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基因工程和細(xì)胞工程一、單選題1.堿基互補(bǔ)配對(duì)發(fā)生在下列哪些生理過(guò)程或生物技術(shù)中()①受精作用②病毒的增殖過(guò)程③細(xì)菌的二分裂過(guò)程④目的基因與運(yùn)載體的結(jié)合⑤DNA探針的使用⑥細(xì)胞的融合A.②③④⑤B.①③④⑤ C.②④⑤D.②③⑤⑥【答案】A【解析】試題分析:受精作用是精子和卵細(xì)胞的融合,染色體組的合并,無(wú)堿基互補(bǔ)配對(duì)發(fā)生。病毒的增殖過(guò)程有核酸的復(fù)制等活動(dòng),所以有堿基互補(bǔ)配對(duì)發(fā)生。細(xì)菌分裂也要進(jìn)行遺傳物質(zhì)的復(fù)制,所以有堿基互補(bǔ)配對(duì)發(fā)生。目的基因與運(yùn)載體的結(jié)合,一般靠黏性末端堿基的互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合。DNA探針的使用依據(jù)的是DNA分子雜交原理,所以有堿基互補(bǔ)配對(duì)發(fā)生。細(xì)胞融合依據(jù)的是膜的流動(dòng)性,所以沒有堿基互補(bǔ)配對(duì)發(fā)生??键c(diǎn):本題考查細(xì)胞代謝的相關(guān)知識(shí),意在考查基礎(chǔ)知識(shí)的理解應(yīng)用。2.乳腺生物反應(yīng)器、人工種子和克隆動(dòng)物均屬于生物工程的成果,下列敘述正確的A.三者都涉及基因工程技術(shù)B.三者都是在細(xì)胞或細(xì)胞器水平操作的C.克隆動(dòng)物屬于無(wú)性生殖范疇D.人工種子的胚狀體是由受精卵發(fā)育而成【答案】C【解析】克隆動(dòng)物屬于無(wú)性繁殖的產(chǎn)物。3.下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述,錯(cuò)誤的是A.植物體細(xì)胞雜交過(guò)程和動(dòng)物細(xì)胞融合的原理不完全相同B.去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理C.通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀察比較白菜細(xì)胞的形態(tài),可以檢驗(yàn)其細(xì)胞壁是否已被除去D.某種植物甲乙兩品種的體細(xì)胞雜種與甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同【答案】D【解析】試題分析:植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性,而動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是膜的流動(dòng)性,A正確;去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁時(shí)用纖維素酶和果膠酶處理,將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞時(shí)需用到胰蛋白酶,B正確;通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀察比較白菜細(xì)胞的形態(tài),可以檢驗(yàn)其細(xì)胞壁是否已被除去,C正確;某種植物甲乙兩品種的體細(xì)胞雜種中染色體數(shù)目是甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目的2倍,D錯(cuò)誤??键c(diǎn):本題考查植物細(xì)胞工程的原理及技術(shù)。4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞常用的酶是A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.纖維素酶D.果膠酶【答案】A【解析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中常用胰蛋白酶破壞細(xì)胞與細(xì)胞之間的膠原纖維,將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞。5.Y染色體是決定生物性別的一種性染色體,包括“DNA-Y染色體檢驗(yàn)”技術(shù)在內(nèi)的DNA檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用,對(duì)案件偵破、身份鑒定等起到重要作用。下列相關(guān)敘述正確的是A.人的初級(jí)精母細(xì)胞核和次級(jí)精母細(xì)胞中都含Y染色體B.人體任何組織和體液的取樣都可以用于DNA檢測(cè)C.DNA分子具有特異性,因此DNA檢測(cè)技術(shù)可達(dá)到100%D.利用“DNA-Y染色體檢驗(yàn)”技術(shù)比對(duì)Y染色體特征值數(shù)據(jù)庫(kù),可以確定DNA檢測(cè)樣本的家族范圍【答案】D【解析】人的初級(jí)精母細(xì)胞核中肯定含有Y染色體,但是次級(jí)精母細(xì)胞中不一定含Y染色體,A錯(cuò)誤;人的成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和線粒體,所以不存在DNA,B錯(cuò)誤;DNA分子具有特異性,但是可能會(huì)發(fā)生基因突變等差錯(cuò),所以DNA檢測(cè)技術(shù)不能達(dá)到100%,C錯(cuò)誤;利用“DNA-Y染色體檢驗(yàn)”技術(shù)比對(duì)Y染色體特征值數(shù)據(jù)庫(kù),可以確定DNA檢測(cè)樣本的家族范圍,D正確。6.關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)相關(guān)知識(shí)的敘述,正確的是 A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變B.植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比會(huì)影響組織分化C.核移植技術(shù)克隆出的動(dòng)物只有一種親本的遺傳性狀D.二倍體動(dòng)物體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的【答案】B【解析】試題分析:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞的基因型一般是不會(huì)發(fā)生改變的,A錯(cuò)誤。植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比會(huì)影響組織分化,比如當(dāng)生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分裂素用量比例高時(shí),有利于根的分化、抑制芽的形成;當(dāng)比值低時(shí),有利于芽的分化、抑制根的形成;當(dāng)比例適中時(shí),促進(jìn)愈傷組織的形成,B正確。核移植技術(shù)克隆的動(dòng)物含有供核方和供質(zhì)方共有的遺傳性狀,C錯(cuò)誤。二倍體動(dòng)物體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)是有限的,一般傳至10代,D錯(cuò)誤。考點(diǎn):本題考查現(xiàn)代生物技術(shù)的相關(guān)知識(shí),意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。7.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是A.培養(yǎng)基往往需要添加生長(zhǎng)素和動(dòng)物血清B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)目的就是獲得大量的分泌蛋白C.單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)至獲得不死性時(shí)遺傳物質(zhì)已發(fā)生改變D.將雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)在小鼠體內(nèi)無(wú)法獲得相應(yīng)的抗體【答案】C【解析】生長(zhǎng)素是植物激素,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要,動(dòng)物細(xì)胞融合目的是獲得大量的分泌蛋白質(zhì),雜交瘤細(xì)胞獲得抗體的方法有體外培養(yǎng)和小鼠腹水提取兩種,答案C。8.下列關(guān)于生物技術(shù)的有關(guān)敘述,不正確的是()A.利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株、利用細(xì)胞工程培育“番茄-馬鈴薯”雜種植株,都利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)B.在進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí),由愈傷組織形成胚狀體的過(guò)程中,會(huì)發(fā)生基因的選擇性表達(dá),還可能會(huì)發(fā)生染色體變異或基因突變C.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交相比,誘導(dǎo)融合的方法有所不同,所用的技術(shù)手段、依據(jù)的原理相同,都能形成雜種細(xì)胞和雜種個(gè)體D.“試管嬰兒”實(shí)質(zhì)上就是“體外受精”和“胚胎移植”的“產(chǎn)物”,但是不能使無(wú)法產(chǎn)生精子或卵細(xì)胞的夫婦得到自己的孩子【答案】C【解析】試題分析:利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株、從紫草的愈傷組織中提取紫草素、利用細(xì)胞工程培育“番茄--馬鈴薯”雜種植株都利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù),A正確;在進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí),由根尖細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過(guò)程中,細(xì)胞通過(guò)有絲分裂方式增殖,可能會(huì)發(fā)生染色體變異或基因突變,而不可能發(fā)生細(xì)胞分化和基因重組,B正確;動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交相比,誘導(dǎo)融合的方法、所用的技術(shù)手段、所依據(jù)的原理均不相同,且動(dòng)物細(xì)胞融合一般不能形成雜種個(gè)體,C錯(cuò)誤;試管嬰兒的產(chǎn)生采用了體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù),但該技術(shù)無(wú)法使不能產(chǎn)生精子或卵細(xì)胞的夫婦得到自己的孩子,D正確??键c(diǎn):植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程;植物培養(yǎng)的條件及過(guò)程;細(xì)胞融合的概念及方法;胚胎移植.【名師點(diǎn)睛】植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較:9.下面是“白菜—甘藍(lán)”雜種植株培育過(guò)程示意圖。在下列敘述中正確的是()A.如將純種的白菜和甘藍(lán)的卵細(xì)胞分別制成原生質(zhì)體,按相同的方法操作也可得到與圖示相同基因型的雜種植株B.可以通過(guò)在0.3g/mL蔗糖溶液中是否發(fā)生質(zhì)壁分離來(lái)判斷白菜原生質(zhì)體的死活C.該培養(yǎng)過(guò)程中可能發(fā)生細(xì)胞分化、染色體變異或基因突變,一般不會(huì)發(fā)生基因重組D.植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基、培養(yǎng)目的不完全相同,但誘導(dǎo)細(xì)胞或原生質(zhì)體融合的方法卻是完全相同的【答案】C【解析】由于純合子只呢個(gè)產(chǎn)生一種基因減半的卵細(xì)胞,所以兩種卵細(xì)胞融合得到的基因組成只有原純合子的基因組成之和的一半,不可能得到與圖示相同放大基因型的雜種植株,A錯(cuò)誤;由于白菜原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁,所以不能觀察到它是否發(fā)生質(zhì)壁分離,B錯(cuò)誤;圖示該培養(yǎng)過(guò)程中可能發(fā)生細(xì)胞分化、染色體變異或基因突變,由于沒有有性生殖過(guò)程,所以一般不會(huì)發(fā)生基因重組,C正確;誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法多一種生物方法——滅活的病毒,D錯(cuò)誤。【考點(diǎn)定位】植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí)【名師點(diǎn)睛】植物體細(xì)胞雜交原理及過(guò)程解讀(1)植物體細(xì)胞雜交的障礙①植物細(xì)胞都有細(xì)胞壁。根據(jù)酶的專一性原理,用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。②原生質(zhì)體融合。人工誘導(dǎo)方法包括物理法,如離心、振動(dòng)、電激;化學(xué)法,如聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)等。(2)雜種細(xì)胞的類型有三種:AA、BB、AB,符合要求的只有AB,需要進(jìn)行篩選。(3)雜種細(xì)胞AB形成的標(biāo)志:新的細(xì)胞壁的生成。(4)雜種植株遺傳物質(zhì)的變化:細(xì)胞融合屬于染色體變異,雜種植株的染色體數(shù)通常是兩親本細(xì)胞染色體數(shù)目之和,形成異源多倍體。(5)植物體細(xì)胞雜交的原理:原生質(zhì)體融合的過(guò)程利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性,雜種細(xì)胞發(fā)育成雜種植株利用了細(xì)胞的全能性。10.下圖是單克隆抗體制備流程示意圖。下列敘述正確的是A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的T淋巴細(xì)胞B.②過(guò)程的方法和植物體細(xì)胞雜交的方法完全相同C.③過(guò)程需要篩選并克降能分泌特異性抗體的淋巴細(xì)胞D.抗癌藥物與單克隆抗體相結(jié)合后具有高度特異性【答案】D【解析】①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細(xì)胞,A項(xiàng)錯(cuò)誤;②過(guò)程可用動(dòng)物細(xì)胞融合特有的滅活病毒促融方法,B項(xiàng)錯(cuò)誤;③過(guò)程需要篩選并克降能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,C項(xiàng)錯(cuò)誤;抗癌藥物與單克隆抗體相結(jié)合后可定向攻擊腫瘤細(xì)胞,具有高度特異性,D項(xiàng)正確。11.下圖所示為某生物學(xué)概念關(guān)系圖,其中Ⅰ代表整個(gè)大圓,Ⅱ包含Ⅳ。下列各項(xiàng)符合圖示關(guān)系的是A.Ⅰ獲取目的基因Ⅱ從基因文庫(kù)中獲?、罄肞CR擴(kuò)增Ⅳ通過(guò)化學(xué)方法人工合成B.Ⅰ目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞Ⅱ?qū)胫参锛?xì)胞Ⅲ導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞Ⅳ顯微注射法C.Ⅰ細(xì)胞工程Ⅱ動(dòng)物細(xì)胞工程Ⅲ植物細(xì)胞工程Ⅳ細(xì)胞核移植D.Ⅰ胚胎工程Ⅱ胚胎移植Ⅲ胚胎分割Ⅳ早期胚胎培養(yǎng)【答案】C【解析】獲得目的基因的方法包括從基因文庫(kù)中獲取和人工合成法,人工合成法包括反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法,A錯(cuò)誤;將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,可以導(dǎo)入植物細(xì)胞或動(dòng)物細(xì)胞,導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法,B錯(cuò)誤;細(xì)胞工程包括動(dòng)物細(xì)胞工程和植物細(xì)胞工程,細(xì)胞核移植屬于動(dòng)物細(xì)胞工程,C正確;胚胎工程包括胚胎移植、胚胎分割、早期胚胎培養(yǎng)等,D錯(cuò)誤?!军c(diǎn)睛】本題以概念圖的形式,考查基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程等,意在考查學(xué)生的識(shí)記和構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)的能力,屬于中檔題。12.下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A.從基因組文庫(kù)中獲取的某種生物的部分基因,可以實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流B.從cDNA文庫(kù)中獲取的目的基因,既無(wú)啟動(dòng)子,又無(wú)終止子C.用人胰高血糖素基因制成的DNA探針,檢測(cè)人胰島B細(xì)胞中的mRNA,可形成雜交分子D.基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因不能含有限制酶的切割位點(diǎn)【答案】C【解析】基因工程可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,因此從基因組文庫(kù)中獲取的某種生物的部分基因,可以實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流,A正確;啟動(dòng)子不能轉(zhuǎn)錄形成mRNA,內(nèi)含子雖然能轉(zhuǎn)錄形成mRNA,但在加工過(guò)程中會(huì)被剪切掉,因此乙mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA中既沒有啟動(dòng)子,又無(wú)內(nèi)含子,B正確;胰高血糖素基因只在胰島A細(xì)胞中表達(dá),因此用人的胰高血糖素基因制成的DNA探針,檢測(cè)人胰島A細(xì)胞中的mRNA,可形成雜交分子,C錯(cuò)誤;基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因不能含有限制酶的切割位點(diǎn),否則在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)標(biāo)記基因會(huì)被限制酶破壞,D正確。13.下列圖甲是動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程,圖乙是將一定量的淀粉酶和足量的淀粉混合后,麥芽糖積累量隨溫度變化的情況。對(duì)圖中有關(guān)的生物學(xué)意義描述正確的是(
)A.甲中A、B細(xì)胞只能取自動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官組織B.乙中T2到T3的曲線表明酶的活性已達(dá)到最大C.丙中a、b、c可依次表示某一細(xì)胞在有絲分裂后期的染色體、染色單體和DNA數(shù)D.丁中,部分細(xì)菌、藍(lán)藻可以完成①過(guò)程,④過(guò)程需氧,②過(guò)程不需氧【答案】D【解析】試題分析:A.甲中A、B細(xì)胞一般取自動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官組織,原因生命力旺盛,細(xì)胞分裂能力強(qiáng);錯(cuò)誤。B.乙中T2到T3的曲線表明麥芽糖的積累量不變,酶失去活性;錯(cuò)誤。C.丙中a、b、c可依次表示某一細(xì)胞在有絲分裂中期的染色體、染色單體和DNA數(shù),后期染色單體數(shù)量為0;錯(cuò)誤。D.丁中硝化細(xì)菌、藍(lán)藻可以完成①過(guò)程,④過(guò)程需氧,②過(guò)程不需氧;正確??键c(diǎn):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),溫度影響酶活性,有絲分裂中染色體等數(shù)目變化、細(xì)菌等代謝活動(dòng)。點(diǎn)評(píng):本題考查相對(duì)綜合,是學(xué)生提升獲取圖示信息、審題、分析能力的較好選擇。14.美國(guó)生物學(xué)家安妮·穆爾發(fā)現(xiàn):在美國(guó)南部有一種稱為“黑寡婦”的蜘蛛,它吐出的絲比現(xiàn)在所知道的任何蜘蛛絲的強(qiáng)度都高,而且這種蜘蛛可以吐出兩種不同類型的絲織成蜘蛛網(wǎng),第一種絲在拉斷之前,可以延伸27%,它的強(qiáng)度竟達(dá)到其他蜘蛛絲的2倍;第二種絲在拉斷之前很少延伸,卻具有很高的防斷裂強(qiáng)度??茖W(xué)家給這種物質(zhì)取名叫“生物鋼”。下列敘述錯(cuò)誤的是A.生物鋼的特性直接決定于“黑寡婦”蜘蛛的絲蛋白的結(jié)構(gòu)B.生決定C.將“黑寡婦”蜘蛛的絲蛋白基因轉(zhuǎn)入奶羊或奶牛,通過(guò)它們?nèi)橄偌?xì)胞可生產(chǎn)“生物鋼”D.【答案】D【解析】試題分析:蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定功能,“生物鋼”的特性直接取決于“黑寡婦”蜘蛛絲的蛋白結(jié)構(gòu),A項(xiàng)正確;生物性狀由蘊(yùn)藏于遺傳物質(zhì)中的遺傳信息(即)決定的,B項(xiàng)正確;由于密碼子的通用性,將“黑寡婦”蜘蛛的絲蛋白基因轉(zhuǎn)入奶羊或奶牛,就可通過(guò)它們的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)“生物鋼”,C項(xiàng)正確;“黑寡婦”蜘蛛細(xì)胞與大腸桿菌細(xì)胞融合得到的“工程菌”(雜種細(xì)胞)不能象癌細(xì)胞一樣無(wú)限增殖,所以也就不能實(shí)現(xiàn)考點(diǎn):本題考查基因工程、細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí),意在考查考生從課外材料中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息,并運(yùn)用這些信息,結(jié)合所學(xué)知識(shí)解決相關(guān)的生物學(xué)問(wèn)題的能力。15.根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)劃分,植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所常用的培養(yǎng)基分別是()A.固體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基B.固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基C.液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基D.液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基【答案】B【解析】試題分析:如果獲得幼苗則一般用固定培養(yǎng)基,植物組織培養(yǎng)一般用固定培養(yǎng)基;如果是獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物用的是液體培養(yǎng)基,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常是貼壁生長(zhǎng),接觸抑制,所以用液體培養(yǎng)基。考點(diǎn):本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基種類。點(diǎn)評(píng):本題難度中等,屬于考綱理解層次。解答本題的關(guān)鍵是理解固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基的區(qū)別。16.馬鈴薯和草莓都是無(wú)性繁殖的作物,它們感染的病毒很容易傳給后代。病毒在作物體內(nèi)逐年積累,就會(huì)導(dǎo)致作物產(chǎn)量降低,品質(zhì)變差。目前對(duì)它們進(jìn)行脫毒處理最好的辦法是A.采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得植株 B.采用基因工程技術(shù)培育抗蟲植株C.采用誘變育種培育抗性植物 D.采用雜交育種培育抗性植物【答案】A【解析】17.下列相關(guān)生物實(shí)踐與其所依據(jù)的生物學(xué)原理或規(guī)律,不符合實(shí)際的是()A.動(dòng)物細(xì)胞融合——細(xì)胞全能性B.單克隆抗體診斷疾病——抗體的特異性C.植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離——滲透作用原理D.害蟲防治——種群數(shù)量的變化規(guī)律【答案】A【解析】本題考查知識(shí)點(diǎn)為生物實(shí)踐與其所依據(jù)的生物學(xué)原理或規(guī)律。動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的原理為細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性;單克隆抗體診斷疾病利用了抗原抗體的特異性結(jié)合;植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離利用了植物細(xì)胞的滲透作用,成熟植物細(xì)胞失水產(chǎn)生的現(xiàn)象;害蟲防治要將害蟲數(shù)量控制在K/2以下,利用了種群數(shù)量的變化規(guī)律,因此答案為A。18.植株甲是二倍體水稻,通過(guò)生物技術(shù)手段利用植株甲獲得了植株乙,再利用甲、乙植株又獲得丙、丁兩種植株,培育過(guò)程如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是A.甲乙植株雜交后獲得的植株丙與原生質(zhì)體融合后獲得的植株丁染色體組數(shù)相同B.用秋水仙素處理植株甲幼苗可獲得植株乙C.植株丙的種子比植株甲的飽滿D.獲得植株丙和植株丁的生殖方式屬于有性生殖【答案】B【解析】試題分析:甲乙植株雜交后獲得的植株丙是三倍體,甲乙原生質(zhì)體融合后獲得的植株丁是六倍體,兩者染色體組數(shù)不相同,A錯(cuò)誤;用秋水仙素處理植株甲幼苗可獲得植株乙,B正確;植株丙是三倍體,不具有種子,C錯(cuò)誤;植株丙是雜交形成的,要經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂過(guò)程,而植株丁是植物體細(xì)胞雜交形成的,不需要經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂,D錯(cuò)誤??键c(diǎn):植物體細(xì)胞雜交19.下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的技術(shù)基礎(chǔ)B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可能發(fā)生癌變而具有無(wú)限增殖的特點(diǎn)C.由多個(gè)不同的親代細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群可稱為細(xì)胞克隆D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行,必要時(shí)可在培養(yǎng)液中添加適量抗生素【答案】C【解析】動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合、核移植技術(shù)等技術(shù),其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ),A正確;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的傳代培養(yǎng),部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變,具有癌變細(xì)胞的特點(diǎn),即無(wú)限增殖的特點(diǎn),B正確;一個(gè)克隆是指1個(gè)細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)形成的細(xì)胞群,C錯(cuò)誤;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要添加抗生素以防止雜菌污染,D正確。20.有關(guān)甘藍(lán)的原生質(zhì)體的敘述中,不正確的是A.組成原生質(zhì)體的主要生命物質(zhì)是蛋白質(zhì)和核酸B.原生質(zhì)體包括細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的細(xì)胞質(zhì)C.去掉細(xì)胞壁的植物細(xì)胞是原生質(zhì)體D.原生質(zhì)體可用于植物體細(xì)胞雜交【答案】B【解析】試題分析:本題考查植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí)。原生質(zhì)體是除植物細(xì)胞壁以外的所有物質(zhì)的總稱。組成原生質(zhì)體的主要成分是蛋白質(zhì)、核酸,全部的細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核是細(xì)胞工程中的原生質(zhì)體,細(xì)胞膜、液泡膜以及兩者之間的細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成的是原生質(zhì)層。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)就是將兩個(gè)不同種的或同種植物細(xì)胞的原生質(zhì)體在人工誘導(dǎo)的情況下融合成一個(gè)雜種細(xì)胞進(jìn)而通過(guò)組織培養(yǎng)發(fā)育成一個(gè)雜種植株的過(guò)程??键c(diǎn):本題主要考查植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí),意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解,把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力。二、非選擇題21.Ⅰ.轉(zhuǎn)基因克隆豬已在我國(guó)培育成功。研究組首先從豬胚胎皮膚細(xì)胞中分離出纖維細(xì)胞,進(jìn)行體外培養(yǎng)。通過(guò)電穿孔的方法將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入纖維細(xì)胞,經(jīng)篩選后將轉(zhuǎn)基因纖維細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞克隆,再將重組胚胎移入代孕母豬子宮內(nèi),最終獲得轉(zhuǎn)基因克隆豬。請(qǐng)回答:(1)在對(duì)豬纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),需要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的,以防止培養(yǎng)過(guò)程的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止對(duì)細(xì)胞自身造成危害。(2)篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞時(shí),需要用到基因表達(dá)載體中的。(3)在進(jìn)行體細(xì)胞克隆前,先要從屠宰場(chǎng)收集豬卵巢,采集,并在體外培養(yǎng)成熟。然后將轉(zhuǎn)基因纖維細(xì)胞核注入中,再經(jīng)過(guò)一系列過(guò)程獲得含有目的基因的重組胚胎。(4)為了提高重組胚胎的利用率,可對(duì)處于階段的胚胎進(jìn)行均等分割,再將重組胚胎移入代孕母豬子宮中繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因克隆豬。一般地,代孕母豬需要用激素處理處理,促使其以利于受孕。Ⅱ.土壤中有些細(xì)菌含有脲酶,可通過(guò)降解尿素作為其生長(zhǎng)的氮源。現(xiàn)對(duì)土壤中的這類細(xì)菌進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn),請(qǐng)回答:(1)分離培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)必須進(jìn)行無(wú)菌操作,包括培養(yǎng)基和各種器皿都必須是無(wú)菌的,常用的滅菌方法有(至少答2種)。(2)可用法分離純化得到能降解尿素的菌種。在接種活菌的過(guò)程中,要在旁進(jìn)行操作,接種后的培養(yǎng)皿于37℃的(3)用含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌,若培養(yǎng)基中存在分解尿素的細(xì)菌,其菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶,這是由于尿素被分解產(chǎn)生的使PH升高,使酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化,從而證明這一菌株以尿素為氮源。變色區(qū)域越大,表明該菌株利用尿素的能力?!敬鸢浮竣瘢?)抗生素;細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累(2)標(biāo)記基因(3)卵母細(xì)胞;去核卵細(xì)胞(4)桑椹胚或囊胚;同期發(fā)情Ⅱ(1)高壓蒸氣滅菌、灼燒滅菌(或干熱滅菌)(2)涂布分離或劃線分離;酒精燈;倒置;恒溫培養(yǎng)箱;(3)氨;越強(qiáng)【解析】試題分析:Ⅰ(1)為了防止雜菌污染,在動(dòng)物培養(yǎng)基中需要加入抗生素。培養(yǎng)過(guò)程中還應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,以防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。(2)基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因的作用是篩選含有目的基因的受體細(xì)胞。(3)在進(jìn)行體細(xì)胞克隆前,先要從屠宰場(chǎng)收集豬卵巢,采集卵母細(xì)胞,并在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期,然后將轉(zhuǎn)基因纖維細(xì)胞核注入去核的卵細(xì)胞中,再經(jīng)過(guò)一系列過(guò)程獲得含有目的基因的重組胚胎。(4)胚胎分割技術(shù)中一般將培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚的胚胎進(jìn)行均等分割。在胚胎移植過(guò)程中,代孕母豬需要用激素處理處理,促使其同期發(fā)情以利于受孕。Ⅱ(1)微生物分離和培養(yǎng)過(guò)程中,培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。(2)菌種純化可以用稀釋涂布平板法或平板劃線法進(jìn)行接種,接種時(shí)注意在酒精燈旁進(jìn)行,因?yàn)榫凭珶舾浇s菌比較少;接種后將培養(yǎng)皿倒置,放在37℃(3)分泌脲酶的細(xì)菌能將尿素分解產(chǎn)生堿性物質(zhì)氨,使得PH上升,與酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化,所以其菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶,此帶月大,表明該菌株利用尿素的能力越強(qiáng)??键c(diǎn):本題考查胚胎工程、微生物的分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí),意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。22.(選修一選修三任選其一)I選修一:(除標(biāo)注外每空2分,共15分)如圖表示菊花的嫩枝和月季的花藥的離體培養(yǎng)過(guò)程,請(qǐng)回答:(1)對(duì)菊花來(lái)說(shuō),要選取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝來(lái)進(jìn)行組織培養(yǎng),其原因是_________________;對(duì)月季來(lái)說(shuō),適宜花粉培養(yǎng)的時(shí)期是________期。為確定花粉是否處于該時(shí)期,最常用的鏡檢方法是________。(2)在培養(yǎng)嫩枝組織和花粉的培養(yǎng)基中都要加入一定的植物激素,常用的植物激素有_______________。(3)兩種植物組織培養(yǎng)都需要接種,在進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)注意()①接種室要消毒②只要戴口罩,操作時(shí)便可說(shuō)話③外植體可預(yù)先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡,取出用無(wú)菌水沖洗后,再用0.1%的氯化汞溶液消毒,并用無(wú)菌水沖洗干凈④接種操作要在酒精燈火焰旁進(jìn)行⑤接種完畢應(yīng)立即蓋好瓶蓋A.①②③④⑤B.①②③④C.①③④⑤ D.②③④⑤(4)月季的花藥培養(yǎng)與菊花的嫩枝組織培養(yǎng)不同,從植物產(chǎn)生的途徑來(lái)說(shuō),花粉植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外,還可以通過(guò)________階段發(fā)育而來(lái),這兩種發(fā)育途徑的差別主要取決于______________________。(5)圖中的B過(guò)程都需要_______(1分),因?yàn)橛鷤M織形成幼小植物后,植物需要葉綠素進(jìn)行光合作用。II選修三:(除標(biāo)注外每空2分,共15分)下圖為培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的技術(shù)流程,請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)質(zhì)粒上標(biāo)記基因的作用是。(2)過(guò)程①是,其組成除了目的基因外還必須有________________________以及標(biāo)記基因。(3)過(guò)程②采用最多的方法是,檢測(cè)抗蟲基因是否整合到棉花細(xì)胞DNA分(4)③過(guò)程的培養(yǎng)基除含有必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂外,還需要添加,④過(guò)程的實(shí)質(zhì)是。(5)經(jīng)檢測(cè)抗蟲棉細(xì)胞染色體上含有一個(gè)抗蟲基因,該植株自交得到Fl,其中全部的抗蟲植株再自交一次,后代中抗蟲植株占總數(shù)的(1分)?!敬鸢浮縄(除標(biāo)注外每空2分,共15分)(1)生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化單核醋酸洋紅法(2)細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素(3)C(4)胚狀體培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比(5)光照(1分)II(除標(biāo)注外每空2分,共15分)(1)鑒定和篩選含有目的基因的細(xì)胞(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建啟動(dòng)子和終止子(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法DNA分子雜交技術(shù)(4)植物激素基因選擇性表達(dá)(5)5/6(1分)【解析】試題分析:I(除標(biāo)注外每空2分,共15分)(1)生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。但合起的花粉適宜進(jìn)行花粉培養(yǎng)。醋酸洋紅法確定花粉是否處于單核期。(2)植物組織培養(yǎng)中常用的植物激素有細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素。(3)植物組織培養(yǎng)需要接種,在進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)注意:接種室要消毒;外植體可預(yù)先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡,取出用無(wú)菌水沖洗后,再用0.1%的氯化汞溶液消毒,并用無(wú)菌水沖洗干凈;接種操作要在酒精燈火焰旁進(jìn)行;接種完畢應(yīng)立即蓋好瓶蓋。(4)花粉植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外,還可以通過(guò)胚狀體階段發(fā)育而來(lái)。是由不定芽芽發(fā)育而來(lái)還是胚狀體發(fā)育而來(lái),主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。(5)圖中的B過(guò)程都需要光照,因?yàn)橐呀?jīng)分化出芽,可通過(guò)光合作用制造有機(jī)物以彌補(bǔ)培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分的不足。II(除標(biāo)注外每空2分,共15分)標(biāo)記基因的存在便于鑒定和篩選含有目的基因的細(xì)胞。①構(gòu)建基因表達(dá)的載體、②目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、③脫分化、④再分化。構(gòu)建的基因表達(dá)載體上必須有啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因等。(3)受體細(xì)胞為植物細(xì)胞,常用的目的基因?qū)敕檗r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。要堅(jiān)定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,利用DNA分子雜交的方法。(4)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除含有必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂外,還需要添加植物激素。再分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。(5)依據(jù)“抗蟲棉細(xì)胞染色體上含有一個(gè)抗蟲基因”,設(shè)該抗蟲植株的基因型為A0(A為抗蟲基因),該植株自交后代基因型為:1/4AA、1/2AO、1/400,篩除不抗蟲的,剩下的抗蟲植株中1/3AA,2/3Aa,再自交F2帶抗蟲植株所占比例為1-2/3*1/4=6/5。本題考查考點(diǎn):本題考查植物組織培養(yǎng)和基因工程的相關(guān)知識(shí),意在考查基礎(chǔ)知識(shí)的識(shí)記能力及理解應(yīng)用能力;用文字、圖表等多種表達(dá)形式準(zhǔn)確地描述生物學(xué)方面的內(nèi)容的能力。23.研究結(jié)果顯示,寨卡病毒(一種RNA病毒)的解旋酶是一種具有驅(qū)動(dòng)能力的“馬達(dá)蛋白”,其通過(guò)水解三磷酸核苷將化學(xué)能轉(zhuǎn)換為機(jī)械能,實(shí)現(xiàn)對(duì)雙鏈核酸的解鏈功能,進(jìn)而通過(guò)將單鏈遺傳物質(zhì)復(fù)制實(shí)現(xiàn)增殖。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題:(1)某生物科技創(chuàng)意小組看過(guò)上述信息后,設(shè)想采用基因工程技術(shù)在植物體內(nèi)合成“馬達(dá)蛋白”,該過(guò)程需要提取寨卡病毒的_______________,并且在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成_______________。
(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增上述產(chǎn)物的原理是________________________,該過(guò)程需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物包括引物、目的基因、4種游離的脫氧核苷酸和______________,擴(kuò)增過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成,一般PCR要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán),每次循環(huán)包括變性、_________________和延伸三步。(3)利用基因工程成功表達(dá)出“馬達(dá)蛋白”的核心步驟是_____________________。在分子水平上,可利用__________________的方法對(duì)“馬達(dá)蛋白”進(jìn)行檢測(cè)。【答案】RNAcDNADNA雙鏈復(fù)制耐高溫的DNA聚合酶(或Taq酶)(低溫)復(fù)性(或退火)復(fù)性基因表達(dá)載體的構(gòu)建抗原—抗體雜交【解析】試題解析:本題綜合考查學(xué)生對(duì)基因工程的知識(shí)的識(shí)記和理解能力。解答本題需熟記并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上,結(jié)合問(wèn)題情境,從題意中提取有效信息進(jìn)行相關(guān)問(wèn)題的解答。(1)依題意可知:“馬達(dá)蛋白”是一種解旋酶,由寨卡病毒的RNA控制合成,所以要想采用基因工程技術(shù)在植物體內(nèi)合成“馬達(dá)蛋白”,需要提取寨卡病毒的RNA,并且在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成cDNA。(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增上述產(chǎn)物(目的基因),利用的是DNA雙鏈復(fù)制的原理。該過(guò)程需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物包括引物、目的基因、4種游離的脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶(或Taq酶)。PCR一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán),每次循環(huán)包括變性、(低溫)復(fù)性(或退火復(fù)性)和延伸三步。(3)實(shí)施基因工程的核心步驟是:基因表達(dá)載體的構(gòu)建。在分子水平上,檢測(cè)“目的基因”是否成功表達(dá)出“馬達(dá)蛋白”,可利用抗原—抗體雜交技術(shù)。24.基因工程制藥是制藥行業(yè)的一支新軍,不僅具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),發(fā)展速度也很快,下圖是應(yīng)用基因工程構(gòu)建皰疹病毒亞單位疫苗的方法,請(qǐng)根據(jù)圖示回答下列問(wèn)題:(1)提取單純皰疹病毒DNA后用__________酶切取___________基因作為目的基因,獲取目的基因后,要用__________對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增。(2)首先,要已知目的基因的_______________,以便人工合成引物。將過(guò)量的引物與目的基因混合,加熱到_____℃,使雙鏈DNA解旋成單鏈,之后冷卻到55-60℃,引物與DNA單鏈結(jié)合,下一步,加入_________和4種脫氧核苷酸,升高溫度至70-75℃后,完成互補(bǔ)鏈的合成,如此重復(fù)循環(huán)多次,直到產(chǎn)生足夠供實(shí)驗(yàn)用的目的基因。(3)提取并剪切牛痘DNA,使其與目的基因連接成重組DNA后,在___________中培養(yǎng)一段時(shí)間后,分離出無(wú)害的病毒(疫苗),它含有與______________相同的外殼。(4)將分離出的疫苗注射到人體內(nèi),激活人體的______________免疫,產(chǎn)生抗體和記憶細(xì)胞?!敬鸢浮肯拗泼竿鈿さ鞍譖CR技術(shù)一段核苷酸序列90—95Taq酶活細(xì)胞單純皰疹病毒體液【解析】試題分析:本題考查基因工程、PCR技術(shù)等相關(guān)知識(shí),解答本題關(guān)鍵是能識(shí)記基因工程的基本步驟,理解PCR技術(shù)的原理,再結(jié)合題意,就能準(zhǔn)確作答。(1)據(jù)題干信息可知,利用皰疹病毒的蛋白質(zhì)外殼制成疫苗,所以要獲得控制合成皰疹病毒蛋白質(zhì)外殼的基因,即為本實(shí)驗(yàn)的目的基因,常利用特定的限制酶進(jìn)行切割皰疹病毒DNA可以獲取目的基因;如果需要大量的目的基因,則可以通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。(2)PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因,該技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成引物,PCR反應(yīng)中溫度呈現(xiàn)周期性變化,其中加熱到90~95℃使是雙鏈DNA解聚為單鏈,然后冷卻到55-60℃使引物與互補(bǔ)DNA鏈結(jié)合,在加入熱穩(wěn)定性DNA聚合酶和合成DNA的原料,即4種脫氧核苷酸;繼續(xù)加熱到70~75℃,目的是在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸。(3)提取并剪切牛痘DNA,使其與目的基因連接成重組DNA,通過(guò)顯微注射法將含有牛痘DNA的表達(dá)載體導(dǎo)入到牛的活細(xì)胞中,經(jīng)過(guò)一段時(shí)間培養(yǎng)后,可獲得與皰疹病毒相同的外殼。(4)疫苗注射到人體內(nèi)后,機(jī)體會(huì)產(chǎn)生特異性免疫,在特異性免疫中能產(chǎn)生抗體的只有體液免疫過(guò)程。25.自然條件下,哺乳動(dòng)物不發(fā)生孤雌生殖。2014年3月,云南農(nóng)大科研團(tuán)隊(duì)把豬卵母細(xì)胞進(jìn)行人為的孤雌激活處理,使其發(fā)育成胚胎,移植到代孕母豬體內(nèi),獲得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆豬。這種克隆豬不同于核移植獲得的克隆豬,現(xiàn)將兩種技術(shù)進(jìn)行比較。(1)圖中過(guò)程①②③④是獲得孤雌生殖克隆豬的技術(shù)流程,那么獲得核移植克隆豬的技術(shù)流程是過(guò)程____________(填序號(hào))。(2)孤雌生殖克隆豬仍然是二倍體生物,但由于缺失____________方親本基因,導(dǎo)致其生長(zhǎng)發(fā)育中出現(xiàn)多種問(wèn)題,給研究者提供了很好的材料。(3)孤雌激活處理其實(shí)質(zhì)是要激活卵母細(xì)胞____________,使其發(fā)育成早期胚胎,得到克隆豬。(4)體細(xì)胞核移植技術(shù)中也會(huì)用到卵母細(xì)胞,需要選擇____________時(shí)期的卵母細(xì)胞,并用微型吸管吸出____________。(5)早期胚胎移植時(shí),必需移植到同種,____________的其他雌性動(dòng)物子宮中,才可能移植成功。(6)可以從兩種不同的克隆豬中提取mRNA進(jìn)行研究,也可通過(guò)____________方法得到多種cDNA,并通過(guò)技術(shù)擴(kuò)增產(chǎn)物?!敬鸢浮浚?)⑤⑥③④(2)父(3)細(xì)胞核全能性(或增殖分化)(4)減數(shù)第二次分裂中期細(xì)胞核和第一極體(缺一不可)(5)生理狀態(tài)相同(6)反轉(zhuǎn)錄PCR【解析】(1)核移植技術(shù)的操作過(guò)程是:將體細(xì)胞的細(xì)胞核和去核卵母細(xì)胞結(jié)合形成重組細(xì)胞,然后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)獲得早期胚胎并利用胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植入受體的子宮中孕育,最后獲得克隆動(dòng)物個(gè)體。據(jù)圖分析知,獲得核移植克隆豬的技術(shù)流程是過(guò)程⑤⑥③④。(2)據(jù)圖分析可知,孤雌生殖克隆豬是把豬卵母細(xì)胞進(jìn)行人為的孤雌激活處理,使其發(fā)育成胚胎,移植到代孕母豬體內(nèi)而獲得的,故缺乏父方的遺傳基因。(3)克隆技術(shù)(核移植技術(shù))的原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性,所以孤雌激活處理其實(shí)質(zhì)是要激活卵母細(xì)胞細(xì)胞核的全能性,使其發(fā)育成早期胚胎,得到克隆豬。(4)體細(xì)胞核移植時(shí)需要選擇處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞,并用微型吸管吸出卵母細(xì)胞的細(xì)胞核和第一極體,再移入體細(xì)胞的細(xì)胞核。(5)胚胎移植的生理基礎(chǔ)之一是動(dòng)物發(fā)情排卵后,同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的(受體能為供體胚胎提供相同的生理環(huán)境,這是胚胎移植成功的關(guān)鍵)。所以早期胚胎移植時(shí),必需移植到同種且生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物子宮中,才可能移植成功。(6)可通過(guò)反轉(zhuǎn)錄方法可得到多種cDNA,并通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增產(chǎn)物?!究键c(diǎn)定位】核移植技術(shù)、孤雌生殖及胚胎工程26.DHA對(duì)腦神經(jīng)發(fā)育至關(guān)重要。以A、B兩種單細(xì)胞真核藻為親本,利用細(xì)胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻。兩種藻特性如下表。親本藻優(yōu)勢(shì)代謝類型生長(zhǎng)速率(g/L天)固體培養(yǎng)基上菌落直徑DHA含量(‰)A藻自養(yǎng)0.06小0.7B藻異養(yǎng)0.14大無(wú)據(jù)表回答:(1)選育的融合藻應(yīng)具有A藻_______________與B藻______________的優(yōu)點(diǎn)。(2)誘導(dǎo)融合前需用纖維素酶處理兩種藻,其目的是獲得_____________________。(3)通過(guò)以下三步篩選融合藻,步驟______可淘汰B藻,步驟______可淘汰生長(zhǎng)速成率較慢的藻落,再通過(guò)步驟______獲取生產(chǎn)所需的融合藻。步驟a:觀察藻落的大小步驟b:用不含有機(jī)碳源(碳源——生物生長(zhǎng)的碳素來(lái)源)的培養(yǎng)基進(jìn)行光照培養(yǎng)步驟c:測(cè)定DHA含量(4)以獲得的融合藻為材料進(jìn)行甲、乙、丙三組試驗(yàn),結(jié)果如下圖。①甲組條件下,融合藻產(chǎn)生[H]的細(xì)胞器是__________;丙組條件下產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器是____________。②與甲、丙兩組相比,乙組融合藻生長(zhǎng)速率較快,原因是在該培養(yǎng)條件下__________________。甲、乙兩組DHA產(chǎn)量均較高,但實(shí)際生產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件,其原因是_______________?!敬鸢浮浚?)產(chǎn)生DHA、自養(yǎng)特性快速生長(zhǎng)(2)原生質(zhì)體(3)bac(4)①線粒體、葉綠體線粒體②融合藻既能光能自養(yǎng),又能異養(yǎng)融合藻利用光能和簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物即能生長(zhǎng),不需要添加葡萄糖,可降低成本,還可防止雜菌生長(zhǎng)【解析】(1)表中數(shù)據(jù)表明,A藻自養(yǎng)且能產(chǎn)生DHA,B藻生長(zhǎng)速率高,因此AB融合后,選育的融合藻應(yīng)具有A藻產(chǎn)生DHA、自養(yǎng)特性與B藻快速生長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)。(2)誘導(dǎo)融合前需用纖維素酶處理兩種藻,其目的是去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體。(3)由于B藻異養(yǎng),步驟b可淘汰B藻;通過(guò)步驟a觀察藻落的大小可淘汰生長(zhǎng)速成率較慢的藻落;再通過(guò)步驟c測(cè)定DHA含量即可獲取生產(chǎn)所需的融合藻。(4)以獲得的融合藻為材料進(jìn)行甲、乙、丙三組試驗(yàn),分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,①甲組光照條件下,融合藻既能進(jìn)行光合作用又能進(jìn)行細(xì)胞呼吸,因此產(chǎn)生[H]的細(xì)胞器是線粒體、葉綠體;丙組黑暗條件下只能進(jìn)行細(xì)胞呼吸,因此產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器是線粒體。②與甲、丙兩組相比,乙組在光照和添加葡萄糖的條件下融合藻生長(zhǎng)速率較快,原因是在該培養(yǎng)條件下融合藻既能光能自養(yǎng),又能異養(yǎng);甲、乙兩組DHA產(chǎn)量均較高,但實(shí)際生產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件,其原因是融合藻利用光能和簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物即能生長(zhǎng),不需要添加葡萄糖,可降低成本,還可防止雜菌生長(zhǎng)。【考點(diǎn)定位】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及其應(yīng)用【名師點(diǎn)睛】1.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖:(1)過(guò)程①為去除細(xì)胞壁獲得具有活力的原生質(zhì)體,所用到的酶是纖維素酶和果膠酶。(2)過(guò)程②是原生質(zhì)體的融合,其原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性,人工誘導(dǎo)的物理法包括離心、振動(dòng)、電激等;化學(xué)法一般用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑。(3)過(guò)程③是原生質(zhì)體融合后再生出細(xì)胞壁,這是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志。(4)過(guò)程④是植物組織培養(yǎng)技術(shù),其原理是植物細(xì)胞的全能性。2.有關(guān)植物體細(xì)胞雜交的三個(gè)易誤點(diǎn)(1)誤認(rèn)為植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果只是形成雜種細(xì)胞。植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果最終要經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)形成雜種植株。(2)誤認(rèn)為植物體細(xì)胞雜交屬于有性生殖。植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中沒有有性生殖細(xì)胞的結(jié)合,因此不屬于有性生殖,應(yīng)為無(wú)性生殖。(3)誤認(rèn)為雜種植株的變異類型屬于基因重組。雜種植株的變異類型屬于染色體變異,雜種植株的染色體數(shù)通常是兩親本細(xì)胞染色體數(shù)目之和,雜種植株屬于異源多倍體。27.如圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)若A、B是植物細(xì)胞,在細(xì)胞融合之前已處理,除去了__________;A、B到細(xì)胞C的過(guò)程中,常用的物理方法是______________________;融合完成的標(biāo)志是___________________;則形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用______________________技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。(2)若A、B是動(dòng)物細(xì)胞,則一般取自幼齡動(dòng)物組織或胚胎,然后用___________使其分散開來(lái);A、B到C的過(guò)程中常用的但不能用于植物體細(xì)胞雜交的手段是__________________。(3)若該過(guò)程是制備單克隆抗體,A為小鼠效應(yīng)B細(xì)胞,那么,在獲得此細(xì)胞之前,小鼠已被注射了__________________。注射后小鼠身體產(chǎn)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng),圖中B為_____________________。用來(lái)培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是能產(chǎn)生特定抗體的__________________?!敬鸢浮考?xì)胞壁離心、振動(dòng)、電激形成新的細(xì)胞壁植物組織培養(yǎng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶滅活病毒誘導(dǎo)相應(yīng)的抗原骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞【解析】本題考查細(xì)胞融合相關(guān)知識(shí),意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記理解掌握程度。(1)若A、B是植物細(xì)胞,在細(xì)胞融合之前已處理,需要用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。A、B到細(xì)胞C的過(guò)程中,常用的物理方法有離心、振動(dòng)、電激。融合完成的標(biāo)志是形成新的細(xì)胞壁。則形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)把D培養(yǎng)成植株,該過(guò)程還需要經(jīng)過(guò)脫分化和再分化。(2)若A、B是動(dòng)物細(xì)胞,則一般取自幼齡動(dòng)物組織或胚胎,然后用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使其分散開來(lái)。A、B到C的過(guò)程中常用的但不能用于植物體細(xì)胞雜交的手段是用滅活的病毒誘導(dǎo)融合,此方法只是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法。(3)單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的,而雜交瘤細(xì)胞需要將效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的。要獲得效應(yīng)B細(xì)胞,小鼠就需要先被注射了相應(yīng)的抗原,注射后小鼠身體產(chǎn)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng),圖中B就應(yīng)是和效應(yīng)B細(xì)胞進(jìn)行融合的骨髓瘤細(xì)胞。而D細(xì)胞應(yīng)該是能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。28.紅豆杉是瀕危植物,其樹皮產(chǎn)生的紫杉醇對(duì)癌癥有一定的療效。如圖是紅豆杉植株組織培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)的流程圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。(1)圖中②為愈傷組織,通過(guò)B過(guò)程可最終產(chǎn)生新的植株,通過(guò)C過(guò)程可產(chǎn)生大量細(xì)胞,則圖中A、B、C分別表示的過(guò)程為。其中B過(guò)程的實(shí)質(zhì)是。(2)對(duì)⑤的培養(yǎng)一般要采用培養(yǎng)基,且要不斷通入無(wú)菌空氣并進(jìn)行攪拌,其目的是
。(3)對(duì)⑤的培養(yǎng)可獲得代謝產(chǎn)物——紫杉醇,但培養(yǎng)后期紫杉醇產(chǎn)量下降,其原因包括等。(4)若①是紅豆杉(基因型為DdTt)的花藥,可選用(填編號(hào))制成人工種子,該“種子”萌發(fā)的幼苗用處理,可快速獲得純種植株,該植株的基因型為。【答案】(1)脫分化、再分化、有絲分裂基因的選擇性表達(dá)(2)液體保證氧氣的供應(yīng)、使細(xì)胞和培養(yǎng)液充分接觸(3)活細(xì)胞數(shù)量減少,某些代謝產(chǎn)物的積累(4)③秋水仙素DDTT、DDtt、ddTT、ddtt【解析】圖中①為紅豆杉離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體),②為愈傷組織,③為試管苗(胚狀體),④為植物體,⑤為大量的紅豆杉細(xì)胞;再分化的實(shí)質(zhì)是細(xì)胞內(nèi)基因的選擇性表達(dá)。⑤的培養(yǎng)目的是使細(xì)胞快速增殖,一般采用液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),在培養(yǎng)過(guò)程中通入無(wú)菌
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