生物技術(shù)與工程（解析版）-2021年高考生物二輪復(fù)習(xí)講義

專題十五生物技術(shù)與工程

考綱要求：1.果酒、果醋與泡菜的制作2.微生物的分離和培養(yǎng)3.培養(yǎng)基對微生

物的選擇作用4.某種微生物數(shù)量的測定5.DNA的粗提取與鑒定6.基因工程

的誕生（I）7.基因工程的原理及技術(shù)（含PCR技術(shù)）（II）8.基因工程的應(yīng)用（II）

9.蛋白質(zhì)工程（I）10.植物的組織培養(yǎng)（II）11.動物細胞培養(yǎng)與體細胞克?。℉）

12.細胞融合與單克隆抗體（II）13.動物胚胎發(fā)育的基本過程與胚胎工程的理論

基礎(chǔ)（I）14.胚胎干細胞的移植（I）15.胚胎工程的應(yīng)用（II）16.轉(zhuǎn)基因生物

的安全性（I）17.生物武器對人類的威脅（I）18.生物技術(shù)中的倫理問題（I）

培養(yǎng)基

水、碳源、氮源、無機鹽果酒制作所需微生物一醉母菌

的構(gòu)成發(fā)辭加工|果鵬制作所包也醋酸菌

微生物

消毒和滅菌無菌技術(shù)

培養(yǎng)食品的方法限制作所需三礴生物.毛霉

計算?稱量-溶化?①額+倒平板一接種.培養(yǎng)■培梵術(shù)

—所需微生物-⑥乳酸菌

Wifi-

選擇培養(yǎng)理地」*探討加酶洗衣粉的洗滌效果

基的制將聯(lián)系應(yīng)所L酵母細胞的固定化

與對照組器爵⑦水蒸氣蒸慵法

以②醒作為唯一敘培養(yǎng)基分解尿充

設(shè)置植物有

源的選擇培養(yǎng)基曲細斌一效成分橘皮精油提取方法叱田“

--------?壓榨法

寫

出微生的提取

③稀釋涂布平板法和

計公

數(shù)

物胡蘿卜素提取

及涵

內(nèi)和鑒定方法

式顯微鏡宜接計數(shù)法

V、：1⑧萃取法提取、⑨紙層析法鑒定

富含④紅鮮的選擇培■培養(yǎng)基,巨野￡今

…螂手善海/芯豪而遠居寫芬薪

比較兩種

聯(lián)系…--{⑤剛果紅染色斗瞿肉、鑒定?原理

剛果紅染血紅蛋白的

提取及分離過程

色法提取與分離

“純度鑒定

植

①限制席、②DNA連接酸、載體包產(chǎn)物廣工⑦細胞的全能性、細胞膜的流動性

目的基因的獲取一）細坦巨植物組織培養(yǎng)、⑧植物體細胞雜交

施

典也植物繁殖的新途徑、培育作法新品種、

③基因型甥體的構(gòu)建?一工

操作程序一*細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)

克程

將目的基因?qū)胧荏w細胞

隆動物細胞培養(yǎng)廣區(qū)⑨期第埴縝

④目的基因的檢測和鑒定?—技

發(fā)術(shù)

一^獲得新細胞，不形成個體

展動2

轉(zhuǎn)期植物、轉(zhuǎn)期4動物I-］應(yīng)用現(xiàn)

物動物體細胞核移植產(chǎn)⑩動物體細胞核的全能性

基因工程藥物、基因治療"<I

⑤基因心塔代細

獲得克隆動物個體

胞

生動物細第融合舞?細蛔的流動性

可產(chǎn)生⑥自然界中沒有的蛋白質(zhì)一3工

物理法、化學(xué)法、生物法

物程

e加杵inN仃胚胎發(fā)育的場所首要步驟

?輸卵管和壬宮1~［就］體內(nèi)受精和早.給小白鼠注射抗原

科單克隆抗所需細胞

?O.胚胎史的移植期1期胚胎發(fā)齊已免疫的B淋巴細胞和滑面痛細胞

體的制備叁晝迪里能產(chǎn)生?生二蚣的雜交痛細胞

培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法體外受桁碉技

“兩鹽”“兩索”一早期胚質(zhì)期胚胎培養(yǎng)安全性向JM?食宿安全、生物安全、環(huán)境安全

“兩酸”,外加曲清培養(yǎng)液成分倫理問題

克隆人、設(shè)計試管嬰兒、班因身份證

早期胚胎在空間位置上的轉(zhuǎn)移3^胚胎

充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛能3麻生物產(chǎn)致病菌、病毒、生化毒劑、經(jīng)過基因取組的致病菌

發(fā)育良好、形態(tài)正常的選材我國政府的觀點.?完全禁止生產(chǎn)生物武器

?桑棋胚或囊胚**~胚胎分一生

態(tài)L概念

加快繁殖速度出L

工-------原理:物種多樣性原理、物質(zhì)循環(huán)再生原理、

程?整體性原理、?協(xié)蠲與平衡原理、

早期胚胎或原始性腺?一胚胎「細胞

?系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理

具有發(fā)育的?全能性?功能特點L

L-生態(tài)工程的實例和發(fā)展前景

教材回歸

1.在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微

生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。

2.當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖

源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

3.加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，在后期的制作過程中不會

過早酥爛。同時，鹽能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。

4.在尋找目的菌株時，要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋

找。

5.在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細菌后，如

果pH升高，指示劑將變紅。

6.艾弗里等人通過不同類型肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗，不僅證明了生物的遺

傳物質(zhì)是DNA,還證明了DNA可以從一種生物個體轉(zhuǎn)移到另一種生物個體。

7.目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因，也可以是一些具有調(diào)控作用的因

子。

8.在植物的組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因

此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力（如射線、化學(xué)物質(zhì)等）的影響而產(chǎn)生突變。

9.2,4-D常用于植物愈傷組織的誘導(dǎo)和生長，但它趨向于抑制植物形態(tài)的

發(fā)生，所以在分化培養(yǎng)基中很少利用。

10.定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自

身造成危害。

11.通過顯微操作去除卵母細胞中的核，由于MH期卵母細胞核的位置靠近

第一極體，用微型吸管可一并吸出細胞核與第一極體。

12.在選擇性培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會

死亡，只有融合的雜種細胞才能生長。

13.胚胎移植實質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。

14.ES細胞具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積小、細胞核大、

核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性。

15.由于ES細胞可分化為胚胎的內(nèi)胚層、中胚層和外胚層中任何一類細胞,

于是可以將帶有遺傳標記的ES細胞注入早期胚胎的囊胚腔，通過組織化學(xué)染色,

了解ES細胞的分化特點。

微生物的培養(yǎng)、分離與計數(shù)

1.微生物培養(yǎng)中的無菌操作技術(shù)

「煮沸消毒法

提一巴氏消毒法

無-化學(xué)藥劑消毒法

菌

操

「灼燒滅菌一接種環(huán)、接種針等金屬用具

作

笑蘭--干熱滅菌一主要針對玻璃器皿等

菌方法

L高壓蒸汽滅菌一主要針對培養(yǎng)基等

2.培養(yǎng)基制備與微生物純化技術(shù)

流產(chǎn)(計算-稱心融?滅菌?蚯^

(通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表

平板面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌

劃線法種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面

〔不宜計數(shù)

r將菌液進行一系列的梯度稀釋，

然后將其分別涂布到瓊脂固體培

稀釋涂布,養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)，聚集在

平板法一起的微生物將被分散成包呦

胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單

I個的菌落適宜計數(shù)

3.篩選目的微生物的原理與實例

(1)原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，

同時抑制或阻止其他微生物生長。因此，可以通過配制選擇培養(yǎng)基、控制培養(yǎng)條

件等選擇目的微生物。

⑵實例

［提醒］(1)圖甲是利用平板劃線法進行微生物接種，圖乙是利用稀釋涂布平板

法進行微生物接種。對這兩種接種工具進行滅菌和消毒的方法依次是灼燒滅菌和

酒精消毒。

w

甲乙

(2)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，這是因為當(dāng)

兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

(3)關(guān)注兩種對照組與一種重復(fù)組

①將一未接種的選擇培養(yǎng)基與接種的選擇培養(yǎng)基一起培養(yǎng)——用于確認培

養(yǎng)基滅菌是否徹底(制備是否合格)。

②將一接種的普通培養(yǎng)基與接種的選擇培養(yǎng)基一起培養(yǎng)——用于確認選擇

培養(yǎng)基是否起到''篩選”作用。

③進行微生物計數(shù)時，每一稀釋度下涂布三個平板，即設(shè)置重復(fù)組，是為了

求平均值，提高計數(shù)準確度。

新題素養(yǎng)訓(xùn)練

1.(2020?高考全國卷I)某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機物)難以降解,

會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥

中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的

組分為無機鹽、水和S,乙的組分為無機鹽、水、S和Y。

接種混罐多次篩選

無菌水甲乙甲

回答下列問題：

(1)實驗時，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用的方法

進行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是o甲、乙培養(yǎng)基均屬于培

養(yǎng)基。

(2)實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2X107個/mL,若要在每個平板

上涂布100RL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，

則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋倍。

(3)在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株

對S的降解量反而下降，其原因可能是(答出1點即可)。

⑷若要測定淤泥中能降解S的細菌細胞數(shù)，請寫出主要實驗步驟:

（5）上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌

的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即________________________________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

解析：（1）實驗過程中，對盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶進行滅菌時，常采用高壓

蒸汽滅菌法。據(jù)題圖分析可知，乙培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，與甲培養(yǎng)基相比，其特

有的組分Y物質(zhì)應(yīng)是凝固劑瓊脂。甲、乙培養(yǎng)基均只允許能利用物質(zhì)S作為氮

源和碳源的微生物生長，因此均為選擇培養(yǎng)基。（2）據(jù)題意可知，假設(shè)至少將搖

瓶M中的菌液稀釋X倍，才能保證稀釋后的100piL菌液中的細菌細胞數(shù)不超過

200個，初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2X107個/mL,則稀釋之前100匹菌

液中有2X106個細菌，可得2X1（）6X（1/X）=200,則X=10、因此至少應(yīng)將搖瓶

M中的菌液稀釋IO4倍。（3）在篩選過程中，若培養(yǎng)基中S濃度過高，可能會導(dǎo)

致細胞失水，進而抑制菌株的生長。（4）將含有能降解S的細菌的淤泥加入無菌

水中，進行適當(dāng)稀釋后，利用稀釋涂布平板法，取適量的菌液涂布到乙培養(yǎng)基上，

在適宜條件下進行培養(yǎng)，一段時間后，統(tǒng)計菌落數(shù)，即可估算出淤泥中能降解S

的細菌細胞數(shù)。（5）本實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都

能為細菌的生長提供的營養(yǎng)物質(zhì)是水、碳源、氮源和無機鹽。

答案：（1）高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇（2）104（3）S的濃度超過某一值時會

抑制菌株的生長（4）取淤泥加入無菌水中，涂布（或稀釋涂布）到乙培養(yǎng)基上，培

養(yǎng)后計數(shù)（5）水、碳源、氮源和無機鹽

2.（2019?高考全國卷I）已知一種有機物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，

會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌（目標

菌）。

I號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白族培養(yǎng)基中加入X（5g/L）o

II號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L）,硝酸鉉（3g/L）,其他無機鹽（適量）,X（15g/L）o

III號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L）,硝酸鏤（3g/L）,其他無機鹽（適量），X（45g/L）o

回答下列問題。

（1）在I號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是oII、III號

培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機物是o

（2）若將土壤懸浮液接種在H號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X

的細菌比例會_____________________________,其原因是

（3）n號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)

目標菌并對菌落進行計數(shù)，接種時，應(yīng)采用的方法是。

（4）假設(shè)從in號培養(yǎng)基中得到了能高效降解x的細菌，且該菌能將x代謝為

丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供和

_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

解析：（1）在I號牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基中，牛肉膏、蛋白陳為微生物提供了

氮源，而II、III號培養(yǎng)基中除X外的其他物質(zhì)均不含碳，所以能為微生物提供

碳源的有機物是Xo（2）因為n號培養(yǎng)基中的碳源只有x,相當(dāng)于選擇培養(yǎng)基，

只有能降解X的細菌才能增殖，而不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖。（3）

要對菌落進行計數(shù)，應(yīng)采用稀釋涂布平板法進行接種。（4）在有氧條件下，丙酮

酸參與細菌的有氧呼吸，可以為該菌的生長提供能量和合成其他物質(zhì)的原料。

答案：（1）牛肉膏、蛋白陳X

（2）下降不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細菌能夠

增殖

（3）稀釋涂布平板法

（4）能量合成其他物質(zhì)的原料

3.（2019?高考全國卷H）物質(zhì)W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培

養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解

W的細菌（目標菌）?；卮鹣铝袉栴}。

（1）要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是o

（2）在從土壤中分離目標菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生

長并形成菌落（如右圖所示）。如果要得到目標菌，應(yīng)該選擇菌落進一步

純化，選擇的依據(jù)是。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設(shè)計實驗進

一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預(yù)期

結(jié)果和結(jié)論，即_____________________________________________________________

（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W

的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗,

請完善相關(guān)內(nèi)容。

①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處

滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加，三處滴加量相同。

②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明

;若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________0

解析：（1）要從土壤中分離出能降解含氮有機物W的目標菌，所用選擇培養(yǎng)

基應(yīng)以該特定物質(zhì)W為氟源。（2）據(jù)圖可知，在乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙

菌能降解W,若要得到目標菌，應(yīng)該選擇乙菌落進一步純化。（3）若要通過設(shè)計

實驗確定甲、乙兩種細菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，需將甲、乙菌分別接

種在無氮源的培養(yǎng)基上，若某細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氟氣作

為氮源。（4）①實驗應(yīng)遵循單一變量原則，故C處應(yīng)滴加緩沖液。②一段時間后，

測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明緩沖液不能降解W;若A、B

處形成的透明圈大小相近，說明酶E與天然酶降解W的能力相近。

答案：⑴W

（2）乙乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W

（3）將甲、乙菌分別接種在無氮源的培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細

菌可以利用空氣中的氮氣作為氮源

（4）①緩沖液②緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近

4.據(jù)圖回答下列問題：

(1)生牛奶在飲用前一般要經(jīng)過_________________(填具體方法)處理.，以保證

人體健康。

(2)培養(yǎng)微生物時必須進行無菌操作，實驗前所需的各種器材如培養(yǎng)皿等常

用法滅菌。

(3)牛奶是微生物生長的良好培養(yǎng)基，為檢測消毒前后牛奶中細菌含量的變

化情況，依圖甲所示操作：用無菌吸管從錐形瓶中吸取1mL生牛奶稀釋液移至

盛有9mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復(fù)2次后，得到的溶液稀釋度

為o

(4)配制的培養(yǎng)基在接種之前需進行無菌檢測，具體做法是

(5)圖乙中統(tǒng)計的菌落數(shù)比實際活菌數(shù),

原因是o

(6)從培養(yǎng)基的作用來看，圖丙所示的培養(yǎng)基稱為,能起

到分離微生物作用的原因是_________________________________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

解析：(1)牛奶常用巴氏消毒法進行消毒處理。(2)培養(yǎng)微生物過程中，吸管、

培養(yǎng)皿等玻璃器皿常用干熱滅菌法進行滅菌。(3)由題圖可知，從錐形瓶中吸取1

mL生牛奶稀釋液移至盛有9mL無菌水的試管中，稀釋了10倍，又重復(fù)了2次，

因此得到的溶液稀釋度為10\(4)對配制的培養(yǎng)基在接種之前進行無菌檢測的常

用方法是將未接種的培養(yǎng)基置于適宜條件下一段時間，如果沒有形成菌落說明滅

菌徹底，反之，有菌落生長則說明滅菌不徹底。(5)圖乙是通過稀釋涂布平板法

接種得到的菌落，由于兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌

落，因此統(tǒng)計的菌落數(shù)比實際活菌數(shù)要少。（6）圖丙用的是含尿素的培養(yǎng)基，只

有能分解尿素的微生物才能生長，其他微生物因不能利用尿素而不能生長，因此

含尿素的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

答案：（1）巴氏消毒法（2）干熱滅菌（3）103（4）將未接種的培養(yǎng)基置于適宜

條件下一段時間，若沒有菌落形成，則說明滅菌徹底（5）少當(dāng)兩個或多個細

胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落（6）選擇培養(yǎng)基這種培養(yǎng)基允

許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長

新題長句訓(xùn)練

1.［2018.全國HT37（2）］牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，

與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是o

答案：在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少

2"2014.全國HT39（2）］某小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌，操作時，

接種環(huán)通過________滅菌。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端

開始劃線。這樣做的目的是________________________________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

答案：灼燒將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，以便獲得單個菌

落

3.［2015.江蘇T31（2）］在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過

多的原因是_______________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

答案：培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果

4.［2017?全國IT37（2）］為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)

選擇（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作為氮源，不選擇

其他兩組的原因是_________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

答案:尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素

的細菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用

5.［2018.全國IHT37（1）］分離培養(yǎng)酵母菌通常使用（填“牛

肉膏蛋白陳”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用

滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后

可觀察到菌落，菌落的含義是_________________________________________________

答案：麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群

體

6.[2014?全國IT39（3）]為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的

單菌落，某同學(xué)設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)基（成分見下表）：

酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水

培養(yǎng)基甲++++—++

培養(yǎng)基乙+++—+++

注：“+”表示有，“一”表示無。

據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素

分解菌，原因是________________________________________________________________

____________________________________________________________________________;

培養(yǎng)基乙_________（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原

因是____________________________________________________________________________

答案：不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維

素，不會形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素

分解菌

7.[2018?全國IT37（4）]甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣

品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：

甲同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值

133；

乙同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。

有人認為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是

答案：乙同學(xué)的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重

復(fù)性差

8.已知金黃色葡萄球菌的最適生長溫度為37℃,并且有高度的耐鹽性，可

以在10%?15%NaCl肉湯培養(yǎng)基中生長，某同學(xué)想快速培養(yǎng)大量的金黃色葡萄

球菌，應(yīng)該如何操作？o該同學(xué)分

離得到金黃色葡萄球菌后，將其接種到固體斜面培養(yǎng)基上進行臨時保存，該保存

方法的缺點是o

答案：挑取金黃色葡萄球菌接種在高鹽的肉湯培養(yǎng)基中，置于37°C條件下

培養(yǎng)保存時間不長，菌種易被污染或產(chǎn)生變異

9.采用下表配方配制的培養(yǎng)液分離果膠酶產(chǎn)生菌時，該表X處的成分應(yīng)是

（填"葡萄糖"或“果膠”），不選另一種成分的原因是

K2HPO4MgSO4NaNO3FeSO4XH2O

0.1g0.5g3g0.01g2g加至1L

答案：果膠大多數(shù)微生物以葡萄糖作為碳源，不具有選擇作用

10.在實驗中，研究者每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定

時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止___________________________________________

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

答案：因培養(yǎng)時間不足導(dǎo)致遺漏細菌數(shù)目

11.對細菌計數(shù)時往往會產(chǎn)生實驗誤差，稀釋涂布平板法計數(shù)的值比實際值

，原因是_________________________________________________________

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________;

顯微計數(shù)法計數(shù)的結(jié)果比實際值________，原因是

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________0

答案：偏小當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

偏大顯微鏡下無法區(qū)分細胞的死活，計數(shù)時包括了死細胞

12.把菌種接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基上，持續(xù)振蕩培養(yǎng)鏈霉菌比靜置培養(yǎng)時的

抗生素產(chǎn)量高，其原因是__________________________________________________

答案：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液溶氧量，利于菌體與培養(yǎng)液充分接觸，促進菌

體的生長與代謝

13.為研究發(fā)酵罐中釀酒酵母菌的生長情況，常要取樣統(tǒng)計分析，并測定

pH。若某研究人員將樣品的次序搞亂了，那么判斷取樣順序的主要依據(jù)是

(填“酵母菌的數(shù)量”或“發(fā)酵液的pH”)。

答案：發(fā)酵液的pH

14.我國的衛(wèi)生標準是每1000mL飲用水中大腸桿菌不得超過3個，在培

養(yǎng)基上每1000mL合格飲用水形成的菌落數(shù)卻大于了3個，原因是

答案：飲用水中還有其他細菌，在伊紅美藍固體培養(yǎng)基上形成的紫黑色菌落

不超過3個，但形成的菌落數(shù)遠大于3個

15.某同學(xué)計劃統(tǒng)計污水池中目的菌的總數(shù)，他選用IO4、1()5、106稀釋液

進行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿，從設(shè)計實驗的角度看，還應(yīng)設(shè)

置的一組對照實驗是，此對照實驗的目的是

O

答案：不接種的空白培養(yǎng)基檢驗培養(yǎng)基滅菌是否合格

16.經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實驗，血平板上均出現(xiàn)

的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應(yīng)商仍認為此菌并

非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進行完善，完善的方案是

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

答案：金黃色葡萄球菌為增強實驗結(jié)論的嚴謹性，應(yīng)增加空白對照組

二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)

1.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比較

項目制作泡菜并檢測亞

果酒和果醋的制作腐乳的制作

內(nèi)容硝酸鹽含量

果酒：酵母菌；果

作用菌種毛霉乳酸菌

醋：醋酸菌

(1)酵母菌在無氧毛霉等微生物產(chǎn)生

乳酸菌在無氧條件

條件下將葡萄糖轉(zhuǎn)的酶將豆腐中的蛋

原理下，將葡萄糖分解

化成乙醇；白質(zhì)、脂肪分解成

成乳酸

(2)醋酸菌在有氧小分子有機物

條件下將乙醇變?yōu)?/p>

乙醛，再將乙醛變

為醋酸

新鮮葡萄（或蘋果大白菜、花椰菜等

原料選擇豆腐

等）新鮮干凈的蔬菜

挑選葡萄

讓豆腐上

;

長出毛霉

沖洗

（選樹［配,1鹽水）

?（加調(diào);料,裝壇）

榨汁加鹽腌制

實驗流程

1

國助測定亞

醋酸

psWl加鹵湯裝瓶一硝酸鹽

1發(fā)酵1一發(fā)酵

1

密封腌制

果酒果醋

充氣口

排氣口

制作裝置令

接種毛霉后

出料口出息加鹽腌制

［提醒］微生物發(fā)酵過程中滅菌措施的分析

微生物發(fā)酵過程應(yīng)該從原料、裝置和實驗過程三個層次進行無菌操作。

（1）果酒與果醋制作中原料的消毒

①榨汁前葡萄應(yīng)先沖洗再除去枝梗，因為若先除去枝梗則會使一些微生物侵

入果實內(nèi)部，影響果酒的制作。

②體積分數(shù)為70%的酒精殺菌效果最強，若酒精濃度過低，殺菌效果弱，而

濃度過高，又會使菌體表面蛋白質(zhì)凝固形成一層保護膜，乙醇分子不能滲入其中，

從而使殺菌效果受到影響。

新題素養(yǎng)訓(xùn)練

1.（2020?高考全國卷II）研究人員從海底微生物中分離到一種在低溫下有催

化活性的a-淀粉酶A3,并對其進行了研究。回答下列問題:

（1）在以淀粉為底物測定A3酶活性時，既可檢測淀粉的減少，檢測應(yīng)采用的

試劑是，也可采用斐林試劑檢測的增加。

（2）在A3的分離過程中可采用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測其純度，通常會在凝

膠中添加SDS,SDS的作用是_____________________________________________

和0

（3）本實驗中，研究人員在確定A3的最適pH時使用了三種組分不同的緩沖

系統(tǒng)，結(jié)果如下圖所示。某同學(xué)據(jù)圖判斷，緩沖系統(tǒng)的組分對酶活性有影響，其

判斷依據(jù)是o

—0O

9O

58O

起7O

贓6O

5O

遵4O

玄3O

毋2O-口NazHPO^KH2PO,緩沖系統(tǒng)

1O?Tris-HCl緩沖系統(tǒng)

oGly-NaOH緩沖系統(tǒng)

06.07.08.09.010.0