第一節(jié)病毒概述

3000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥。第六章非細(xì)胞型微生物第一節(jié)病毒概述Virus：體積微小，結(jié)構(gòu)簡單，只有一種類型的核酸，只能在活的、敏感細(xì)胞內(nèi)以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞型微生物。病毒種類繁多，分布廣泛，可以感染人類、動(dòng)物、植物和微生物等。按其感染的對(duì)象不同，可分別稱為動(dòng)物病毒、植物病毒和細(xì)菌病毒(即噬菌體)等三大類。病毒能侵害飼料作物和畜禽，引起傳染病，造成畜牧業(yè)的嚴(yán)重?fù)p失。病毒的危害所致疾病約占傳染病的80%傳染性強(qiáng)、流行廣泛，很少有效藥物有些所致疾病嚴(yán)重，病死率高或有后遺癥持續(xù)性感染與腫瘤和自身免疫病有關(guān)威脅健康的新病原體不斷出現(xiàn)學(xué)習(xí)病毒學(xué)，要注意防治和控制一、病毒的基本特性（一）病毒的大小與形態(tài)測量單位為納米（nm,為1/1000

m）<50nm小型病毒（最小20nm，如口蹄疫病毒等）50nm-150nm中等大小病毒（大多數(shù)）>150nm大型病毒（最大300nm，如痘病毒）多數(shù)病毒呈球形或近似球形，桿狀，絲狀，少數(shù)可為子彈狀、磚塊狀，噬菌體可呈蝌蚪狀。微生物大小比較葡萄球菌(1000nm）

牛痘病毒300×250nmABCDEFG立克次體450nm衣原體390nmA、大腸桿菌噬菌體

(65×95nm)B、腺病毒

(70nm)C、脊髓灰質(zhì)炎病毒

(30nm)D、乙腦病毒

(40nm)E、蛋白分子

(10nm)F、流感病毒

(100nm)G、煙草花葉病毒病毒的形態(tài)球形磚形桿狀子彈狀蝌蚪形磚形（痘病毒）子彈形（狂犬病病毒）蝌蚪形（噬菌體）桿狀（煙草花葉病毒）電鏡下不同病毒形態(tài)（二）病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成一個(gè)完整的病毒或病毒顆粒是由蛋白質(zhì)(或多肽)組成的衣殼，構(gòu)成最外層，衣殼內(nèi)包有核蛋白構(gòu)成的核心，衣殼及其包裹著的核酸和相隨蛋白質(zhì)合起來組成核蛋白殼膜，叫做核衣殼。有的病毒在衣殼之外還有一層包膜，甚至雙層殼膜。核衣殼無包膜病毒(nakedvirus）有包膜病毒（envelopedvirus）衣殼病毒體衣殼

無包膜病毒的基本結(jié)構(gòu)核心

核衣殼裸病毒（nakdevirus）腺病毒有包膜病毒的結(jié)構(gòu)核心

衣殼

核衣殼包膜刺突汗坦病毒核心：核酸→基因組genome→決定病毒遺傳、變異和復(fù)制一種病毒只含有DNA或RNA一種核酸?？煞譃镈NA病毒和RNA病毒兩大類。DNA多數(shù)是雙股的，但細(xì)小病毒的DNA為單股DNA，呼腸孤病毒是雙股DNA。最大的病毒基因組(即核酸)含有幾百個(gè)基因，然而最小的病毒僅攜有只能編碼少數(shù)蛋白的基因，其中多數(shù)為病毒子的結(jié)構(gòu)蛋白。病毒雖然具有核酸，但不能獨(dú)立復(fù)制，只能依賴寄主細(xì)胞幫助才能復(fù)制。失去衣殼的裸露核酸仍具有傳染性，稱為感染性核酸。核酸若被破壞，病毒及失去活性。殼粒capsomere→衣殼capsid→保護(hù)、介導(dǎo)、抗原性衣殼是包繞在核酸外面的蛋白質(zhì)外殼。在電鏡下呈許多球形或管狀亞單位，化學(xué)亞單位以非共價(jià)鍵串聯(lián)起來，即殼粒按一定的對(duì)稱規(guī)律構(gòu)成。有以下類型：螺旋對(duì)稱性，20面體對(duì)稱性，復(fù)合對(duì)稱性。衣殼具有抗原性，是病毒的主要抗原成分，可保護(hù)病毒核酸免受環(huán)境中核酸酶或其他影響因素的破壞，并能介導(dǎo)病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞。簡單的病毒只有1種衣殼蛋白，較復(fù)雜的如腺病毒衣殼是由六鄰體、五鄰體和纖維3種蛋白構(gòu)成的。核衣殼的對(duì)稱形式

SymmetryofNucleocapsid螺旋對(duì)稱型（HelicalSymmetry）二十面體立體對(duì)稱型（IcosahedralSymmetry）復(fù)合對(duì)稱型（ComplexSymmetry）圖3-9煙草花葉病毒結(jié)晶螺旋對(duì)稱病毒多面體形態(tài)復(fù)合對(duì)稱五鄰體六鄰體包膜：蛋白質(zhì)、多糖、脂類比較復(fù)雜的病毒，核衣殼外面還有一層或幾層富含脂質(zhì)的外膜，即為包膜。目前對(duì)包膜的性質(zhì)和組成還不十分清楚，但在多數(shù)情況下，包膜既含有病毒特異性物質(zhì)，同時(shí)又含有寄主細(xì)胞膜的成分。在病毒發(fā)育過程中，某些病毒在成熟過程中穿過宿主細(xì)胞，以出芽方式向宿主細(xì)胞外釋放時(shí)獲得的，含有宿主細(xì)胞膜或核膜成分。由于病毒包膜的脂類來源于細(xì)胞，所以易被指溶劑如乙醚、氯仿和膽鹽等溶解破壞。有包膜的病毒體稱為包膜病毒，無包膜的稱為裸露病毒。突刺：病毒包膜表面具有長短不等，呈放射狀排列的突起，稱為“突刺”包膜的主要作用：維持病毒體結(jié)構(gòu)的完整性，保護(hù)衣殼，與病毒吸附宿主細(xì)胞有關(guān)。(三)、病毒的增殖1.病毒的復(fù)制病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖，完全不同于其他微生物。病毒沒有完整的酶系統(tǒng)，只能依靠宿主活細(xì)胞，在原代病毒基因組控制下合成病毒核酸和蛋白質(zhì)，并裝配為成熟的子代病毒，以不同的方式釋放出細(xì)胞外，或再感染其他易感活細(xì)胞，這種病毒增殖的方式稱為病毒復(fù)制(Replication)。復(fù)制形式：半保留形式復(fù)制，逆轉(zhuǎn)錄形式復(fù)制。

從病毒靠近宿主細(xì)胞，并進(jìn)入細(xì)胞，到復(fù)制后再釋放出來的全過程，稱為復(fù)制周期或增殖周期，也叫感染周期。復(fù)制周期一般可分為五個(gè)連續(xù)的階段，即吸附、侵入、脫殼、生物合成、裝配和釋放。病毒的復(fù)制過程

1.吸附

病毒感染細(xì)胞先要吸附在易感細(xì)胞上。分兩步，首先為離子間的吸引，病毒顆粒與細(xì)胞在有陽離子(如Mg)存在時(shí)，發(fā)生隨機(jī)吸附,它是可逆的。第二步為病毒顆粒特異地吸附于宿主細(xì)胞表面，這是病毒顆粒的表面成分與細(xì)胞膜的受體發(fā)生相互作用的結(jié)果。病毒吸附是牢固的，非可逆的。病毒復(fù)制周期吸附adsorption2.侵入

病毒吸附在宿主胞膜后，可通過多種方式進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，稱為侵入或穿入。有的病毒是通過細(xì)胞膜吞入，稱為病毒胞飲，’形成含病毒的吞飲泡，是病毒穿入的主要方式。有的病毒可直接穿過宿主細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞漿。還有的病毒被吸附后，其病毒囊膜與宿主細(xì)胞膜發(fā)生融合，囊膜留在細(xì)胞外面進(jìn)入細(xì)胞漿內(nèi)。有些病毒在進(jìn)入的過程中同時(shí)脫殼，如大腸桿菌噬菌體T4。3.脫殼

病毒進(jìn)入細(xì)胞后，迅速在溶酶體蛋白水解酶的作用下，脫掉衣殼，釋放出核酸。不同病毒從吸附至脫殼所需的時(shí)間從數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)不等。

病毒復(fù)制周期穿入penetration脫殼uncoating融合胞飲直接穿入

4.生物合成

病毒在細(xì)胞內(nèi)從脫殼到新的子代病毒出現(xiàn)這一階段稱為隱蔽期。此期不能從細(xì)胞檢出感染性病毒顆粒，但其生物合成作用卻非?；钴S，包括核酸和蛋白質(zhì)的合成兩部分。

在病毒基因的控制下，多數(shù)DNA病毒在宿主細(xì)胞核內(nèi)合成核酸，而多數(shù)RNA病毒則在細(xì)胞漿中合成。

(1)按親代病毒的樣板轉(zhuǎn)錄mRNA；

(2)由mRNA轉(zhuǎn)錄“早期蛋白”，這些早期蛋白一般為非結(jié)構(gòu)蛋白，如合成核酸時(shí)所需要的RNA或DNA多聚酶，控制宿主蛋白質(zhì)和核酸合成的調(diào)控蛋白等(3)復(fù)制核酸，以親代病毒核酸為模板

(4)合成“晚期蛋白”，主要由子代核酸轉(zhuǎn)錄mRNA，再轉(zhuǎn)譯為，“晚期蛋白”，晚期蛋白主要為子代病毒的衣殼蛋白、酶類以及在病毒形成階段起作用的非結(jié)構(gòu)蛋白等。由于病毒核酸類型及股數(shù)不同，其轉(zhuǎn)錄和復(fù)制過程各有差異。5.裝配和釋放

病毒核酸與蛋白質(zhì)合成完畢后，根據(jù)病毒種類不同或在細(xì)胞核內(nèi)；在胞漿內(nèi)進(jìn)行裝配，形成核衣殼。有囊膜的病毒，形成核衣殼之后，其囊膜是通過細(xì)胞核膜或細(xì)胞膜時(shí)獲得，并以“出芽”的方式釋放。無囊膜病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)裝配成核衣殼后，為成熟的病毒子，以宿主細(xì)胞破裂或反吞飲方式釋放出來。病毒復(fù)制周期

裝配與釋放

assemblyandrelease復(fù)制周期replicationcycle2.包涵體病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí)，可導(dǎo)致細(xì)胞代謝功能絮亂、形態(tài)發(fā)生改變，細(xì)胞出現(xiàn)病變甚至死亡。某些病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖后，能在胞核或胞質(zhì)內(nèi)形成圓形或橢圓形、嗜酸性或嗜堿性的斑塊，稱為包涵體?？袢《景w（Negribody）巨細(xì)胞病毒包涵體3.病毒的異常復(fù)制

頓挫感染：病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后，若細(xì)胞不能為病毒提供所需的酶、能量和原料等，則不能復(fù)制出完整的具有感染性的病毒顆粒，稱為頓挫感染缺陷病毒：有些病毒基因組不完整或某一基因位點(diǎn)發(fā)生改變，進(jìn)入宿主細(xì)胞后不能單獨(dú)復(fù)制出具有感染性的病毒顆粒，稱為缺陷病毒。(四）、干擾現(xiàn)象與干擾素一種病毒感染動(dòng)物機(jī)體(或細(xì)胞)后能產(chǎn)生抑制其它他種病毒再感染的作用，這種現(xiàn)象稱為病毒的干擾現(xiàn)象。干擾現(xiàn)象可因滅活病毒或缺損病毒的產(chǎn)生而發(fā)生于同一株病毒內(nèi)，稱為自身干擾：也可發(fā)生于同種異型或異株之間，稱為同種干擾，發(fā)生于同屬異種之間，稱為同屬干擾。同屬干擾較常見。產(chǎn)生原因1干擾素（IFN）與干擾機(jī)制

2競爭干擾：改變了細(xì)胞表面受體結(jié)構(gòu)、或競爭底物、復(fù)制部位3細(xì)胞代謝途徑發(fā)生變化；4阻止第二種病毒mRNA的翻譯干擾素由病毒或其他干擾素生劑刺激機(jī)體細(xì)胞所產(chǎn)生的一種具有抗病毒等作用的糖蛋白種類 產(chǎn)生細(xì)胞 抗病毒抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)

人白細(xì)胞 強(qiáng) 弱 弱

人成纖維細(xì)胞強(qiáng)弱弱

T細(xì)胞 弱 強(qiáng)強(qiáng) （五）病毒的抵抗力1.耐冷不耐熱(60℃30′滅活)2.對(duì)X、γ射線、紫外線敏感3.對(duì)甘油有抵抗力4.有包膜的病毒對(duì)脂溶劑(乙醚氯仿)敏感5.對(duì)常用消毒劑敏感6.抗生素和磺胺類藥物對(duì)病毒無作用.二、病毒的致病性（一）病毒的感染方式與途徑1.水平感染（后天感染）病毒在人群不同個(gè)體間的傳播病毒侵入機(jī)體的三大重要門戶皮膚呼吸道消化道2.垂直感染（先天性感染）通過胎盤或產(chǎn)道，病毒由母親傳給胎兒的方式胎盤產(chǎn)道（二）病毒的致病機(jī)制1.直接損害宿主細(xì)胞(1)殺細(xì)胞效應(yīng)①病毒增殖、釋放時(shí)引起細(xì)胞裂解②病毒增殖，阻斷主細(xì)胞蛋白質(zhì)及核酸的合成③病毒感染后，細(xì)胞膜溶酶體膜通透性增強(qiáng)，酶釋放④大量的衣殼蛋白，直接損傷宿主細(xì)胞（2）細(xì)胞膜改變非溶細(xì)胞性病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖后不引起細(xì)胞溶解死亡，病毒成熟后以出芽方式釋出，再感染鄰近細(xì)胞，引起宿主細(xì)胞膜改變。①細(xì)胞膜融合,形成多核巨細(xì)胞②細(xì)胞膜出現(xiàn)新抗原③細(xì)胞膜通透性異常（3）細(xì)胞轉(zhuǎn)化：病毒DNA或其片段整合到宿主細(xì)胞DNA中，使宿主細(xì)胞遺傳性狀改變，細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化，成為腫瘤細(xì)胞，如腫瘤病毒的某些基因或其產(chǎn)物可啟動(dòng)細(xì)胞原癌基因成為癌基而至細(xì)胞惡變

2.抗病毒免疫反應(yīng)導(dǎo)致宿主細(xì)胞的免疫損傷病毒具有較強(qiáng)的免疫原性，能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，其后果即可表現(xiàn)為抗病毒的保護(hù)作用，也可導(dǎo)致對(duì)機(jī)體的免疫損傷。①體液免疫的損害作用：補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒作用；Ⅱ型，Ⅲ型超敏反應(yīng)②細(xì)胞免疫的損害作用：TC直接破壞受病毒感染的細(xì)胞；Ⅳ型超敏反應(yīng)（三）感染的類型向外播散病毒機(jī)體獲得特異性免疫（1）急性感染（2）持續(xù)性感染

1.隱性感染2.顯性感染（1）急性感染：病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)大量增殖，引起明顯的臨床癥狀者稱為顯性感染。（2）持續(xù)性感染：病毒在宿主體內(nèi)持續(xù)存在較長時(shí)間，甚至持續(xù)終生者稱為持續(xù)感染。分為三類。慢性感染：

病程長病毒可檢出如慢性肝炎潛伏感染：可反復(fù)激活，急性發(fā)作病毒只有在急性發(fā)作時(shí)才被檢出如HSV、ZVZ遲發(fā)感染：又稱慢發(fā)病毒感染潛伏期長，發(fā)病后為亞急性進(jìn)行性直至死亡尋常病毒非尋常病毒

朊病毒麻疹病毒持續(xù)性感染

三、抗病毒感染免疫（一）非特異性免疫1,先天不感受性:宿主細(xì)胞膜上是否有病毒感染所必須的受體.2.屏障作用和巨噬細(xì)胞的作用(中性粒細(xì)胞對(duì)病毒無作用).3.干擾素及其作用（二）特異性免疫１.體液免疫:產(chǎn)生IgG、IgM和IgA抗體。具有吸附穿入作用的病毒表面抗原所誘生的抗體，稱之為中和抗體。活病毒與中和抗體結(jié)合，導(dǎo)致病毒喪失感染力，稱為中和作用。

2．細(xì)胞免疫:(1)細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞（CTL）的抗毒作用CTL能特異性殺傷病毒感染的靶細(xì)胞，受MHC-Ⅰ類分子的限制。是使病毒感染恢復(fù)的主要機(jī)制。(2)細(xì)胞因子的抗病毒作用細(xì)胞毒效應(yīng)細(xì)胞（CTL、NK及活化的巨噬細(xì)胞）與靶細(xì)胞結(jié)合后，通過釋放出的細(xì)胞因子殺傷病毒感染的靶細(xì)胞。四、病毒感染的檢查方法病毒的分離培養(yǎng)免疫學(xué)檢查病毒基因物質(zhì)的檢查形態(tài)學(xué)檢查標(biāo)本的采?。ㄒ唬?biāo)本的采集根據(jù)臨床評(píng)估及病期采集不同的標(biāo)本。呼吸道感染一般采集鼻咽洗漱液或痰液；腸道感染采集糞便；腦內(nèi)感染取腦脊液；病毒血癥時(shí)期取血液；作病毒分離或病毒抗原的標(biāo)本，應(yīng)在發(fā)病初期或急性期采集，因此時(shí)病毒在體內(nèi)大量增殖，檢出率高。病毒分離標(biāo)本的采取，最好在發(fā)病1-2天進(jìn)行。血清學(xué)檢查的標(biāo)本應(yīng)采取雙份血清送檢即以發(fā)病初期和病后2-3周分別采取血清標(biāo)本。雙份血清同時(shí)進(jìn)行檢查，如抗體滴度有4倍以上升高才有診斷意義。標(biāo)本處理標(biāo)本采取必須嚴(yán)格無菌操作。對(duì)于本身帶有雜菌的標(biāo)本，如糞便、咽嗽液、痰液等，應(yīng)加入高濃度青霉素、鏈霉素、慶大霉素等處理。大多數(shù)病毒對(duì)甘油有抵抗力，送檢組織、糞便標(biāo)本等可置于含抗生素的50%甘油緩沖鹽水中，低溫保存送檢。標(biāo)本送檢與保存病毒在室溫下很快滅活，標(biāo)本采集后應(yīng)立即送到病毒實(shí)驗(yàn)室，如實(shí)驗(yàn)室距離較遠(yuǎn)或一時(shí)無法立即送檢時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本放入裝有冰塊的冰壺內(nèi)，最好在1-2小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室，立即進(jìn)行檢查或分離培養(yǎng)。暫時(shí)不能檢查或分離培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本存放在-70℃低溫冰箱內(nèi)保存。（二）形態(tài)學(xué)檢查1.光學(xué)顯微鏡檢查用光學(xué)顯微鏡可直接觀察痘類病毒的單個(gè)病毒體；也可直接被某些病毒受染的組織細(xì)胞中的包涵體。根據(jù)包涵體的特點(diǎn)，作出輔助診斷。2.電子顯微鏡檢查1）電鏡直接檢查法：用于從皰疹液、糞便或血清標(biāo)本中直接檢查皰疹病毒、甲肝病毒、乙肝病毒顆粒等；2）免疫電鏡檢查法：將病毒標(biāo)本制成懸液，加入特異性抗體混合，可使標(biāo)本中的病毒顆粒凝聚成團(tuán)。再用電鏡，可提高病毒的檢出率。（三）病毒的分離培養(yǎng)動(dòng)物接種雞胚接種組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)移植培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)

原代細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞培養(yǎng)傳代細(xì)胞培養(yǎng)三大培養(yǎng)方法1.動(dòng)物接種：是最原始的病毒培養(yǎng)方法。目前對(duì)某些病毒分離仍然應(yīng)用。常用的動(dòng)物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等。接種途徑有鼻內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、腦內(nèi)、腹腔內(nèi)、靜脈等。根據(jù)病毒種類不同，選擇敏感的動(dòng)物及適宜接種部位。如嗜神經(jīng)病毒（乙腦病毒、狂犬病毒）可選用小鼠腦內(nèi)接種，以使病毒增殖，并根據(jù)動(dòng)物出現(xiàn)的癥狀特征幫助診斷。2.雞胚培養(yǎng)：是一種經(jīng)濟(jì)簡便的方法。一般采用孵化9-12天的雞胚，根據(jù)病毒的特性將病毒標(biāo)本接種于雞胚的不同部位。如皰疹病毒接種于絨毛尿囊上，流感病毒初次分離接種于羊膜腔，傳代培養(yǎng)接種于尿囊內(nèi)。雞胚接種3、組織細(xì)胞培養(yǎng)將離體活組織塊或分散的活細(xì)胞加以培養(yǎng)，統(tǒng)稱為組織培養(yǎng)。后者雙稱為單層細(xì)胞培養(yǎng)。是目前分離培養(yǎng)病毒的主要方法。通常用人胚腎細(xì)胞、人胎盤羊膜細(xì)胞、人胚二培體細(xì)胞、雞胚等原代細(xì)胞以及傳代細(xì)胞等制備單層細(xì)胞培養(yǎng)。病毒感染細(xì)胞后，大多數(shù)能引起細(xì)胞病變，無需染色即可直接在普通光學(xué)顯微鏡下觀察。有的細(xì)胞不產(chǎn)生病變，但能改變培養(yǎng)液的PH，或出現(xiàn)紅細(xì)胞吸附及血凝現(xiàn)象（流感病毒），有時(shí)還可用免疫熒光技術(shù)檢查細(xì)胞中的病毒和細(xì)胞變化。組織培養(yǎng)多用于病毒分離培養(yǎng)和檢測中和抗體，制備疫苗等。

（四）免疫學(xué)檢查中和試驗(yàn)免疫熒光技術(shù)血凝抑制試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（四）免疫學(xué)檢查利用抗原抗體能特異性結(jié)合的原理，用已知的病毒和特異性抗體檢測病人標(biāo)本新分離的病毒株制備的抗原，或用已知的病毒抗原檢查病人血清中有無相應(yīng)抗體。病人恢復(fù)期血清的抗體效價(jià)必須比急性期增高4倍以上才有診斷意義。常用的方法有中和試驗(yàn)、補(bǔ)休結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、免疫擴(kuò)散及熒光素、酶、放射性核素標(biāo)記技術(shù)等。virus1.中和反應(yīng)觀察特異性抗體能否保護(hù)易感的試驗(yàn)動(dòng)物死亡，能否抑制病毒的細(xì)胞病變效應(yīng)。凡能與病毒結(jié)合，使其失去感染力的抗體又稱中和抗體。2.血凝抑制試驗(yàn)血凝試驗(yàn)血凝抑制試驗(yàn)3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）將已知的抗體或抗原結(jié)合在某種固相裁體上，并保持其免疫活性。測定時(shí)，將待檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同步驟與固相載體表面吸附的抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)。然后加入酶的作用底物催化顯色，進(jìn)行定性或定量測定。4.免疫熒光技術(shù)常用間接熒光抗體法（IFA）（五）病毒基因物質(zhì)的檢查1.DNA探針技術(shù)又稱核酸分子雜交技術(shù)是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、應(yīng)用面廣的診斷技術(shù)和研究手段。原理是根據(jù)雙股DNA具有解離和重新組合的特性，用一條已知的單鏈DNA，標(biāo)記上放射性核素作探針與固定在硝酸纖維膜上的待測單股DNA進(jìn)行雜交，再用放射自顯影技術(shù)檢測，以確定有無病原體存在。2.聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)是一種快速體外擴(kuò)增特異性DNA片段的技術(shù)，能在一至數(shù)小時(shí)內(nèi)通過簡單的酶促反應(yīng)使待測的DNA擴(kuò)增至數(shù)百萬倍，然后取反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，即可觀察到核酸條帶，不需放射性核素標(biāo)記。該技術(shù)可用于病毒、細(xì)菌等微生物疾病的診斷。3′3′5′5′3′3′3′3′3′3′5′5′5′5′5′5′3′3′5′5′3′3′5′5′模板DNA雙鏈形成新的雙鏈DNA退火變性聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）五、病毒性疾病的防治原則（一）免疫學(xué)預(yù)防和治療1.人工自動(dòng)免疫目前應(yīng)用各種滅活疫苗或減毒活疫苗進(jìn)行人工自動(dòng)免疫。滅活疫苗常用的有流腦疫苗、狂犬疫苗、流感滅活疫苗等。減毒活疫苗常用的