飼料質(zhì)量安全檢測(cè)方法建立、確認(rèn)、驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制實(shí)施指南 編制說明

根據(jù)《國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)關(guān)于下達(dá)2020年第三批推薦性國家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)劃目名稱為《飼料質(zhì)量安全檢測(cè)方法建立、確該標(biāo)準(zhǔn)自2009年實(shí)施以來，對(duì)指導(dǎo)我國飼料中獸藥及其他化合物的儀器分），二、國家標(biāo)準(zhǔn)編制原則、主要內(nèi)容及其確定依據(jù)。修訂國家標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，還包化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》（GB/《標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則第7部分：指南標(biāo)準(zhǔn)》（GB/T20001.7－2017）的規(guī)定，進(jìn)行GB/T23182－2008飼料中GB/T27025－2019檢GB/T27404－2008實(shí)驗(yàn)室GB/T27405－2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)GB/T27407－2010實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制利用統(tǒng)計(jì)質(zhì)量保證和控制圖技術(shù)GB/T27417－2017合格評(píng)定GB/T32464－2015化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制利用控制圖核查分GB/T32465－2015化學(xué)分析方GB/T32467－2015化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制術(shù)語及定義GB/T33464－2016化學(xué)分GB/T35655－2017化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制實(shí)施指南GB/T35656－2017化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制實(shí)施指南GB/T35657－2017化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制實(shí)施指南RB/T030－2020化學(xué)分析RB/T032－2020基因擴(kuò)增CNAS-GL027－2018化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制指南——控制圖的（GB/T23182-2008）相比，修訂前后變化詳見表2.表2標(biāo)準(zhǔn)修訂前后范圍變化情況序號(hào)GB/T23182-2008本文件變化情況1規(guī)定了飼料中藥物、微量化學(xué)添加劑和化學(xué)污染物檢測(cè)試驗(yàn)的基本要求（檢測(cè)方法確立、性能檢驗(yàn)、標(biāo)準(zhǔn)曲線制作、檢出物確證、結(jié)果計(jì)算與表述、試驗(yàn)報(bào)告撰寫等）。規(guī)定了飼料質(zhì)量安全檢測(cè)方法建立、確認(rèn)、驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制的一般原則和要求。豐富完善了原標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容，增加了內(nèi)部質(zhì)量控制的一般原則和要求。2適用于指導(dǎo)配合飼料、濃縮飼料及飼料添加劑預(yù)混合飼料中獸藥、違禁使用藥物及其他化學(xué)污染物的儀器分析試驗(yàn)。適用于飼料質(zhì)量安全檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)新檢測(cè)方法的建立，以及實(shí)驗(yàn)室對(duì)新引入標(biāo)準(zhǔn)方法的確認(rèn)、驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制。擴(kuò)大了標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍，由原來3種飼料中的獸藥、違禁使用藥物及其他化學(xué)污染物的儀器分析試驗(yàn)方法擴(kuò)大為飼料質(zhì)量安全檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的使用的所有新方法，不在局限于儀器分析試驗(yàn)。適用于本文件?！盙B/T27025－2019（ISO/IGB/T27407－2010實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制利用統(tǒng)計(jì)質(zhì)量保證和控制圖技術(shù)化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制利用控制圖核查分析32467）界定的術(shù)語和定義均適用于本文件.保留了原有的12個(gè)術(shù)語中的靈敏度、檢測(cè)限、定量度）第1部分：總則與定義》（GB/T6379.1）和《化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和部質(zhì)量控制等11個(gè)術(shù)語和定義。其中驗(yàn)證的定義采用了ISO/IEC17025:2），已知確切含量樣品中的待測(cè)物或添加到空白樣品中的測(cè)試物測(cè)定值占其真（11）內(nèi)部質(zhì)量控制interna注：參見國際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)技術(shù)報(bào)告：1995《分析實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制一致性指南》（IUPACharmonizedguidelinesforinternalqualitycontrolinanalyticallaboratories.IUPACTECHNICALREPORT:1995。）（12）標(biāo)準(zhǔn)操作程序standardope等?！狈椒?yàn)證或確認(rèn)后應(yīng)對(duì)結(jié)果加以利用，并按照GB/T32465－2015第8章SOP的要求編制SOP，SOP的格式和內(nèi)容規(guī)依據(jù)GB/T32465－2015第9章IQC要求的規(guī)定建立內(nèi)部質(zhì)量控制體系，按照GB/T32464－2015和《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量2.2.5.3.1應(yīng)使用有證標(biāo)準(zhǔn)樣品核查、參加能力驗(yàn)證計(jì)劃、與經(jīng)典的方法或2.2.5.3.2可結(jié)合回收率進(jìn)2.2.5.3.3使用有證標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行重復(fù)性分析，研究正確度，重復(fù)檢測(cè)的平2.2.5.3.5發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室存在偏倚(實(shí)驗(yàn)室偏倚)時(shí)，應(yīng)檢查存在偏倚的原因，結(jié)果經(jīng)回收率校正后的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)與接受參考值之間的偏差不能超過表2的表2定量方法的最低正確度要求濃度水平/(μg/kg）范圍/%-50~20-30~10>10-20~102.2.5.3.7如果只是對(duì)方法實(shí)施正確度驗(yàn)證，工作內(nèi)容可適當(dāng)從簡，只要回時(shí)，結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)；2.2.5.3.5條款規(guī)定了發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室存在偏倚(實(shí)驗(yàn)室偏倚)時(shí)1~10μg/kg、＞10μg/kg三個(gè)濃度水平給出，具有較好的適用性；5.3.7條款規(guī)定了2.2.5.4.1精密度包括重復(fù)性和再現(xiàn)性。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定方案，確認(rèn)方法的重2.2.5.4.2一般情況下，用重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差sr和再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差sRM作為重復(fù)性和再現(xiàn)性參數(shù)，重復(fù)性限r(nóng)=3sr，再現(xiàn)性限R=3sRM。2.2.5.4.3精密度獨(dú)立重復(fù)檢假定樣品基質(zhì)類型為n，每種樣品基質(zhì)檢測(cè)m個(gè)子樣，每個(gè)子樣獨(dú)立重復(fù)檢測(cè)r（r≥2）次，共進(jìn)行d天檢測(cè)。則表3重復(fù)檢測(cè)的自由度計(jì)算基質(zhì)類型子樣數(shù)重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差自由度再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差自由度716未確定42673368266nm（n－l）m2.2.5.4.4工作范圍內(nèi)精密度a）實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在校準(zhǔn)曲線所確定的工作范圍內(nèi)研究精密度絕對(duì)值與目b）可將使用Horwitz方程計(jì)算的結(jié)果用于評(píng)價(jià)精密度。Horwitz方程：表4是用Horwitz方程計(jì)算得到的變異系數(shù)d）在重復(fù)性條件下，變異系數(shù)通常為Horwitz方程計(jì)算的結(jié)表4不同濃度或含量范圍的再現(xiàn)性質(zhì)量分?jǐn)?shù)/(μg/kg）重復(fù)性CV/%1aa23表5不同濃度或含量的待測(cè)物精密度期望值目標(biāo)組分含量/%目標(biāo)組分所占比率單位相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差/%112.70.013.70.001100mg/kg5.30.000110mg/kg7.30.000011mg/kg0.000001100μg/kg0.0000001210.0000000130含量范圍內(nèi)重復(fù)性變異系數(shù)的參考結(jié)果，通過列表的方式2.2.5.5.1應(yīng)結(jié)合方法的特點(diǎn)，研究檢出限、定量表6定量檢測(cè)中LOD的表示方法2）加入最低可接受濃度的樣品空白獨(dú)立測(cè)試注1：“最低可接受濃度”為在所得不確定度可接受a僅當(dāng)空白中干擾物質(zhì)的信號(hào)值高于樣品空白之的3s的概率遠(yuǎn)小于1%時(shí)適用。如果在LOD附近或接近LOD的樣品數(shù)據(jù)無法獲得時(shí)，可利用校準(zhǔn)方程的參數(shù)評(píng)估儀器的LOD。如果用空白平均值加上空白的3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差，儀器對(duì)于空白顧客利用方程yLOD=a+3Sy/x=a+bxLOD，則xLOD=3Sy/x/b。此方程可廣泛應(yīng)用于分析），表7定性分析-確定臨界值次次2.2.5.5.3如果樣品經(jīng)過前處理后，前處理液的體積與樣品目標(biāo)組分含量存在倍數(shù)關(guān)系，不能簡單地用樣品前處理液的最2.2.5.5.4若方法中已給出該方法的方法檢出限（MethodDetectionLimit，出的MDL，分析結(jié)果應(yīng)在給出的MDL±20%范圍內(nèi)；若方法未給出MDL，實(shí)2.2.5.5.5應(yīng)在基體中逐步稀釋目標(biāo)組分，多次重復(fù)檢測(cè)。對(duì)結(jié)果的平均值）：b）方法定量限為在特定基質(zhì)中在一定可信度內(nèi)，用魔衣方法可靠地檢出并標(biāo)準(zhǔn)偏差作為LOQ，也可以3倍的LOD或高于方法確認(rèn)中使用最低加標(biāo)量的50%作為LOQ，如為增加數(shù)據(jù)的可信性，LOQ也可用10倍的LOD來表示。另外在某與樣品目標(biāo)組分含量存在倍數(shù)關(guān)系的情況下，確定方法檢出條款規(guī)定了在給出方法檢出限（MDL）的情況下驗(yàn)證時(shí)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)，及未給出MDL情況下進(jìn)行檢出限研究的原則；2.2.5.5.5條款規(guī)定2.2.5.6.1校準(zhǔn)曲線工作范圍確定,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)校準(zhǔn)曲線的線性范圍和樣2.2.5.6.2應(yīng)在校準(zhǔn)曲線濃度范圍均勻布置6個(gè)或以上的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)（包括2.2.5.6.4應(yīng)考察校準(zhǔn)曲線各濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)偏差與濃度的關(guān)系。若標(biāo)準(zhǔn)偏差2.2.5.6.5校準(zhǔn)和線性度的評(píng)估有多種方法，具體選擇哪種方法，也應(yīng)視具2.2.5.6.6應(yīng)確定校準(zhǔn)曲線是否穩(wěn)定，即在不同時(shí)間，制作同一條曲線的重2.2.5.6.7當(dāng)目標(biāo)組分含量或濃度在工作曲線工作范圍內(nèi)時(shí)，可使用單點(diǎn)校2.2.5.6.8對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行線性及校準(zhǔn)驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)a）在方法文本規(guī)定的工作范圍內(nèi)確定校準(zhǔn)曲線的各個(gè)濃度點(diǎn)。濃度應(yīng)滿足2.2.5.6.2的要求，最低濃度校準(zhǔn)點(diǎn)應(yīng)遠(yuǎn)離檢出限位于定量限附近，中間點(diǎn)2.2.5.6.9對(duì)非標(biāo)準(zhǔn)方法線性及校準(zhǔn)進(jìn)行確認(rèn)時(shí)，應(yīng)a）實(shí)驗(yàn)室用有證標(biāo)準(zhǔn)樣品，采用比較檢測(cè)法檢測(cè)樣品中目標(biāo)組分含b）線性度及其對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響的研究內(nèi)容包括：線性范圍、工作范圍、校c）如果不能確定目標(biāo)組分含量與儀器信號(hào)的關(guān)系，應(yīng)按照GB/Td）在完成線性范圍、工作范圍、校準(zhǔn)函數(shù)擬合及檢驗(yàn)的基礎(chǔ)上獲得的校準(zhǔn)e）如果一條校準(zhǔn)曲線在最低濃度到最高濃度范圍內(nèi)不能滿足相關(guān)要求，可本部分共包含10個(gè)條款，主要是參考了法；2.2.5.6.5條款內(nèi)容給出了校準(zhǔn)和線性度評(píng)估方法選擇的通則；2.2.5.6.6條款方法線性及校準(zhǔn)驗(yàn)證的要求、濃度點(diǎn)選擇的原則、研究內(nèi)容等；2.2.5.6.10條款2.2.5.7.1如果方法已提供了干擾情況的所有信息，則實(shí)驗(yàn)室無需對(duì)干擾情2.2.5.7.2如果方法在使用中還有新的干擾產(chǎn)生，則），2.2.5.7.4如果檢測(cè)目標(biāo)組分是多種組分，則應(yīng)單獨(dú)和全面檢測(cè)這些組分，a）分析一定數(shù)量的代表性空白樣品，檢查在目標(biāo)物出現(xiàn)的區(qū)域）；2.2.5.7.6如果證明了方法受到干擾物的干擾，則應(yīng)進(jìn)一步研究消除干擾的2.2.5.7.7如果需要證實(shí)方法定性準(zhǔn)確性，如含有低濃度的有機(jī)化合物的樣b）標(biāo)準(zhǔn)溶液；中：2.2.5.7.1條款和2.2.5.7.2條款規(guī)定了需要進(jìn)行選擇性研究的情形；2.2.5.7.32.2.5.8.1應(yīng)研究樣品及前處理后的基體、標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液的穩(wěn)定期限。在表8溶液中目標(biāo)分析物穩(wěn)定檢測(cè)計(jì)劃檢測(cè)條件-20°C4°C20°C避光光照2.2.5.8.3通過穩(wěn)定性試驗(yàn)可得到樣品及樣品前處理基體、標(biāo)準(zhǔn)溶液的保存中：2.2.5.8.1條款闡述了需要進(jìn)行穩(wěn)定性研究的范圍及研究結(jié)果的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)；2.2.5.8.2條款列出了穩(wěn)定性研究計(jì)劃，包括檢測(cè)條件、保存溫度、保存時(shí)間；2.2.5.9.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)識(shí)別檢測(cè)過程中，檢測(cè)條件如（但不限于）試劑溶劑、2.2.5.9.2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡可能全面找出這些因素，通過耐用性試驗(yàn)，確認(rèn)對(duì)檢2.2.5.9.3實(shí)驗(yàn)室獲得耐用性試驗(yàn)結(jié)果后，應(yīng)針對(duì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度有較大影響的因素，提出有效控制措施，寫入SOP中，要求2.2.5.10.1若可能，應(yīng)使用有證標(biāo)準(zhǔn)樣品研究方法的原有表9方法回收率偏差范圍%b）合同或法定要求不使用回收率校正；回收率研究的方法，即“再現(xiàn)性條件下方法的回收率”；2.2.5.10.4條款和2.2.5.11.1應(yīng)計(jì)算在2.2.5.6線性及校準(zhǔn)研究中得到的典型校準(zhǔn)曲線的檢測(cè)2.2.5.11.2應(yīng)結(jié)合具體情況，選擇ISO11843系列標(biāo)準(zhǔn)給出的計(jì)算方法計(jì)算本部分共包含2個(gè)條款，主要規(guī)定了檢測(cè)能力計(jì)算的兩種方法，即通過典型a）方法的測(cè)量范圍應(yīng)覆蓋方法的最低檢測(cè)濃度水平（定量限）和關(guān)b）至少需要確認(rèn)方法測(cè)量范圍的最低濃度水平（定量限）、關(guān)注濃度水平2.2.5.12.2按照批準(zhǔn)發(fā)布后的測(cè)量不確定度評(píng)定作業(yè)指導(dǎo)書的要求評(píng)定測(cè)2.2.5.12.3應(yīng)建立重復(fù)評(píng)定測(cè)量不確定度的程序及將測(cè)量不確定度運(yùn)用到本部分共包含3個(gè)條款，主要規(guī)定了測(cè)量不確定度評(píng)定的要求，其中：原則、發(fā)布和應(yīng)用要求；2.2.5.12.3條款規(guī)定了重復(fù)評(píng)定測(cè)量不確定度及測(cè)量不2.2.6.1.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用適當(dāng)?shù)姆椒ê统绦蜷_展所有檢測(cè)活動(dòng)，適當(dāng)時(shí)，包2.2.6.1.2所有方法、程序和支持文件，例如與實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)相關(guān)的指導(dǎo)書、2.2.6.1.3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確保使用最新有效版本的方法，除非不合適或不可能做2.2.6.1.4當(dāng)客戶未指定所用的方法時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)姆椒ú⑼ㄖ蜅l款的要求是方法要適應(yīng)檢測(cè)活動(dòng)，包括檢測(cè)后的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理；2.2.6.1.2條款2.2.6.2.1實(shí)驗(yàn)室選擇使用方法應(yīng)滿足GB/T27025－2019中7.2職能部門、知名技術(shù)組織或有關(guān)科學(xué)書籍和期刊公布的，或由設(shè)備制造商指定的方法，如果實(shí)驗(yàn)室能確認(rèn)這些方法已經(jīng)溯源至國家計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)，且有基本的方明了方法選擇的原則；2.2.6.2.2條款規(guī)定了合同約定或客戶要求2.2.6.3.1當(dāng)需要開發(fā)方法時(shí)，應(yīng)予以策劃，指定具備能力的人員，并為其2.2.6.3.2開發(fā)計(jì)劃的任何變更應(yīng)得2.2.6.3.3對(duì)實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)方法的偏離，應(yīng)事先將該偏離形成文件，做技術(shù)判2.2.7.1.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在首次采用標(biāo)準(zhǔn)方法之前，2.2.7.1.2實(shí)驗(yàn)室在首次采用非標(biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室開發(fā)的方法、超出預(yù)定范2.2.7.1.3如果依據(jù)的檢測(cè)方法文本中已經(jīng)給出了完整的驗(yàn)證或確認(rèn)程序，2.2.7.1.4驗(yàn)證或確認(rèn)包括證明實(shí)驗(yàn)室建立的方法滿足其準(zhǔn)確度（包含正確2.2.7.1.5驗(yàn)證或確認(rèn)內(nèi)容及其結(jié)果輸出的多少是實(shí)驗(yàn)室綜合平衡技術(shù)經(jīng)濟(jì)2.2.7.1.6如果實(shí)驗(yàn)室使用的方法發(fā)生變動(dòng)（方法變動(dòng)），應(yīng)重新確認(rèn)。方7.1.4條款闡述了方法驗(yàn)證或確認(rèn)的目的；2.2.7.1.5條款闡述了方法驗(yàn)證或確認(rèn)項(xiàng)目確定的原則及最低要求；2.2.7.1.6條款規(guī)定了方法變動(dòng)應(yīng)重新確認(rèn)的要求，并2.2.7.2.1實(shí)驗(yàn)室在引入方法前，應(yīng)驗(yàn)證能夠正確地運(yùn)用該方法，以確保實(shí)2.2.7.2.2一般情況下，驗(yàn)證的內(nèi)容應(yīng)包含（但不限于）分析系統(tǒng)適應(yīng)性、空白試驗(yàn)、準(zhǔn)確度（正確度與精密度）、檢出限和定量限、線性及校準(zhǔn)、本部分共包含2個(gè)條款，主要規(guī)定了方法驗(yàn)證的要求，闡明了方法驗(yàn)證需包2.2.7.3.1實(shí)驗(yàn)室在首次采用非標(biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室開發(fā)的方法、超出預(yù)定范2.2.7.3.2一般情況下，確認(rèn)的內(nèi)容應(yīng)包含（但不限于）分析系統(tǒng)適應(yīng)性、2.2.7.3.3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)非標(biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室制定的方法、超出預(yù)定范圍使用f）根據(jù)對(duì)方法原理的理解以及抽樣或檢測(cè)方法的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，評(píng)定結(jié)果2.2.7.3.5當(dāng)按預(yù)期用途評(píng)估被確認(rèn)方法的性能特性時(shí)，應(yīng)確保與客戶需求2.2.7.3.6實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存以下b）規(guī)定的要求；2.2.7.4.1應(yīng)根據(jù)方法驗(yàn)證或確認(rèn)的結(jié)果超出預(yù)定的準(zhǔn)則，應(yīng)當(dāng)采取適當(dāng)措施避免不質(zhì)控樣品的檢測(cè)順序，將系統(tǒng)的微小變化導(dǎo)致的（1）規(guī)定了每批樣品的檢測(cè)順序：空白（或陰性樣品）、