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文檔簡介

ICS 65.020.20CCSB39

DB61陜 西 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB61/T1776—2023金耳菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范TechnicalspecificationforsolidandliquidspawnproductionofNaemateliaaurantialba20232023122220240122陜西省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB61/T1776DB61/T1776—2023DB61/T1776DB61/T1776—2023目 次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語和定義 1生產(chǎn)條件 2生產(chǎn)要求 3貯存 5生產(chǎn)檔案 5附錄A(資料性)常用母種培養(yǎng)基及其配方 6附錄B(資料性)常用原種和栽培種培養(yǎng)基及其配方 7附錄C(資料性)金耳液體菌種生產(chǎn)工藝流程 8附錄E(資料性)常用液體三級菌種培養(yǎng)基及其配方 10參考文獻(xiàn) 附錄E(資料性)常用液體三級菌種培養(yǎng)基及其配方 10參考文獻(xiàn) 11I前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由陜西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位:陜西省微生物研究所、柞水縣科技開發(fā)中心、陜西省園藝技術(shù)工作站、陜西中科菌業(yè)科技有限公司、陜西和豐陽光生物科技有限責(zé)任公司、商洛市商州區(qū)潤科農(nóng)業(yè)投資開發(fā)有限公司、柞水縣小嶺鎮(zhèn)金米村股份經(jīng)濟(jì)合作社。本文件由陜西省微生物研究所負(fù)責(zé)解釋。本文件首次發(fā)布。聯(lián)系信息如下:電話址:陜西省西安市西影路電話址:陜西省西安市西影路76號郵編:710043II金耳菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范范圍本文件規(guī)定了金耳菌種生產(chǎn)中生產(chǎn)條件、生產(chǎn)要求、貯存和生產(chǎn)檔案的要求。規(guī)范性引用文件(包括所有的修改單適用于本文件。GB/T12728—2006 食用菌術(shù)語GB50073 潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范NY/T528—2010 食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1846—2010 食用菌菌種檢驗(yàn)規(guī)程術(shù)語和定義GB/T12728GB/T12728界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1金耳(Bandoni&M.Zang)millanes&wedin耳。3.2毛韌革菌(WilldFr.擔(dān)子菌亞門,傘菌綱,紅菇目,韌革菌科,韌革菌屬真菌,是金耳生長發(fā)育的共生菌。3.3金耳菌種culture生長在適宜基質(zhì)上具有結(jié)實(shí)性的金耳菌絲體和毛韌革菌菌絲體的混合培養(yǎng)物。3.4母種stockculture具有結(jié)實(shí)性的金耳和毛韌革菌菌絲體純培養(yǎng)物,也稱一級種。[來源:GB/T12728—2006,2.5.7,有修改]13.5原種motherspawn由母種繁殖的菌絲體固體純培養(yǎng)物,也稱二級種。[來源:GB/T12728—2006,2.5.8,有修改]3.6栽培種spawn由原種繁殖的菌絲體固體純培養(yǎng)物,也稱三級種。[來源:GB/T12728—2006,2.5.9,有修改]3.7液體二級菌種secondaryliquidspawn由母種移植到液體培養(yǎng)基中繁殖的菌絲體純培養(yǎng)物。3.8液體三級菌種tertiaryliquidspawn由液體二級菌種移植到液體培養(yǎng)基中繁殖的菌絲體純培養(yǎng)物。3.9固體培養(yǎng)基表面形成的,尚未成熟的米白色或淡黃色金耳幼子實(shí)體。3.10有效菌種effectivestrains固體培養(yǎng)基表面形成的,尚未成熟的米白色或淡黃色金耳幼子實(shí)體。3.10有效菌種effectivestrains能夠形成健康子實(shí)體的菌種。4生產(chǎn)條件技術(shù)人員應(yīng)符合《食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定。生產(chǎn)環(huán)境要求應(yīng)符合NY/T528—2010中4.2的規(guī)定。廠房設(shè)置和布局固體菌種廠房應(yīng)符合NY/T528—2010中4.3的規(guī)定。液體菌種廠房應(yīng)設(shè)有原料庫、配料室、滅菌室、無菌接種室、液體菌種培養(yǎng)室、菌種檢驗(yàn)室。2廠房地面、墻壁和天花板應(yīng)能防水、防腐蝕、防滲漏、防滑、易清洗、防潮、防霉、有排水系統(tǒng)。門窗應(yīng)設(shè)置防蚊蠅紗網(wǎng)。車間應(yīng)配備送、排風(fēng)系統(tǒng)。GB50073的要求。設(shè)施、設(shè)備固體菌種應(yīng)符合NY/T528—2010中4.4的規(guī)定。液體菌種種源按照NY/T528—2010中4.5的規(guī)定執(zhí)行。生產(chǎn)要求母種生產(chǎn)應(yīng)符合NY/T528—2010中應(yīng)符合NY/T528—2010中4.7.1.2的規(guī)定。培養(yǎng)基的配制NY/T528—20104.7.21/5~1/4,管口保持干凈。12130min50℃~60℃后,將試管擺放為斜面。3%~5%28℃~3548h,無菌落長出。接種應(yīng)按照NY/T528—2010中4.7.7的規(guī)定執(zhí)行。培養(yǎng)溫度控制在18℃~21℃,避光培養(yǎng)10d~15d。培養(yǎng)基表面形成直徑大于1cm、無黃斑、無絨毛的原基。原種、栽培種生產(chǎn)容器應(yīng)符合NY/T528—2010中4.7.1.3和4.7.1.4的規(guī)定。培養(yǎng)基的配制所用原材料應(yīng)符合NY/T528—2010中4.7.2的規(guī)定。原種和栽培種培養(yǎng)基配方見附錄B。裝料量控制在袋(瓶)的1/2即可,121℃滅菌120min。3接種原種袋(瓶)和栽培種袋(瓶)滅菌、冷卻后,將菌絲體和子實(shí)體塊同時(shí)轉(zhuǎn)接至培養(yǎng)袋(瓶)中。消毒和接種應(yīng)符合NY/T528—2010中4.7.7的規(guī)定。培養(yǎng)18℃~2128d~35d18℃~2135d~42d檢查分別在第4d~5d、第15d~17d、第25d~30d逐袋(瓶)檢查,并及時(shí)剔除未萌發(fā)、已污染、分泌黃水、不分化、生長不良的菌袋(瓶。液體菌種生產(chǎn)工藝流程見附錄C。液體二級菌種容器容器耐高溫的玻璃三角瓶、棉塞或硅膠塞。培養(yǎng)基的制備所用原材料應(yīng)符合NY/T528—2010中4.7.2的規(guī)定。培養(yǎng)基配方見附錄D。接種和培養(yǎng)取有效母種培養(yǎng)基和組織塊接入液體二級菌種培養(yǎng)基中,20℃靜置培養(yǎng)24h后,以轉(zhuǎn)速150r/min~180r/min震蕩培養(yǎng)7d。觀察1min后,菌絲球體積占液體培養(yǎng)基總體積的4/5以上時(shí),即可結(jié)束培養(yǎng)。檢查發(fā)酵結(jié)束后,抽取樣品,按照NY/T1846—2010中的4.2、4.3和4.4檢驗(yàn)。液體三級菌種空消發(fā)酵罐121℃滅菌30min。培養(yǎng)基4所用原材料應(yīng)符合NY/T528—2010中4.7.2的規(guī)定。培養(yǎng)基配方見附錄E。投料與定容將配制好的培養(yǎng)基材料攪拌均勻,倒入或用泵抽入發(fā)酵罐中,加水定容至所需體積。發(fā)酵罐實(shí)消0.1Mpa~0.12Mpa121℃~12450min~70min℃。接種把液體二級菌種接入發(fā)酵罐,接種量的體積比為0.8‰~2‰。培養(yǎng)培養(yǎng)溫度18℃~21pH6.2~pH150r/min~160r/min,罐壓0.02MPa,培養(yǎng)時(shí)間4d~8d。檢查培養(yǎng)3d后每天取樣,按照NY/T1846—2010中的4.2、4.3和4.4檢驗(yàn)。貯存固體菌種固體菌種4℃~6℃避光貯存且不超過15d。液體菌種培養(yǎng)好后應(yīng)立即使用。7生產(chǎn)檔案應(yīng)符合《食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定。5附錄A(資料性)常用母種培養(yǎng)基及其配方PDA(馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基)200?g20?g20?g1000?mL。CPDA(綜合馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基)馬鈴薯200?g,葡萄糖20?g,磷酸二氫鉀2?g,硫酸鎂0.5?g,瓊脂20?g,加水定容至1000?mL。66附錄B(資料性)常用原種和栽培種培養(yǎng)基及其配方1闊葉樹木屑85%,麩皮12%,豆粕2%,生石膏1%,水分58%~60%,pH6~pH6.5。2闊葉樹木屑58%,棉籽殼25%,麩皮15%,生石膏1%,蔗糖1%,水分58%~60%,pH6~pH6.5。77附錄C(資料性)金耳液體菌種生產(chǎn)工藝流程金耳母種金耳母種液體二級菌種培養(yǎng)基接種培養(yǎng)金耳液體二級菌種發(fā)酵罐的準(zhǔn)備培養(yǎng)基制備、滅菌、冷卻接種發(fā)酵培養(yǎng)金耳液體三級菌種圖C.1金耳液體菌種生產(chǎn)工藝流程88附錄D(資料性)常用液體二級菌種培養(yǎng)基及其配方1馬鈴薯200

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