養(yǎng)殖水域生態(tài)學(xué)課件

緒論

一、水產(chǎn)餌料生物學(xué)的定義、內(nèi)容和任務(wù)水產(chǎn)餌料生物學(xué)是研究作為經(jīng)濟(jì)水生動(dòng)物餌料的浮游植物、浮游動(dòng)物、底棲生物和水生大型植物的科學(xué)。主要內(nèi)容包括水產(chǎn)餌料生物的形態(tài)、分類、生理、生態(tài)、經(jīng)濟(jì)意義及其主要類群的增殖（培養(yǎng)）利用。任務(wù)是在學(xué)習(xí)各類水生動(dòng)植物生物學(xué)特徵和種類鑒定的基礎(chǔ)上，著重瞭解重要餌料生物的餌料價(jià)值和個(gè)體生態(tài)，並初步掌握其培養(yǎng)（增殖）、利用的理論與方法。二、研究簡(jiǎn)史１.人類在與海洋、湖川、池沼各類水域的接觸和利用中逐漸發(fā)現(xiàn)和記錄了水生生物的種類及其分佈和生活史，首先被注意的的是魚類和其他大型生物。自?shī)湮暮揽?Leewenhoek，1632-1723)研製和改善顯微鏡後，微型和小型生物才得以深入研究。婁氏本人首先發(fā)現(xiàn)輪蟲(chóng)和一些單細(xì)胞生物。

2.Forbes在1815年用底拖網(wǎng)採(cǎi)集並觀察了海岸底棲生物的分帶現(xiàn)象。

3.Muller於1845年在德國(guó)沿海用浮游生物網(wǎng)採(cǎi)集浮游生物並進(jìn)行浮游生物研究。4.德國(guó)學(xué)者Hensen1867年率遠(yuǎn)征隊(duì)去大西洋採(cǎi)集和調(diào)查浮游生物的種類和分佈。首先創(chuàng)用了“浮游生物（Plankton）”一詞。5.瑞士學(xué)者Forel於1869年(F.A.,1841-1912)研究了日內(nèi)瓦湖的底棲動(dòng)物早期在水生生物形態(tài)分類研究中作過(guò)較多貢獻(xiàn)的還有Sars(1900-)等等。三、我國(guó)水生生物學(xué)發(fā)展概況

（一）分類工作有新進(jìn)展發(fā)表了大量論文，很多分類專著先後出版，為我國(guó)水產(chǎn)餌料生物學(xué)的研究鋪平了道路?！度A東水生維管束植物》裴鑒等，1952；《湖泊調(diào)查基本知識(shí)》饒欽止等，1955；《中國(guó)淡水輪蟲(chóng)志》王家楫，1961；《中國(guó)海洋浮游矽藻類》金德詳?shù)龋?965；《中國(guó)海洋浮游橈足類》鄭重等，1965；《中國(guó)動(dòng)物志—淡水枝角類》蔣燮治、堵南山，1979；《中國(guó)動(dòng)物志—淡水橈足類》沈嘉瑞等，1979《中國(guó)淡水藻類》胡鴻鈞等，1980；《西藏水生無(wú)脊椎動(dòng)物》蔣燮治等，1983；《海洋浮游生物學(xué)》鄭重等，1984；《中國(guó)淡水藻志-鞘藻目》饒欽止，1988；《中國(guó)近海多毛環(huán)節(jié)動(dòng)物》楊德漸、孫瑞平，1988；《中國(guó)淡水藻志-矽藻門中心綱》齊雨藻等，1995；《中國(guó)淡水藻志-色球藻目》朱浩然等，1997；《中國(guó)淡水藻志——裸藻門》施之新等，1999；《原生動(dòng)物學(xué)》沈韞芬等，1999（二）開(kāi)展不同水域的漁業(yè)資源調(diào)查

在海洋方面，上世紀(jì)50年代，中科院海洋所對(duì)黃、渤海進(jìn)行綜合調(diào)查。1958年《全國(guó)海洋綜合調(diào)查》，1980年進(jìn)行全國(guó)海岸及海洋資源綜合調(diào)查等；在內(nèi)陸水域方面，50年代中蘇合作對(duì)黑龍江進(jìn)行綜合考察。中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所對(duì)長(zhǎng)江中、下游的湖泊調(diào)查，青海湖調(diào)查，80年代初由各省、市水產(chǎn)研究機(jī)構(gòu)和幾所水產(chǎn)高等院校協(xié)作，對(duì)長(zhǎng)江、黃河、黑龍江、珠江四大水系的漁業(yè)資源進(jìn)行綜合調(diào)查。大連水產(chǎn)學(xué)院等單位開(kāi)展了內(nèi)陸鹽水及其生物資源的調(diào)查和利用的研究。這些工作為水產(chǎn)餌料生物的區(qū)系和分佈提供了豐富的資料。

（三）生物餌料培養(yǎng)、利用取得成效

在單胞藻培養(yǎng)方面，青島海洋大學(xué)、中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所、海洋研究所等建立了比較完整的藻種室，可隨時(shí)為生產(chǎn)、科研單位進(jìn)行藻類培養(yǎng)提供種源；水生生物研究所進(jìn)行了固氮藍(lán)藻的培養(yǎng)和在農(nóng)業(yè)、漁業(yè)中利用的研究；海南、廣東建起了多處螺旋藻培養(yǎng)基地，其產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用於水產(chǎn)品育苗生產(chǎn)中；曾被視為害藻的螺旋魚腥藻(Anabaenaspiroides)經(jīng)陝西省水產(chǎn)研究所多年研究，證實(shí)其為鰱易利用的優(yōu)質(zhì)餌料，並在大面積培養(yǎng)方面做了大量工作。在輪蟲(chóng)培養(yǎng)方面，繼上世紀(jì)50年代引進(jìn)日本工廠化培養(yǎng)技術(shù)後，近年，李永函等利用廣泛蘊(yùn)藏於水體沉積物中的休眠卵，在土池中大量增殖輪蟲(chóng)獲得成功，並已在淡、海水苗種生產(chǎn)中，特別是河蟹土池生態(tài)育苗中得到應(yīng)用。枝角類作為“魚蟲(chóng)”，早在我國(guó)民間養(yǎng)魚中採(cǎi)用。十幾年前何志輝等從晉南採(cǎi)集到鹽水枝角類—蒙古裸腹溞（Moinamongolica）馴化於海水中，並對(duì)其生物學(xué)和培養(yǎng)方法進(jìn)行了深入的實(shí)驗(yàn)研究，為大規(guī)模增殖作為海水苗種生產(chǎn)新的活餌料奠定了基礎(chǔ)。隨著沿海鹵蟲(chóng)資源的急劇下降，內(nèi)陸鹽湖資源開(kāi)發(fā)已引起人們的關(guān)注。上世紀(jì)末，由黑龍江、新疆、內(nèi)蒙古等水產(chǎn)研究所，對(duì)西北地區(qū)鹽湖鹵蟲(chóng)資源進(jìn)行了為期4年的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)有鹵蟲(chóng)的鹽湖31處，水面1620km2，為鹵蟲(chóng)資源利用開(kāi)拓了新領(lǐng)域。

水產(chǎn)餌料生物的室內(nèi)培養(yǎng)

藻類培養(yǎng)方法簡(jiǎn)介

藻類，特別是單細(xì)胞藻類的營(yíng)養(yǎng)豐富，含有動(dòng)物和人生長(zhǎng)髮育所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。自上世紀(jì)四十年代以來(lái)，各國(guó)學(xué)者都試圖用藻類這一資源解決人類食物和動(dòng)物餌料的缺乏問(wèn)題。另一方面，藻類可直接或間接的作為魚類及其他水生動(dòng)物的餌料，因此，藻類培養(yǎng)對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖具有更大意義。關(guān)於藻類培養(yǎng)，還有其他意義，如利用培養(yǎng)固氮藍(lán)藻解決稻田氮素肥料；或從一些藻類提取藥物；或研究藻類生理，以及用於太空食品等。在漁業(yè)利用方面，藻類培養(yǎng)主要是解決水產(chǎn)動(dòng)物餌料。目前，有關(guān)海水藻類的培養(yǎng)較多，我國(guó)在海水養(yǎng)殖方面，已大規(guī)模展開(kāi)了某些浮游植物的培養(yǎng)，如扁藻（Platymonasspp）、中肋骨條藻（Skeletonemacostatum）、三角褐指藻（Phaeodactylumtricornutum）、鹽藻（Dunaliellaspp.）、新月菱形藻（Nitzschiaclostertum）、牟氏角毛藻（Chaetocerosmuelleri）及球等鞭金藻（Isochrysisgalbana）等，已解決貝類人工養(yǎng)殖的早期幼體餌料問(wèn)題。在淡水養(yǎng)殖方面，我國(guó)只進(jìn)行了螺旋藻、魚腥藻、小球藻、柵列藻等的培養(yǎng)。今後，隨著養(yǎng)殖事業(yè)的發(fā)展，對(duì)一些新品種的養(yǎng)殖以及解決某些品種幼魚的餌料，必然涉及到藻類的培養(yǎng)。因此，有必要瞭解藻類培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識(shí)。先僅就藻類、主要是單細(xì)胞藻類的一般培養(yǎng)方法及有關(guān)理論加以簡(jiǎn)述。

藻類的生長(zhǎng)模式

單細(xì)胞藻類在培養(yǎng)過(guò)程中，生長(zhǎng)繁殖的速度，出現(xiàn)一定的起伏，這種生長(zhǎng)模式可劃分為六個(gè)時(shí)期

藻類的培養(yǎng)方式

藻類的培養(yǎng)方式，以藻類培養(yǎng)的目的要求而各種各樣。但可分為密閉式培養(yǎng)和開(kāi)放式培養(yǎng)兩大類。1．密閉式培養(yǎng)：密閉式培養(yǎng)的目的是不使外界雜藻、菌類及其他有機(jī)體混入培養(yǎng)物中。將培養(yǎng)液密封在與外界完全隔離的透明容器中，由此通氣、攪拌、輸送培養(yǎng)液及調(diào)節(jié)水溫和取樣等設(shè)備，也都要與外界隔離。培養(yǎng)容器多為管狀、也有池狀，用有機(jī)玻璃或透明的聚乙烯所料做成水準(zhǔn)管道，直立或斜立在地上，暴露陽(yáng)光或人工光照下。這種培養(yǎng)方式，成本高，好控制，產(chǎn)量亦穩(wěn)定。2．開(kāi)放式培養(yǎng)：將藻類培養(yǎng)於敞開(kāi)的容器（如水泥池、管道、木盆等）中。方法設(shè)備較簡(jiǎn)便，可進(jìn)行小量或大面積的培養(yǎng)。該法培養(yǎng)物中易發(fā)生敵害生物污染，但成本低，使用較普遍，也是今後藻類培養(yǎng)所應(yīng)採(cǎi)取的方式。開(kāi)放式可分如下幾種類型：⑴開(kāi)放迴圈培養(yǎng)：其特點(diǎn)式培養(yǎng)液借助迴圈水泵而不斷迴圈流動(dòng)。培養(yǎng)物能迴圈，就可省卻攪拌工作。⑵開(kāi)放非迴圈培養(yǎng)：其特點(diǎn)是培養(yǎng)液不迴圈流動(dòng)，而定時(shí)由小管通入CO2和空氣到培養(yǎng)液中；同時(shí)也起攪拌作用。此法在大面積培養(yǎng)中使用較普遍。優(yōu)點(diǎn)是設(shè)備簡(jiǎn)單，無(wú)需動(dòng)力，水泵及大量的CO2及通氣設(shè)備。⑶半開(kāi)放迴圈培養(yǎng)：半開(kāi)放培養(yǎng)是指培養(yǎng)容器或池、槽等場(chǎng)所雖仍敞開(kāi)，但有些部分密閉，或用塑膠布覆蓋。這種培養(yǎng)方式，利用管道，依靠動(dòng)力，使培養(yǎng)液流動(dòng)和通入含二氧化碳的空氣。該方式設(shè)備複雜，但效果較好。

培養(yǎng)液的配製及舉例

在實(shí)驗(yàn)條件下培養(yǎng)微型藻類有多種培養(yǎng)基配方。這些配方大多數(shù)是早先發(fā)表過(guò)的配方的修改方，有些則從分析天然生境的水而得到，有些是從生態(tài)角度考慮的。發(fā)展藻類培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)配方時(shí)的主要考慮的問(wèn)題是：a．鹽的總濃度：大多是取決於有機(jī)體的生態(tài)來(lái)源。b．主要離子組分的組成及濃度：他們是鉀、鎂、鈉、鈣、硫酸鹽和磷酸鹽。c．氮源：硝酸鹽、氨和尿素常用作配方中的氮源，根據(jù)造中的性能和pH的最適點(diǎn)而定。藻類的生長(zhǎng)主要依賴氮的可利用性。大多數(shù)微型藻幹物中含有7～9％的氮。因此在1升培養(yǎng)液中生產(chǎn)10g細(xì)胞就至少需要500～600mgL-1KNO3。d．碳源：無(wú)機(jī)碳通常是用含1～5％CO2的空氣來(lái)供應(yīng)的，碳的另一種供應(yīng)辦法是用碳酸氫鹽。選用何種辦法主要是根據(jù)藻類生長(zhǎng)的pH最適點(diǎn)而定。e．pH：通常用偏酸的pH值來(lái)避免鈣鎂和其他微量元素發(fā)生沉澱。f．微量元素：培養(yǎng)基中的微量元素通常是用早已證明有效濃度的混合溶液來(lái)提供的（濃度在μgl-1級(jí)範(fàn)圍）。然而，這些微量元素的組分對(duì)藻類生長(zhǎng)是否必須卻不能總能顯示。為增加微量元素的穩(wěn)定性，常用檸檬酸鹽和EDTA作為螯合劑。維生素：許多藻類要求有硫胺素和維生素B12的供應(yīng)。

以下是幾種很有用的培養(yǎng)液配方1．單細(xì)胞綠藻（柵列藻）培養(yǎng)液水生4號(hào)（NH4）2SO40.200gCa(H2PO4)2·H2O+2（CaSO4·H2O）0.030gMgSO4·7H2O0.080gNaHCO30.100gKCL0.025gFeCL3（1％）0.150mL

土壤浸出液0.500mL

水1000mL水生6號(hào)

NH2CONH20.133gH2PO40.033mLMgSO4·7H2O0.100gNaHCO30.100gKCL0.033gFeSO4（1％水溶液）0.200mLCacl20.050mL

土壤浸出液0.500mL

水1000mL水生四號(hào)培養(yǎng)液中，藻類呈深綠色，生長(zhǎng)繁殖速率較低。水生6號(hào)培養(yǎng)液中，藻類呈草綠色，色素不夠正常，但生長(zhǎng)繁殖迅速。

土壤浸出液是用田園土壤按水與圖2:1的比例，攪勻浸泡後的上層清液，用前煮一小時(shí)後鏡檢，發(fā)現(xiàn)污染生物，應(yīng)再加溫消毒後使用。

2．浮游矽藻培養(yǎng)液水生矽1（mg/l）硝酸氨120硫酸鎂70磷酸氫二鉀40磷酸二氫鉀80氯化鈣20氯化鈉10矽酸鈉100檸檬酸鐵5土壤浸出液20硫酸錳2水1000mLpH7.0水生矽2（mg/l）尿素150氯化鉀30過(guò)磷酸鈣50矽酸鈣100硫酸鎂50碳酸氫鈉3硫酸錳3土壤浸出液4mLEDTA－鐵1mL水1000mL水生矽2號(hào)是用化肥尿素過(guò)磷酸鈣為氮磷來(lái)源，適於大量培養(yǎng)矽藻時(shí)選用，生長(zhǎng)適溫為20～30℃；光強(qiáng)為2,000～5,000米燭光。

3．朱氏10號(hào)培養(yǎng)液：適用於培養(yǎng)矽藻、藍(lán)綠藻等。H2O1000mLCa(NO3)20.04gK2HPO40.01gMgSO4·7H2O0.025gNa2CO30.02gNa2SiO30.025gFeCL30.008g使用時(shí)按1/2、1/4、1/10稀釋使用。4．f/2培養(yǎng)液硝酸鈉（NaNo3）75mg磷酸二氫鈉（NaH2PO4）4.4mgf/2微量元素溶液1mLf/2維生素溶液1mL海水1000mL本配方時(shí)應(yīng)與目前生產(chǎn)上使用的各種偽造的培養(yǎng)，但用於矽藻培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)再加50mgNa2SiO3。

附I：f/2微量元素溶液配方：硫酸鋅（ZnSO4·4H2O）23mg硫酸銅（CuSO4·5H2O）10mg氯化錳（MnCl2·4H2O）178mg檸檬酸鐵（FeC6H5O7·5H2O）3.9g鉬酸鈉（NaMoO4·5H2O）7.3mg乙二銨四乙酸鈉（Na2EDTA）4.35g六水氯化鈷（CoCl2·6H2O）12mg純水1000mL附II：f/2微量元素溶液配方：維生素B120.5mg維生素H（生物素）0.5mg維生素B1100mg純水1000mL

四、藻種的分離培養(yǎng)

為了要進(jìn)行某種藻類的科學(xué)研究活大量培養(yǎng)，有必要把某種藻類與其他生物分離。分離培養(yǎng)藻種，可分為兩大類，一為單種培養(yǎng)，即藻類雖只有一種，但還混雜細(xì)菌。另一為純培養(yǎng)，即不僅藻類只有一種，亦無(wú)其他任何生物。純培養(yǎng)比較困難，一般的分離培養(yǎng)往往只能做到單種培養(yǎng)。決定培養(yǎng)哪一種藻類，主要根據(jù)培養(yǎng)的目的要求，及某一種類的生物學(xué)特徵。藻類的分離主要有以下幾種常用方法。1．離心法：將混合液用離心機(jī)離心，水中不同藻體及細(xì)菌就以不同的速度下沉，因此得以分開(kāi)。這樣將不同時(shí)間下從導(dǎo)管底的藻體取出，經(jīng)鏡檢選定某種藻類最多的沉積物，再加清水，繼續(xù)離心，如此反復(fù)就可得到比較單純的藻體，在接種相應(yīng)培養(yǎng)液中培養(yǎng)。該法可消除細(xì)菌，並增加純粹分離的可能性，至少可作為藻種平板培養(yǎng)的準(zhǔn)備工作。另外，在水液中藻體含量較少時(shí)，可用此法集中藻體。但此法不能做到使不同藻類完全分離。2．稀釋法：該法源於中野治房（1933）的方法。用已消毒試管5只，在第一管盛蒸餾水10mL，第2～5管都裝5mL，用高壓蒸汽消毒，待冷卻後，第1管用滴管滴入混合藻液1～2滴，充分振盪，使均勻稀釋。次用消毒吸管，從第1管中吸取5mL滴入第二管中如前振盪，使均勻稀釋。以後依次同樣滴入第3～5管，並都充分均勻稀釋。然後把五個(gè)已盛又消毒的瓊膠培養(yǎng)基培養(yǎng)皿，加熱使之溶解，待冷卻而尚未凝固時(shí)，分別滴入五個(gè)試管的藻液各一滴，用力振盪，使藻液充分混乳培養(yǎng)基中。待冷凝後，把五個(gè)培養(yǎng)皿放在受著漫射光窗口，一直到出現(xiàn)藻群時(shí)為止。在20℃左右時(shí)，約10天即出現(xiàn)藻群。用消過(guò)毒的白金絲取些藻群，進(jìn)行瓊膠固體培養(yǎng)基的不通氣培養(yǎng)。此過(guò)程反復(fù)多次，直至得到完全分離的純?cè)宸N群為止。此法稀釋要使用較多容器分組培養(yǎng)，比較麻煩，但較易成功。

3．微吸管法：將水樣在載玻片上滴成綠豆粒大小的一些水滴，這樣可使每個(gè)水滴中有很少生物而便於分離；在解剖鏡下用微吸管（口徑小至0.008～0.16mm，圓口，可自行拉制）。將要分離的藻體吸出，用蒸餾水或平衡礦物質(zhì)溶液沖洗數(shù)次，然後主導(dǎo)成有培養(yǎng)基的小培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，待生長(zhǎng)旺盛後，再擴(kuò)大培養(yǎng)。此法較適用於能運(yùn)動(dòng)的藻類。4．趨向反應(yīng)法：利用藻類的特殊趨向性（如向光、向地等）不同而分離藻體。此過(guò)程反復(fù)幾次就可得到一定純度的藻體。分離效果較好，只是不能應(yīng)用於不運(yùn)動(dòng)的藻體。5．平板分離法：在培養(yǎng)液中加入戰(zhàn)培養(yǎng)液1.5％的瓊膠，加溶解後，注入培養(yǎng)皿中，加蓋後用15磅壓力121℃滅菌20分鐘，即製成膠質(zhì)培養(yǎng)基（也可用矽酸膠和明膠製備）。在瓊膠培養(yǎng)基放在40℃以下的水浴鍋內(nèi)，開(kāi)改用吸管注入混合藻液，搖勻，使之分散在培養(yǎng)基平面上。之後，可放在恒溫箱內(nèi)，用螢光燈照射，使藻群生長(zhǎng)。再經(jīng)鏡檢，反復(fù)此法不斷提純，即可分離出較純的藻種。6．固氮藍(lán)藻分離培養(yǎng)法：將一小片藻絲群接種到培養(yǎng)基上，幾天後再用滅菌白金絲挑取生出的新藻絲接種到平板培養(yǎng)基上。這樣經(jīng)幾次分離接種就得到較純的藻種。

五、藻種的選擇、接種和保存1．藻種的選擇：雖然藻類種類較多，但其中僅少數(shù)經(jīng)過(guò)人工培養(yǎng)。應(yīng)該研究在室外培養(yǎng)其他藻種的可能性和他們生產(chǎn)的潛力，所選擇的生物種應(yīng)具有下列特徵：⑴生長(zhǎng)迅速；⑵對(duì)極端的溫度和輻射條件的耐性範(fàn)圍大；⑶蛋白質(zhì)，脂類和糖類含量高，或有選擇地積累一種特殊的代謝產(chǎn)物（如甘油）；⑷無(wú)毒性，且易於收穫。根據(jù)系統(tǒng)的要求和特殊的方法，還可有其他要求。2．接種：再分離到單純?cè)迦横幔涂山臃N到培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，進(jìn)而移養(yǎng)擴(kuò)大培養(yǎng)。接種方法有液體接種和幹藻接種。前者是將藻液直接加入培養(yǎng)液中進(jìn)行攪拌，加入的藻種分量視水溫而定，水溫較低（10℃以內(nèi)）時(shí)，多加；約占培養(yǎng)液總量的30～40％左右，水溫適宜時(shí)（25～30℃左右），可加5～8％左右。後者是用幹藻的藻體接種，接種量為0.1～0.2％。

3．藻種的保存：一旦藻種分離得到，就要保存好以便在一定的時(shí)間內(nèi)供接種用。為此，要將藻種消毒，避免其他來(lái)源的污染。給以適當(dāng)?shù)墓庹蘸蜏囟?。在液體培養(yǎng)中，為了快速增殖，可用5400lx。再得到良好生長(zhǎng)後（1～2周），培養(yǎng)液移到更低的光照條件（540～1100lx），以求緩慢生長(zhǎng)及儲(chǔ)藏。藻類在瓊脂培養(yǎng)基上接種後的藻種，先給予2700lx光照6～7天，直到得到良好生長(zhǎng)，然後移到540～800lx光強(qiáng)的地方。大多數(shù)藻類保存在室溫下（15～20℃）即可，少數(shù)造中存活需較高溫度。藻種接代一致的頻率視物種及貯存條件而不同，單胞藻及絲狀不運(yùn)動(dòng)的物種可以每六個(gè)月到十二個(gè)月移種一次，有鞭毛的物種移種次數(shù)要更頻繁些。某些藻種曾成功地做到了在液氮下長(zhǎng)期保存。

六、管理及採(cǎi)收方法藻類培養(yǎng)的管理包括培養(yǎng)基養(yǎng)料的補(bǔ)給、光照及溫度調(diào)節(jié)、CO2的補(bǔ)給、攪拌、防汙等。在培養(yǎng)過(guò)程中，補(bǔ)給的養(yǎng)料，要選擇肥效速，並有持久性，來(lái)源較廣，價(jià)格低廉的種類。一般都以有機(jī)肥料為補(bǔ)肥。光照、溫度的調(diào)節(jié)視種類及季節(jié)而定。室內(nèi)照光一般都採(cǎi)用白熾電燈和螢光管。溫度調(diào)節(jié)一般採(cǎi)用室內(nèi)用白熾燈照射培養(yǎng)物或用溫室、安裝電熱管等升溫，室外冬季升溫較困難，主要採(cǎi)用玻璃棚；用冷水管道降溫，或經(jīng)通風(fēng)遮陽(yáng)降溫。CO2的補(bǔ)給一般通過(guò)空氣壓縮機(jī)或橡皮管將含5％CO2的空氣通過(guò)培養(yǎng)物中。攪拌使藻類培養(yǎng)不可少的一道工序。攪拌可使培養(yǎng)物均勻分佈，水溫均勻，利於藻類生長(zhǎng)。攪拌的方法一般為人力攪拌、風(fēng)力攪拌、空氣攪拌和磁力攪拌。此外還有迴圈流動(dòng)法。防汙在藻類培養(yǎng)中很重要，對(duì)雜藻及細(xì)菌的防治主要採(cǎi)用石灰、漂白粉、硫酸銅等試劑。用1～0.5ppmCuSO4防值雜藻的效果較好。當(dāng)有浮游動(dòng)物污染時(shí)，可施用化學(xué)試劑、殺蟲(chóng)劑等殺滅，如硫酸銅1～2ppm可殺滅輪蟲(chóng)、纖毛蟲(chóng)；漂白粉4ppm對(duì)各種蟲(chóng)類均有效；食鹽9‰，可殺滅輪蟲(chóng)；碘液5‰，再稀釋到十萬(wàn)分之一，可殺滅纖毛蟲(chóng)。

培養(yǎng)物的採(cǎi)收的時(shí)間要適當(dāng)，主要根據(jù)其密度大小決定。採(cǎi)收的方法有：1．物理濃縮：⑴離心法：國(guó)外使用最普遍。它利用離心力來(lái)把藻體與水液分離，是藻體下沉達(dá)到濃縮目的。主要工具是離心機(jī)。⑵重力沉降法：利用重力使培養(yǎng)物下沉而得到濃縮物。使用的工具是沉澱器。⑶遮光法和降溫法：對(duì)趨光性強(qiáng)的藻類，如衣藻等進(jìn)行遮蔽光線，使培養(yǎng)物下沉而得到濃縮物。低溫使藻類也有下沉現(xiàn)象2．化學(xué)濃縮法：用沉澱劑如明礬、石灰等，使培養(yǎng)物下沉，而得到濃縮物。明礬0.3～0.4‰，將之研碎，加入培養(yǎng)物中攪拌，半小時(shí)培養(yǎng)物大部分下沉，在6～12小時(shí)後，全部下沉。石灰一般是將其1斤溶在100～200斤水中，制得飽和石灰水，其用量是6％。但該兩法沉澱的藻濃縮物的灰分較多。此外，較大體積的種類，如絲狀體、非浮游性的藻類等可用過(guò)濾法採(cǎi)收。採(cǎi)收後的藻濃縮物即可經(jīng)乾燥加工成飼料或其他原料。

七、分析技術(shù)1．細(xì)胞計(jì)數(shù)—顯微鏡法培養(yǎng)物中的個(gè)體數(shù)測(cè)定，是按照個(gè)體計(jì)數(shù)方法，測(cè)定和估計(jì)培養(yǎng)物單位容積中的個(gè)體數(shù)。計(jì)數(shù)方法同浮游植物定量的方法（見(jiàn)前章）。此外，也可以採(cǎi)用血球計(jì)數(shù)法。2．分光光度計(jì)法：培養(yǎng)物的藻類密度也可用分光光度計(jì)測(cè)定。當(dāng)藻類密度較低時(shí)，光徑中的細(xì)胞數(shù)與測(cè)量到的光密度有一簡(jiǎn)單的幾何關(guān)係。在藻類密度不大時(shí)，光密度大，細(xì)胞數(shù)目就多，即可用測(cè)得的光密度值表示細(xì)胞數(shù)目。3．幹重測(cè)定測(cè)定幹重的增加量是生產(chǎn)估測(cè)方法中的一個(gè)最直接的方法，其步驟如下：⑴取樣—從藻體培養(yǎng)液中取出有代表性的一小部分體積的藻液。取樣時(shí)在以下三點(diǎn)上要特別注意：a．將培養(yǎng)物攪拌均勻b．快速吸取樣品以免沉積c．足夠多的樣品⑵分離—取出樣品後，用過(guò)濾膜過(guò)濾或用離心法把藻體與介質(zhì)分開(kāi)。細(xì)胞必須洗過(guò)以除去鹽分和其他汙物，通常是用稀釋的培養(yǎng)液或緩衝液。海洋藻類不能用蒸餾水洗，以免質(zhì)壁分離和細(xì)胞脹破。⑶乾燥—選擇對(duì)特定有機(jī)體最適的烘乾溫度。a．避免過(guò)熱b．有好的重複性c．對(duì)同一樣品增烘1小時(shí)後，稱得統(tǒng)一重量。⑷測(cè)定結(jié)果的表示法所得幹重測(cè)定值要以單位培養(yǎng)液體積的幹重表示。室外的培養(yǎng)池則用單位照光面積的幹重來(lái)表示。

表5-1一些已大量培養(yǎng)利用藻類的生態(tài)適應(yīng)性

浮游動(dòng)物集約化培養(yǎng)簡(jiǎn)介浮游動(dòng)物主要包括原生動(dòng)物、輪蟲(chóng)、鰓足類、橈足類、糠蝦和浮游幼蟲(chóng)等。是魚類的天然餌料，尤其是水產(chǎn)重要經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的重要餌料。浮游動(dòng)物的培養(yǎng)與藻類培養(yǎng)一樣，具有重要的意義。下麵簡(jiǎn)述現(xiàn)在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)上常用的浮游動(dòng)物集約化培養(yǎng)的方法。一、浮游動(dòng)物培養(yǎng)所需要的一般條件對(duì)培養(yǎng)浮游動(dòng)物影響較大的因素有飼養(yǎng)用水的水質(zhì)、水溫、鹽度、pH、含氧量、光照條件、餌料的種類和數(shù)量、容器的大小等，現(xiàn)分述如下：㈠培養(yǎng)用水：培養(yǎng)用水可用海水、湖泊或池沼裏的水，或者保存2～3周的住家井水或自來(lái)水。在用自來(lái)水時(shí)，每升水中要加入5～8毫克的硫代硫酸鈉以除去水中的氯。飼養(yǎng)時(shí)，為防止由於細(xì)菌繁殖而造成的水質(zhì)惡變，最好是添加青黴素或鏈黴素之類的抗生素。但抗生素的效果只在36小時(shí)之內(nèi)。因此，如果在10～12℃以下培養(yǎng)，並且注意水的交換，可不添加抗生素。㈡水溫和鹽度：在一定範(fàn)圍內(nèi)，溫度越高其攝食速度、生長(zhǎng)速度也越高。飼養(yǎng)水溫應(yīng)與該種動(dòng)物棲息場(chǎng)所的水溫相適應(yīng)。為了提高生長(zhǎng)速度或繁殖速度，應(yīng)考慮棲息現(xiàn)場(chǎng)的水溫變動(dòng)幅度，應(yīng)接近其上限。對(duì)飼養(yǎng)用水的鹽度問(wèn)題研究較少，怎樣影響浮游動(dòng)物尚無(wú)充分瞭解。㈢pH和含氧量：培養(yǎng)用水的pH值一般都保持7.0～8.5。含氧量都希望達(dá)到接近飽和的條件。如橈足類克氏紡錘鏢水蚤Acartiaclausi在高密度（380個(gè)／L）下飼養(yǎng)時(shí)，如果含氧量低於3.2mg/L，就將全部死亡。

㈣光照：飼養(yǎng)浮游動(dòng)物的光照條將俄中各樣，其效果無(wú)明顯差異，但必須避免直射日光。㈤餌料：現(xiàn)在常用的餌料有五大類：①培養(yǎng)的矽藻類和植物性鞭毛蟲(chóng)類。②培養(yǎng)的輪蟲(chóng)類、枝角類和橈足類等。③鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體。④酵母、小麥粉、大豆粉、醬油粕、海藻粉末以及相應(yīng)配方的配合餌料等人工餌料。⑤用網(wǎng)採(cǎi)集的天然浮游動(dòng)物。㈥飼養(yǎng)容器：一般以水槽、指管或土池培養(yǎng)浮游動(dòng)物主要採(cǎi)用靜水方式培養(yǎng)。

二、淡水枝角類及蒙古裸腹蚤的培養(yǎng)方法1.淡水枝角類:枝角類的培養(yǎng)易於掌握，但大量培養(yǎng)時(shí)需注意如下幾點(diǎn)：⑴班塔法（Banta）：培養(yǎng)液為肥泥1kg、馬糞（一周之久）170g、過(guò)濾池水10L。將上述培養(yǎng)液放在15～18℃處，過(guò)3～4d，用細(xì)篩絹過(guò)濾；然後用過(guò)濾池水適當(dāng)沖稀（1:2～4），便可使用。培養(yǎng)液要常更換，以確保餌料充分供給。這種培養(yǎng)液培養(yǎng)的枝角類常紅色，並產(chǎn)卵較多，是一種良好的培養(yǎng)液。⑵用綠藻培養(yǎng)枝角類法：?jiǎn)渭?xì)胞綠藻、小球藻和柵藻等是枝角類的天然餌料，可直接用於培養(yǎng)枝角類，以免投餌的麻煩。這種單細(xì)胞培養(yǎng)液配製如下：每立方米水中放硝酸銨3.5～35g；過(guò)磷酸鹽6.6～26.4g為確保藻類的不斷繁殖，需經(jīng)常追加這兩種無(wú)機(jī)鹽類。⑶土池培養(yǎng)法：土池1m深，注入50cm深的水，加入混合堆肥液汁，促使單細(xì)胞藻類和細(xì)菌大量繁殖，然後移入溞、裸腹溞等，在溫度20～25℃時(shí)，3～4d後即可大量繁殖。一般在良好環(huán)境下，可產(chǎn)800g/m3。培養(yǎng)期間要注意觀察水溫、水質(zhì)、浮游植物等，更應(yīng)觀察水蚤是否懷卵、卵形及卵數(shù)，有無(wú)冬卵，體色及消化道情況等。溞的顏色應(yīng)為淡黃色，略帶紅色或淡綠色；腸道應(yīng)為綠色或深褐色；卵應(yīng)為圓形、暗色，數(shù)量在10～20個(gè)以上。如果水藻體色很淡，腸呈藍(lán)綠或黑色，卵數(shù)少，橢圓且淺綠，並出現(xiàn)大批雄溞或動(dòng)亂的，同時(shí)種群中幼體數(shù)小於成體數(shù)；這都是培養(yǎng)情況惡化的象徵，應(yīng)抓緊採(cǎi)取措施或重新培養(yǎng)。

2.蒙古裸腹溞:是從內(nèi)陸鹽水中采得，現(xiàn)已成功馴化於海水中正常生長(zhǎng)繁殖。其大量培養(yǎng)方法與淡水枝角類的相似，但用水是海水，鹽度30-32左右，溫度25℃左右，適當(dāng)光照。用小球藻或微綠球藻加酵母投喂。小球藻要適當(dāng)擴(kuò)種培養(yǎng)，以便滿足大量培養(yǎng)蒙古裸腹溞的需要?？捎盟喑嘏囵B(yǎng)大量培養(yǎng)小球藻，培養(yǎng)用水要消毒，施肥等，要給以一定的光照。最大培養(yǎng)密度可達(dá)7000~1000/L,生產(chǎn)量可達(dá)70g/m3?d。

三、輪蟲(chóng)的培養(yǎng)方法目前，用於水產(chǎn)動(dòng)物育苗生產(chǎn)上室內(nèi)工廠化培養(yǎng)的輪蟲(chóng)主要是褶皺臂尾輪蟲(chóng)輪蟲(chóng)，可以用培養(yǎng)的小球藻、扁藻、衣藻等為餌料培養(yǎng)。特別是臂尾輪蟲(chóng)培養(yǎng)簡(jiǎn)單，水溫保持20～25℃，適宜pH值為7～8，投喂小球藻時(shí)，投喂量為105～106個(gè)細(xì)胞／毫升。也可投喂酵母培養(yǎng)輪蟲(chóng)。將800mL馬糞和1000mL水很合在一起，煮沸約1h，待冷卻後過(guò)濾，並以二倍冷沸水沖稀，也可用之培養(yǎng)輪蟲(chóng)。

(一)輪蟲(chóng)種的分離與保種目前使用的種輪蟲(chóng)最初都是從天然水體中分離出來(lái)的，這些輪蟲(chóng)品系一般都經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期研究和實(shí)際使用證明具有優(yōu)良的品質(zhì)，因而生產(chǎn)所用的種輪蟲(chóng)一般不需自己分離，可從有關(guān)科研、教學(xué)單位獲得。輪蟲(chóng)種的分離並不困難、需要時(shí)可以自己進(jìn)行分離。在溫暖的季節(jié)(水溫15℃以上)，海邊的小水體、小水塘特別是鹽度較低的水體如鹽鹼灘上暫時(shí)性的小水窪中常有輪蟲(chóng)生活，用浮游生物網(wǎng)撈取浮游生物樣，在解剖鏡下用吸管可比較容易地將輪蟲(chóng)吸出。輪蟲(chóng)一般採(cǎi)用保存冬卵的方式進(jìn)行保種。在秋冬季冬卵往往大量出現(xiàn)於輪蟲(chóng)培養(yǎng)池，從池底的沉澱物中可收集到大量的輪蟲(chóng)卵。由於將輪蟲(chóng)卵與池底污泥分離開(kāi)來(lái)比較困難，可直接將含有輪蟲(chóng)卵的底泥放入冰櫃保存。需要時(shí)，將這種底泥從冰櫃中取出，加入鹽度為15—25的海水，待輪蟲(chóng)冬卵孵化後，用篩絹濾出輪蟲(chóng)，再轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)水體中培養(yǎng)。

（二）輪蟲(chóng)的集約化培養(yǎng)所謂輪蟲(chóng)的集約化培養(yǎng)是指在室內(nèi)進(jìn)行輪蟲(chóng)的高密度培養(yǎng)。在這種培養(yǎng)方式下，培養(yǎng)條件一般能得到較好的控制，輪蟲(chóng)的生產(chǎn)比較穩(wěn)定。其生產(chǎn)流程與微藻的培養(yǎng)相似，也可按規(guī)模的大小分為種級(jí)培養(yǎng)、擴(kuò)大培養(yǎng)和大量培養(yǎng)等。1.培養(yǎng)容器室內(nèi)培養(yǎng)輪蟲(chóng)對(duì)容器並沒(méi)有嚴(yán)格的要求，因培養(yǎng)規(guī)模不同可選不同大小的容器。種級(jí)培養(yǎng)一般使用各種規(guī)格的三角燒瓶、細(xì)口瓶、玻璃缸等，擴(kuò)大培養(yǎng)通常使用玻璃鋼捅，大量培養(yǎng)則以水泥池最為常用。這些容器在位用前都需要用有效氯或高錳酸鉀進(jìn)行化學(xué)消毒，小型培養(yǎng)容器也可進(jìn)行高溫消毒。2.培養(yǎng)用水育苗廠進(jìn)行輪蟲(chóng)的大量培養(yǎng)一般採(cǎi)用砂濾水，種級(jí)培養(yǎng)可採(cǎi)用消毒水，以減少原生動(dòng)物的污染。

3.培養(yǎng)條件和管理（1）鹽度褶皺臂尾輪蟲(chóng)的適應(yīng)鹽度範(fàn)圍很廣，在鹽度為1—250的水中均能生活，比較喜好鹽度較低的海水，最適鹽度範(fàn)圍因品系不同而不同。生產(chǎn)上最好控制鹽度在15—25（2）溫度有報(bào)導(dǎo)說(shuō)褶皺臂尾輪蟲(chóng)在水溫5℃一40℃均能繁殖，但絕大多數(shù)的研究和實(shí)踐都證明培養(yǎng)褶皺臂尾輪蟲(chóng)的最適水溫為25℃一28℃。（3）餌料輪蟲(chóng)培養(yǎng)常用的餌料主要是微藻和酵母。微藻是培養(yǎng)輪蟲(chóng)的首選餌料，常用微藻主要包括小球藻、新月菱形藻、三角褐指藻、微綠球藻、球等鞭金藻、纖細(xì)角毛藻、扁藻等。投喂次數(shù)和投喂密度並沒(méi)有嚴(yán)格的要求，既可一日投喂多次，保持培養(yǎng)水體具有相對(duì)較低的餌料密度，又可一次性投喂高密度的微藻餌料，然後較長(zhǎng)時(shí)間不再投喂。實(shí)際操作中，可以先將微藻培養(yǎng)起來(lái)，然後直接將輪蟲(chóng)接種到微藻培養(yǎng)物中。一般直接向密度為500一700萬(wàn)個(gè)／mL的微綠球藻、200一250萬(wàn)個(gè)／mL的纖細(xì)角刺藻、200一250萬(wàn)個(gè)／mL的球等鞭金簇中接種輪蟲(chóng)是沒(méi)有問(wèn)題的。用微藻餵養(yǎng)輪蟲(chóng)時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：①應(yīng)選用處?kù)吨笖?shù)生長(zhǎng)期的微藻，老化的藻種不利於輪蟲(chóng)的生長(zhǎng)甚至致毒；②直接向高密度微藻中接沖輪蟲(chóng)時(shí)要保證輪蟲(chóng)種內(nèi)沒(méi)有原生動(dòng)物．因?yàn)樵谖⒃屦D料豐富的條件下，原生動(dòng)物繁殖迅速，不僅浪費(fèi)餌料，而且抑制輪蟲(chóng)的生長(zhǎng)；②對(duì)輪蟲(chóng)培養(yǎng)水體給予一定的光照，微藻的生長(zhǎng)可利用培養(yǎng)液中的代謝廢物，改善水質(zhì)。雖然微藻是輪蟲(chóng)最理想的餌料，但由於輪蟲(chóng)的大量培養(yǎng)需要的餌料很多，通過(guò)培養(yǎng)微藻來(lái)繁殖輪蟲(chóng)往往不能滿足生產(chǎn)的需要，必須尋找低成本的替代餌料。酵母是迄今較好的替代餌料，主要包括麵包酵母、啤酒酵母、海洋酵酵母等，其中以麵包酵母最易獲得，出而應(yīng)用最廣。所用的麵包酵母一般是從酵母廠或食品廠購(gòu)得，一般用鮮酵母，也可用幹酵母。鮮酵母通常放在冰櫃保存。投喂前先在少量水中將冰凍的酵母塊融化，充分?jǐn)嚢柩u成酵母懸液，然後施入培養(yǎng)輪蟲(chóng)的水體。酵母的投喂量一般按照l(shuí)g／100萬(wàn)個(gè)輪蟲(chóng)·d，分2—4次投喂。

4.充氣除在小型玻璃瓶?jī)?nèi)進(jìn)行輪蟲(chóng)種級(jí)培養(yǎng)外，輪蟲(chóng)的培養(yǎng)一般需要充氣，特別是用麵包酵母培養(yǎng)輪蟲(chóng)時(shí)—定量的充氣是必不可少的。充氣的作用一是補(bǔ)充氧氣，二是防止餌料下沉。但是輪蟲(chóng)不是一種喜歡劇烈震盪的生物．培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)把氣量調(diào)小，只要輪蟲(chóng)不出缺氧而漂浮在水面就可以了。日常管理中要經(jīng)常檢查充氣系統(tǒng)，及時(shí)糾正過(guò)大或過(guò)小的充氣。5.水質(zhì)管理由於輪蟲(chóng)的耐汙能力很強(qiáng)，很多培養(yǎng)輪蟲(chóng)自接種至收穫不換水，這在用微藻作餌料時(shí)並不會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的問(wèn)題。但由於投喂藻液的稀釋作用，很難作到高密度培養(yǎng)。只有通過(guò)換水不斷補(bǔ)充新藻液才能培養(yǎng)出高密度的輪蟲(chóng)，減少水體的佔(zhàn)用。當(dāng)用麵包酵母培養(yǎng)輪蟲(chóng)時(shí)，殘餌會(huì)敗壞水質(zhì)，必須進(jìn)行換水?？捎镁W(wǎng)箱濾出要換的培養(yǎng)用水，然後補(bǔ)充預(yù)先調(diào)溫的過(guò)濾海水。一般每日換水一次，換水量為50％。除換水外，如果池底很髒，還需要進(jìn)行清底，用虹吸管將池底沉澱的汙物吸出即可。為減少輪蟲(chóng)的損失，吸底時(shí)可將吸出的水和汙物接入一容器，沉澱後再將上層的輪蟲(chóng)濾出，放回原來(lái)的培養(yǎng)池。換水和清底都只能部分地改善水質(zhì)，如果發(fā)現(xiàn)大量的原生動(dòng)物繁殖起來(lái)，需要對(duì)輪蟲(chóng)的培養(yǎng)水體進(jìn)行徹底的改變，此時(shí)要對(duì)輪蟲(chóng)倒池。方法是用篩絹將池內(nèi)的輪蟲(chóng)全部收集起來(lái)，並以過(guò)濾海水沖洗數(shù)遍，然後轉(zhuǎn)移到另一備好海水的培養(yǎng)池內(nèi)。6.輪蟲(chóng)生長(zhǎng)的檢查輪蟲(chóng)的培養(yǎng)需要經(jīng)常用解剖鏡檢查，生長(zhǎng)良好的個(gè)體肥大，腸胃飽滿，遊動(dòng)活潑。輪蟲(chóng)成體帶夏卵的比例和數(shù)目是判斷生良好壞的重要標(biāo)準(zhǔn)，如果多數(shù)成體帶有夏卵(一般3—4個(gè)，少的1—2個(gè)，多的10一15個(gè))，則說(shuō)明生長(zhǎng)較好。如果輪蟲(chóng)死殼多，身體上附著汙物，沉底，不活潑，不帶卵或帶冬卵，雄體山現(xiàn)等都是生長(zhǎng)不良的表現(xiàn)。輪蟲(chóng)密度的檢查可用肉眼估計(jì)，但用鏡檢精確計(jì)數(shù)較為科學(xué)。於培養(yǎng)池各部位分別取一定體積的水樣(1mL即可)，加碘液殺死輪蟲(chóng)，然後在解剖鏡下計(jì)數(shù)水樣中輪蟲(chóng)的個(gè)數(shù)，並由此計(jì)算出培養(yǎng)池中輪蟲(chóng)的密度。

(三)輪蟲(chóng)的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化輪蟲(chóng)是目前海水魚類育苗中最重要的開(kāi)口餌料，其所含的營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)魚類的生長(zhǎng)速度、抗病力及成活率等均有重要影響。在各種營(yíng)養(yǎng)成分中，以ω3系列不飽和脂肪酸持別是二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸(DHA)的缺乏造成的危害最為嚴(yán)重。因輪蟲(chóng)體內(nèi)的的EPA／DHA主要是從其攝食的餌料中獲取的，而海洋微藻中EPA／DHA的含量通常都比較高，完全用海洋微藻培養(yǎng)的輪蟲(chóng)—般並不缺乏這些營(yíng)養(yǎng)成分。然而，現(xiàn)在生產(chǎn)上進(jìn)行大規(guī)模輪蟲(chóng)培養(yǎng)時(shí)，微藻供應(yīng)量往往不能滿足需要，輪蟲(chóng)的餌料主要是麵包酵母，而用麵包酵母生產(chǎn)的輪蟲(chóng)嚴(yán)重缺乏EPA／DHA，在使用前必須進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化。強(qiáng)化輪蟲(chóng)EPA／DHA的方式主要有兩種方法：1.用富含EPA／DHA的海洋微藻強(qiáng)化輪蟲(chóng)將酵母輪蟲(chóng)用海洋微藻進(jìn)行再次培養(yǎng)，但應(yīng)選用ω一3系列不飽和脂肪酸(特別EPA和DHA)含量豐富的藻種如三角褐指藻、新月菱形藻、纖細(xì)角毛藻、球等鞭金藻、小球藻、微綠球藻等。綜合考慮季節(jié)、培養(yǎng)的難易程度等因素，以小球藻和微綠球藻較好。(1)強(qiáng)化培養(yǎng)一般在玻璃鋼桶內(nèi)進(jìn)行，也可在小型的水泥池內(nèi)進(jìn)行。用高錳酸鉀或有效氯對(duì)強(qiáng)化容器消毒後，加入高含量的藻液(小球藻、微綠球藻的密度應(yīng)在700萬(wàn)／mL;(2)用篩絹將要強(qiáng)化的酵母輪蟲(chóng)收集起來(lái)，用乾淨(jìng)海水沖洗數(shù)遍，除去其中可能混有的原生動(dòng)物，以免與輪蟲(chóng)爭(zhēng)奪微藻餌料。(3)將要強(qiáng)化培養(yǎng)的輪蟲(chóng)轉(zhuǎn)移到強(qiáng)化容器進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)。輪蟲(chóng)的密度以400一500個(gè)／mL效果較好，強(qiáng)化過(guò)程中需不間斷充氣，控溫在25℃一28℃。強(qiáng)化時(shí)間為24—48h，時(shí)間太短效果較差。在強(qiáng)化過(guò)程中，如發(fā)現(xiàn)微藻被輪蟲(chóng)食盡，應(yīng)把輪蟲(chóng)濾出，並換藻液繼續(xù)進(jìn)行強(qiáng)化培養(yǎng)。

2.用強(qiáng)化劑強(qiáng)化輪蟲(chóng)以強(qiáng)化輪蟲(chóng)EPA／DHA為目的的強(qiáng)化劑種類很多，一般是從魚油、烏賊油等海洋動(dòng)物中提取的。這類強(qiáng)化劑含有多種不飽和脂肪酸和維生素，是經(jīng)乳化製成的乳濁液，使用時(shí)比較容易與水混合。強(qiáng)化劑的品牌很多，不同型號(hào)的強(qiáng)化劑所含的成分不完全相同，使用時(shí)應(yīng)根據(jù)其使用說(shuō)明操作，這裏以比利時(shí)的INVE公司Superselco為例將強(qiáng)化步驟簡(jiǎn)介如下：(1)準(zhǔn)備強(qiáng)化缸，通常採(cǎi)用玻璃鋼捅，最好是具錐形底的琉璃鋼桶。用高錳酸鉀或有效氯消毒後，加入25℃的過(guò)濾海水。布入充氣管，採(cǎi)用大氣泡充氣，不要使用氣石。(2)用篩絹網(wǎng)將要強(qiáng)化的輪蟲(chóng)收集起來(lái)，沖洗後轉(zhuǎn)移到強(qiáng)化缸中，輪蟲(chóng)密度為300一500個(gè)／mL。(3)按50g／l強(qiáng)化水體的量稱取強(qiáng)化劑，加少量水用組織搗碎機(jī)、攪拌機(jī)等混勻後倒入強(qiáng)化缸，強(qiáng)化3—4小時(shí)後，依法再加等量的強(qiáng)化劑繼續(xù)強(qiáng)化3—4h。(4)強(qiáng)化完備後，用篩絹網(wǎng)濾出輪蟲(chóng)，用海水充分洗滌，除去多餘的強(qiáng)化劑，以減少對(duì)育苗水體的污染。

四、原生動(dòng)物的培養(yǎng)：原生動(dòng)物的培養(yǎng)方法較多，如有用植物液溶解在水中供細(xì)菌繁殖生長(zhǎng)過(guò)程中利用，這時(shí)溶液混濁，纖毛蟲(chóng)就可繁殖起來(lái)。具體方法為：雜草50克、自來(lái)水1000mL，煮沸2h，放置1晝夜後過(guò)濾，以濾液為培養(yǎng)液，用顯微鏡從野外污水中吸選纖毛蟲(chóng)，接種於培養(yǎng)液，在20℃下培養(yǎng)一周，能繁生大量纖毛蟲(chóng)。淡水鞭毛蟲(chóng)類Polytoma的培養(yǎng)液配方為：在一升蒸餾水中加腖2g、動(dòng)物膠150g，醋酸鈉2克、磷酸二氫鉀0.25g、硫酸鎂0.25g。

五、鹵蟲(chóng)

常見(jiàn)的一種為鹽鹵蟲(chóng)Artemiasalina：分佈於沿海及內(nèi)陸的鹹水湖泊，西北地區(qū)特別豐富，有待開(kāi)發(fā)利用。鹵蟲(chóng)分佈甚廣，在海邊的鹽場(chǎng)，內(nèi)陸鹹水湖泊均有生活。常見(jiàn)到的多是雌性個(gè)體，通常以孤雌生殖的方式來(lái)繁殖後代；只有在環(huán)境不良時(shí)才出現(xiàn)雄性個(gè)體，行有性繁殖，產(chǎn)生休眠卵，渡過(guò)惡劣的環(huán)境；有些種群只行孤雌生殖，終年見(jiàn)不到有雄性個(gè)體的出現(xiàn)；然而，在另一些種群，則一遇不良的環(huán)境條件，即見(jiàn)大量的雄蟲(chóng)。鹵蟲(chóng)的適應(yīng)力很強(qiáng)，生長(zhǎng)迅速，加上卵易保存，並可在人工控制條件下培養(yǎng)作活餌料，廣為利用，深受養(yǎng)殖工作者的歡迎，但價(jià)格很高。如2001年價(jià)格高達(dá)60多萬(wàn)元/t。鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體是水產(chǎn)動(dòng)物培育初期的優(yōu)良餌料。它在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的應(yīng)用日趨廣泛，地位也日趨重要。一般的鹵蟲(chóng)休眠卵依其產(chǎn)地不同，其孵化率和餌料價(jià)值各異。目前，我國(guó)的鹵蟲(chóng)應(yīng)用主要是利用其無(wú)節(jié)幼體作為甲殼類、魚類育苗的餌料，隨著蟲(chóng)卵需求量的增大，價(jià)格上漲，購(gòu)買蟲(chóng)卵已成為魚類、甲殼類育苗場(chǎng)成本估算的主要專案之一。投喂無(wú)節(jié)幼體時(shí)，應(yīng)先用自來(lái)水或海水洗淨(jìng)後再使用，目的在去除去鹵蟲(chóng)孵化過(guò)程中產(chǎn)生的大量甘油和孵化水中很有的細(xì)菌、有害物質(zhì)等，避免污染育苗他。此外，為了儘量使用具有較高能量的無(wú)節(jié)幼體，應(yīng)使用剛剛孵化的無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)。未用完的無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)應(yīng)在低溫(0℃~5℃)保存，以減少能量消耗。鹵蟲(chóng)成體亦可作為水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的餌料，這在天然鹵蟲(chóng)比較豐富的地區(qū)(如河北、山東等鹽田較多的沿海地區(qū))已大量用於海水動(dòng)物的人工育苗。鹵蟲(chóng)成蟲(chóng)的加工在國(guó)外已有嘗試，如泰國(guó)將鹵蟲(chóng)製成蝦醬，供人們食用。由於鹵蟲(chóng)蛋白質(zhì)含量豐富，是魚類和甲殼類的良好餌料，且飼養(yǎng)容易，天然資源量很大，有望取代魚粉成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)最重要的蛋白質(zhì)源。把卵放入海水或相當(dāng)於海水的鹽水（適宜鹽度為30～40，可用1L淡水中加40～50g粗制鹽制得），在25～30℃下孵化約1.5d，即得鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體，孵化率在新鮮的好卵可達(dá)70％以上。孵化時(shí)要通氣，不斷攪拌，孵化出來(lái)的無(wú)節(jié)幼體具有趨光性，可以在有光照明下使之聚集在水槽一側(cè)，用吸量管吸收。孵化後1～2d以內(nèi)就可把鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體用於魚苗的餌料。也可作為浮游動(dòng)物的餌料。

(一)鹵蟲(chóng)冬卵的生物學(xué)特徵鹵蟲(chóng)冬卵的外層為一厚的卵殼，卵殼內(nèi)為處?kù)对c期的胚胎。卵殼分為三層。外層是卵外殼，呈土黃至咖啡等不同深度的顏色，這一層具有物理和機(jī)械的保護(hù)功能；中間一層稱為外皮層，有篩分作用，可阻止大於二氧化碳(CO2)分子的分子通過(guò)；最內(nèi)一層是胚表皮，為一透明而有彈性的膜。

卵殼內(nèi)為胚胎，一般處?kù)稖?。這種狀態(tài)的鹵蟲(chóng)卵處?kù)稌簳r(shí)的發(fā)育停止?fàn)顟B(tài)，對(duì)環(huán)境的忍耐力很強(qiáng)，耐乾燥、低溫，對(duì)較高的溫度也不敏感。當(dāng)含水量低於10％時(shí)可一直保持這種滯育狀態(tài)，當(dāng)含水量高於10％且又處丁有氧的環(huán)境中時(shí)，胚胎便開(kāi)始代謝活動(dòng)。乾燥的鹵蟲(chóng)卵受溫度的影響不大，置於-273℃一60℃並本影響其孵化率，短時(shí)間放置在60℃一90℃對(duì)孵化率也無(wú)影響。蟲(chóng)卵完全吸水後對(duì)溫度則有明顯的反應(yīng)，當(dāng)溫度低於18℃或高於40℃時(shí)就可使胚胎致死，在-18℃一4C及32℃一40℃時(shí)不使胚胎致死，但可停止胚胎的活動(dòng)，這種停止是可逆的，但長(zhǎng)時(shí)間放置會(huì)降低蟲(chóng)卵的孵化率。

（二）鹵蟲(chóng)卵的收穫與簡(jiǎn)單加工目前，鹵蟲(chóng)養(yǎng)殖尚沒(méi)有大規(guī)模開(kāi)展起來(lái)，水產(chǎn)養(yǎng)殖中所用的鹵蟲(chóng)卵絕大多數(shù)是從天然水域中撈取的。收穫鹵蟲(chóng)卵的方法非常簡(jiǎn)單。一膠採(cǎi)用150μm孔徑的篩絹縫製而成的小網(wǎng)在鹽田、鹽湖的岸邊撈取。因鹵蟲(chóng)卵浮力大，浮於水面，易隨風(fēng)在水面漂移，因而水體的下風(fēng)處鹵蟲(chóng)卵比較集中，是捕撈鹵蟲(chóng)的理想去處。另外，鹵蟲(chóng)產(chǎn)地往往是大風(fēng)天氣較多的地區(qū)，常有很多蟲(chóng)卵披風(fēng)浪吹到岸上，這些蟲(chóng)卵與塵土混合在一起，除非用鹵水浮選，平時(shí)很難對(duì)其進(jìn)行分離。在出現(xiàn)較大的降雨時(shí)，雨水能將這些鹵蟲(chóng)卵從岸上沖到臨近的高鹽水體中，因此雨後是捕撈鹵蟲(chóng)卵的良好時(shí)機(jī)。由於降水引起鹽度下降，容易使鹵蟲(chóng)卵吸水甚至孵化，雨後不僅要抓緊時(shí)間捕撈，而且要及時(shí)對(duì)所捕獲的鹵蟲(chóng)卵進(jìn)行脫水等加工處理。鹵蟲(chóng)卵用篩絹網(wǎng)從天然水域撈取後，往往含有很多的水分、泥沙、腐爛有機(jī)質(zhì)等雜質(zhì)，貯存之前需要進(jìn)行加工，鹵蟲(chóng)卵的加工程式一般包括下列步驟：

(1)用飽和鹽水進(jìn)行分離：這一步操作是利用鹵蟲(chóng)卵能浮於飽和鹽水的特性，沉澱除去蟲(chóng)卵中較重的雜質(zhì)。為增加分離效果，可輔以少量充氣。(2)用飽和鹵水沖淋篩分：此步操作旨在除去比蟲(chóng)卵大和比蟲(chóng)卵小的雜質(zhì)。先用1mm和0.5mm孔徑的篩絹除去較大的雜質(zhì)，再用150μm孔徑的篩絹除去比蟲(chóng)卵小的雜質(zhì)。(3)用淡水洗去鹽分：在150μm孔徑篩絹中沖洗除鹽，時(shí)間不得超過(guò)5—10min。(4)用淡水進(jìn)行比重分離：這一步驟是為了除去空殼和比蟲(chóng)卵輕的雜質(zhì)，時(shí)間不超過(guò)15min。漂浮後用150μm孔徑的篩絹將沉底的蟲(chóng)卵擠幹，也可再離心除水?？刂茣r(shí)間是為了防止蟲(chóng)卵過(guò)多吸收水份而啟動(dòng)孵化生理活動(dòng)，以免下一步的乾燥處理破壞蟲(chóng)卵。(5)乾燥：用淡水分離後的蟲(chóng)卵應(yīng)儘快將含水量降到10％以下，只有在此含水量以下，蟲(chóng)卵的生理活動(dòng)才能停止。乾燥時(shí)的溫度應(yīng)控制在40℃以下，可在空氣中鋪成薄層遮陰風(fēng)幹，也可在35℃一38℃烘箱烘乾或在其他乾燥裝置中乾燥。最好採(cǎi)用真空乾燥或氣流乾燥。(6)包裝：此步驟是將乾燥好的蟲(chóng)卵裝入一定大小的聽(tīng)、袋等容器，以便出售和貯存。

除以上步驟外，為了終止滯育和提高孵化率，鹵蟲(chóng)卵的加工通常還包括以下內(nèi)容：(1)冰凍處理：將除去雜質(zhì)的蟲(chóng)卵放入飽和鹵水中於25℃冷凍1—2個(gè)月。冷凍後需將蟲(chóng)卵在室溫下至少放置一周後再乾燥或使用。(2)飽和鹵水浸泡：這一過(guò)程通常與飽和鹵水比重分離相結(jié)合。(3)雙氧水處理：用2％的H202每升加l0一20g蟲(chóng)卵充氣浸泡30min後，用清水洗淨(jìng)。此法加工的蟲(chóng)卵適於直接孵化。(4)重複吸水和脫水處理：將乾燥蟲(chóng)卵按50g／L於25℃一30℃的淡水中浸泡2h，再於飽和鹵水中浸泡至少24h，脫水。洗淨(jìng)後再按上述吸水——脫水過(guò)程至少重複3次。最後一次吸水後立即烘乾或直接孵化。

(三)鹵蟲(chóng)卵的貯存鹵蟲(chóng)卵貯存原理是使其生命活動(dòng)處?kù)锻顟B(tài)，在貯存過(guò)程中不能啟動(dòng)蟲(chóng)卵的孵化生理。常用的方法有：(1)乾燥貯存：使蟲(chóng)卵含水量保持在9％以下。(2)真空貯存：真空是為了減少氧氣的存在，長(zhǎng)期保存常與乾燥法結(jié)合使用。(3)飽和鹵水貯存：貯存的同時(shí)有終止蟲(chóng)卵滯育的作用。這是—種簡(jiǎn)單實(shí)用的儲(chǔ)存鹵蟲(chóng)卵的方法，在沒(méi)有鹵水的地區(qū)可用粗鹽代替。(4)低溫：乾燥和浸泡在鹵水小的蟲(chóng)卵都可用低溫貯存。完全吸水的蟲(chóng)卵也可在-18℃的冷庫(kù)中貯存。

（四）鹵蟲(chóng)卵的孵化1.孵化條件鹵蟲(chóng)卵的孵化一般在孵化桶、罐、槽中充氣進(jìn)行。孵化率是衡量蟲(chóng)卵的孵化效果和蟲(chóng)卵品質(zhì)的尺度。孵化率是指孵化卵數(shù)占蟲(chóng)卵總數(shù)的百分?jǐn)?shù)。除蟲(chóng)卵品質(zhì)外，影響孵化率的因數(shù)主要有下列幾個(gè)。要得到好的孵化效果，這些因數(shù)需要保持在合適的水準(zhǔn)。(1)溫度：孵化水溫要維持在25℃一30℃，最好28℃。25℃以下孵化時(shí)間延長(zhǎng)。33℃以上時(shí)，過(guò)高的溫度會(huì)使胚胎發(fā)育停止。孵化過(guò)程最好保持恒溫，以保持孵化的同步進(jìn)行。(2)鹽度：鹵蟲(chóng)卵在天然海水甚至在鹽度為100的鹵水中都能孵化。但一般在較淡的海水中孵化率較高。常用鹽度為20一30的海水。如埠口鹽場(chǎng)、竅歌鹽場(chǎng)和柯柯鹽湖的鹵蟲(chóng)卵最適孵化鹽度分別為30、20和35。有些品牌的鹵蟲(chóng)卵推薦使用鹽度為15的海水。

(3)pH值：以7．5—8．5為佳，過(guò)低可用NaHCO3調(diào)節(jié)。有報(bào)導(dǎo)稱最有效的孵化用水是在鹽度為5的半鹹水中加2.0％的NaHCO3，孵化水中加入NaHCO3是為了保持pH值不低於8。(4)充氣和溶解氧：在孵化缸的底部放置足夠的氣石，孵化過(guò)程中需連續(xù)充氣，使水體翻滾，避免在缸底形成死角。據(jù)報(bào)導(dǎo)將DO維持在2mg／L的水準(zhǔn)可得到最佳的孵化效果。因而對(duì)允氣量應(yīng)作適當(dāng)控制，不宜過(guò)大，使蟲(chóng)卵能均勻分佈而又能避免機(jī)械性損傷。(5)蟲(chóng)卵密度：優(yōu)質(zhì)蟲(chóng)卵(孵化率85％以上)的密度一般不超過(guò)5g幹重／L。密度過(guò)大為維持DO，要增大充氣，充氣過(guò)大會(huì)使幼蟲(chóng)受傷，產(chǎn)生的泡沫能使蟲(chóng)卵粘附，對(duì)孵化不利。一般採(cǎi)用的蟲(chóng)卵密度為1—3g／L。(6)光照：蟲(chóng)卵用淡水浸泡充分吸水後的lh內(nèi)的光照對(duì)提高孵化率是重要的。一般2000lx的光照即能取得最佳效果。孵化時(shí)常採(cǎi)用人工光照，用日光燈或白熾燈從孵化缸的上方照明。

2.孵化方法

準(zhǔn)備孵化缸，最好使用具錐形底的玻璃鋼槽。孵化缸用前需要進(jìn)行消毒。鹵蟲(chóng)卵在孵化前常用淡水浸泡1至數(shù)小時(shí)，使蟲(chóng)卵充分吸水，以加快孵化速度，減少孵化過(guò)程中的能量消耗。為了殺滅蟲(chóng)卵表面粘附的細(xì)菌，孵化前要對(duì)蟲(chóng)卵消毒，一般用2％一3％的福馬林浸泡10一15min，或用200×10-6的有效氯浸泡20min。在前述的孵化條件下，孵化24—36h。

(三)無(wú)節(jié)幼體的收集與分離孵化結(jié)束後，要將鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體從孵化容器內(nèi)收集起來(lái)。首先把充氣管、氣石從孵化器中取出，在孵化器頂上覆蓋一塊黑布，使缸內(nèi)呈黑暗狀態(tài)，10一15min後自容器底虹吸無(wú)節(jié)幼體和未孵化卵的混合物於篩絹網(wǎng)內(nèi)，此過(guò)程應(yīng)儘量避免混入空殼。無(wú)節(jié)幼體收集起來(lái)後，還需要將混入的空殼和末孵化的蟲(chóng)卵分離開(kāi)來(lái)，否則空殼被魚苗吞食能引起大批此亡。分離方法有多種，主要有趨光分離和比重分離。(1)利用趨光性分離鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體：此種分離方法可在各種玻璃容器中進(jìn)行，一般長(zhǎng)方形的玻璃水族箱比較經(jīng)濟(jì)實(shí)用。①將水族箱放置在高度為60cm左右的桌上或水泥臺(tái)上，加過(guò)濾海水至水深40cm左右。②將從孵化器內(nèi)收集起來(lái)的無(wú)節(jié)幼體、卵殼和未孵化卵的混合物移到該水族箱內(nèi)，充氣5min。③用黑布罩住水族箱，在水族箱的一角開(kāi)一小孔，並在距該孔10cm處放一只100W燈泡，靜置可見(jiàn)無(wú)節(jié)幼體趨光不斷向此處集中。④約5—10min後空殼上浮到水面，未孵化卵下沉到箱底。此時(shí)開(kāi)始虹吸集中到光亮處的無(wú)節(jié)幼體於一充氣的桶內(nèi)。虹吸時(shí)每次只能吸出少量的水，片刻後無(wú)節(jié)幼體又集中過(guò)來(lái)再吸一次，不斷重複這一過(guò)程直到分離結(jié)束。在分離過(guò)程如發(fā)現(xiàn)鹵蟲(chóng)有缺氧現(xiàn)象，應(yīng)立即停止分離，待沖氣增氧後再繼續(xù)分離。

(2)淡水比重分離法：此法是利用無(wú)節(jié)幼體、卵殼、未孵化卵的比重差異來(lái)將它們分離開(kāi)來(lái)。①將三者的混合物倒入盛有淡水的盆內(nèi)，將盆傾斜靜置3min。末孵化卵因比重大而沉降到盆底，無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)因淡水麻醉出現(xiàn)暫時(shí)休克也下沉，並靠近底部，空卵殼比重最輕浮在水面。②用虹吸法將無(wú)節(jié)幼體吸入網(wǎng)袋內(nèi)，濾去淡水。不論哪種方法都不能一次分離出很純的無(wú)節(jié)幼體，往往需要進(jìn)行二次分離。用去殼卵孵化的無(wú)節(jié)外蟲(chóng)不必進(jìn)行分離便可投喂魚苗。

（五）鹵蟲(chóng)卵的去殼處理由於鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體與末孵化的卵、卵殼難以分離，投喂時(shí)就不可避免地將大量卵殼和未孵化的卵一起吧到育苗池中，這些卵殼和未孵化的卵一方面會(huì)因腐爛或帶有細(xì)菌而引起水

體污染或?qū)е虏『?，另一方面某些養(yǎng)殖動(dòng)物會(huì)因吞食卵殼和末孵化的卵而引起腸梗塞．甚至死亡。這個(gè)問(wèn)題可用蟲(chóng)卵去殼來(lái)解決，即用化學(xué)除去蟲(chóng)卵的咖啡色外殼而不影響胚胎的活力。

(1)吸水：蟲(chóng)卵吸水膨脹後呈圓球形．有利於去殼。一級(jí)是在25℃淡水或海水中浸泡1—2h。(2)配製去殼溶液和去殼；鹵蟲(chóng)卵殼的主要成分是脂蛋白和正鐵血紅素，去殼的原理就是利用次氯酸鈉或次氯酸鈣溶液氧化去除這些物質(zhì)。常用的去殼溶液是次氯酸鹽[NaClO或Ca(ClO)2]、pH值穩(wěn)定劑和海水按一定比例配製而成的。由於不同品系鹵蟲(chóng)卵殼的厚度不同，因而去殼溶液中要求的有效氯濃度不同，以期達(dá)到最佳效果。一船而言，每克幹蟲(chóng)卵需使用0.5g的有效氯，而去殼溶液的總體積按每克幹卵14mL的比例配製。配製去殼溶液需用NaOH(用NaClO時(shí)使用，用量為每克幹卵0.15g)，或Na2CO3：[用Ca(ClO)2時(shí)使用，用量為每克幹卵0.67g，也可用CaO，每克幹卵0.4g]來(lái)調(diào)節(jié)pH值在10以下。去殼溶液用海水配成，加上冰塊使水溫降至15~20℃。在配製Ca(ClO)2去殼液時(shí)，應(yīng)先將Ca(ClO)2溶解後再加Na2CO3或CaO，靜置後使用上清液。當(dāng)把吸水後的卵放入去殼液中去殼時(shí)，要不停地?cái)嚢杌虺錃猓藭r(shí)是一個(gè)氧化過(guò)程，並產(chǎn)生氣泡，要不停地測(cè)定其溫度，可用冰塊防止升溫到40℃以上。去殼時(shí)間—般為5—15min，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)影響孵化率。

(3)清洗和停止去殼液的氧化作用：當(dāng)在解剖鏡下看不見(jiàn)咖啡色的卵殼時(shí)，即表示去殼完畢，此時(shí)去殼溶液的溫度不再上升。有一定的操作經(jīng)驗(yàn)後，用肉眼目測(cè)即可比較好的掌握去殼的進(jìn)程。用孔徑為120μm的篩絹收集上述已除去殼的鹵蟲(chóng)卵，用清水及海水沖洗，直到聞不小有氯氣味為止。為了進(jìn)一步除去殘留的NaClO，可放於0.1mol／LHCl，0.1mol／LCH3COOH或0.05mol／LNa2SO3溶液中1min中和殘氯，然後用淡水或海水沖洗。去殼卵可直接使用，也可脫水後貯存?zhèn)溆?，但最好是孵化後使用?4)脫水和貯存：清洗後的去殼卵如需保存一周以上，需要脫水。具體作法是先用120μm篩絹收集去殼卵，然後濾去水分，用飽和鹵水浸泡，飽和鹵水用量為每克幹卵10mL，浸泡2h後更換鹵水或加鹽一次。脫水後的去殼蟲(chóng)卵可保存於冰箱中。上述保存於鹵水中的去殼卵的含水量約為16％一20％．只能在數(shù)周內(nèi)保持其原有孵化率。更長(zhǎng)時(shí)期的保存要求含水量在10％以下，可用飽和氯化鎂溶液進(jìn)行脫水。去殼卵在紫外線照射下不能孵化，因而去殼過(guò)程和去殼卵保存時(shí)都應(yīng)避免陽(yáng)光直射。去殼卵解決了幼蟲(chóng)與卵殼分離困難的問(wèn)題，此外去殼卵還有以下優(yōu)點(diǎn)：①去殼時(shí)使用次氯酸溶液同時(shí)有對(duì)蟲(chóng)卵消毒的作用。②魚蝦幼體可直接攝食去殼卵而在消化上沒(méi)有問(wèn)題，可減少孵化工作的麻煩。②去殼卵在孵化時(shí)消耗的能雖較少，每個(gè)幼蟲(chóng)的體重顯著提高。

（六）鹵蟲(chóng)卵的品質(zhì)評(píng)價(jià)鹵蟲(chóng)卵的品質(zhì)可以從兩個(gè)方面來(lái)評(píng)價(jià)。對(duì)養(yǎng)殖者而言，理想的餌料生物必須來(lái)源可靠，使用操作方便；對(duì)養(yǎng)殖對(duì)象而言，必須具有較好的物理持性(如大小等)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。鹵蟲(chóng)卵評(píng)價(jià)主要有以下幾個(gè)專案。1.孵化品質(zhì)包括以下四個(gè)指標(biāo)：(1)孵化率(孵化百分率或百分比)：指每一百粒蟲(chóng)卵所能孵化出的無(wú)節(jié)幼體的只數(shù)。優(yōu)質(zhì)蟲(chóng)卵的孵化率可達(dá)90％以上。孵化率不能表示出雜質(zhì)及空殼含量。(2)孵化效率：每克蟲(chóng)卵所能孵化出的無(wú)節(jié)幼體的只數(shù)。蟲(chóng)卵的最高孵化效率可達(dá)30萬(wàn)只／g。這個(gè)數(shù)值能表示出蟲(chóng)卵的孵出情況和雜質(zhì)含量。但還不能表示出無(wú)節(jié)幼體的大小和重量。(3)孵化量：每克蟲(chóng)卵所能孵化出的無(wú)節(jié)幼體總幹重(mg)。蟲(chóng)卵的最高孵化量可達(dá)600mg幹重／g幹蟲(chóng)卵。孵化量最能表示出蟲(chóng)卵的品質(zhì)，是最可靠的一種鹵蟲(chóng)卵評(píng)價(jià)方法。(4)孵化速度：這個(gè)數(shù)值是表示鹵蟲(chóng)卵孵化快慢和孵化同步性的。在25℃時(shí)，天然蟲(chóng)卵得到的最佳孵化速度是15h開(kāi)始出現(xiàn)無(wú)節(jié)幼體，而後的5h內(nèi)有90％的無(wú)節(jié)幼體孵出。根據(jù)孵化速度可以計(jì)算出何時(shí)進(jìn)行初孵幼體的收集，以便得到含有高能量的無(wú)節(jié)幼體。

2.鹵蟲(chóng)卵的生物學(xué)測(cè)定不同品系的鹵蟲(chóng)卵及其所孵出的無(wú)節(jié)幼體的大小不同，卵殼的厚度也不相同。卵殼薄孵化較快，且有用成份的相對(duì)含量較高。另外，無(wú)節(jié)幼體的大小對(duì)於不同育苗對(duì)象的攝食適應(yīng)性也不司。3.無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)的脂肪酸含量及組成成分的分析不同的脂肪酸(特別是ω3系列高度不飽和脂肪酸)的組成和含量對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物的餌料效果有重大影響，因?yàn)轲B(yǎng)殖動(dòng)物的某些必須不飽和脂肪酸只有從食物中才能獲得。脂肪酸含量和組成可用氣相色譜和高壓液相色譜來(lái)分析。進(jìn)行向蟲(chóng)卵評(píng)價(jià)時(shí)，必須用剛孵出的無(wú)節(jié)幼體或上殼卵進(jìn)行分析。4.從投喂效果來(lái)測(cè)定餌料效果即通過(guò)養(yǎng)殖動(dòng)物的增重及生長(zhǎng)發(fā)育情況等米判斷鹵蟲(chóng)卵的優(yōu)劣。5.鹵蟲(chóng)卵的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

（七）中國(guó)的鹵蟲(chóng)卵我國(guó)沿海的鹽田和內(nèi)陸鹽湖幅員遼闊、鹵蟲(chóng)資源豐富，但我國(guó)鹵蟲(chóng)卵的應(yīng)用開(kāi)發(fā)工作起步較晚，我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)需用的鹵蟲(chóng)卵大多依賴進(jìn)口，每年耗資上千萬(wàn)美元。80年代起開(kāi)始在沿海地區(qū)進(jìn)行鹵蟲(chóng)卵的加工工作，並有產(chǎn)品出口。但因設(shè)備、工藝等原因，鹵蟲(chóng)卵的品質(zhì)不如進(jìn)口的名牌產(chǎn)品穩(wěn)定，尚沒(méi)有創(chuàng)出自己的名牌。一段時(shí)期以來(lái)國(guó)內(nèi)外盛傳中國(guó)鹵蟲(chóng)卵具有孵化率低、孵化時(shí)間長(zhǎng)而不整齊、雜質(zhì)含量高、初孵幼體較大等缺點(diǎn)。然而，近年的研究表明，事實(shí)並不盡如此，除中國(guó)鹵蟲(chóng)卵的原料來(lái)源背景複雜、原料的雜質(zhì)含量較高、不同產(chǎn)地的鹵蟲(chóng)卵的生物學(xué)特性有所差異外，中國(guó)由蟲(chóng)卵的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值並不比進(jìn)口鹵蟲(chóng)卵差，某些地理品系的鹵蟲(chóng)卵的主要營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)還優(yōu)於進(jìn)口鹵也卵，經(jīng)適當(dāng)加工後孵化品質(zhì)亦不成問(wèn)題。

（八）鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體的強(qiáng)化與輪蟲(chóng)的強(qiáng)比方法相似，但出於鹵蟲(chóng)的初孵無(wú)節(jié)幼體攝食能力很差，一般不用微藻強(qiáng)化。這裏仍以比利時(shí)INVE公司出產(chǎn)的Superselco為例說(shuō)明用強(qiáng)化劑強(qiáng)化鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體的方法。(1)準(zhǔn)備錐形底強(qiáng)化缸、充氣管和氣石，用高錳酸鉀或有效氯消毒，添加25℃一30℃的過(guò)濾海水。(2)分離收集初孵的鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體，按300ind.／mL轉(zhuǎn)移到強(qiáng)化缸中。(3)按300mg／L強(qiáng)化水體的量稱取強(qiáng)化劑，加少量水混勻後轉(zhuǎn)移到強(qiáng)化缸中。強(qiáng)化過(guò)程中充氣量要大，強(qiáng)化時(shí)間為12—24h。如果強(qiáng)化時(shí)間比較長(zhǎng)(24h)。中間需再加一次強(qiáng)化劑。(4)強(qiáng)化結(jié)束後，將鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體收集起來(lái)，充分沖洗，除去多餘的強(qiáng)化劑和附著在無(wú)節(jié)幼體身上的細(xì)菌等有害物質(zhì)，然後才能投喂魚類等養(yǎng)殖動(dòng)物。

（九）鹵蟲(chóng)的集約化養(yǎng)殖由於鹵蟲(chóng)具有以下幾個(gè)特點(diǎn)，因而是適合於集約化養(yǎng)殖的水產(chǎn)動(dòng)物。①鹵蟲(chóng)從無(wú)節(jié)幼體到成體只需兩個(gè)星期。在此期間體長(zhǎng)增加了20倍，體重增加了500倍。②鹵蟲(chóng)發(fā)育過(guò)程中，幼體與成體的環(huán)境要求沒(méi)有區(qū)別，因而不必改變養(yǎng)殖的環(huán)境及設(shè)施。②鹵蟲(chóng)的生殖率高，每四到五天可產(chǎn)100一300個(gè)後代，生命期長(zhǎng)，平均成活期在六個(gè)月以上，這是有利於養(yǎng)殖的優(yōu)點(diǎn)?，F(xiàn)簡(jiǎn)單介紹大規(guī)模的鹵蟲(chóng)集約化養(yǎng)殖的一般操作規(guī)程，詳細(xì)瞭解請(qǐng)參照有關(guān)書籍（如《實(shí)用鹵蟲(chóng)養(yǎng)殖及應(yīng)用技術(shù)》(卡伯仲，1990)。(1)養(yǎng)殖用水：通常用海水，鹽度35—50，pH值7.8，如pH值小於8，用1g／L的NaHCO：調(diào)節(jié)。鹵蟲(chóng)養(yǎng)殖用的海水須經(jīng)砂濾池過(guò)濾。(2)溫度：控制在25℃一30℃。(3)用另外的容器孵化出鹵蟲(chóng)將無(wú)節(jié)幼體用新鮮海水沖洗後放入培育槽。無(wú)節(jié)幼體的投放密度在l000ind./L以上。(4)投餌：所用餌料為米糠、玉米麵等農(nóng)產(chǎn)品，也可用微藻、酵母等投喂。投喂農(nóng)產(chǎn)品時(shí)須磨細(xì)並用細(xì)篩絹過(guò)濾，因鹵蟲(chóng)只能攝食直徑在50μm以下的顆粒，投喂時(shí)遵循少量多次的原則。並根據(jù)腸胃飽滿情況保證餌料供應(yīng)。由於鹵蟲(chóng)孵化後12h內(nèi)不攝食，故第一天可不投餌。(5)清除汙物：一般每三到四天對(duì)沉澱的殘餌等汙物清理一次。(6)換水：集約化養(yǎng)殖常採(cǎi)用流水，如採(cǎi)用充氣養(yǎng)殖則需每天至少換水一次。(7)充氣：鹵蟲(chóng)的耐低氧能力很強(qiáng)，不需要很大的充氣，保證DO在2—3mg／L以上即可，最好不用氣石，因氣石產(chǎn)生的大量氣泡對(duì)鹵蟲(chóng)不利。(8)日常觀察：經(jīng)常檢查pH、DO、鹵蟲(chóng)的游泳和健康狀況等。pH值低於7.5時(shí)，加0.3g/L的NaHC03提高pH值。DO降到2mg/L時(shí)，需要增加氧氣。集約化養(yǎng)殖一般在小水泥池和各種槽、缸中進(jìn)行。國(guó)外比較先進(jìn)的方法是跑道式水槽流水養(yǎng)殖，其養(yǎng)殖密度可達(dá)數(shù)千只/L．月產(chǎn)量達(dá)20kg／m2。國(guó)內(nèi)也有單位在對(duì)蝦育苗池進(jìn)行充氣養(yǎng)殖。

（十）鹵蟲(chóng)的開(kāi)放池養(yǎng)殖鹵蟲(chóng)在天然條件下都生活在高鹽水域，在普通海水中由於敵害較多，會(huì)因不適應(yīng)環(huán)境而被淘汰。開(kāi)放池養(yǎng)殖不能嚴(yán)格控制故害生物的傳播，因而都是在高鹽水域中進(jìn)行放養(yǎng)，常見(jiàn)的是鹽田養(yǎng)殖。1.養(yǎng)殖場(chǎng)地的選擇與建造因?yàn)辂u蟲(chóng)的敵害生物在波美10度以下不能完全消除，所以選擇養(yǎng)殖場(chǎng)地的首要條件是能持續(xù)提供波美10度以上的鹵水。另外養(yǎng)殖場(chǎng)地的土壤必須能夠防滲漏。建池時(shí)必須保證水深30cm以上，最好是50一100cm。池塘的大小在300~10000m2不等。最大不宜超過(guò)10000m2。此外，池塘必須具有進(jìn)排水裝置。2.鹵蟲(chóng)放養(yǎng)的準(zhǔn)備工作(1)鹵蟲(chóng)品種的選擇：根據(jù)當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件(主要是水溫)．選擇適當(dāng)?shù)钠贩N進(jìn)行養(yǎng)殖。此外還應(yīng)考慮生產(chǎn)上的要求，是為了得到鹵蟲(chóng)卵還是鮮活鹵蟲(chóng)，因不同品系鹵蟲(chóng)的卵生和卵胎生比例不同。(2)灌水：開(kāi)放池養(yǎng)殖採(cǎi)用鹵蟲(chóng)敵害忍耐鹽度上限的鹵水，一般是波美10度的鹵水進(jìn)行養(yǎng)殖。海水時(shí)最好加以過(guò)濾．水深要求30cm以上。(3)施肥和餌料生物培養(yǎng)：為保證鹵蟲(chóng)下池時(shí)有足夠的餌料，放水後應(yīng)施肥培養(yǎng)微藻。常用的肥料是雞糞，用量是50~100g/m2。也可使用化肥，施肥量一般要求氮含量達(dá)到15×l0-6~30×l0-6，磷含量達(dá)到1×l0-6~4×l0-6。對(duì)酸性土境區(qū)，除了施肥外，還成施石灰，使pH值達(dá)到8以上。施肥後，鹵水中的微藻(如杜氏簇)生長(zhǎng)繁殖加快，池水透明度逐漸下降。待微藻生長(zhǎng)達(dá)到鼎盛時(shí)期(透明度在20cm以下)要及時(shí)接種鹵蟲(chóng)幼蟲(chóng)。施肥後，除微藻數(shù)量大量增加外，細(xì)菌及有機(jī)顆粒的數(shù)量亦大量增加，它們都可成為鹵蟲(chóng)的餌料3.接種根據(jù)鹵蟲(chóng)卵的孵化率和接種數(shù)量計(jì)算鹵蟲(chóng)卵的用量，再按前面所述的方法在25℃~30℃孵化鹵蟲(chóng)。無(wú)節(jié)幼體能立刻適應(yīng)從海水到波美l0度的鹽度變化，孵出後應(yīng)立即按種。如準(zhǔn)備人工投餌，接種密度可達(dá)100ind.／L以上，不投餌的粗放養(yǎng)殖接種密度達(dá)20~30ind.／L就可以了。剛接種後很難在池中看到蟲(chóng)體，這是因?yàn)樗鼈兪チ俗丶t色並沉到水底的緣故。

4.管理(1)投餌：為了補(bǔ)充水中餌料不足，提高養(yǎng)殖密度，需要進(jìn)行人工投餌，常用的是玉米麵、米糠等農(nóng)副產(chǎn)品，加水磨漿後投喂，遭循少量多次的原則，避免剩餌沉澱浪費(fèi)。鹵蟲(chóng)是否吃飽可以有無(wú)糞便判斷。(2)施肥：經(jīng)常向池中施肥(以有機(jī)肥較好)，有補(bǔ)充餌料的作用，這種方式可使養(yǎng)殖密度達(dá)到100~500ind.／L，追肥量為雞糞l0~20g/m2。(3)換水：開(kāi)放池養(yǎng)殖不換水一般也不致引起缺氧，但換水可以補(bǔ)充餌料，除去池內(nèi)的有害物質(zhì)。換水時(shí)用篩絹排水。(4)日常觀察：鹵蟲(chóng)養(yǎng)殖過(guò)程中，應(yīng)經(jīng)常觀察水質(zhì)變化(如溫度，鹽度，DO，pH值等)和鹵蟲(chóng)的生長(zhǎng)情況，養(yǎng)殖的鹽度一般認(rèn)為應(yīng)維持在波美6—18度，但實(shí)驗(yàn)表明在6—10度也能取得良好的效果。pH值不能低於7.5，如pH值過(guò)低，可通過(guò)換水或加石灰調(diào)節(jié)。溶解氧只要維持在2mg/L就可以了，DO太低可採(cǎi)用加注新水的辦法來(lái)補(bǔ)充。對(duì)鹵蟲(chóng)生長(zhǎng)情況的觀察主要包括蟲(chóng)體是否健康、是否吃飽(有無(wú)拖便)、生殖方式是卵生還是卵胎生等內(nèi)容。鹵蟲(chóng)卵生

可能是由於水溫不適或餌料不足造成，可根據(jù)需要是為了得到成蟲(chóng)還是蟲(chóng)卵而採(cǎi)取相應(yīng)的措施，一般是先提供適應(yīng)條件使鹵蟲(chóng)卵胎生在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到高密度後，再使之餌料不足而產(chǎn)卵。

5.收穫蟲(chóng)卵的收集是每天在池內(nèi)下風(fēng)處用小篩網(wǎng)撈取，撈後涼下或貯存於飽和鹵水中以備加工。成蟲(chóng)—般採(cǎi)用紗窗製成的工具進(jìn)行拖捕，這樣年幼的蟲(chóng)體可留在池中繼續(xù)生長(zhǎng)。如是為了得到鮮活鹵蟲(chóng)，應(yīng)隔兩周收穫—次。

復(fù)習(xí)思考題

1．簡(jiǎn)要敘述輪蟲(chóng)、鹵蟲(chóng)和枝角類的室內(nèi)培養(yǎng)方法。2．藻種分離的方法有那些？3.圖示鹵蟲(chóng)卵的去殼過(guò)程。

第二章

水產(chǎn)餌料生物的敞池增殖

單胞藻的敞池增殖

傳統(tǒng)的單胞藻培養(yǎng)是築建餌料室，遵循保種－接種－擴(kuò)種－生產(chǎn)性培養(yǎng)的程式，其優(yōu)點(diǎn)是能保證純種生產(chǎn)，避免原生動(dòng)物等有害生物的干擾，對(duì)貝類育苗是必須的，但對(duì)河蟹等甲殼動(dòng)物幼體來(lái)說(shuō)，採(cǎi)用敞池比較粗放地培養(yǎng)單胞藻更為經(jīng)濟(jì)實(shí)用。因?yàn)樗麄儾幌褙愵愑左w那樣懼怕原生動(dòng)物，也不需要純而又純的某種單胞藻。相反，由各種藻類和少量小型浮游動(dòng)物組成的群落，在營(yíng)養(yǎng)上更加優(yōu)質(zhì)全面，由於池塘底泥、水源和大氣中到處蘊(yùn)藏著大量的藻類孢子，所以不必引種，只要選擇好培育池並採(cǎi)取若干人為措施，即可增殖成功。

一、一般增殖（一）選塘從藻類自身的繁殖著眼應(yīng)選擇沉積物肥厚的老池為好，因?yàn)槠渲刑N(yùn)藏著更為豐富的“藻種”──孢子，並能為其繁殖提供大量的營(yíng)養(yǎng)元素。但是在這類水體沉積物中又往往貯存著相當(dāng)多的輪蟲(chóng)、枝角類等濾食性浮游動(dòng)物的休眠卵，而成為藻類增殖的隱患。若能遴選到底質(zhì)肥沃而又較少敵害生物的水體做培育池當(dāng)然理想?？磥?lái)，水體交換量較大的養(yǎng)蝦池和以浮游動(dòng)物為終身餌料的鱅魚飼養(yǎng)池可為首選，而連年飼養(yǎng)鯉、鯽、鯰、鱔等底層魚類的水體則不宜入選。培育池的大小、深淺視培養(yǎng)對(duì)象而定，但嚴(yán)重滲漏的池塘是決不可選用的。（二）清塘用生石灰（淡水）和漂白粉（海水）按常規(guī)方法清塘即可。通常排水清塘比帶水清塘為好。前者既節(jié)省用藥量又能使藻類種群密度迅速增長(zhǎng)。還