動,Oozing。③反式作用因子的組合式調(diào)控作用。每一種反式作用因子結(jié)合順式元件后雖然可發(fā)揮促進(jìn)或抑制作用,但反式作用因子對基因表達(dá)的調(diào)控不是由單一反式作用因子完成的,而是由幾種因子組合,發(fā)揮特定的作用。(3)轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控:(2)①5ˊ端加帽和3ˊ端多聚腺苷酸化mRNA②前體的選擇性剪接(4)翻譯水平的調(diào)控:(2)①翻譯起始的調(diào)控,包括翻譯起始因子的功能調(diào)控、阻遏蛋白的調(diào)節(jié)作用、5ˊAUG對翻譯的調(diào)節(jié)作用、mRNA5ˊ端非編碼區(qū)長度對翻譯的影響等。②穩(wěn)定性調(diào)節(jié)③小分子RNA對翻譯的調(diào)控作用《分子生物學(xué)》復(fù)習(xí)資料(二)一、名詞解釋 1、基因:2、啟動子:3、單順反子:4、轉(zhuǎn)座子:5、基因組學(xué):二、填空題1、RNA酶的剪切分為()、()兩種類型。2、原核生物中有三種起始因子分別是()、()和()。3、PCR的基本反應(yīng)過程包括:()、()、()三個階段。4、質(zhì)粒DNA具有三種不同的構(gòu)型分別是:()、()、()。在電泳中最前面的是()。5、蛋白質(zhì)的跨膜需要()的引導(dǎo),蛋白伴侶的作用是輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)。6、基因突變主要是DNA一級結(jié)構(gòu)的改變,其分子機(jī)制可以是()、()或()等。三、選擇題1.DNA的二級結(jié)構(gòu)指:();A:是指4種核苷酸的連接及其排列順序,表示了該DNA分子的化學(xué)構(gòu)成;B:是指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu);C:是指兩條多核苷酸鏈反向平行盤繞所生成的雙螺旋結(jié)構(gòu)。2.下列哪一種蛋白不是組蛋白的成分()A:H1B:H2A、H2BC:H3、H4D:H53.下面那一項不屬于原核生物mRNA的特征()A:半衰期短B:存在多順反子的形式C:5’端有帽子結(jié)構(gòu)D:3’端沒有或只有較短的多聚(A)結(jié)構(gòu)4.1972年,第一個用于構(gòu)建重組體的限制性內(nèi)切核酸酶是()A:EcoRIB:EcoBC:EcoCD:EcoRII5.下面那項不屬于原核生物操縱元的結(jié)構(gòu)。()A:啟動子B:終止子C:操縱子D:內(nèi)含子6.下列敘述不正確的是:()A:共有20個不同的密碼子代表遺傳密碼B:每個核苷三聯(lián)體編碼一個氨基酸C:不同的密碼子可能編碼同一個氨基酸D:密碼子的第三位具有可變性7.反密碼子中那個堿基對參與了密碼子的簡并性(搖擺)()A:第一個B:第二個C:第一個與第二個D:第三個8.Shine-Dalgarno順序(SD-順序)是指:()A.在mRNA分子的起始碼上游8-13個核苷酸處的順序B.在DNA分子上轉(zhuǎn)錄起始點前8-13個核苷酸處的順序C.16srRNA3'端富含嘧啶的互補順序D.啟動基因的順序特征9.下列有關(guān)TATA盒(Hognessbox)的敘述,哪個是正確的:()A:它位于第一個結(jié)構(gòu)基因處B:它和RNA聚合酶結(jié)合C:它編碼阻遏蛋白D:它和反密碼子結(jié)合10.tRNA的分子結(jié)構(gòu)特征是:()A:密碼環(huán)B:5'-端有-C-C-AC:有反密碼環(huán)和3'-端-C-C-AD:有反密碼環(huán)和5'端-C-C-A四、判斷題(如正確寫√,錯誤寫×)1.雙鏈DNA中作為模板的那條鏈稱為有意義鏈;()2.轉(zhuǎn)錄原點記為+1,其上游記為正值,下游記為負(fù)值;()3.tRNA都必須通過A位點到達(dá)P位點,再由E位點離開核糖體;()4.瓊脂糖凝膠分辨DNA片段的范圍為0.2~50kb之間,聚丙烯酰胺凝膠,其分辨范圍為1個堿基對到1000個堿基對之間;()5.在先導(dǎo)鏈上DNA以5’->3’方向合成,在后隨鏈上則沿3’->5’方向合成;()6.DNA的復(fù)制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶;()7.在轉(zhuǎn)錄終止子柄部的A-T堿基對可以增強結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性;()8.RNA聚合酶同操縱基因結(jié)合()9.轉(zhuǎn)座要求供體和受體位點之間有同源性10.高等真核生物的大部分DNA是不編碼蛋白質(zhì)的()《分子生物學(xué)》復(fù)習(xí)資料(二)答案一、名詞解釋 1、基因(gene):是核酸中儲存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列信息及表達(dá)這些信息所必需的全部核苷酸序列。2、啟動子(promoter):RNA聚合酶特異識別結(jié)合和啟動轉(zhuǎn)錄的DNA序列。3、單順反子(monocistron):一個結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄生成一個mRNA分子。4、轉(zhuǎn)座子(transposon):轉(zhuǎn)座因子的一種類型,大小通常為2-20kb,常帶有抗性基因等其它基因。5、基因組學(xué)(genomics):闡明基因組結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系以及基因與基因之間相互作用的一門科學(xué)。二、填空題1、自體催化、異體催化2、IF-1、IF-2、IF-33、變性、退火、延伸4、SC構(gòu)型、oc構(gòu)型、L構(gòu)型、SC構(gòu)型5、信號肽6、替換、插入、缺失三、選擇題1-5CDCAD6-10AAABC四、判斷題(如正確寫√,錯誤寫×)1.×;2.×;3.×;4.√;5.;×6.√;7.×;8.×;9.√;10.√;《分子生物學(xué)》復(fù)習(xí)資料(三)一、名詞解釋 1.質(zhì)粒2.信號肽3.核受體4.細(xì)菌轉(zhuǎn)化5.hnRNA二、簡答題1.簡述原核生物RNA聚合酶各組成部分的主要功能;2.簡述切除修復(fù)的大致過程。3.PCR的原理,其在基因分析和基因診斷中有哪些應(yīng)用?4.何為Southern印跡雜交?簡述其原理和方法。三、問答題比較真核生物基因組與原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點?!斗肿由飳W(xué)》復(fù)習(xí)資料(三)答案一、名詞解釋 1.質(zhì)粒:質(zhì)粒是染色體外能夠進(jìn)行自主復(fù)制的遺傳單位,包括真核生物的細(xì)胞器和細(xì)菌細(xì)胞中染色體以外的脫氧核糖核酸(DNA)分子。2.信號肽:在蛋白質(zhì)合成過程中N端有15~36個氨基酸殘基的肽段,引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。3.核受體:細(xì)胞內(nèi)受體分布于胞漿或核內(nèi),本質(zhì)上都是配體調(diào)控的轉(zhuǎn)錄因子,均在核內(nèi)啟動信號轉(zhuǎn)導(dǎo)并影響基因轉(zhuǎn)錄,統(tǒng)稱核受體。4.細(xì)菌轉(zhuǎn)化是指一種細(xì)菌菌株由于捕獲了來自另一種細(xì)菌菌株的DNA而導(dǎo)致性狀特征發(fā)生遺傳改變的生命過程。5.hnRNA:核不均一RNA,即mRNA的前體,經(jīng)過5’加帽和3’酶切加多聚A,再經(jīng)過RNA的剪接,將外顯子連接成開放閱讀框,通過核孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)就可以作為蛋白質(zhì)合成的模板了。二、簡答題1、簡述原核生物RNA聚合酶各組成部分的主要功能;答:(1)位于前端的α因子使雙鏈解鏈為單鏈;(1)(2)位于尾端的α因子使單鏈新聚合為雙鏈;(1)(3)σ因子的作用是負(fù)責(zé)模板鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始,它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物,使酶專一性識別模板上的啟動子;(2)(4)β因子完成NTP之間的磷酸酯鍵的連接;(1)(5)β’因子促使RNApol與非模板鏈(sensestrand)結(jié)合。(1)2、簡述切除修復(fù)的大致過程。切除修復(fù)是修復(fù)DNA損傷最為普遍的方式。修復(fù)過程需要多種酶的一系列作用(1分),基本步驟如下:① 首先由核酸酶識別(1分)DNA的損傷位點,在損傷部位的5'側(cè)切開磷酸二酯鍵。不同的DNA損傷需要不同的特殊核酸內(nèi)切酶來識別和切割;(1)②由5'→3'核酸外切酶將有損傷的DNA片段切除(1分);③在DNA聚合酶的催化下,以完整的互補鏈為模板,按5'→3'方向DNA鏈,填補已切除的空隙(1分);④由DNA連接酶將新合成的DNA片段與原來的DNA斷鏈連接起來。這樣完成的修復(fù)能使DNA恢復(fù)原來的結(jié)構(gòu)(1分)。3、PCR的原理,其在基因分析和基因診斷中有哪些應(yīng)用?答:(PCR原理2分)進(jìn)行DNA體外擴(kuò)增、基因克隆1分,分析基因拷貝數(shù)1分(定性定量分析)(PCR-SSCP或DNA序列分析或甲基化分析)1分,基因突變的診斷1分4、何為Southern印跡雜交?簡述其原理和方法。答:Southern印跡雜交是1975年Southern建立該法的主要特點是利用毛細(xì)現(xiàn)象將DNA轉(zhuǎn)移到固體支持物上,稱為Southern轉(zhuǎn)移或Southern印跡(Southernblot)。(3)它首先用合適的限制性內(nèi)切核酸酶將DNA切割,進(jìn)行電泳分離后,利用干燥的吸水紙產(chǎn)生毛細(xì)作用,使液體經(jīng)過凝膠,從而使DNA片段由液流攜帶從凝膠轉(zhuǎn)移并結(jié)合在固體支持物表面,在通過和探針雜交來檢測固體支持物表面的

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