21三體綜合征產(chǎn)前診斷滿(mǎn)分

21，三體綜合征產(chǎn)前診斷

瀘州醫(yī)學(xué)院第三組總分值PPT案例張某，女，31歲，商場(chǎng)收銀員，懷孕15周，擔(dān)憂(yōu)所孕胎兒不正常，前來(lái)進(jìn)展遺傳咨詢(xún)。經(jīng)訊問(wèn)得知，張某的一表姐曾生育一智力低下兒子，經(jīng)某醫(yī)院診斷為先天愚型，但詳細(xì)核型不詳。張某孕前檢查各項(xiàng)優(yōu)生目的均正常，孕前無(wú)感冒服藥史，無(wú)有毒有害物質(zhì)接觸史。張某的丈夫，32歲，司機(jī)，有煙酒嗜好，在妻子懷孕前半年已戒酒，減少吸煙量。兩人核型檢查均正常，家族中其他特殊疾病患者。根據(jù)張某的情況，作中孕期唐氏篩查，結(jié)果張某血清的AFP,hCG和uE3檢查結(jié)果陽(yáng)性，再進(jìn)展B超檢查胎兒情況，證明胎兒胎齡正確，發(fā)育正常。根據(jù)上述資料，張某所孕胎兒具有21三體綜合癥的高風(fēng)險(xiǎn)，建議進(jìn)展產(chǎn)前診斷。

孕婦就診

常規(guī)篩查綜合分析風(fēng)險(xiǎn)值孕期檢查進(jìn)一步確診羊膜穿刺產(chǎn)前診斷產(chǎn)前診斷是在遺傳咨詢(xún)的根底上，主要經(jīng)過(guò)遺傳學(xué)檢測(cè)和影像學(xué)檢查，對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)胎兒進(jìn)展明確診斷，經(jīng)過(guò)對(duì)患胎的選擇性流產(chǎn)到達(dá)胎兒選擇的目的，從而降低出生缺陷率，提高優(yōu)生質(zhì)量和人口素質(zhì)。產(chǎn)前診斷又稱(chēng)宮內(nèi)診斷。它是為了了解胎兒在子宮內(nèi)的安康情況，有無(wú)先天性畸形或遺傳病，用某些特殊檢查方法在子宮內(nèi)對(duì)胎兒進(jìn)展診斷，以便及早采取措施防止殘疾兒的出生，提高出生人口的素質(zhì)，是有生學(xué)的重要組成部分。案例張某，女，31歲，商場(chǎng)收銀員，懷孕15周，擔(dān)憂(yōu)所孕胎兒不正常，前來(lái)進(jìn)展遺傳咨詢(xún)。經(jīng)訊問(wèn)得知，張某的一表姐曾生育一智力低下兒子，經(jīng)某醫(yī)院診斷為先天愚型，但詳細(xì)核型不詳。張某孕前檢查各項(xiàng)優(yōu)生目的均正常，孕前無(wú)感冒服藥史，無(wú)有毒有害物質(zhì)接觸史。張某的丈夫，32歲，司機(jī)，有煙酒嗜好，在妻子懷孕前半年已戒酒，減少吸煙量。兩人核型檢查均正常，家族中其他特殊疾病患者。根據(jù)張某的情況，作中孕期唐氏篩查，結(jié)果張某血清的AFP,hCG和uE3檢查結(jié)果陽(yáng)性，再進(jìn)展B超檢查胎兒情況，證明胎兒胎齡正確，發(fā)育正常。根據(jù)上述資料，張某所孕胎兒具有21三體綜合癥的高風(fēng)險(xiǎn)，建議進(jìn)展產(chǎn)前診斷。產(chǎn)前診斷方法1.X線檢查2.超聲波檢查3.胎兒鏡4.羊膜穿刺術(shù)5.絨毛汲取術(shù)6.臍帶穿刺術(shù)7.孕婦外周血分別胎兒細(xì)胞8.植入前診斷一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆者z傳病的產(chǎn)前診斷過(guò)程，經(jīng)過(guò)對(duì)21三體綜合征的診斷設(shè)計(jì)，培育運(yùn)用遺傳學(xué)現(xiàn)代技術(shù)處理醫(yī)學(xué)實(shí)踐問(wèn)題的才干。二、實(shí)驗(yàn)原理1.羊水中有一定數(shù)量胎兒零落細(xì)胞，經(jīng)過(guò)羊膜穿刺獲取羊水中的胎兒細(xì)胞，經(jīng)體外培育后經(jīng)過(guò)G顯帶實(shí)驗(yàn)進(jìn)展核型分析，判別染色體能否畸形，診斷能否患有21三體綜合征。2.G顯帶是指以Giemsa染料染色后，使染色體顯帶的技術(shù)。Giemsa染料是由噻嗪和曙紅組成的，著色時(shí)DNA先于2個(gè)噻嗪分子結(jié)合，然后再與一個(gè)曙紅分子結(jié)合，構(gòu)成沉淀物，而DNA的某些部位對(duì)染料不敏感，由此構(gòu)成明暗相間的條帶。三、實(shí)驗(yàn)資料、試劑及器材〔1〕器材：離心管，離心機(jī)，天平，37℃溫箱，載玻片，蓋玻片，恒溫水浴鍋，光學(xué)顯微鏡，標(biāo)本板，玻璃鉛筆，定時(shí)鐘，染色缸，直柄虹膜鑷，滴管?！?〕藥品：pH6.8PBS，Giemsa，0.025%胰蛋白酶〔取0.9%氯化鈉100ml，加0.25%胰蛋白酶1ml〕。四、實(shí)驗(yàn)步驟取材↓體外細(xì)胞培育↓制片↓顯帶↓核型分析取材1、腹部備皮，排光膀胱，平臥位常規(guī)消毒后鋪無(wú)菌洞巾。2、麻醉，普通不用需求，精神緊張者或可用普魯卡因或利多卡因麻醉。

取材3、選擇穿刺部位，經(jīng)B超胎盤(pán)定位后避開(kāi)胎盤(pán)。

中期妊娠時(shí)，普通選擇在恥骨結(jié)合上3橫指相當(dāng)于子宮下段處，于腹中線或其左右側(cè)旁，捫及囊樣感的部位做穿刺；也可于宮底與恥骨結(jié)合連線中點(diǎn)或左右任何一側(cè)穿刺。

晚期妊娠時(shí)，先捫清胎先露，然后上推先露部，在先露部下方穿刺；也可在胎兒頸背部空隙處或胎兒肢體側(cè)空隙處穿刺。

取材4、確定穿刺部位后，以20～21號(hào)腰椎穿刺針垂直刺入腹壁，經(jīng)過(guò)腹壁及宮壁兩次阻力，當(dāng)有落空感時(shí)即進(jìn)入羊膜腔，抽出芯針，見(jiàn)羊水溢出，接上注射器，順利抽得清亮羊水，再次證明在羊膜腔內(nèi)后，可注射藥物。如欲做羊水檢查，那么抽取羊水20ml立刻送檢。

5、穿刺終了后拔出穿刺針，部分壓迫5分鐘，穿刺部位敷以無(wú)菌紗布，膠布固定。

四、實(shí)驗(yàn)步驟取材↓體外細(xì)胞培育↓制片↓顯帶↓核型分析細(xì)胞體外培育無(wú)菌超凈臺(tái)上將羊水注入50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1500r/min常溫離心10min，移去上清，留約0.5ml上清液，槍尖混勻，分裝汲取至3個(gè)60mm培育皿〔falcon〕，每皿添加4ml羊水完全培育基，37℃5%CO2培育箱中培育6-7d。四、實(shí)驗(yàn)步驟取材↓體外細(xì)胞培育↓制片↓顯帶↓核型分析制片培育6-7d后，倒置顯微鏡下察看細(xì)胞生長(zhǎng)情況，有假設(shè)干梭形型細(xì)胞克隆生長(zhǎng)，每個(gè)克隆細(xì)胞形狀較好且構(gòu)成細(xì)胞島，改換新穎培育液，每天察看，2-3d后，每個(gè)細(xì)胞島已長(zhǎng)成一個(gè)個(gè)較大克隆且細(xì)胞交融度達(dá)70%-80%，并出現(xiàn)數(shù)目不等的較多圓形，類(lèi)圓形透亮細(xì)胞時(shí)，可進(jìn)展細(xì)胞收獲，收獲前一天或當(dāng)天改換培育液，參與秋水仙素，終濃度為0.1微克每毫升，作用4-4.5h,鏡下察看有大量“魚(yú)眼樣〞透明細(xì)胞出現(xiàn)時(shí)，即可收獲。汲取培育上清至一新離心管，參與0.25%胰酶，37℃消化2min，1000r/min離心10min，棄上清，參與0.075mol/LKCl低滲液，37℃12-13min，用3:1甲醇/冰醋酸預(yù)固定和固定后，滴片，常規(guī)G顯帶。四、實(shí)驗(yàn)步驟取材↓體外細(xì)胞培育↓制片↓顯帶↓核型分析顯帶1、將制好的染色體標(biāo)本，置72℃～75℃烤箱中烤片3h。

2、放入預(yù)溫至37℃的0.025%胰酶溶液中〔pH=7.2～7.4〕消化1min左右，每次的作用時(shí)間并不完全一樣，可先試一張片子，再根據(jù)顯帶效果調(diào)整胰酶作用時(shí)間。顯帶3、在Giemsa染液中染色10min，自來(lái)水沖洗干凈，晾干后，即可閱片。4、鏡檢：在顯微鏡高倍目鏡下檢查顯帶標(biāo)本，在染色體上假設(shè)出現(xiàn)明晰的深淺相間的帶型，即為可取標(biāo)本，可供攝像分析四、實(shí)驗(yàn)步驟取材↓體外細(xì)胞培育↓制片↓顯帶↓核型分析結(jié)果判別(1)規(guī)范型占患者總數(shù)的92.5%，患兒體細(xì)胞染色體有47條，有一條額外的21號(hào)染色體，核型為47，XX〔或XY〕+21。其發(fā)活力制為親代〔多為母親〕的生殖細(xì)胞在減數(shù)分裂時(shí)染色體不分別所致。核型分析純合型結(jié)果判別(2)嵌合型僅占21-三體綜合征的2.5%-5%，是指受精卵在有絲分裂期間染色體不分別而導(dǎo)致的，因此只是部分而不是一切的細(xì)胞存在缺陷。患兒體內(nèi)含有正常和21-三體細(xì)胞二種細(xì)胞株，構(gòu)成嵌合體，核型為46，XX〔或XY〕/47，XX〔或XY〕+21，其臨床表現(xiàn)隨正常細(xì)胞所占百分比而定。嵌合型的患兒的智商較其它兩型高，臨床并發(fā)癥的發(fā)生率也相對(duì)較少。核型分析易位型結(jié)果判別(3)易位型約占全部病例的2.5%～5%，多為羅伯遜易位，即著絲粒交融，其額外的21號(hào)染色體長(zhǎng)臂易位到另一近端著絲粒染色體上。最常見(jiàn)為D/G易位，D組中以14號(hào)染色體為主，核型為46，XX〔或XY〕-14，+t〔14q;21q〕，少數(shù)為15號(hào)染色體。另一種為G/G易位，是由于G組中兩個(gè)21號(hào)染色體發(fā)生著絲粒交融，構(gòu)成等臂染色體，核型為46，XX〔或XY〕-21，+t〔21q；21q〕。易位型先天愚型五、本卷須知〔1〕胰蛋白酶濃度和處置時(shí)間隨氣溫高低有所不同。普通規(guī)律是標(biāo)本存放時(shí)間越長(zhǎng)，在胰蛋白酶當(dāng)中處置時(shí)間越長(zhǎng)。太新穎的標(biāo)本，染色領(lǐng)會(huì)出現(xiàn)毛茸景象。片齡很長(zhǎng)的標(biāo)本往往會(huì)導(dǎo)致斑點(diǎn)狀的染色體。〔2〕胰蛋白酶溫度：溫度越高，反響的速度就越快，普通是室溫，但溫度必需穩(wěn)定至少20min?！?〕胰蛋白酶處置的時(shí)間：假設(shè)細(xì)胞呈紫藍(lán)色，闡明胰蛋白酶的作用時(shí)間不夠，假設(shè)細(xì)胞呈桃紅色，闡明作用時(shí)間剛好。

綜上總結(jié)給與遺傳建議：假設(shè)出現(xiàn)上