《植物組織培養(yǎng)實驗》課程教學(xué)大綱

PAGEPAGE2《植物組織培養(yǎng)實驗》課程教學(xué)大綱課程中文名稱：植物組織培養(yǎng)實驗課程英文名稱：Experimentofplanttissueculture課程類型：選修學(xué)分?jǐn)?shù)：2學(xué)時數(shù)：16(要與實際實驗課學(xué)時吻合)適用專業(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)、生物教育、食品生物技術(shù)開課學(xué)期：6先修課程：植物學(xué)、植物生理學(xué)、生物化學(xué)、細(xì)胞學(xué)執(zhí)筆人（課程負(fù)責(zé)人）：陳剛、鐘佩橋?qū)徍巳耍ㄏ抵魅危宏悇偵茖W(xué)學(xué)院一、課程的地位、教學(xué)目標(biāo)和基本要求課程的地位：植物組織培養(yǎng)課程實驗是生物科學(xué)專業(yè)學(xué)生選修的一門專業(yè)課的重要組成部分。目的是通過本課程的教學(xué)，使學(xué)生了解植物組培實驗室建設(shè)，掌握植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)理論知識和基本技能。近幾十年來此項技術(shù)得到了迅速的發(fā)展，已滲透到生物科學(xué)的各個領(lǐng)域，成為生物科學(xué)的重要研究技術(shù)和手段。通過植物組織培養(yǎng)實驗的學(xué)習(xí)，為培養(yǎng)生物科學(xué)教學(xué)和科研人員奠定基礎(chǔ)。教學(xué)目標(biāo)：為了進(jìn)一步加強學(xué)生綜合素質(zhì)和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)，樹立科學(xué)的世界觀，增強學(xué)生分析問題和解決問題的能力而開設(shè)植物組織培養(yǎng)課程實驗，尤其是在增強生物科學(xué)專業(yè)（師范方向）畢業(yè)生就業(yè)能力是十分必要的?；疽螅洪_設(shè)植物組織培養(yǎng)課程實驗，使學(xué)生學(xué)習(xí)植物組培養(yǎng)的培養(yǎng)基母液的配制、培養(yǎng)基的配制、滅菌及無菌操作一般技術(shù)，掌握外植體消毒、愈傷組織誘導(dǎo)、不定芽誘導(dǎo)、生根培養(yǎng)及煉苗移栽，在科學(xué)工作態(tài)度和植物組織培養(yǎng)一般實驗技能等方面獲得初步的訓(xùn)練，為學(xué)生將來從事中學(xué)教學(xué)、科研、開發(fā)等多方面工作，奠定良好的基礎(chǔ)。二、教學(xué)學(xué)時分配序號內(nèi)容實驗學(xué)時1培養(yǎng)基的制備32外植體消毒33愈傷組織的誘導(dǎo)及培養(yǎng)34不定芽的誘導(dǎo)25生根培養(yǎng)26煉苗和移栽或試管花卉的制作3總學(xué)時16三、教學(xué)內(nèi)容與要求實驗一培養(yǎng)基的制備實驗?zāi)康模?．了解植物對營養(yǎng)的要求；2．掌握培養(yǎng)基的基本成分和培養(yǎng)基的制備方法；3．了解高壓滅菌鍋的使用和維護知識。實驗內(nèi)容：1．母液的配制（一種配制方法）2．MS培養(yǎng)基的配制(1)取1L三角燒瓶加蒸餾水約600ml+蔗糖30g，稱取MS干粉4.74克，瓊脂粉7g，加植物生長調(diào)節(jié)劑6-BA（）+NAA（）+蒸餾水定容1L；(2)pH調(diào)整至5.8-6.2：pH試紙：0.1mol/L的HCl或0.1mol/L的NaOH(3)分裝(4)滅菌：121℃20分鐘(5)冷卻備用實驗二外植體消毒實驗?zāi)康模?．了解常用的消毒劑及其使用效果；2．掌握外植體消毒的一般方法；3．掌握超凈工作臺的使用和維護。實驗內(nèi)容：1．無菌水制備（老師做）2．消毒液的配制：HgCl2為例HgCl21g溶于蒸餾水100ml，定容，備用。3．取植物材料（葉、莖）：自來水沖洗10分鐘——75%酒精漂洗（15秒）——0.1%HgCl2處理5~20分鐘——（超凈臺內(nèi)操作）無菌水沖洗3次——切取邊長或高約0.5ml的材料——接種到初代培養(yǎng)基4．注意事項（1）消毒劑的濃度和處理時間（2）無菌水中如何避免污染實驗三愈傷組織的誘導(dǎo)和培養(yǎng)實驗?zāi)康模?．了解愈傷組織形成的基本條件和愈傷組織形成過程；2．掌握愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)方法。實驗內(nèi)容：1．材料：試管苗植物的葉片，莖段；2．材料處理：無菌操作，取試管苗葉片，剪取約邊長0.5cm的方塊，接種，每瓶2~3個。3．培養(yǎng)基MS+2,4-D1mg/L（單位以下同）MS+2,4-D1+NAA0.2MS+2,4-D2MS+2,4-D2+NAA0.24．觀察，記錄，總結(jié)：每周記錄一次，4~5周后總結(jié)，寫實驗報告。實驗四不定芽誘導(dǎo)實驗?zāi)康模?．了解植物形態(tài)發(fā)生的影響因素；2．掌握不定芽誘導(dǎo)的一般方法。實驗內(nèi)容：1．材料：試管苗植物葉片產(chǎn)生的愈傷組織。2．材料處理與接種：從上實驗中獲得的愈傷組織，其中一部分把愈傷組織也初起外植體分離，另一部分保留原外植體和產(chǎn)生愈傷組織，并接到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中去。3．培養(yǎng)基MS+6-BA1MS+6-BA2MS+6-BA1+NAA0.2MS+6-BA2+NAA0.24．觀察、記錄、實驗報告。實驗五生根培養(yǎng)實驗?zāi)康模?．了解無根苗試管生根的原理；2．掌握生根培養(yǎng)的一般方法。實驗內(nèi)容：1．材料：愈傷組織誘導(dǎo)的不定芽。2．材料處理與接種。從增殖培養(yǎng)中獲得的不定芽，選取較健壯，切取芽高1~2cm的不定芽或枝，接種到生根培養(yǎng)莖中，帶幼小芽體的外植體可接種到增殖培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基：溫度25℃±3℃光照2000lx12h/d。培養(yǎng)基：A：MS+NAA0.1B：1/2MS+NAA0.1觀察、記錄、實驗報告。實驗六煉苗和移栽實驗?zāi)康模?．了解煉菌的原理和方法；2．掌握試管菌的移栽方法。實驗內(nèi)容：1．材料：生根培養(yǎng)后半月，具3—5條根長2cm的瓶苗。2．煉菌：移栽前3—5天，打開瓶蓋，置于80%遮光率的陰柵，培養(yǎng)3—5天，葉片轉(zhuǎn)深綠，即可移栽。3．床準(zhǔn)備：蔭柵內(nèi)，基質(zhì)珍珠巖和泥炭土混合，比例3：1或4：1。4．瓶苗處理：自來水沖洗干凈，切莫損傷苗株。5．種植：株行距3*3cm。6．定根水。7．?；⌒姓谏w。8．苗期管理：保濕、保溫、遮光、根外施肥。9．觀察、記錄、寫出實驗報告。實驗六試管花卉的制作（選）一、預(yù)習(xí)內(nèi)容1.查閱資料，了解試管花卉的制作方法。二、目的要求1.了解試管花卉的制作方法，掌握試管花卉的制作方法。三、實驗內(nèi)容1.材料：選取試驗中獲得不定芽。2.方法：將帶色素的培養(yǎng)基加熱，轉(zhuǎn)入相應(yīng)的小瓶中，冷卻，接種小苗到瓶中。培養(yǎng)1星期，無污染的試管花卉即為制作成功。四、實驗報告或作業(yè)1.寫出實驗報告。四、考核成績分配比例（實驗課）平時成績實驗報告出勤操作35%15%50