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文檔簡介
3.1
藍(lán)莓離體培養(yǎng)體系的建立
模塊Ⅲ藍(lán)莓種苗工廠化生產(chǎn)
任務(wù)3藍(lán)莓無菌操作與培養(yǎng)基本知識點和技能點一、外植體的選擇原則二、外植體的消毒過程三、藍(lán)莓外植體消毒及接種3.1
藍(lán)莓離體培養(yǎng)體系的建立
一、外植體選擇原則(一)選擇優(yōu)良的種質(zhì)無論是離體培養(yǎng)繁殖種苗,還是進(jìn)行生物技術(shù)研究,培養(yǎng)材料的選擇都要選取性狀優(yōu)良的種質(zhì)。選取性狀優(yōu)良的種質(zhì)、特殊的基因型和生長健壯的無病蟲害植株。同時選擇生長健壯無病蟲害的植株、器官或組織,其代謝旺盛,再生能力強,培養(yǎng)后容易成功。果實性狀表現(xiàn)不同5外植體-藍(lán)莓葉外植體-藍(lán)莓莖外植體-藍(lán)莓莖外植體-藍(lán)莓花芽不同的植物品種、不同器官、同一器官不同生理狀態(tài),對外界的誘導(dǎo)反應(yīng)的能力和分化再生能力也有差別,培養(yǎng)的難易程度也不同。(二)選擇健壯的植株6(三)選擇最適的時期在藍(lán)莓的生長季節(jié)和生長發(fā)育階段在晴天取材在下午采取的外植體要比早晨采好(四)選擇適宜的大小0.5-1cm0.5cm2二、藍(lán)莓無菌操作技術(shù)外植體的接種—無菌操作外植體的接種是指:把經(jīng)過表面滅菌后的植物材料切碎或分離出器官、組織、細(xì)胞,轉(zhuǎn)放到無菌培養(yǎng)基上的全部操作過程。1、進(jìn)入接種室前用肥皂水洗凈雙手。2、進(jìn)入緩沖間穿上滅過菌的工作服、口罩、帶上帽子。3、進(jìn)入接種室,再接種之前用75%的酒精擦拭雙手和臺面,點燃酒精燈(一)外植體的接種二、藍(lán)莓無菌操作技術(shù)(一)外植體的接種4、把培養(yǎng)瓶在酒精燈旁打開進(jìn)行接種,避免雜菌的污染,在接種時嚴(yán)禁交談,經(jīng)常用75%酒精進(jìn)行擦洗雙手.接種時把培養(yǎng)瓶拿成斜角。5、接種器具要及時滅菌,避免交叉感染。6、接種完畢后,清理臺面和地面1.材料的預(yù)處理,流水沖洗20min。二、藍(lán)莓無菌操作技術(shù)(二)外植體的消毒過程二、藍(lán)莓無菌操作技術(shù)(二)外植體的消毒過程2.放進(jìn)75%的酒精中30s,后用無菌水沖洗2-3遍.二、藍(lán)莓無菌操作技術(shù)(二)外植體的消毒過程3.10%次氯酸鈉液中浸泡10-15分鐘.要不斷的搖動.再用無菌水沖洗3-5次.二、藍(lán)莓無菌操作技術(shù)(二)外植體的消毒過程4.濾紙吸干表面水分,切成0.5cm左右大小,每瓶一個外植體。藍(lán)莓外植體的消毒要求及注意事項:1、工具的擺放2、消毒過程正確無交叉污染動作
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