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文檔簡介

實驗十五

尿液淀粉酶活力測定

（Winslow）氏法

原理：臨床上通常用Winslow氏法測定尿或血清中淀粉酶活性。該法對淀粉酶活性單位的規(guī)定是：在37℃，30分鐘，恰好能將0.1%淀粉溶液1m1水解（指加入碘液后不再呈蘭色或紅色）的酶量定為一個活力單位。試劑與器材：1.0.9%NaC1；2.0.1%淀粉；3.碘化鉀一碘溶液（20KI和10g碘溶于100m1水中，使用前稀釋10倍）；4.移液管；5.試管；6.恒溫水溶鍋。操作：1.取10支試管，按次序記上號碼，各加0.9%NaCl1m1。2.用1m1移液管加尿液1m1于第一管，使其與0.9%；NaC1混合（若尿液中含淀粉酶過多，應(yīng)預(yù)先將尿液適當(dāng)稀釋）。用移液管吸取，然后任其流出。反復(fù)三次，使全管混勻。從第一管吸出1m1到第二管中，混勻。吸出1m1到第三管……依次類推。到第九管吸出1m1棄之。這樣即可獲得分別含有尿液1/2、1/4、1/8……1/512m1的不同濃度的尿稀釋液，第10管不加尿液作為對照管。3.將10支試管置冰水溶中，然后從第10管起依次迅速準(zhǔn)確加入0.1%淀粉液1m1。迅速搖勻。立即從冰水浴中取出，置37℃，并記錄時間。注意保持水浴的溫度。4.保溫30分鐘后，取出各管。迅速浸入冰水浴中冷卻。然后向各管中加稀碘液2滴搖勻。觀察各管的顏色。各試管中出現(xiàn)黃到蘭的色序。黃色表明無淀粉存在，淺紅色到紫色表明有淀粉的水解中間產(chǎn)物。蘭色表明有淀粉或其初期水解產(chǎn)物存在。計算：選擇黃色管中尿液稀釋倍數(shù)最大的一管來計算。假設(shè)第5管為黃色（從第6管起仍有紅色或蘭色）。已知第5管內(nèi)含尿液為1/32m1。即1/32m1尿液能在37℃，30分鐘水解0.1%淀粉1m1。所以，1m1尿液在同樣條件下可水解0.

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