氨茶堿的血藥濃度測定

【目的】學習氨茶堿血藥濃度的紫外測定方法，驗證其藥動學模型?！驹怼?.氨茶堿為臨床常用平喘藥，由茶堿與乙二胺縮合而成。在酸性條件下,可用有機溶劑從血清中提取出茶堿,再用堿液將茶堿從有機溶劑中提出。測量λ274和λ298處的吸光度（A274為茶堿和本底，即溶劑、血清的吸光度，A298為本底的吸光度），ΔA=A274-A298。茶堿吸收度曲線茶堿本底274298Aλ2.氨茶堿經(jīng)靜脈進入血液，隨血液循環(huán)進行組織分布，達到平衡后轉(zhuǎn)入消除相。時量曲線呈二房室動力學模型。3.房室模型是抽象的數(shù)學模型，它的劃分與解剖學部位或生理學功能無關(guān)。藥物轉(zhuǎn)運速率相同或相近的部位可劃分為同一房室。房室模型可以分為一室模型、二室模型、多室模型。大多數(shù)藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運和分布符合二室模型。即藥物靜脈注射入血后，首先快速進入血流量大的組織，如心、肝、腎、肺、腦等，然后緩慢地向血流量小的組織，如脂肪組織、靜止的肌肉組織等轉(zhuǎn)移?！酒鞑呐c藥品】

754型紫外分光光度計，液體渦旋混和器，數(shù)學坐標紙、半對數(shù)坐標紙各一張。氨茶堿標準液，0.1mol/LHCl,0.1mol/LNaOH,異丙醇：氯仿抽提液（5:95）?！緦嶒瀯游铩考彝谩緦嶒灢襟E】1．取體重2.5-3kg健康家兔1只，一耳緣靜脈注射氨茶堿15mg/kg，另一耳用銳利刀片切割取血。分別在給氨茶堿后5、10、20、30、60、120、180、300、420min取血。2．分離血清，各管均取血清0.5ml于15ml試管中，加0.1mol/L鹽酸0.2ml、抽提液5ml，振搖混合，2500r/min離心10min。3．吸取下層氯仿液4ml置另一試管中，加入0.1mol/LNaOH溶液4ml，振搖混勻，2500r/min離心10min。4．吸取上層堿液，以0.1mol/LNaOH溶液作參比，測定其在λ274和λ298處的吸收度（A274和A298），計算△A。5.制作茶堿標準曲線：取5支試管，依次加入茶堿標準液20、40、60、80、100μl，各加入0.1mol/LNaOH溶液4ml，終濃度依次為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5μg/ml，測定各管的A274和A298，計算△A。以茶堿濃度為橫坐標，△A為縱坐標描點繪圖，用Excel軟件求直線回歸方程，即為茶堿標準曲線的直線方程（圖示）。①

將茶堿濃度和吸光度的數(shù)據(jù)錄入Excel的工作表中。茶堿標準曲線的制作茶堿標準曲線的制作②選取Excel表上任一格，點擊菜單“插入/圖表”，出現(xiàn)“圖表指南”，選取“XY散點圖”，進行下一步。茶堿標準曲線的制作③“數(shù)據(jù)區(qū)域”選取茶堿濃度和吸光度相關(guān)數(shù)據(jù)，“系列產(chǎn)生在－列”，直至完成。茶堿標準曲線的制作④選取所得圖形，用右鍵點擊5個散點中任一點，出現(xiàn)對話框，點選“添加趨勢線”選項。茶堿標準曲線的制作⑤在“添加趨勢線”對話框的“選項”一欄，選中“顯示公式”和“顯示R平方值”，然后“確定”。茶堿標準曲線的制作⑥標準曲線的直線方程和R2值自動出現(xiàn)。R（相關(guān)系數(shù)）表示曲線方程對原始數(shù)據(jù)擬合的程度。6.將測得血清樣品的△A代入標準曲線的方程，求得相應的C，C×10即為茶堿的血藥濃度。以時間為橫坐標，濃度對數(shù)為縱坐標，用CAPP軟件描點做圖，判斷氨茶堿在體內(nèi)代謝的房室模型。時間（min）ΔAC（μg/ml）血藥濃度（μg/ml）

510203060120180300420①

將取血時間和茶堿血藥濃度輸入CAPP軟件。②

添加消除相的數(shù)據(jù)點，點擊“更新曲線”。③

添加分布相的數(shù)據(jù)點，點擊“更新曲線”。④

氨茶堿體內(nèi)代謝的時量曲線即繪制完成，曲線方程和相關(guān)的藥動學參數(shù)值亦同時列出?！咀⒁馐马棥?.紫外分光光度計使用前需預熱30min并激發(fā)氫燈。2.振搖混勻藥液時防止濺出并準確加樣。3.樣品離心前需配平。4.測量時若更換波長，必須重新調(diào)節(jié)0和100％。【討論】1.氨茶堿的時量曲線呈幾房室模型？為什么？