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1.1DNA重組技術(shù)的基本工具問(wèn)題引領(lǐng)1、基因工程的定義2、基因工程的三種工具名稱3、限制酶的來(lái)源、種類、作用、結(jié)果4、DNA連接酶的種類、作用5、質(zhì)粒的特點(diǎn)、標(biāo)記基因的作用6、載體必備的5個(gè)條件、種類基因工程的概念基因工程的別名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平原理目的DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平人類需要的生物類型和生物產(chǎn)品基因重組基因工程概念的分析
DNA重組技術(shù)的基本工具“分子手術(shù)刀”--“分子縫合針”--“分子運(yùn)輸車”--限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶載體一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”
1、來(lái)源:主要是原核生物(約300種)
2、種類:
3、作用:
4、結(jié)果:約4000種識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。形成兩種末端黏性末端平末端1、EcoRI只能識(shí)別GAATTC的核苷酸序列且只能從G和A之間切開,畫出切割結(jié)果:2、SmaI只能識(shí)別CCCGGG的核苷酸序列且只能從C和G之間切開,畫出切割后的結(jié)果:
GAATTCCTTAAGEcoRICCCGGGGGGCCCSmaI練習(xí):3、課本P6的“模擬制作”4、P7“思考與探究”第1題1、種類:2、作用部位:E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶磷酸二酯鍵
二、DNA連接酶——“分子縫合針”(黏性末端)(黏性末端和平末端)GAATTCCTTAAGEcoRI練習(xí):GAATTCCTTAAGEcoRI()三、載體——“分子運(yùn)輸車”1、載體的作用將
轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中去。目的基因2、常用的載體
質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒3、作為載體必須具備的5個(gè)條件練習(xí):1、畫出一個(gè)載體模式圖2、P7“思考與探究”的第2-4題1、關(guān)于限制酶的說(shuō)法中,正確的是A、限制酶是一種酶,只識(shí)別GAATTC堿基序列B、EcoRI切割的是G—A之間的氫鍵C.限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNAD.限制酶只存在于原核生物中課堂鞏固C2、基因工程的載體,必須具備的條件及理由是()A、能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地保存下來(lái)并大量復(fù)制,以便提供大量的目的基因B、具有多個(gè)限制酶切點(diǎn),以便于目的基因的表達(dá)C.具有某些標(biāo)記基因,以便為目的基因的表達(dá)提供條件D、能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存,以便于進(jìn)行篩選A3、質(zhì)粒是基因工程最常見(jiàn)的載體,它的主要特點(diǎn)是()①能自主復(fù)制 ②不能自主復(fù)制 ③大小合適 ④是蛋白質(zhì) ⑤是環(huán)狀RNA
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