重慶市萬州二中2024年高三最后一卷生物試卷含解析

重慶市萬州二中2024年高三最后一卷生物試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項(xiàng)》，按規(guī)定答題。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于細(xì)胞中糖類、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．細(xì)胞中的脂質(zhì)能夠與糖類結(jié)合B．細(xì)胞中的脂質(zhì)不會(huì)含有氮元素C．細(xì)胞膜上糖類與蛋白質(zhì)的結(jié)合物具有識別作用D．細(xì)胞中的糖類不能作為人體的直接能源物質(zhì)2．新冠病毒2019-nCov引發(fā)全球疫情，為了盡快阻斷疫情傳播，其疫苗研制正如火如荼地進(jìn)行著。下列有關(guān)人體接種疫苗的說法正確的是（）A．接種疫苗后會(huì)發(fā)生免疫反應(yīng)，不利于維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)B．首次接種疫苗會(huì)引起記憶細(xì)胞增殖分化，產(chǎn)生漿細(xì)胞C．接種后T細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子，刺激B細(xì)胞合成分泌抗體D．接種后產(chǎn)生的抗體存在于細(xì)胞外液中，可與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合3．某生物興趣小組的同學(xué)從資料上獲知：二氯二乙胺能夠阻止參與DNA復(fù)制的酶與DNA相互作用。他們推測二氯二乙胺能抑制癌細(xì)胞的增殖，能作為癌癥的一種化療藥物。他們對二氯二乙胺作用于癌細(xì)胞的適應(yīng)濃度進(jìn)行了探究。下列是興趣小組同學(xué)們的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路，其中正確的是（）A．取小鼠肝臟的腫瘤細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)組，正常肝臟細(xì)胞為對照組B．將實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞放在含有不同濃度二氯二乙胺的生理鹽水中進(jìn)行培養(yǎng)C．在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)放在25℃恒溫箱中培養(yǎng)，并保證氧氣濃度正常D．實(shí)驗(yàn)開始時(shí)和實(shí)驗(yàn)結(jié)束后都要用抽樣調(diào)查的方法對每組細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)并記錄4．如圖為某人工魚塘的主要能量流動(dòng)圖解，其中a、b、c、d為相關(guān)魚的能量同化量。下列敘述中正確的是A．用標(biāo)志重捕法調(diào)査魚種甲的種群密度時(shí)，網(wǎng)眼太大常使調(diào)査值偏大B．魚種乙中不同個(gè)體在魚塘不同水層覓食不能體現(xiàn)群落在垂直方向上合理利用資源C．若除去魚種乙和增加投放飼料，則魚種甲會(huì)在魚塘中呈現(xiàn)“J”型數(shù)量增長D．據(jù)圖分析魚種甲和魚種乙間的能量傳遞效率為（b+d）/（a+c）5．旱金蓮由三對等位基因控制花的長度，這三對基因分別位于三對同源染色體上，作用相等且具疊加性。已知每個(gè)顯性基因控制花長為5mm，每個(gè)隱性基因控制花長為2mm?；ㄩL為24mm的同種基因型個(gè)體相互授粉，后代出現(xiàn)性狀分離，其中與親本具有同等花長的個(gè)體所占比例是（）A．1/16 B．1/8 C．5/16 D．3/86．下列敘述中，正確的有幾項(xiàng)①三倍體西瓜不結(jié)籽的性狀可以遺傳，但它不是一個(gè)新物種②多倍體在植物中比在動(dòng)物中更為常見③八倍體小黑麥?zhǔn)怯没蚬こ碳夹g(shù)創(chuàng)造的新物種④馬和驢雜交的后代騾是不育的二倍體，而雄蜂是可育的單倍體⑤多倍體的形成可因有絲分裂過程異常造成⑥單倍體育種常用一定濃度的秋水仙素處理單倍體的種子⑦秋水仙素溶液處理休眠種子是誘發(fā)多倍體形成的有效方法A．三項(xiàng) B．四項(xiàng) C．五項(xiàng) D．六項(xiàng)7．螳螂是一種中至大型昆蟲。肉食性，在田間和林區(qū)能消滅不少害蟲，因而是益蟲。有些種類進(jìn)行孤雌生殖（未受精的卵細(xì)胞單獨(dú)發(fā)育成個(gè)體）。性殘暴好斗，缺食時(shí)常有大吞小和雌吃雄的現(xiàn)象。體色與其所處環(huán)境相似，借以捕食多種害蟲。下列說法正確的是A．螳螂為了適應(yīng)環(huán)境，體色朝與環(huán)境相似的顏色變異，得以進(jìn)化B．螳螂常有大吞小，雌吃雄的現(xiàn)象，體現(xiàn)了種間激烈的競爭關(guān)系C．孤雌生殖說明了未受精的卵細(xì)胞具有全能性D．螳螂捕蟬黃雀在后，從食物鏈上看，螳螂屬于初級消費(fèi)者8．（10分）下列各曲線圖表示在果酒的制作過程中，各種因素對酵母菌產(chǎn)生酒精速率（V）的影響，其中正確的是（）A． B．C． D．二、非選擇題9．（10分）2020年3月份新冠肺炎席卷全球多個(gè)國家，新冠肺炎由新型冠狀病毒感染所致。面對疫情，專家提醒：“比起焦慮和恐慌，我們更需要的是盡量放松、保持心情愉悅，同時(shí)，疫苗仍然是防控傳染病最有效的手段。”回答下列問題：（1）在免疫學(xué)上，侵入人體的新型冠狀病毒屬于_________。（2）當(dāng)人體感染新型冠狀病毒時(shí)，免疫系統(tǒng)的功能加強(qiáng)，往往會(huì)引起發(fā)燒。發(fā)燒的原因是病毒產(chǎn)生的毒素可以改變下丘腦中____________的功能，最終使機(jī)體產(chǎn)熱量增加，體溫升高。（3）焦慮或緊張會(huì)使T細(xì)胞活性下降，從而更易感染病毒而患病，分析其原因是____________________。（4）冠狀病毒爆發(fā)的同時(shí)北半球正處于流感季節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)，BY型流感病毒衣殼蛋白在一定表達(dá)系統(tǒng)中能重新自我組裝成病毒樣顆粒（VLP），該顆粒不含病毒核酸，可作為預(yù)防BY的疫苗。VLP注入機(jī)體后一般不會(huì)引發(fā)細(xì)胞免疫，其原因是____________________________________。10．（14分）幾丁質(zhì)是構(gòu)成植物病原真菌和昆蟲外骨骼的組分，高等動(dòng)植物和人類體內(nèi)不含幾丁質(zhì)。某些微生物能合成幾丁質(zhì)酶（胞外酶），將幾丁質(zhì)降解為N-乙酰氨基葡萄糖。科研人員通過微生物培養(yǎng)獲得幾丁質(zhì)酶，用于生物防治?；卮鹣铝袉栴}。（l）幾丁質(zhì)酶用于植物病蟲害防治的優(yōu)勢是____。（2）欲篩選幾丁質(zhì)酶高產(chǎn)菌株，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入幾丁質(zhì)，為微生物提供____。菌株接種前對培養(yǎng)基滅菌，殺死培養(yǎng)基內(nèi)外_______。菌株篩選成功后，可將培養(yǎng)的菌液與滅菌后的___混合，在-20℃長期保存。（3）將篩選出的菌株接種到培養(yǎng)基中，30℃恒溫振蕩培養(yǎng)至幾丁質(zhì)降解完全，得到幾丁質(zhì)酶發(fā)酵液，將其離心，保留_________（填“上清液”或“沉淀”），獲得粗酶樣品；在膠體幾丁質(zhì)固體培養(yǎng)基上打孔，將粗酶樣品加入孔內(nèi)，恒溫靜置8h，根據(jù)透明圈的大小可判____________________。（4）通過SDS-___法進(jìn)行幾丁質(zhì)酶樣品純度檢測，加入SDS的目的是____。11．（14分）近年來煙草葉綠體基因工程在提高光合效率、抗性和品質(zhì)等方面取得了研究進(jìn)展。下圖是將擬南芥果糖1，6-二磷酸醛縮酶基因（簡稱“醛縮酶基因”）轉(zhuǎn)人煙草葉綠體基因組的部分流程示意圖，請據(jù)圖同答下列問題：（1）在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是_______圖1中，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增擬南芥醛縮酶基因時(shí)，應(yīng)選用的引物是_______。（2）圖2重組質(zhì)粒中未標(biāo)注出的必需元件還有____，構(gòu)建該重組質(zhì)料用的限制性核酸內(nèi)切酶有_______。（3）將擬南芥醛縮酶基因?qū)藷煵萑~綠體基因組時(shí)，一般將含有目的基因的質(zhì)粒包裹在金粉上，通過轟擊進(jìn)入葉綠體中，這種方法稱為_______，葉綠體基因組中存在基因區(qū)和基因間隔區(qū)，應(yīng)將目的基因?qū)肴~綠體基因組中的基因間隔區(qū)，其原因是____。（4）檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是_______，該項(xiàng)技術(shù)用到的基因探針的制作方法是：在____上用放射性同位素等做標(biāo)記。12．黑麥草具有抗除草劑草甘膦的能力，是因?yàn)楹邴湶菥哂锌共莞熟⒒颉？茖W(xué)家利用該基因通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了抗除草劑草甘膦的玉米新品種，回答下列問題：（1）科研人員選擇能夠茁壯生長在噴灑過草甘膦溶液環(huán)境中的黑麥草，從黑麥草細(xì)胞中提取___________，通過反轉(zhuǎn)錄法構(gòu)建_______文庫，再從中選取抗草甘膦基因。該方法獲得的目的基因直接導(dǎo)入玉米細(xì)胞中不能正常表達(dá)，其原因是__________________。（2）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞有多種方法，最常用的是___________________。（3）經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)該種玉米新品種抗草甘膦的能力較低，可通過_____________工程修飾或合成編碼抗草甘膦的基因。（4）種植該轉(zhuǎn)基因玉米作為食物會(huì)引發(fā)公眾在食物安全方面的擔(dān)憂，主要是擔(dān)心轉(zhuǎn)基因生物會(huì)產(chǎn)生出___________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

脂質(zhì)的種類及其功能：功能分類化學(xué)本質(zhì)分類功能儲(chǔ)藏脂類脂肪儲(chǔ)藏能量，緩沖壓力，減少摩擦，保溫作用結(jié)構(gòu)脂類磷脂是細(xì)胞膜、細(xì)胞器膜和細(xì)胞核膜的重要成份調(diào)節(jié)脂類固醇膽固醇細(xì)胞膜的重要成份，與細(xì)胞膜的流動(dòng)性有關(guān)性激素促進(jìn)生殖器官的生長發(fā)育，激發(fā)和維持第二性征及雌性動(dòng)物的性周期維生素D促進(jìn)動(dòng)物腸道對鈣磷的吸收，調(diào)節(jié)鈣磷的平衡生物膜的流動(dòng)鑲嵌模型：（1）磷脂雙分子層構(gòu)成膜的基本支架，這個(gè)支架是可以流動(dòng)的；（2）蛋白質(zhì)分子有的鑲嵌在磷脂雙分子層表面，有的部分或全部嵌入磷脂雙分子層中，有的橫跨整個(gè)磷脂雙分子層．大多數(shù)蛋白質(zhì)也是可以流動(dòng)的；（3）在細(xì)胞膜的外表，少數(shù)糖類與蛋白質(zhì)結(jié)合形成糖蛋白，除糖蛋白外，細(xì)胞膜表面還有糖類與脂質(zhì)結(jié)合形成糖脂?！驹斀狻緼、細(xì)胞膜中的脂質(zhì)可以與糖類結(jié)合形成糖脂，A正確；B、磷脂含有氮元素，B錯(cuò)誤；C、糖類與蛋白質(zhì)的結(jié)合形成糖蛋白，糖蛋白具有識別作用，C正確；D、人體的直接能源物質(zhì)是ATP，D正確。故選B。2、D【解析】

接種疫苗后，刺激B細(xì)胞增殖分化形成漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞，漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體與抗原特異性結(jié)合，抗體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)?！驹斀狻緼、接種疫苗后可以產(chǎn)生記憶細(xì)胞，抵抗同種抗原的再次入侵，有利于維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，A錯(cuò)誤；B、首次接種不會(huì)引起記憶細(xì)胞增殖分化，B錯(cuò)誤；C、接種后T細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子，刺激B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞，由漿細(xì)胞合成分泌抗體，C錯(cuò)誤；D、接種后產(chǎn)生的抗體存在于細(xì)胞外液中，可與相應(yīng)抗原特異結(jié)合發(fā)生免疫反應(yīng)，D正確。故選D。3、D【解析】

分析題目可知，本題是通過實(shí)驗(yàn)研究癌癥治療的方法，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對照原則和單一變量原則，由實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍?，自變量是不同濃度的二氯二乙胺，因變量是癌?xì)胞增殖的數(shù)量?！驹斀狻緼、應(yīng)該是含有腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中添加不同濃度的二氯二乙胺溶液作為實(shí)驗(yàn)組，對照組中加入等量的生理鹽水，A錯(cuò)誤；B、應(yīng)該是將細(xì)胞放在培養(yǎng)液中培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；C、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)該在37℃恒溫箱中培養(yǎng)，C錯(cuò)誤；D、對于細(xì)胞的計(jì)數(shù)可以采用抽樣檢測法利用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，實(shí)驗(yàn)前后實(shí)驗(yàn)后都計(jì)數(shù)并記錄，D正確。故選D。4、B【解析】

1、群落的垂直結(jié)構(gòu)：指群落在垂直方向上的分層現(xiàn)象。2、種群增長的“S”型曲線：原因：自然界的資源和空間是有限的，當(dāng)種群密度增大時(shí)，種內(nèi)競爭就會(huì)加劇，以該種群為食的捕食者數(shù)量也會(huì)增加。3、能量傳遞效率是指相鄰兩個(gè)營養(yǎng)級之間的同化量的比值。【詳解】A、用標(biāo)志重捕法調(diào)査魚種甲的種群密度時(shí)，網(wǎng)眼太大常使小魚不能被捕撈，進(jìn)而導(dǎo)致調(diào)査值偏小，A錯(cuò)誤；B、魚種乙中不同個(gè)體在魚塘不同水層覓食，屬于種群的空間特征，不能體現(xiàn)群落的垂直結(jié)構(gòu)，B正確；C、若除去魚種乙和增加投放飼料，則魚種甲的食物非常充足，但是生存空間是有限的，因此魚種甲在魚塘中將呈現(xiàn)“S”型數(shù)量增長，C錯(cuò)誤；D、據(jù)圖分析，魚種甲和魚種乙間的能量傳遞效率為b/（a+c），D錯(cuò)誤。故選B。5、D【解析】

根據(jù)題干信息，旱金蓮隱性純合子aabbcc的高度為12mm，顯性純合在AABBCC的高度為30mm，每增加一個(gè)顯性基因，高度增加3mm。所以花長為24mm的個(gè)體中應(yīng)該有（24-12）÷3=4個(gè)顯性基因?！驹斀狻扛鶕?jù)題意花長為24mm的個(gè)體中應(yīng)該有（24-12）÷3=4個(gè)顯性基因，且后代有性狀分離，不可能是純合子，所以基因型可能是AaBbCC、AaBBCc、AABbCc。以AaBbCC為例，其自交后代含有4個(gè)顯性基因的比例為1/4×1/4×1+1/4×1/4×1+1/2×1/2×1=6/16=3/8，D正確，ABC錯(cuò)誤，故選D。【點(diǎn)睛】該題考查了多基因的累加效應(yīng)，基因自由組合定律的實(shí)質(zhì)及應(yīng)用的相關(guān)知識點(diǎn)，解題的關(guān)鍵是根據(jù)單個(gè)顯性基因、單個(gè)隱性基因分別控制的花長，確定相關(guān)個(gè)體基因組成，再根據(jù)基因自由組合定律解題。6、B【解析】

由于三倍體植株減數(shù)分裂過程中，聯(lián)會(huì)紊亂不能產(chǎn)生正常配子，因此三倍體不是一個(gè)物種，①正確；多倍體植物常見，自然界中幾乎沒有多倍體動(dòng)物，故②正確；八倍體小黑麥?zhǔn)嵌啾扼w育種的結(jié)果，故③錯(cuò)；騾子是馬和驢雜交的后代，由于騾子不育，且馬和驢都是二倍體，因此騾子是不育的二倍體，蜜蜂中的雄峰是由蜂王的卵細(xì)胞直接發(fā)育而來，因此雄峰是單倍體，故④正確；在細(xì)胞分裂過程中，抑制紡錘體的形成，能形成多倍體，故⑤正確；獲得單倍體的方法是花藥離體培養(yǎng)，同時(shí)單倍體是高度不育，因此單倍體沒有種子，故⑥錯(cuò)；獲得多倍體植物的方法是用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，故⑦錯(cuò)，故選B。7、C【解析】

細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞，仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。細(xì)胞具有全能性的原因是細(xì)胞包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因?！驹斀狻緼、不是螳螂的體色朝與環(huán)境相似的顏色變異，而是由于螳螂有許多體色的變異，由于環(huán)境的選擇作用，體色與環(huán)境相似的得以保留下來，其他的被淘汰，這樣，螳螂就進(jìn)化了，A錯(cuò)誤；

B、螳螂常有大吞小，雌吃雄的現(xiàn)象，這體現(xiàn)了螳螂種內(nèi)激烈的斗爭關(guān)系，競爭為種間關(guān)系，B錯(cuò)誤；

C、未受精的卵細(xì)胞單獨(dú)發(fā)育成個(gè)體說明了未受精的卵細(xì)胞具有全能性，C正確；

D、“螳螂捕蟬，黃雀在后”，從食物鏈上看蟬屬于初級消費(fèi)者，螳螂屬于次級消費(fèi)者，黃雀屬于三級消費(fèi)者，D錯(cuò)誤。

故選C。8、C【解析】酵母菌屬于兼性厭氧性生物，既可以進(jìn)行有氧呼吸也可進(jìn)行無氧呼吸。果酒制作時(shí)利用酵母菌無氧呼吸時(shí)產(chǎn)生酒精的原理。如果溶氧量越大，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，只產(chǎn)生CO2和H2O，不產(chǎn)生C2H5OH，A錯(cuò)誤；由于pH可以影響酶活性，每種酶有一個(gè)最適PH，高于或低于該P(yáng)H，酶活性下降，所以B中曲線應(yīng)該先上升，再下降，B錯(cuò)誤；在一定范圍內(nèi)，溫度對酶活性有提高作用，超過最適溫度，酶活性下降，C正確；酵母菌釀酒初期，進(jìn)行有氧呼吸，繁殖后代，然后進(jìn)行無氧呼吸，發(fā)酵后期由于產(chǎn)物積累，影響酒精發(fā)酵，所以曲線是先從0點(diǎn)開始上升，再下降，D錯(cuò)誤。二、非選擇題9、抗原體溫調(diào)節(jié)中樞焦慮或緊張時(shí)，會(huì)降低T細(xì)胞的活性，淋巴因子分泌減少，使記憶細(xì)胞和抗體分泌減少；同時(shí)使效應(yīng)T細(xì)胞數(shù)量少，從而導(dǎo)致免疫功能下降VLP不含核酸，不會(huì)侵入到細(xì)胞內(nèi)，所以不會(huì)引起細(xì)胞免疫【解析】

體液免疫的大致過程：大多數(shù)病原體經(jīng)過吞噬細(xì)胞等的攝取和處理，暴露出這種病原體所特有的抗原，將抗原傳遞給T細(xì)胞，刺激T細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子。少數(shù)抗原直接刺激B細(xì)胞。B細(xì)胞受到刺激后，在淋巴因子的作用下，開始一系列的增殖、分化，大部分分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生抗體，小部分形成記憶細(xì)胞。抗體可以與病原體結(jié)合，從而抑制病原體的繁殖和對人體細(xì)胞的黏附。在大多數(shù)情況下，抗原、抗體結(jié)合后會(huì)發(fā)生一系列變化，如形成沉淀或細(xì)胞集團(tuán)，進(jìn)而被吞噬細(xì)胞吞噬消化。記憶細(xì)胞可以在抗原消失后很長時(shí)間內(nèi)保持對這種抗原的記憶，當(dāng)再次接觸這種抗原時(shí)，能迅速增殖分化，快速產(chǎn)生大量的抗體。【詳解】（1）能夠引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)的物質(zhì)叫做抗原，病毒、細(xì)菌等病原體表面的蛋白質(zhì)等物質(zhì)，都可以作為引起免疫反應(yīng)的抗原。（2）體溫調(diào)節(jié)中樞位于下丘腦，當(dāng)人體感染新型冠狀病毒時(shí)，病毒產(chǎn)生的毒素可以改變下丘腦中體溫調(diào)節(jié)中樞的功能，最終使機(jī)體產(chǎn)熱量大于散熱量，體溫升高。（3）T細(xì)胞既參與體液免疫，又參與細(xì)胞免疫。焦慮或緊張時(shí)，會(huì)降低T細(xì)胞的活性，淋巴因子分泌減少，使記憶細(xì)胞和抗體分泌減少，體液免疫能力降低；同時(shí)使效應(yīng)T細(xì)胞數(shù)量少，從而導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能下降。（4）由題干可知，病毒樣顆粒（VLP），不含病毒核酸，因此只能引起體液免疫，使機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)記憶細(xì)胞和抗體，不會(huì)侵入到細(xì)胞內(nèi)，所以不會(huì)引起細(xì)胞免疫?！军c(diǎn)睛】本題以新型冠狀病毒為例，考查特異性免疫反應(yīng)，要求識記人體免疫系統(tǒng)的組成，掌握特異性免疫過程。10、無毒、無污染碳源、氮源所有的微生物，包括芽孢和孢子甘油上清液幾丁質(zhì)酶活力的高低聚丙烯酰胺凝膠電泳使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性；消除凈電荷對遷移率的影響【解析】

1、培養(yǎng)基的成分：碳源、氮源、水、無機(jī)鹽、生長因子等。培養(yǎng)基按照用途可分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基具有能夠滿足篩選微生物正常生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)或條件，而不利于非篩選微生物的生長。而獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，因此采用無菌技術(shù)避免雜菌的污染，對培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌處理，目的是殺傷物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。2、凝膠色譜法原理：凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動(dòng)的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離。【詳解】（1）幾丁質(zhì)酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，其作用主要是降解幾丁質(zhì)，而幾丁質(zhì)是構(gòu)成植物病原真菌和昆蟲外骨骼的組分，且高等動(dòng)植物和人類體內(nèi)不含幾丁質(zhì)，幾丁質(zhì)酶用于植物病蟲害防治的優(yōu)勢是無污染。（2）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基必不可少的條件是碳源、氮源、無機(jī)鹽、水、適宜pH以及溫度等。要篩選幾丁質(zhì)酶高產(chǎn)菌株，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入幾丁質(zhì)作為微生物營養(yǎng)來源，幾丁質(zhì)為N-乙酰葡糖胺通過β-1，4-糖苷鍵連接聚合而成的多糖，為其提供碳源和氮源。微生物的接種過程需要嚴(yán)格無菌操作，防止菌株受到污染，在菌株接種前應(yīng)對培養(yǎng)基滅菌，殺死培養(yǎng)基內(nèi)外所有微生物，包括芽孢和孢子。污染菌液的長期保存應(yīng)隔絕空氣，防止受到其他污染，通常在菌株篩選成功后，將培養(yǎng)的菌液與滅菌的甘油混合，在-20℃長期保存。（3）將幾丁質(zhì)發(fā)酵液離心，重的菌株沉淀在底部，而粗酶樣品分布于上清液；通過觀察固體培養(yǎng)基上是否產(chǎn)生透明圈來確定菌株是否具有降解幾丁質(zhì)的酶活性，而透明圈的大小指幾丁質(zhì)酶活力的高低。（4）幾丁質(zhì)酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)樣品純度檢測采用的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子大小等因素，為了消除凈電荷對遷移率的影響，可以在凝膠中加入SDS?！军c(diǎn)睛】本題考查微生物的篩選和培養(yǎng)以及蛋白質(zhì)的純度的鑒定方法的知識點(diǎn)，要求學(xué)生掌握培養(yǎng)基的成分和類型，把握選擇培養(yǎng)基的作用及其特點(diǎn)，能夠根據(jù)題意判斷該題中微生物選擇的方法，識記滅菌的目的和生物防治的優(yōu)點(diǎn)，理解蛋白質(zhì)純度的鑒定方法和原理，這是該題考查的重點(diǎn)。11、加熱至90~95℃引物甲、引物丙復(fù)制原點(diǎn)HindⅢ和BclI基因槍法避免對葉綠體自身的基因組的表達(dá)造成影響DNA分子雜交技術(shù)含有目的基因的DNA單鏈片段（或“與目的基因互補(bǔ)的RNA單鏈片段”）【解析】

（1）目的基因的獲取的方法有：從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法昰：顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锝I胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，利用高溫條件使模板DNA解鏈為單鏈，即加熱至90~95℃條件下使模板DNA解旋，圖1中，基因中兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械模世肞CR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，應(yīng)該選基因上下游、方向相反的一對引物，故所選的引物是引物甲、引物丙。（2）重組質(zhì)粒應(yīng)包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)等，圖2重組質(zhì)粒中未標(biāo)注出的必需元件還有復(fù)制原點(diǎn)，由圖2可知，BamHI會(huì)破壞標(biāo)記基因，結(jié)合圖1目的基因兩端的限制酶切點(diǎn)可判斷構(gòu)建該重組質(zhì)粒用的限制性核酸內(nèi)切酶應(yīng)選擇HindIII和BclI。（3）將目的基因?qū)霟煵萑~綠體基因組時(shí)，一般將含有目的基因的質(zhì)粒包裹在金粉上，通過轟擊進(jìn)入葉綠體中，這種方法稱為基因槍法。葉綠體基因組中存在基因區(qū)和基因間隔區(qū)，為避免對葉綠體自身的基因組的表達(dá)造成影響，應(yīng)將目的基因?qū)肴~綠體基因組中的基因間隔區(qū)。（4）檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體