軟骨代謝標(biāo)志物COMP對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨改變的反應(yīng)

軟骨代謝標(biāo)志物COMP對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨改變的反應(yīng)軟骨代謝標(biāo)志物COMP對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨改變的反應(yīng)作者：劉志偉，嚴(yán)偉洪，孫曉亮，朱江，羅光華，徐寧作者單位：江蘇省常州市第一人民醫(yī)院，江蘇常州213003【摘要】目的研究血清中軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(cartilageoligomericmatrixprotein,COMP)水平與骨關(guān)節(jié)炎病變嚴(yán)重程度的關(guān)系。方法采用ELISA方法測(cè)定正常對(duì)照組和22例骨關(guān)節(jié)炎患者血清中及關(guān)節(jié)液中的COMP水平。結(jié)果骨關(guān)節(jié)炎患者血清中COMP水平明顯高于正常組水平，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論血清中COMP水平與骨關(guān)節(jié)炎病變嚴(yán)重程度相關(guān)，測(cè)定骨關(guān)節(jié)炎患者血中COMP水平對(duì)進(jìn)一步研究OA發(fā)病機(jī)理及早期發(fā)現(xiàn)骨關(guān)節(jié)炎并采取有效防治策略，監(jiān)測(cè)防治效果具有極其重要的意義。【關(guān)鍵詞】 骨關(guān)節(jié)炎；COMP；酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定MetabolicChangeofCartilageReflectedbyCartilageO ， ，SUNligomericMatrixPtoteinLIUZhiWeiYANWeihong，etalHospitalofChangzhouCity，JiangsuXiaoLiang213003，China) Abstract：ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetweenthelevelsofCOMPinserumandseverityofosteoarthritis.MethodsSerumsamplesof22patientswithosteoarthritisand40(DepartmentofOrthopaedics,the1stnormalpersonsincontrolswerecollected.SerumlevelsofCOMPwereanalysedusingEnzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)?ResultslsofosteoarthritispatientswerehigherSerumCOMPlevethanthoseincontrolgroup(PV0.05).ConclusionTheserumlevelsofCOMPisrelatedwiththegradeofdestruetionofosteoarthritiscartilage.COMPisthesensitivemarkerreflectingthemetabolicchangesofarticularcartilage?Keywords：osteoarthritis；COMP；enzymelinkedimmunosorbentassay骨關(guān)節(jié)炎以關(guān)節(jié)軟骨的退變?yōu)橹饕±硖卣?，通過(guò)測(cè)定血清、關(guān)節(jié)液或尿液中反映軟骨代謝程度的特異性分子的水平，有助于判斷骨關(guān)節(jié)炎軟骨病變的程度、預(yù)后和治療效果，可能成為早期診斷骨關(guān)節(jié)炎有效的輔助方法。本研究米用夾心酶聯(lián)免疫吸附法(SandwichELISA)測(cè)定正常人及骨關(guān)節(jié)炎患者血清中軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(cartilageoligomericmatrixprotein,COMP)的水平，研究骨關(guān)節(jié)炎病變程度與血清中軟骨代謝標(biāo)志物COMP水平的關(guān)系及其意義。1材料與方法1?1研究對(duì)象研究對(duì)象為2003年9月至2005年1月在我科治療的膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎患者，及同期確診的正常人。骨關(guān)節(jié)炎患者共22例，平均年齡58歲（46?68歲）；其中全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)患者10例，平均年齡62歲（53?65歲）；關(guān)節(jié)探查及清理術(shù)患者12例，平均年齡51歲（46?68歲）。正常對(duì)照組40例，為合格的健康人，平均年齡35歲（26?45歲）。1.2標(biāo)本收集和保存統(tǒng)一在上午靜脈抽取骨關(guān)節(jié)炎患者血10mL，空腹靜脈抽取健康人血10mL，所有標(biāo)本均離心取上清液,放置在一20°C冰凍保存待測(cè)。1.3測(cè)定方法采用ELISA法測(cè)定血清中COMP水平，試劑為瑞典AnamarMedicalAB公司生產(chǎn)的COMPELISA試劑盒。1.4實(shí)驗(yàn)步驟用移液管吸取標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照樣本及稀釋后的檢測(cè)樣本各25L，加入孵育液100L/孔。室溫孵育2ho洗液洗板6次。吸走液體后，加入抗體復(fù)合物200L/孔。室溫孵育15min，每孔中加入停止液50L。于450nm波長(zhǎng)處測(cè)定并讀取吸光度值，計(jì)算COMP含量。2結(jié)果 數(shù)據(jù)采用SAS統(tǒng)計(jì)軟件分析表明，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，所有數(shù)據(jù)均以s表示。結(jié)果顯示骨關(guān)節(jié)炎患者血清中COMP水平為（11.874.46）U/L，明顯高于正常組水平(10.012.93)U/L,PV0.05有顯著性差異。3討論 我國(guó)骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)的發(fā)病率為2.2%?3.5%,據(jù)統(tǒng)計(jì)40?49歲與50?59歲人群發(fā)病率為27%和62%。隨著現(xiàn)代社會(huì)人口老齡化，該病發(fā)生越來(lái)越多，嚴(yán)重危害老年人的健康。因此，膝關(guān)節(jié)OA的診斷與治療方法的研究越來(lái)越受到臨床學(xué)者的重視。骨關(guān)節(jié)炎最早病理所見是軟骨超負(fù)荷表面的變薄和破裂，軟骨出現(xiàn)碎片和凹陷，直至軟骨完全裸露。垂直的裂隙已直達(dá)軟骨的深處。骨關(guān)節(jié)炎的特征可概括為：a)功能退變；b)軟骨損害；c)關(guān)節(jié)表面周圍的新骨形成。機(jī)械和生物學(xué)因素的相互影響是它受累的原因。目前認(rèn)為骨關(guān)節(jié)炎病理演變的關(guān)鍵是關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的功能改變，II型膠原總量丟失。骨關(guān)節(jié)炎缺乏特異性的癥狀和體征，臨床早期影像檢查改變亦不顯著。所以，骨關(guān)節(jié)炎的早期診斷頗為困難，甚至需要治療性診斷或手術(shù)確定。傳統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)方法是通過(guò)測(cè)定炎癥因子如 C反應(yīng)蛋白?reactiveprotein，CRP）、紅細(xì)胞沉降率（erythrocytesedimentationrate,ESR)來(lái)監(jiān)測(cè)關(guān)節(jié)炎疾病，但這些炎癥因子卻不能反應(yīng)出關(guān)節(jié)軟骨的破壞程度。同時(shí)臨床試驗(yàn)也指出某些病人傳統(tǒng)炎癥標(biāo)志物水平低，但軟骨破壞較嚴(yán)重，同樣也有病人有顯著炎癥反應(yīng)而軟骨破壞很輕［1］。軟骨生物學(xué)知識(shí)的進(jìn)展使我們對(duì)于關(guān)節(jié)炎的診斷、預(yù)見和治療能力發(fā)生改變。我們需要在出現(xiàn)軟骨顯著丟失之前，找到一個(gè)能早期診斷的方法來(lái)改善關(guān)節(jié)炎的治療結(jié)果，需要有一個(gè)特殊的標(biāo)志物用來(lái)監(jiān)測(cè)軟骨的合成與退變，比較理想的應(yīng)該是血液中的標(biāo)記物。正常和退行性變的關(guān)節(jié)軟骨在代謝轉(zhuǎn)化過(guò)程中釋放的代謝產(chǎn)物均進(jìn)入血液和關(guān)節(jié)液中，利用酶聯(lián)免疫分析的方法能夠敏感而特異地檢測(cè)出血清中代謝標(biāo)志物的水平，而COMP就是這樣一種軟骨代謝標(biāo)志物。1992年瑞典LUND大學(xué)DickHeinegard教授首先描述了COMP，它是由五個(gè)獨(dú)立的次級(jí)單位由二硫鍵相連的五聚蛋白［2］。COMP最先發(fā)現(xiàn)于軟骨，近來(lái)也少量發(fā)現(xiàn)于肌腱和滑膜，但在皮膚、肺等結(jié)締組織中卻找不到COMP，COMP與II型膠原相結(jié)合,在軟骨組織膠原網(wǎng)中起穩(wěn)定的作用［3］。軟骨由于疾病過(guò)程而破碎時(shí)會(huì)釋放蛋白分子進(jìn)入到滑液中，在血液中也可以發(fā)現(xiàn)這些蛋白如COMP。瑞典人的正常人群COMP水平為(10.22.9)U/L(數(shù)據(jù)來(lái)源于瑞典AnamarMedical公司)，通過(guò)本研究中對(duì)正常人群中血清COMP水平的測(cè)定，結(jié)果顯示正常人群COMP水平為(10.012.93)U/L,較瑞典正常人水平稍低，可能與人種或正常組年齡構(gòu)成不同有一定關(guān)系。該結(jié)果可以為檢測(cè)我國(guó)正常人群COMP水平提供參考。在研究非炎癥性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎中顯示，COMP在血清中濃度變化與軟骨變化相適應(yīng)，在動(dòng)物關(guān)節(jié)炎模型中COMP血清水平與關(guān)節(jié)炎嚴(yán)重性相關(guān)［9］。本研究顯示在骨關(guān)節(jié)炎組中血清COMP水平明顯高于正常對(duì)照組。研究認(rèn)為血清中COMP逐漸升高與骨關(guān)節(jié)炎疾病進(jìn)展相關(guān)聯(lián)［4， 5］。血清中COMP的濃度與ESR、CRP無(wú)關(guān)，一些治療方法如果只是減輕炎癥反應(yīng)而不能影響軟骨的病變，這些患者血清中的CRP、ESR可能下降但COMP水平卻沒(méi)什么改變［6］。通過(guò)測(cè)定COMP的水平可以預(yù)見是否出現(xiàn)軟骨的破壞，可以預(yù)判哪些人群將來(lái)會(huì)受到骨關(guān)節(jié)炎的影響［7］。姚力［8, 9］研究發(fā)現(xiàn)，骨關(guān)節(jié)炎患者血清中II型膠原水平顯著高于正常對(duì)照組，在經(jīng)X線檢測(cè)確定的骨關(guān)節(jié)炎早期組,II型膠原水平、蛋白聚糖已明顯升高，在出現(xiàn)關(guān)節(jié)間隙狹窄時(shí)血清中II型膠原、蛋白聚糖的水平最高，當(dāng)關(guān)節(jié)間隙進(jìn)一步減小甚至消失時(shí)，則逐漸下降。COMP與II型膠原相結(jié)合，這一變化趨勢(shì)與COMP的變化一致。在骨關(guān)節(jié)炎的早期階段，軟骨破壞尚不明顯，血清中COMP升高不多；在出現(xiàn)明顯的關(guān)節(jié)間隙狹窄時(shí)，軟骨基質(zhì)破壞明顯，但軟骨細(xì)胞的合成作用卻相應(yīng)增加，膝關(guān)節(jié)軟骨剩余的總量還較多，這時(shí)血清中的COMP的水平最高；在骨關(guān)節(jié)炎的晚期階段，軟骨基質(zhì)破壞殆盡，軟骨細(xì)胞合成能力明顯下降，血清中COMP水平也隨之下降［10］。在臨床上晚期病人較少，所以大部分患者COMP水平是升高的。在本組病例中有1例屬于晚期的病例，術(shù)中見軟骨破壞殆盡,其血清中COMP在正常偏低水平。此外，Crnkic［1］研究中發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)A 治療的TNF骨關(guān)節(jié)炎的病人血清中COMP水平有下降，說(shuō)明通過(guò)檢測(cè)血清COMP水平可以觀察治療效果。Larsson［11］通過(guò)鼠的關(guān)節(jié)炎模型中發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)糖皮質(zhì)激素治療使軟骨破壞緩解的鼠血清中COMP水平都有明顯下降。Weitoft［12］在用經(jīng)關(guān)節(jié)內(nèi)注射糖皮質(zhì)激素治療骨關(guān)節(jié)炎病人的研究中通過(guò)血清COMP水平的檢測(cè)來(lái)判斷激素是否起到了對(duì)軟骨的保護(hù)作用，使軟骨減少釋放COMP分子，這都說(shuō)明COMP可以作為一個(gè)有效的判斷療效好壞的工具。目前許多學(xué)者根據(jù)研究目的的不同選擇了炎性標(biāo)志物、骨代謝標(biāo)志物、滑液代謝標(biāo)志物、免疫標(biāo)志物等來(lái)研究骨關(guān)節(jié)炎及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病，但沒(méi)有哪個(gè)標(biāo)志物可以完全區(qū)分骨關(guān)節(jié)炎病人及正常人，Otterness等[13]在研究中將COMP與其他兩種標(biāo)志物聯(lián)合應(yīng)用，使骨關(guān)書炎的診斷率達(dá)到90%,所以如果聯(lián)合應(yīng)用多種標(biāo)志物就能大大提高診斷及預(yù)后判斷的準(zhǔn)確性。本研究結(jié)果為COMP成為骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎軟骨病變?cè)缙谠\斷指標(biāo)及判斷軟骨病變預(yù)后和治療效果的指標(biāo)提供了初步研究基礎(chǔ)。而如何聯(lián)合應(yīng)用其他標(biāo)志物來(lái)提高其在骨關(guān)節(jié)炎診療中的作用，還有待進(jìn)一步去開展。晉升網(wǎng)簡(jiǎn)介晉升網(wǎng)()致力于成為醫(yī)務(wù)工作者晉升職稱心靈導(dǎo)師；是目前國(guó)內(nèi)收錄醫(yī)學(xué)期刊、醫(yī)學(xué)雜志最多最權(quán)威的醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)平臺(tái)；提供免費(fèi)醫(yī)學(xué)期刊在線閱讀；網(wǎng)羅和甄選海量?jī)?yōu)秀醫(yī)學(xué)論文檢索，獨(dú)立研發(fā)醫(yī)學(xué)在線資源分享庫(kù)和醫(yī)學(xué)在線模擬考試庫(kù)；整合刊類、標(biāo)題、關(guān)鍵詞檢索及全文檢索，并獨(dú)家研發(fā)刊社管理和刊社加盟系統(tǒng)、在線投稿、在線查稿、在線閱讀、遠(yuǎn)程審稿、在線下載等系統(tǒng)；聚刊社力量，建服務(wù)平臺(tái),讓晉升網(wǎng)通過(guò)專業(yè)走入每一個(gè)醫(yī)務(wù)人員的身邊是我們不懈的追求目標(biāo)； 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968.al.Crosssectionalevaluationofbiochemicalmarkersofbone,cartilage,andsynovialtissuemetabolisminpatientswithkneeosteoarthritis：relationswithdiseaseactivityandjointdamage[J] ?AnnRheumDis, 2019, 60(6)：

619626.[6]JoostenL,HelsenMM,SaxneT,et619626.[6]JoostenL,HelsenMM,SaxneT,etal.IL1alphabetablockadepreventscartilageandbonedestruetioninmurinetypeIIcollageninducedaTthritis，atesjointwhereasTNF alphablockadeonlyameliorinflammation[j]?JImmunol, 1999, 163(9)：DragomirAD,KrausVB,RennerJB,5049 5055.etal.Serumcartilageoligomericmatrixproteinandclinicalsignsandsymptomsofpotentialpre radiographichipandkneepathology[J]?0steoarthritisCartilage, 2019, 10(9):姚力，周乙雄，趙丹慧，等?軟骨代謝TOC\o"1-5"\h\z687 691.標(biāo)志物對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨改變的反映[J]?中華骨科雜志，2019,22(12)：姚力，周乙雄，趙丹慧，等?骨關(guān)節(jié)炎705 708.軟骨中I型和II型膠原的分布[J]?中國(guó)矯形外科雜志，2019,9(2)：VilimV,OlejarovaM,MachacekS,167 169.etal.Serumlevelsofcartilageoligomericmatrixprotein(COMP)correlatewithradiographicprogressionofkneeosteoarthritis[J].OsteoarthritisCartilage, 2019, 10(9):[11]LarssonE,ErlandssonHarrisH,707 713.Larsson