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文檔簡介
第一章緒論
六、論述題
1、什么叫細胞生物用?試論述細胞生物學(xué)研究的主要內(nèi)容。
答:細胞生物學(xué)是研究細胞基本生命活動規(guī)律的科學(xué),它是在三個水平(顯微、亞顯微與分子水
平)上,以研究細胞的結(jié)構(gòu)與功能、細胞增殖、細胞分化、細胞衰老與凋亡、細胞信號傳遞、
真核細胞基因表達與調(diào)控、細胞起源與進化等為主要內(nèi)容的一門科學(xué)。
細胞生物學(xué)的主要研究內(nèi)容主要包括兩個大方面:細胞結(jié)構(gòu)與功能、細胞重要生命活動。涵
蓋九個方面的內(nèi)容:⑴細胞核、染色體以及基因表達的研究;⑵生物膜與細胞器的研究;⑶
細胞骨架體系的研究;⑷細胞增殖及其調(diào)控;⑸細胞分化及其調(diào)控;⑹細胞的衰老與凋亡;
⑺細胞的起源與進化;⑻細胞工程;⑼細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。
第二章細胞的統(tǒng)一性與多樣性
一、名詞解釋
1、細胞;由膜轉(zhuǎn)圍成的、能進行獨立繁殖的最小原生質(zhì)團,是生物體電基本的開礦結(jié)構(gòu)和
生理功能單位。其基本結(jié)構(gòu)包括:細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核(擬核)。
2、原核細胞;沒有由膜圍成的明確的細胞核、體積小、結(jié)構(gòu)簡單、進化地位原始的細胞。
8、原核細胞和真核細胞核糖體的沉降系數(shù)分別為70S和80S。
9、細菌細胞表面主要是指細胞壁和細胞膜及其特化結(jié)構(gòu)回體,莢膜和
鞭毛等。
10、真核細胞亞顯微水平的三大基本結(jié)構(gòu)體系是生物膜結(jié)構(gòu)系統(tǒng)、遺傳信息表達系統(tǒng),和細
胞骨架系統(tǒng)。
三、選擇題
1、大腸桿菌的核糖體的沉降系數(shù)為(B)
A、80SB、70SC、60SD、50S
3、在病毒與細胞起源的關(guān)系上,下面的(C)觀戰(zhàn)越來越有說服力。
A、生物大分子一病毒一細胞B、生物大分子一細胞和病毒
C、生物大分子一細胞一病毒D、都不對
8、原核細胞的呼吸酶定位在(B)。
A、細胞質(zhì)中B、質(zhì)膜上C、線粒體內(nèi)膜上D、類核區(qū)內(nèi)
7、細菌核糖體的沉降系數(shù)為70S,由50S大亞基和30S小亞基組成。(√)
五、簡答題
1、為什么說支原體是目前發(fā)現(xiàn)的最小、最簡單的能獨立生活的細胞生物?
答:支原體的的結(jié)構(gòu)和機能極為簡單:細胞膜、遺傳信息載體DNA與RNA、進行蛋白質(zhì)合
成的一定數(shù)量的核糖體以及催化主要酶促反應(yīng)所需要的酶。這些結(jié)構(gòu)及其功能活動所需空間
不可能小于Ioonm。因此作為比支原體更小、更簡單的細胞,又要維持細胞生命活動的基本
要求,似乎是不可能存在的,所以說支原體是最小、最簡單的細胞。
六、論述題
1、如何理解“細胞是生命活動的基本單位”。
答:①細胞是構(gòu)成有機體的基本單位。一切有機體均由細胞構(gòu)成,只有病毒是非細胞形態(tài)的
生命體。②細胞具有獨立的、有序的自控代謝體系,細胞是代謝與功能的基本單位③細胞是
有機體生長與發(fā)育的基礎(chǔ)④細胞是遺傳的基本單位,細胞具有遺傳的全能性⑤細胞是生命起
源和進化的基本單位。⑥沒有細胞就沒有完整的生命
2、試論述原核細胞與真核細胞最根本的區(qū)別。
答:原核細胞與真核細胞最根本的區(qū)別在于:①生物膜系統(tǒng)的分化與演變:真核細胞以生物
膜分化為基礎(chǔ),分化為結(jié)構(gòu)更精細、功能更專一的基本單位——細胞器,使細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)與
職能的分工是真核細胞區(qū)別于原核細胞的重要標志;②遺傳信息量與遺傳裝置的擴增與復(fù)雜
化:由于真核細胞結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)雜化,遺傳信息量相應(yīng)擴增,即編碼結(jié)構(gòu)蛋白與功能蛋白
的基因數(shù)首先大大增多;遺傳信息重復(fù)序列與染色體多倍性的出現(xiàn)是真核細胞區(qū)別于原核細
胞的一個重大標志。遺傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯的裝置和程序也相應(yīng)復(fù)雜化,真核細胞內(nèi)
遺傳信息的轉(zhuǎn)錄與翻譯有嚴格的階段性與區(qū)域性,而在原核細胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄與翻譯可同時進行。
第三章細胞生物學(xué)研究方法
一、名詞解釋
1、原代細胞培養(yǎng);直接從有機體取出組織,通過組織塊長出單層細胞,或者用酶消化或機
械方法將組織分散成單個細胞,在體外進行培養(yǎng),在首次傳代前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。
2、傳代細胞培養(yǎng);原代培養(yǎng)形成的單層培養(yǎng)細胞匯合以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞
會因生存空間不足或由于細胞密度過大引起營養(yǎng)枯竭,將影響細胞的生長,這一分離培養(yǎng)稱
為傳代細胞培養(yǎng)
3、細胞融合;兩個或多個細胞融合成一個雙核細胞或多核細胞的現(xiàn)象。一般通過滅活的病
毒或化學(xué)物質(zhì)介導(dǎo),也可通過電刺激融合。
4、單克隆抗體;通過克隆單個分泌抗體的B淋巴細胞,獲得的只針對某一抗原決定簇的
抗體,具有專一性強、能大規(guī)模生產(chǎn)的特點。
二、填空題
1、熒光顯微鏡是以紫外光為光源,電子顯微鏡則是以電子束為光源。
3、細胞組分的分級分離方法有超速離心法,層析法和電泳法。
4、電子顯微鏡使用的是電磁透鏡,而光學(xué)顯微鏡使用的是玻璃透鏡。
5、雜交瘤是通過(小鼠骨髓)瘤細胞細胞和B淋巴細胞種細胞的融合實現(xiàn)的,由此所分泌
的抗體稱為單克隆抗體。
6、觀察活細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可選用相差顯微鏡顯微鏡,觀察觀察細胞的形態(tài)和運動可選用喳
視野顯微鏡顯微鏡,觀察生物膜的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可采用冰凍蝕刻法。
7、體外培養(yǎng)的細胞,不論是原代細胞還是傳代細胞,一般不保持體內(nèi)原有的細胞形態(tài),而
呈現(xiàn)出兩種基本形態(tài)即成纖維樣細胞和上皮樣細胞。
三、選擇題
1、由小鼠骨髓瘤細胞與某一B細胞融合后形成的細胞克隆所產(chǎn)生的抗體稱(A)。
A、單克隆抗體B、多克隆抗體C、單鏈抗體D、嵌合抗體
2、適于觀察培養(yǎng)瓶中活細胞的顯微鏡是(C)
A、熒光顯微鏡B、相差顯微鏡C、倒置顯微鏡D、掃描電鏡
3、冰凍蝕刻技術(shù)主要用于(A)
A、電子顯微鏡B、光學(xué)顯微鏡C、微分干涉顯微鏡D、掃描隧道顯微鏡
4、分離細胞內(nèi)不同細胞器的主要技術(shù)是(A)
A、超速離心技術(shù)B、電泳技術(shù)C、層析技術(shù)D、光鏡技術(shù)
5、FeUlgen反應(yīng)是一種經(jīng)典的細胞化學(xué)染色方法,常用于細胞內(nèi)(C)
A、蛋白質(zhì)的分布與定位B、脂肪的分布與定位
C、DNA的分布與定位D、RNA的分布與定位
6、流式細胞術(shù)可用于測定(D)
A、細胞的大小和特定細胞類群的數(shù)量B、分選出特定的細胞類群
C、細胞中DNA、RNA或某種蛋白的含量D、以上三種功能都有
11、動物細胞在體外培養(yǎng)條件下生長情況是(C)。
A、能無限增殖B、不能增殖分裂很快死亡C、經(jīng)過有限增殖后死亡
D、一般進行有限增殖后死亡,但少數(shù)情況下某些細胞發(fā)生了遺傳突變,獲得無限增殖能力
13、在雜交瘤技術(shù)中,篩選融合細胞時常選用的方法是(C)。
A、密度梯度離心法B、熒光標記的抗體和流式細胞術(shù)
C、采用在選擇培養(yǎng)劑中不能存活的缺陷型瘤系細胞來制作融合細胞
D、讓未融合的細胞在培養(yǎng)過程中自然死亡
五、簡答題
1、超薄切片的樣品制片過程包括哪些步驟?
答案要點:固定,包埋,切片,染色。
3、比較差速離心與密度梯度離心的異同。
答案要點:二者都是依靠離心力對細胞勻漿懸浮扔中的顆粒進行分離的技術(shù)?差速離心是一
種較為簡便的分離法,常用于細胞核和細胞器的分離。因為在密度均一的介質(zhì)中,顆粒越大
沉降越快,反之則沉降較慢。這種離心方法只能將那些大小有顯著差異的組分分開,而且所
獲得的分離組分往往不很純;而密度梯度離心則是較為精細的分離手段,這種方法的關(guān)鍵是
先在離心管中制備出蔗糖或氯化鈉等介質(zhì)的濃度梯度并將細胞勻漿裝在最上層,密度梯度的
介質(zhì)可以穩(wěn)定沉淀成分,防止對流混合,在此條件下離心,細胞不同組分將以不同速率沉降
并形成不同沉降帶。
六、論述題
1、試比較電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的區(qū)別。
答案要點:光學(xué)顯微鏡是以可見光為照明源,將微小的物體形成放大影像的光學(xué)儀器;而電
子顯微鏡則是以電子束為照明源,通過電子流對樣品的透射或反射及電磁透鏡的多級放大后
在熒光屏上成像的大型儀器。它們的不同在于:
①照明源不同:光鏡的照明源是可見光,電鏡的照明源是電子束;由于電子束的波長遠短于
光波波長,因而電鏡的放大率及分辨率顯著高于光鏡。
②透鏡不同:光鏡為玻璃透鏡;電鏡為電磁透鏡。
③分辨率及有效放大本領(lǐng)不同:光鏡的分辨率為0?2μm左右,放大倍數(shù)為IOOO倍;電鏡的
分辨率可達0.2nm,放大倍數(shù)106倍。
④真空要求不同:光鏡不要求真空;電鏡要求真空。
⑤成像原理不同:光鏡是利用樣品對光的吸收形成明暗反差和顏色變化成像;而電鏡則是利
用樣品對電子的散射和透射形成明暗反差成像。
⑥生物樣品制備技術(shù)不同:光鏡樣品制片技術(shù)較簡單,通常有組織切片、細胞涂片、組強壓
片和細胞滴片等;而電鏡樣品的制備較復(fù)雜,技術(shù)難度和費用都較高,在取材、固定、脫水
和包埋等環(huán)節(jié)上需要特殊的試劑和操作,還需要制備超薄切片
第四章細胞膜與細胞表面
一、名詞解釋
2、脂質(zhì)體;是根據(jù)磷脂分子可在水相中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的而制備的人工膜。
3、內(nèi)在蛋白;分布于磷脂雙分子層之間,以疏水氨基酸與磷脂分子的疏水尾部結(jié)合,結(jié)合
力較強。只有用去垢劑處理,使膜崩解后,才能將它們分離出來。
4、外周蛋白:為水溶性蛋白,靠離子鍵或其它弱鍵與膜表面的蛋白質(zhì)分子或脂分子極性頭
部非共價結(jié)合,易分離。
四、簡答題
1、簡述細胞膜的基本功能。
答案要點:(1)限定細胞的范圍,維持細胞的形狀。(2)具有高度的選擇性,(為半透膜)
并能進行主動運輸使細胞內(nèi)外形成不同的離子濃度并保持細胞內(nèi)物質(zhì)和外界環(huán)境之間的必
要差別。(3)是接受外界信號的傳感器,使細胞對外界環(huán)境的變化產(chǎn)生適當?shù)姆磻?yīng)。(4)與
細胞新陳代謝、生長繁殖、分化及癌變等重要生命活動密切相關(guān)。
第五章物質(zhì)的跨膜運輸
第八章細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
一、名詞解釋
1、載體蛋白:是一類膜內(nèi)在蛋白,幾乎所有類型的生物膜上存在的多次跨膜的蛋白質(zhì)分子。
通過與特定溶質(zhì)分子的結(jié)合,引起一系列構(gòu)象改變以介導(dǎo)溶質(zhì)分子的跨膜轉(zhuǎn)運。
2、細胞通訊一個細胞發(fā)出的信息通過介質(zhì)傳遞到另一個細胞產(chǎn)生相應(yīng)的反應(yīng)。對于多細
胞生物體的發(fā)生和組織的構(gòu)建,協(xié)調(diào)細胞的功能,控制細胞的生長、分裂、分化和凋亡是必
須的。
3、通道蛋白由幾個蛋白亞基在膜上形成的孔道,能使適宜大小的分子及帶電荷的溶質(zhì)通過
簡單的自由擴散運動從膜的一側(cè)到另一側(cè)。
4、分子開關(guān)細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中,通過結(jié)合GTP與水解GTP,或者通過蛋白質(zhì)磷酸化與去
磷酸化而開啟或關(guān)閉蛋白質(zhì)的活性。
5、鈉一鉀泵(Na+一K+pump)又稱Na+-K+ATPase,能水解ATP,使a亞基帶上磷酸集團
或去磷酸化,將Na+泵出細胞,而將K+泵入細胞的膜裝運載體蛋白。
6質(zhì)子泵質(zhì)子泵是位于細胞膜或細胞內(nèi)膜上的一種能主動轉(zhuǎn)運質(zhì)子(H+)的特殊蛋白質(zhì).
7、胞吞作用細胞攝取大分子和顆粒性物質(zhì)時,細胞膜向內(nèi)凹陷形成囊泡,將物質(zhì)裹進并
輸入細胞的過程。
8、胞吐作用攜帶有內(nèi)容物的膜泡與質(zhì)膜融合,將內(nèi)容物釋放到胞外的過程。
9、胞飲作用細胞對液體物質(zhì)或細微顆粒物質(zhì)的攝入和消化過程。
10、信號分子生物體內(nèi)的某些化學(xué)分子,如激素、神經(jīng)遞質(zhì)、生長因子等,在細胞間和細
胞內(nèi)傳遞信息,特稱為信號分子。
11、受體一種能夠識別和選擇性地結(jié)合某種配體(信號分子)的大分子,當與配體結(jié)
合后,通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用將胞外信號轉(zhuǎn)導(dǎo)為胞內(nèi)化學(xué)或物理的信號,以啟動一系列過程,最
終表現(xiàn)為生物學(xué)效應(yīng)。
12、第一信使:一般將胞外信號分子稱為第一信使。
13、第二信使:細胞表面受體接受胞外信號后最早在胞內(nèi)產(chǎn)生的信號分子。細胞內(nèi)重要的第
二信使有:cAMP,cGMPsDAG>IP3等。
15、G一蛋白由GTP控制活性的蛋白,當與GTP結(jié)合時具有活性,當與GDP結(jié)合時沒有活性。
既有單體形式(ras蛋白),也有三聚體形式(GS蛋白)。在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中起著分子開關(guān)的
作用。
16、G蛋白耦聯(lián)受體是指配體一受體復(fù)合物與靶蛋白的作用要通過與G蛋白的偶聯(lián),在細
胞內(nèi)產(chǎn)生第二信使,從而將胞外信號跨膜傳遞到胞內(nèi)影響細胞的行為。
17、組成型胞吐作用所有真核細胞都有的、從高爾基體反面管網(wǎng)區(qū)分泌的囊泡向質(zhì)膜流
動并與質(zhì)膜融合、將分泌小泡的內(nèi)含物釋放到細胞外的過程。此過程不需要任何信號的觸發(fā),
除了給細胞外提供酶、生長因子和細胞外基質(zhì)成分外,還為細胞膜提供膜整合蛋白和膜脂。
18、調(diào)節(jié)型胞吐作用某些特化的細胞(如分泌細胞)產(chǎn)生的分泌物(如激素、粘液或消
化酶)儲存在分泌泡內(nèi),當細胞受到胞外信號刺激時,分泌泡與質(zhì)膜融合并將內(nèi)含物釋放出
去的過程。
三、選擇題
1、下列不屬于第二信使的是(D)。
A、cΛMPB、CGMPC、DGD、NO
2、Na+-K+泵由ɑ、β兩個亞基組成,當ɑ亞基上的(C)磷酸化才可能引起α亞基構(gòu)象
變化,而將Na+泵出細胞外。
A、蘇氨酸B、酪氨酸C、天冬氨酸D、半胱氨酸
3、真核細胞的胞質(zhì)中,Na+和K+平時相對胞外,保持(C)o
A、濃度相等B、[Na+]高,[K+]低
C、[Na+]低,[K+]高D、[Na+]是[K+]的3倍
4、生長因子是細胞內(nèi)的(C
A、結(jié)構(gòu)物質(zhì)B、能源物質(zhì)C、信息分子D、酶
5、腎上腺素可誘導(dǎo)一些酶將儲藏在肝細胞和肌細胞中的糖原水解,第一個被激活的酶是
(D)。
A、蛋白激酶AB、糖原合成酶C、糖原磷酸化酶D、腺甘酸環(huán)化酶
6、RaS基因的哪一種突變有可能引起細胞的癌變(A)
A、突變后的RaS蛋臼不能水解GTPB、突變后的RaS蛋白不能結(jié)合GTP
C、突變后的RaS蛋白不能結(jié)合Grb2或SoSD、突變后的RaS蛋白不能結(jié)合Raf
7、(D)不是細胞表面受體。
A、離子通道B、醯連受體C、G蛋白偶聯(lián)受體D、核受體
8、動物細胞中cAMP的主要生物學(xué)功能是活化(A)。
A、蛋白激酶CB、蛋臼激酶AC、蛋白激酶KD、Ca2+激酶
9、在G蛋白中,α亞基的活性狀態(tài)是(A)。
A、與GTP結(jié)合,與BY分離B、與GTP結(jié)合,與BY聚合
C、與GDP結(jié)合,與BY分離D、與GTP結(jié)合,與BY聚合
五、簡答題
1、簡述細胞信號分子的類型及特點?
答案要點:細胞信號分子包括:短肽、蛋白質(zhì)、氣體分子(NO、Co)以及氨基酸、核甘酸、
脂類的膽固醇衍生物等,其共同特點是:①特異性,只能與特定的受體結(jié)合;②高效性,幾
個分子即可發(fā)生明顯的生物學(xué)效應(yīng),這一特性有賴于細胞的信號逐級放大系統(tǒng);③可被滅活,
完成信息傳遞后可被降解或修飾而失去活性,保證信息傳遞的完整性和細胞免于疲勞。
2、簡要說明由G蛋白偶聯(lián)的受體介導(dǎo)的信號的特點。
答案要點:G蛋白偶聯(lián)的受體是細胞質(zhì)膜上最多,也是最重要的倍轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng),具有兩個重要
特點:⑴信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)由三部分構(gòu)成:①G蛋白偶聯(lián)的受體,是細胞表面由單條多肽鏈經(jīng)7
次跨膜形成的受體;②G蛋白能與GTP結(jié)合被活化,可進一步激活其效應(yīng)底物;③效應(yīng)物:
通常是腺昔酸環(huán)化酶,被激活后可提高細胞內(nèi)環(huán)腺昔酸(CAMP)的濃度,可激活CAMP依賴
的蛋白激酶,引發(fā)一系列生物學(xué)效應(yīng)。⑵產(chǎn)生第二信使。配體一受體復(fù)合物結(jié)合后,通過與
G蛋白的偶聯(lián),在細胞內(nèi)產(chǎn)生第二信使,從而將胞外信號跨膜傳遞到胞內(nèi),影響細胞的行為。
根據(jù)產(chǎn)生的第二信使的不同,又可分為CAMP信號通路和磷酯酰肌醇信號通路。
CAMP信號通路的主要效應(yīng)是激活靶酶和開啟基因表達,這是通過蛋白激酶完成的。該
信號途徑涉及的反應(yīng)鏈可表示為:激素一G蛋白偶聯(lián)受體一G蛋白一腺昔酸環(huán)化化酶一cAMP
-cAMP依賴的蛋白激酶Af基因調(diào)控蛋白一基因轉(zhuǎn)錄。
磷酯酰肌醇信號通路的最大特點是胞外信號被膜受體接受后,同時產(chǎn)牛兩個胞內(nèi)信使,分別
啟動兩個信號傳遞途徑即IP3—Ca2+和DG—PKC途徑,實現(xiàn)細胞對外界信號的應(yīng)答,因此,
把這一信號系統(tǒng)又稱為“雙信使系統(tǒng)”。
六、論述題
1、試論述Na+-K+泵的結(jié)構(gòu)及作用機理。
答案要點:1、結(jié)構(gòu):由兩個亞單位構(gòu)成:一個大的多次跨膜的催化亞單位(α亞基)和一
個小的單次跨膜具組織特異性的糖蛋白(B亞基)。前者對Na+和ATP的結(jié)合位點在細胞質(zhì)
面,對K+的結(jié)合位點在膜的外表面。2、機制:在細胞內(nèi)側(cè),α亞基與Na+相結(jié)合促進ATP
水解,α亞基上的一個天門冬氨酸殘基磷酸化引起ɑ亞基的構(gòu)象發(fā)生變化,將Na+泵出細胞
外,同時將細胞外的K+與α亞基的另一個位點結(jié)合,使其去磷酸化,a亞基構(gòu)象再度發(fā)生
變化將K+泵進細胞,完成整個循環(huán)。Na+依賴的磷酸化和K+依賴的去磷酸化引起構(gòu)象變化有
序交替發(fā)生。每個循環(huán)消耗一個ATP分子,泵出3個Na+和泵進2個K+。
2、CAMP信號系統(tǒng)的組成及其信號途徑?
答案要點:1、組成:主要包括:RS和Gs;Ri和Gi;腺甘酸不化酶;PKA;環(huán)腺甘酸磷酸二
酯酶。2、信號途徑主要有兩種調(diào)節(jié)模型:GS調(diào)節(jié)模型,當激素信號與RS結(jié)合后,導(dǎo)致RS
構(gòu)象改變,暴露出與GS結(jié)合的位點,使激素-受體復(fù)合物與GS結(jié)合,GS的構(gòu)象發(fā)生改變從
而結(jié)合GTP而活化,導(dǎo)致腺昔酸環(huán)化酶活化,將ATP轉(zhuǎn)化為CAMP,而GTP水解導(dǎo)致G蛋白
構(gòu)象恢復(fù),終止了腺甘酸環(huán)化酶的作用。該信號途徑為:激素一識別并與G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)
合一激活G蛋白一活化腺甘酸環(huán)化酶一胞內(nèi)的CAMP濃度升高一激活PKAf基因調(diào)控蛋白一
基因轉(zhuǎn)錄。Gi調(diào)節(jié)模型,Gi對腺甘酸環(huán)化酶的抑制作用通過兩個途徑:一是通過α亞基與
腺甘酸環(huán)化酶結(jié)合,直接抑制酶的活性;一是通過B和Y亞基復(fù)合物與游離的GS的a亞基
結(jié)合,阻斷GS的a亞基對腺甘酸醐的活化作用。
第七章細胞質(zhì)基質(zhì)與細胞內(nèi)膜系統(tǒng)
一、名詞解釋
1、細胞質(zhì)基質(zhì):真核細胞的細胞質(zhì)中除去細胞器和內(nèi)含物以外的、較為均質(zhì)半透明的液態(tài)
膠狀物稱為細胞質(zhì)基質(zhì)或胞質(zhì)溶膠。
2、微粒體:為了研究ER的功能,常需要分離ER膜,用離心分離的方法將組織或細胞勻漿,
經(jīng)低速離心去除核及線粒體后,再經(jīng)超速離心,破碎ER的片段又封合為許多小囊泡(直徑
約為IOOnm),這就是微粒體。
3、糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng):細胞質(zhì)內(nèi)有一些形狀大小略不相同的小管、小囊連接成網(wǎng)狀,集中在胞質(zhì)
中,故稱為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的外表面附有核糖體顆粒,則為糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),為蛋白質(zhì)合成的
部位。核糖體附著的膜系多為扁囊單位成分,普遍存在于分泌蛋白質(zhì)的細胞中,其數(shù)量隨細
胞而異,越是分泌旺盛的細胞中越多。
6、溶酶體:溶酶體幾乎存在于所有的動物細胞中,是由單層膜圍繞、內(nèi)含多種酸性水解酶
類、形態(tài)不一、執(zhí)行不同生理功能的囊泡狀細胞器,主要功能是進行細胞內(nèi)的消化作用,在
維持細胞正常代謝活動及防御方面起重要作用。
8、蛋白質(zhì)分選:細胞中絕大多數(shù)蛋白質(zhì)均在細胞質(zhì)基質(zhì)中的核糖體上開始合成,隨后或在
細胞質(zhì)基質(zhì)中或轉(zhuǎn)至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成,然后,通過不同途徑轉(zhuǎn)運到細胞的特定部位并
裝配成結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)合體,參與細胞的生命活動的過程。又稱定向轉(zhuǎn)運。
9、信號假說:1975年CBIobel和D.Sabatini等根據(jù)進一步實驗依據(jù)提出,蛋白合成的位
置是由其N端氨基酸序列決定的。他們認為:⑴分泌蛋白在N端含有一信號序列,稱信號肽,
由它指導(dǎo)在細胞質(zhì)基質(zhì)開始合成的多肽和核糖體轉(zhuǎn)移到ER膜;⑵多肽邊合成邊通過ER膜上
的水通道進入ER腔。這就是“信號假說”。
12、信號肽:分泌蛋白的N端序列,指導(dǎo)分泌性蛋白到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上合成,在蛋白合成結(jié)束前
信號肽被切除。
三、選擇題
1、屬于溶酶體病的是(A)。
A、臺一薩氏病B、克山病C、白血病D、貧血病
2、真核細胞中,酸性水解酶多存在于(D)。
A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B、高爾基體C、中心體D、溶酶體
3、真核細胞中合成脂類分子的場所主要是(A)。
A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B、高爾基體C、核糖體D、溶酶體
4、被稱為細胞內(nèi)大分子運輸交通樞紐大細胞器是(B)。
A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B、高爾基體C、中心體D、溶酶體
5、下列哪組蛋白質(zhì)的合成開始于胞液中,在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成(C)。
A、膜蛋白、核定位蛋白B、分泌蛋白、細胞骨架
C、膜蛋白、分泌蛋白D、核定位蛋白、細胞骨架
6、細胞內(nèi)鈣的儲備庫是(B)。
A、細胞質(zhì)B、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)C、高爾基體D、溶酶體
7、質(zhì)子膜存在于(C)。
A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上B、高爾基體膜上C、溶酶體膜上D、過氧化物酶體膜上
8、細胞核內(nèi)的蛋白質(zhì)主要通過(B)完成。
A、跨膜運輸B、門控運輸C、膜泡運輸D、由核膜上的核糖體合成
五、簡答題
1、信號假說的主要內(nèi)容是什么?
答:分泌蛋白在N端含有一信號序列,稱信號肽,由它指導(dǎo)在細胞質(zhì)基質(zhì)開始合成的多肽和
核糖體轉(zhuǎn)移到ER膜;多肽邊合成邊通過ER膜上的水通道進入ER腔,在蛋白合成結(jié)束前信
號肽被切除。指導(dǎo)分泌性蛋白到糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的決定因素是N端的信號肽,信號識別顆
粒(SRP)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的信號識別顆粒受體(又稱停泊蛋白dockingprotein,DP)等因
子協(xié)助完成這一過程。
2、比較粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能?
4、筒述細胞質(zhì)基質(zhì)的功能。
:物質(zhì)中間代謝的重要場所;有細胞骨架的功能;蛋白質(zhì)的合成、修飾、降解和折疊。
56、蛋白質(zhì)糖基化的基本類型、特征及生物學(xué)意義?
7、已知的膜泡運輸有哪幾種類型?各自主要功能如何?
六、論述題
1、何為蛋白質(zhì)分選?細胞內(nèi)蛋白質(zhì)分選的基本途徑、分選類型是怎樣的?
答案要點:
蛋白質(zhì)的分選:細胞中絕大多數(shù)蛋白質(zhì)均在細胞質(zhì)基質(zhì)中的核糖體上開始合成,隨后或在細
胞質(zhì)基質(zhì)中或轉(zhuǎn)至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成,然后,通過不同途徑轉(zhuǎn)運到細胞的特定部位并裝
配成結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)合體,參與細胞的生命活動的過程。又稱定向轉(zhuǎn)運。
細胞中蛋白質(zhì)都是在核糖體上合成的,并都是起始于細胞質(zhì)基質(zhì)中?;就緩剑阂粭l
是在細胞質(zhì)基質(zhì)中完成多肽鏈的合成,然后轉(zhuǎn)運至膜圍繞的細胞器,如線粒體、葉綠體、過
氧化物酶體、細胞核及細胞質(zhì)基質(zhì)的特定部位,有些還可轉(zhuǎn)運至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中;另一條途徑是蛋
白質(zhì)合成起始后轉(zhuǎn)移至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),新生肽邊合成邊轉(zhuǎn)入糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中,隨后經(jīng)高爾基體
轉(zhuǎn)運至溶酶體、細胞膜或分泌到細胞外,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體本身的蛋白成分的分選也是通過
這一途徑完成的。
蛋白質(zhì)分選的四種基本類型:
1、蛋白質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運:主要指在細胞質(zhì)基質(zhì)合成的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、葉
綠體和過氧化物酶體等細胞器。
2、膜泡運輸:蛋白質(zhì)通過不同類型的轉(zhuǎn)運小泡從其糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成部位轉(zhuǎn)運至高爾基
體進而分選運至細胞不同的部位。
3、選擇性的門控轉(zhuǎn)運:指在細胞質(zhì)基質(zhì)中合成的蛋白質(zhì)通過核孔復(fù)合體選擇性地完成
核輸入或從細胞核返回細胞質(zhì)。
4、細胞質(zhì)基質(zhì)中的蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)運
第九章細胞骨架
一、名詞解釋
1、細胞骨架:由微管、微絲和中間絲組成的蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),具有為細胞提供結(jié)構(gòu)支架、維
持細胞形態(tài)、負責(zé)細胞內(nèi)物質(zhì)和細胞器轉(zhuǎn)運和細胞運動等功能。
3、微管;在真核細胞質(zhì)中,由微管蛋白構(gòu)成的,可形成紡錘體、中心體及細胞特化結(jié)構(gòu)鞭
毛和纖毛的結(jié)構(gòu)。
4、微絲;在真核細胞的細胞質(zhì)中,由肌動蛋白和肌球蛋白構(gòu)成的,可在細胞形態(tài)的支持及
細胞肌性收縮和非肌性運動等方面起重要作用的結(jié)構(gòu)。
5、中間纖維;存在于真核細胞質(zhì)中的,由蛋白質(zhì)構(gòu)成的,其直徑介于微管和微絲之間,在
支持細胞形態(tài)、參與物質(zhì)運輸?shù)确矫嫫鹬匾饔玫睦w維狀結(jié)構(gòu)。
6、微管組織中心(MTOC);存在于真核細胞質(zhì)中的,由蛋白質(zhì)構(gòu)成的,其直徑介于微管和微
絲之間,在支持細胞形態(tài)、參與物質(zhì)運輸?shù)确矫嫫鹬匾饔玫睦w維狀結(jié)構(gòu)。
7、肌球蛋白;依賴于維絲的分子馬達。
8、分子馬達;主要是指依賴于圍觀的驅(qū)動蛋白、動力蛋白和依賴于維斯的肌球蛋白。
三、選擇題
1、細胞骨架是由哪幾種物質(zhì)構(gòu)成的(D)。
A、糖類B、脂類C、核酸D、蛋白質(zhì)E.以上物質(zhì)都包括
2.下列哪種結(jié)構(gòu)不是由細胞中的微管組成(D
A、鞭毛B、纖毛C、中心粒D、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)E、以上都不是
3.關(guān)于微管的組裝,哪種說法是錯誤的(E)。
A、微管可隨細胞的生命活動不斷的組裝與去組裝B、微管的組裝分步進行
C.微管的極性對微管的增長有重要意義
D、微管蛋白的聚合和解聚是可逆的自體組裝過程E、微管兩端的組裝速度是相同的
4.在電鏡下可見中心粒的每個短筒狀小體(C
A、由9組二聯(lián)微管環(huán)狀斜向排列B、由9組單管微管環(huán)狀斜向排列
C、由9組三聯(lián)微管環(huán)狀斜向排列D、由9組外圍微管和一個中央微管排列
E、由9組外圍微管和二個中央微管排列
5、組成微絲最主要的化學(xué)成分是(A)。
A、球狀肌動蛋白B、纖維狀肌動蛋白C、原肌球蛋白D、肌鈣蛋白E、錨定蛋白
6、能夠?qū)R灰种莆⒔z組裝的物質(zhì)是(B)。
A、秋水仙素B、細胞松弛素BC、長春花堿I)、鬼筆環(huán)肽E、Mg'
7.在非肌細胞中,微絲與哪種運動無關(guān)(C)。
A、支持作用B、吞噬作用C、主動運輸D、變形運動E、變皺膜運動
8、在微絲的組成成分中,起調(diào)節(jié)作用的是(A)。
A、原肌球蛋白B、肌球蛋白C、肌動蛋白D、絲狀蛋白E、組帶蛋白
五、簡答題
1、微絲的化學(xué)組成及在細胞中的功能。
微絲的化學(xué)組成:主要成分為肌動蛋白和肌球蛋白,肌球蛋白起控制微絲的形成、連接、蓋
帽、切斷的作用,也可影響微絲的功能。其他成分為調(diào)節(jié)蛋白、連接蛋白、交聯(lián)蛋白。
微絲的功能:(1)與微管共同組成細胞的骨架,維持細胞的形狀。(2)具有非肌性運動功
能,與細胞質(zhì)運動、細胞的變形運動、胞吐作用、細胞器與分子運動、細胞分裂時的膜縊縮
有關(guān)。(3)具有肌性收縮作用(4)與其他細胞器相連,關(guān)系密切。(5)參與細胞內(nèi)信號
傳遞和物質(zhì)運輸。
2、什么是微管組織中心,它與微管有何關(guān)系。
答:微管組織中心是指微管裝配的發(fā)生處。它可以調(diào)節(jié)微管蛋白的聚合和解聚,
使微管增長或縮短。而微管是由微管蛋白組成的一個結(jié)構(gòu)。二者有很大的不同,
但又有十分密切的關(guān)系。微管組織中心可以指揮微管的組裝與去組裝,它可以根
據(jù)細胞的生理需要,調(diào)節(jié)微管的活動。如在細胞有絲分裂前期,根據(jù)染色體平均
分配的需要,從微管組織中心:中心粒和染色體著絲粒處進行微管的裝配形成紡
錘體,到分裂末期,紡錘體解聚成微管蛋白。所以說,微管組織中心是微管活動
的指揮
3、簡述中間纖維的結(jié)構(gòu)及功能。
答:中間纖維的直徑約7?12nm的中空管狀結(jié)構(gòu),由4或8個亞絲組成。單獨或成束存在
于細胞中。中間纖維具有一個較穩(wěn)定的310個氨基酸的α螺旋組成的桿狀中心區(qū),桿狀區(qū)兩
端為非螺旋的頭部區(qū)(N端)和尾部區(qū)(C端)。頭部區(qū)和尾部區(qū)由不同的氨基酸構(gòu)成,為
高度可變區(qū)域。
功能:(1)支持和固定作用:支持細胞形態(tài),固定細胞核。(2)物質(zhì)運輸和信息傳遞作用:
在細胞質(zhì)中與微管、微絲共同完成物質(zhì)的運輸,在細胞核內(nèi),與DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄有關(guān).(3)
細胞分裂時,對紡錘體和染色體起空間支架作用,負責(zé)子細胞內(nèi)細胞器的分配與定位。(4)
在細胞癌變過程中起調(diào)控作用。
六、論述題
1、比較微管、微絲和中間纖維的異同。
答:微管、微絲和中間纖維的相同點:(1)在化學(xué)組成上均由蛋白質(zhì)構(gòu)成。(2)在結(jié)構(gòu)上
都是纖維狀,共同組成細胞骨架。(30在功能都可支持細胞的形狀;都參與細胞內(nèi)物質(zhì)運
輸和信息的傳遞;都能在細胞運動和細胞分裂上發(fā)揮重要作用。微管、微絲和中間纖維的不
同點:(1)在化學(xué)組成上均由蛋白質(zhì)構(gòu)成,但三者的蛋白質(zhì)的種類不同,而且中等纖維在
不同種類細胞中的基本成分也不同。(2)在結(jié)構(gòu)上,微管和中間纖維是中空的纖維狀,微
絲是實心的纖維狀。微管的結(jié)構(gòu)是均一的,而中等纖維結(jié)構(gòu)是為中央為桿狀部,兩側(cè)為頭部
或尾部。(3)功能不同:微管可構(gòu)成中心粒、鞭毛或纖毛等重要的細胞器和附屬結(jié)構(gòu),在
細胞運動時或細胞分裂時發(fā)揮作用:微絲在細胞的肌性收縮或非肌性收縮中發(fā)揮作用,使細
胞更好的執(zhí)行生理功能;中等纖維具有固定細胞核作用,行使子細胞中的細胞器分配與定位
的功能,還可能與DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄有關(guān)。
總之,微管、微絲和中間纖維是真核細胞內(nèi)重要的非膜相結(jié)構(gòu),共同擔(dān)負維持細胞形態(tài),細
胞器位置的固定及物質(zhì)和信息傳遞重要功能。
2、試述微管的化學(xué)組成、類型和功能。
答;微管的化學(xué)組成:主要化學(xué)成分為微管蛋白,為酸性蛋白。其他化學(xué)成分為微管結(jié)合蛋
白包括為微管相關(guān)蛋白、微管修飾蛋白、達因蛋白。微管的類型:單微管、二聯(lián)管、三聯(lián)管。
微管的功能:(1)構(gòu)成細胞的網(wǎng)狀支架,維持細胞的形態(tài)。(2)參與細胞器的分布與運動,
固定支持細胞器的位置(3)參與細胞收縮和偽足運動,是鞭毛纖毛等細胞運動器官的基本
組成成分。(4)參與細胞分裂時染色體的分離和位移。(5)參與細胞物質(zhì)運輸和傳遞。
第十章細胞核與染色體
一、名詞解釋
1、染色體;是細胞在有絲分裂或減數(shù)分裂過程中,由染色質(zhì)聚縮而成的棒狀結(jié)構(gòu),是細胞
分裂期遺傳物質(zhì)存在的特定形式。
2、染色質(zhì);指間期細胞核內(nèi)能被堿性物質(zhì)染色的,由DNA,組蛋白、非組蛋白及少量RNA
組成的線性復(fù)合結(jié)構(gòu),是間期細胞遺傳物質(zhì)的存在形式。常伸展為非光鏡所能看到的網(wǎng)狀細
纖絲。
3、常染色質(zhì);間期核內(nèi)染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度低,處于伸展狀態(tài),用堿性染料染色時著
色淺的染色質(zhì)組分。
4、異染色質(zhì);間期核內(nèi)染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度高,處于聚縮狀態(tài),用堿性染料染色時著
色深的染色質(zhì)組分
5、核小體I;染色體的基本結(jié)構(gòu)單位,是由組蛋白和200個堿基對的DNA雙螺旋組成的球形
小體,其核心由四種組蛋白(H2A、H2B、H3、H4)各兩分子共8分子組成的八聚體,核心的
外面纏繞了L75圈的DNA雙螺旋,其進出端結(jié)合有Hl組蛋白分子。
6、核型;即細胞分裂中期染色體特征的總和。包括染色體的數(shù)目、大小和形態(tài)特征等方面
7、核型分析;
8、核定位信號;親核蛋白一般都含有特殊的氨基酸序列,這些內(nèi)含的特殊短肽保證了整個
蛋白質(zhì)能夠通過核孔復(fù)合體被轉(zhuǎn)運到細胞核內(nèi)。這段具有“定向”“定位”作用的序列被命
名為核定位序列或核定位信號(親核蛋白的特殊氨基酸序列,具有定向、定位的作用,保證
蛋白質(zhì)能夠通過核孔復(fù)合體轉(zhuǎn)運到細胞核內(nèi))。
9、端粒;位于每條染色體端部,為染色體端部的異染色質(zhì)結(jié)構(gòu),由高度重復(fù)的DNA序列構(gòu)
成,高度保守。主要功能是維持染色體穩(wěn)定,防止末端粘連和重組,并能錨定染色體于細胞
核內(nèi),輔助線性DNA復(fù)制等,與染色體在核內(nèi)的空間排布及減數(shù)分裂時同源染色體配對有關(guān);
起著細胞計時器的作用.
三、選擇題
1、真核細胞間期核中最顯著的結(jié)構(gòu)是(C)。
A、染色體B、染色質(zhì)C、核仁D、核纖層
3、每個核小體基本單位包括多少個堿基是(B)。
A、IOObpB、200bpC、300bpD、400bp
2、從氨基酸序列的同源比較上看,核纖層蛋白屬于(C)。
A、微管B、微絲C、中間纖維D、核蛋白骨架
3、細胞核被膜常常與胞質(zhì)中的(B)相連通。
A、光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)C、高爾基體D、溶酶體
4、下面有關(guān)核仁的描述錯誤的是(D)。
A、核仁的主要功能之一是參與核糖體的生物合成B、rDNA定位于核仁區(qū)內(nèi)
C、細胞在M期末和S期重新組織核仁D、細胞在G2期,核仁消
5、下列(A)組蛋白在進化上最不保守。
A、HlB、H2AC、H3D、H4
6、構(gòu)成染色體的基本單位是(B)。
A、DNAB、核小體C、螺線管D、超螺線管
7、染色體骨架的主要成分是(B)。
A、組蛋白B、非組蛋白C、DNAD、RNA
8、異染色質(zhì)是(B)。
A、高度凝集和轉(zhuǎn)錄活躍的B、高度凝集和轉(zhuǎn)錄不活躍的
C、松散和轉(zhuǎn)錄活躍的D、松散和轉(zhuǎn)錄不活躍的
五、簡答題
1、簡述細胞核的基本結(jié)構(gòu)及其主要功能。
、細胞核是真核細胞內(nèi)最大、最重要的細胞器,主要由核被膜、染色質(zhì)、核仁及由非組蛋白
質(zhì)組成的網(wǎng)絡(luò)狀的核基質(zhì)組成,是遺傳信息的貯存場所,是細胞內(nèi)基因復(fù)制和RNA轉(zhuǎn)錄的中
心,是細胞生命活動的調(diào)控中心
2、簡述染色質(zhì)的類型及其特征。
間期染色質(zhì)按其形態(tài)特征和染色性能區(qū)分為兩種類型:常染色質(zhì)和染色質(zhì)染色質(zhì)。常染色質(zhì)
纖維折疊壓縮程度低,處于伸展狀態(tài),用堿性染料染色時著色淺。構(gòu)成常染色質(zhì)的DNA主要是
單一序列DNA和中度重復(fù)序列DNA。異染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度高,處于聚縮狀態(tài),用堿性
染料染色時著色較深,又分結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)或組成型異染色質(zhì)和兼性異染色質(zhì)。
3、愉述核仁的結(jié)構(gòu)及其功能。
在光學(xué)顯微鏡下,核仁通常是勻質(zhì)的球形小體,一般有『2個,但也有多個。主要含蛋白質(zhì),
是真核細胞間期核中最明顯的結(jié)構(gòu),在電鏡下顯示出的核仁超微結(jié)構(gòu)與胞質(zhì)中大多數(shù)細胞器
不同,在核仁周圍沒有界膜包圍,可識別出3個特征性區(qū)域:纖維中心、致密纖維組分、顆
粒組分。功能是進行核蛋白體的生物發(fā)生的重要場所,即核仁是進行rRNA的合成、加工和
核蛋白體亞單位的裝配的重要場所。
5、組蛋白如何參與表觀遺傳調(diào)控?
組蛋白修飾主要包括甲基化、乙?;⒘姿峄?。其參與調(diào)控的方式主要包括:1,改變
空間結(jié)構(gòu),因為基因平時是以染色體形式存在的,在轉(zhuǎn)錄時需要通過組蛋白的改變打開,放
轉(zhuǎn)錄因子進入。2,作用于特定轉(zhuǎn)錄元件。3,和DNA甲基化進行相互作用,來調(diào)控表達變
化。
六、論述題
1、試述核孔復(fù)合體的結(jié)構(gòu)及其功能。
核孔復(fù)合體主要有下列結(jié)構(gòu)組分:
①、胞質(zhì)環(huán)
位于核孔邊緣的胞質(zhì)面一側(cè),又稱外環(huán),環(huán)上有8條短纖維對稱分布伸向胞質(zhì);
②、核質(zhì)環(huán)
位于核孔邊緣的核質(zhì)面(又稱內(nèi)環(huán)),環(huán)上8條纖維伸向核內(nèi),并且在纖維末端形成一個小
環(huán),使核質(zhì)環(huán)形成類似"捕魚籠"(fish-trap)的核籃(nuclearbasket)結(jié)構(gòu);
③、輻
由核孔邊緣伸向核孔中央,呈輻射狀八重對稱,該結(jié)構(gòu)連接內(nèi)、外環(huán)并在發(fā)揮支撐及形成核
質(zhì)間物質(zhì)交換通道等方面起作用;它的結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,可進一步分為三個結(jié)構(gòu)域:⑴柱狀亞
單位:主要的區(qū)域,位于核孔邊緣,連接內(nèi)、外環(huán),起支撐作用;⑵腔內(nèi)亞單位:柱狀亞單
位以外,接觸核膜部分的區(qū)域,穿過核膜伸入雙層核膜的膜間腔;⑶環(huán)帶亞單位:在柱狀亞
單位之內(nèi),靠近核孔復(fù)合體中心的部分,由8個顆粒狀結(jié)構(gòu)環(huán)繞形成核孔復(fù)合體核質(zhì)交換的
通道。
④、中央栓
位于核孔的中心,呈顆粒狀或棒狀,又稱為中央顆粒,由于推測它在核質(zhì)交換中起一定的作
用,所以又把它稱做轉(zhuǎn)運器(transporter)
核孔復(fù)合體是一種特殊的跨膜運輸?shù)鞍讖?fù)合體,并且是一個雙功能、雙向性的親水性核質(zhì)交
換通道,雙功能表現(xiàn)在它有兩種運輸方式:被動擴散與主動運輸;雙向性表現(xiàn)在既介導(dǎo)蛋白
質(zhì)的入核轉(zhuǎn)運,又介導(dǎo)RNA、核糖核蛋白顆粒(RNP)的出核轉(zhuǎn)運。
2、試述核小體的結(jié)構(gòu)要點及其實驗證據(jù)。
結(jié)構(gòu)要點:⑴每個核小體單位包括200bp左右的DNA超螺旋和一個組蛋白八聚體及一個分子
Hl0
⑵、組蛋白八聚體構(gòu)成核小體的盤狀核心結(jié)構(gòu),由4個異二聚體組成,包括兩個II2A-H2B
和兩個113-114?兩個113-114形成4聚體位于核心顆粒中央,兩個H2A-H2B二聚體分別位于4
聚體兩側(cè)。每個異二聚體通過離子健和氫鍵結(jié)合約30bpDNA0
⑶、146bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體L75圈,組蛋白Ill在核心顆粒外結(jié)合額外
20bpDNA,鎖住核小體DNA的進出端,起穩(wěn)定核小體的作用。包括組蛋白IIl和166bpDNA
的核小體結(jié)構(gòu)又稱染色質(zhì)小體。
⑷、兩個相鄰核小體之間以連接DNA相連,典型長度60bp,不同物種變化值為0?80bp。
實驗證據(jù):
a、用溫和的方法裂解細胞核,鋪展染色質(zhì),電鏡觀察
未經(jīng)處理的染色質(zhì)自然結(jié)構(gòu)為30nm的纖絲,經(jīng)鹽溶液處理后解聚的染色質(zhì)呈現(xiàn)IOnm串珠狀
結(jié)構(gòu)。
b、用非特異性微球菌核酸酶消化染色質(zhì),經(jīng)過蔗糖梯度離心及瓊脂糖凝膠電泳分析,發(fā)現(xiàn)
絕大多數(shù)DNA被降解成約200bp的片段;部分酶解,則得到的片段是以20ObP不單位的單體、
二體(400bp),三體(60ObP)等等。如果用同樣的方法處理裸露的DNA,則產(chǎn)生隨機大小
的片段群體,由此顯示染色體DNA除某些周期性位點之外,均受到某種結(jié)構(gòu)的保護,避免酶
的接近。
c、應(yīng)用X射線衍射、中子散射和電鏡三維重建技術(shù)研究,發(fā)現(xiàn)核小體顆粒是直徑為IInm、
高6.Onm的扁園柱體,具有二分對稱性,核心組蛋白的構(gòu)成是先形成(H3)2?(H4)2四聚
體,然后再與兩個H2A?H2B異二聚體結(jié)合形成八聚體。
d、SV40微小染色體(minichromosome)分析與電鏡觀察:用SV40病毒感染細胞,病毒DNA
進入細胞后,與宿主的組蛋白結(jié)合,形成串珠狀微小染色體,電鏡觀察到SV40DNA為環(huán)狀,
周長為150Onn1,約含5.0kb0若20ObP相當于一個核小體,則可形成25個核小體,實際觀
察到23個,與推斷基本一致。
3、試述從DNA到染色體的包裝過程(多級螺旋模型)。
、a、由DNA與組蛋白包裝成核小體,在組蛋白Hl的介導(dǎo)下核小體彼此連接形成直徑約IOmn
的核小體串珠結(jié)構(gòu),這是染色質(zhì)包裝的一級結(jié)構(gòu);b、在有組蛋白Hl存在的情況下,由直徑
IOnm的核小體串珠結(jié)構(gòu)螺旋盤繞,每圈6個核小體,形成外徑30nm,內(nèi)徑Ionnι,螺距IInm
的螺線管。螺線管是染色質(zhì)包裝的二級結(jié)構(gòu)。C、螺線管進一步螺旋化形成直徑為0.4Unl的
圓筒狀結(jié)構(gòu),稱為超螺線管,這是染色質(zhì)包裝的三級結(jié)構(gòu)。d、超螺線管進一步折疊、壓縮,
形成長2-10Um的染色單體,即四級結(jié)構(gòu)。
率壓縮7倍b壓縮6倍壓縮40倍壓縮5倍
DNA核小體螺線管超螺線管染色單體
(20ObP長約70nπι)(直徑約IOnm)(直徑30nm,螺距IInnI)(直徑40OnIn長1l~60um)
(長2?IOUm)
第十二章細胞增殖及其調(diào)控
一、名詞解釋
1、細胞周期:連續(xù)分裂的細胞,從上一次有絲分裂結(jié)束開始到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷
的整個過程。在這個過程中,細胞遺傳物質(zhì)復(fù)制,各組分加倍,平均分配到兩個子細胞中。
2、細胞周期檢驗點:在細胞內(nèi)存在一系列的監(jiān)控機制,可以鑒別細胞周期進程中的錯誤,
并誘導(dǎo)產(chǎn)生特異的抑制因子,阻止細胞周期的進行,這些監(jiān)控機制稱為檢驗點。不僅存在于
Gl期,也存在于細胞周期的其他時期。
3、細胞同步化:在自然過程中發(fā)生的或因研究工作的需要,為得到具有分裂能力且細胞時
相一致的細胞群體的方法。
4、染色體的早期凝集:將細胞同步化在細胞周期的不同時期,通過細胞融合,將M期細胞
與其他間期細胞融合后培養(yǎng)一段時間,與M期細胞融合的間期細胞發(fā)生了形態(tài)各異的染色體
凝集現(xiàn)象。
5、MPF(細胞促分裂因子):又稱促成熟因子或M期促進因子,是指存在于成熟卵細胞的細
胞質(zhì)中,可以誘導(dǎo)卵細胞成熟的一種活性物質(zhì)。已經(jīng)證明,MPF是一種蛋白激酶,包括兩個
亞基即CdC2蛋白和周期蛋白,當二者結(jié)合后表現(xiàn)出蛋白激酶活性,可以使多種蛋白質(zhì)底物
磷酸化;MPF是一種普遍存在的、進化上較保守的G2/M轉(zhuǎn)換調(diào)控者。
6、周期中細胞:又稱周期細胞或連續(xù)分裂的細胞,是指在細胞周期中連續(xù)運轉(zhuǎn)不斷分裂,
保持分裂能力的細胞。
7、靜止期細胞:又稱GO期細胞或靜止期細胞,是指暫時脫離細胞周期不進行增殖,但在適
當?shù)拇碳は?,可重新進入細胞周期的細胞。
8、細胞周期蛋白:與細胞周期調(diào)控有關(guān)的、其含量隨細胞周期進程變化而變化的特殊蛋白
質(zhì)。最初在海膽卵中發(fā)現(xiàn),一般在細胞間期內(nèi)積累,在細胞分裂期內(nèi)消失,在下一個細胞周
期又重復(fù)這一消長現(xiàn)象,即在每一輪間期合成,G2/M時達到高峰,M期結(jié)束時被水解,下一
輪周期又重新合成積累。已經(jīng)證明周期蛋白廣泛存在于各種真核生物中,是誘導(dǎo)細胞進入M
期必需的,說明周期蛋白是細胞周期的調(diào)控者,可能參與了MPF功能的調(diào)節(jié),是MPF的一部
分。
13、細胞分裂周期基因:是指與細胞分裂和細胞周期有關(guān)的基因,稱為CdC基因。
10、CDK抑制因子(CKI):是細胞內(nèi)存在的一些對CDK激酶活性起負調(diào)作用的蛋白質(zhì)。它是
能與CDK激酶結(jié)合并抑制其活性的一類蛋白質(zhì),具有確保細胞周期高度時序性的功能,在細
胞周期的負調(diào)控過程中起著重要作用。
Ik周期蛋白依賴性激酶(CDK):是與細胞周期進程相對應(yīng)的一套Ser/Thr激酶系統(tǒng)。各種
CDK沿細胞周期時相交替活化,磷酸化相應(yīng)底物,使細胞周期事件有條不紊地進行下去。
12、DNA合成阻斷法:通過使用DNA合成抑制劑,特異性地抑制DNA的合成,將細胞阻斷在
G1/S交界處的細胞同步化方法。
13、中期阻斷法:經(jīng)過藥物處理,抑制微管的形成,從而抑制有絲分裂器的形成,將細胞阻
斷在細胞分裂中期的同步化方法。
16、轉(zhuǎn)錄因子E2F它調(diào)控的基因有周期蛋白E和A,它們與CDK2結(jié)合復(fù)合物是使細胞從
Gl進入S期轉(zhuǎn)變所必須的。
17、p53:腫瘤抑制基因,在DNA受到損傷時,它通過激活和抑制基因的轉(zhuǎn)錄,而起著阻斷
細胞周期和誘導(dǎo)細胞凋亡的作用。。
8、細胞周期中重要的檢驗點包括R點、Gl/S、G2/M和中期/后期。
三、選擇題
1、在細胞分裂中期與紡錘體的動粒微管相連,保證染色體平均分配到兩個子細胞中的結(jié)構(gòu)
是(D)o
A、復(fù)制源B、著絲粒C、端粒D、動粒
2、關(guān)于細胞周期限制點的表述,錯誤的是(A)o
A、限制點對正常細胞周期運轉(zhuǎn)并不是必需的
B、它的作用是細胞遇到環(huán)境壓力或DNA受到損傷時使細胞周期停止的“剎車”作用,對細胞
進入下一期之前進行“檢查”。
C、細胞周期有四個限制點:Gl/S,S/G2、G2/M和M/Gl限制點
3、MPF的分子組成是(B)o
A、CDK2和CyCIinBB、CDKl和CyClinBC、CDK4和CyClinDD、CDK2和CyCIinD
4、細胞周期正確的順序是(D)。
A、Gl-M-G2-SB、Gl-G2-S-MC、Gl-M-G2-SD、G1-S-G2-M
5、CDK是否具有酶活性依賴于(D)。
A、與周期蛋白的結(jié)合B、CDK本身的磷酸化C、A、B都必須D、A、B還不夠
7、MPF的主要作用是調(diào)控細胞周期中(B)。
A、Gl期向S期轉(zhuǎn)換B、G2期向M期轉(zhuǎn)換C、中期向后期轉(zhuǎn)換I)、S期向G2期轉(zhuǎn)換
8、核仁的消失發(fā)生在細胞周期的(C)。
A、GI期B、S期C、M期D、G2期
9、休眠期細胞是暫時脫離細胞周期,不進行增殖,但在適當刺激下可以重新進入細胞周期
的細胞,下列屬于休眠期細胞的是(C)。
A、肝細胞B、神經(jīng)細胞C、小腸上皮組織基底層細胞D、肌細胞
10、在細胞周期的G2期,細胞核的DNA含量為Gl期的(C)。
A、1/2倍B、1倍C、2倍D、不變
IkGO期細胞一般是從(A)即脫離了細胞周期。
A、Gl期B、S期C、G2期D、M期
12、MPF不能促進(B)o
A、卵母細胞成為卵細胞B、卵巢發(fā)育C、G2期向M期轉(zhuǎn)化D、蛋白質(zhì)磷酸化
13、在有絲分裂過程中,使用(A)可以抑制紡錘體的形成。
A、秋水仙素B、紫杉酚C、羥基麻D、細胞松弛素B
五、簡答題
1、什么是細胞周期?細胞周期各時期主要變化是什么?
答案要點:連續(xù)分裂的細胞,從上一次有絲分裂結(jié)束開始到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整
個過程。在這個過程中,細胞遺傳物質(zhì)復(fù)制,各組分加倍,平均分配到兩個子細胞中。
細胞周期被劃分為四個時期:Gl期(復(fù)制前期,M期結(jié)束至S期間的間隙)、S期(復(fù)
制期,DNA合成期)、G2期(復(fù)制后期,S期結(jié)束至M期間的間隙)、M期(有絲分裂期)。在
正常情況下,細胞沿著Gl-S-G2-M運轉(zhuǎn),細胞通過M期被分裂為兩個子細胞,完成增殖
過程。Gl期:主要合成細胞生長所需要的各種蛋白質(zhì)、RNA、糖類、脂質(zhì)等。S期:主要進
行DNA的復(fù)制和組蛋白的合成。G2期:此時DNA的含量己增加一倍。此時主要進行其他蛋
白質(zhì)的合成。M期:主要進行染色體的分離、胞質(zhì)分裂,一個細胞分裂為兩個子細胞。
2、細胞周期人工同步化有哪些方法?比較其優(yōu)缺點。
答案要點:(1)、選擇同步化包括:
①有絲分裂選擇法:優(yōu)點:同步化程度高,細胞不受藥物侵害。缺點:得到的細胞數(shù)量少。
②密度梯度離心法:優(yōu)點:簡單省時,效率高、成本低。缺點:對大多數(shù)種類的細胞并不適
用。
(2)、誘導(dǎo)同步化包括:
(I)DNA合成阻斷法:優(yōu)點:同步化效率高,幾乎適合于所有體外培養(yǎng)的細胞體系。缺點:
誘導(dǎo)過程可造成細胞非均衡生長.
⑵中期阻斷法:優(yōu)點:操作簡便,效率高;缺點:藥物毒性作用較大。
3、細胞周期中有哪些主要檢驗點?細胞周期檢驗點的生理作用是什么?
答案要點:細胞周期檢驗點主要有:R點,Gl/S,G2/M,中期/后期,即:Gl期中的R點或
限制點,S期的DNA損傷檢驗點、DNA復(fù)制檢驗點,G2/M檢驗點,M中期至M后期又稱紡錘
體組裝檢驗點等。
通過細胞周期檢驗點的調(diào)控使細胞周期能正常動轉(zhuǎn),從而保證了遺傳物質(zhì)能精確地均等
分配,產(chǎn)生具有正常遺傳性能和生理功能的子代細胞,如果上述檢驗點調(diào)控作用丟失,就會
導(dǎo)致基因突變、重排,使細胞遺傳性能紊亂,增殖、分化異常,細胞癌變甚至死亡。
六、論述題
1、什么是MPF?如何證明某一細胞提取液中有MPF?
答案要點:又稱促成熟因子或M期促進因子,是指存在于成熟卵細胞的細胞質(zhì)中,可以誘導(dǎo)
卵細胞成熟的一種活性物質(zhì)。已經(jīng)證明,MPF是一種蛋白激酶,包括兩個亞基即Cdc2蛋白
和周期蛋白,當二者結(jié)合后表現(xiàn)出蛋白激酶活性,可以使多種蛋白質(zhì)底物磷酸化。
將該細胞提取液注射到新的未成熟的卵母細胞中,檢測該卵母細胞是否能夠被誘導(dǎo)成熟,若
能,則證明該細胞提取液中存在MPF。
4、細胞周期中有哪些主要檢驗點?細胞周期檢驗點的生理作用是什么?
細胞周期檢驗點主要有:R點,Gl/S,G2/M,中期/后期,即:Gl期中的R點或限制點,S
期的DNA損傷檢驗點、DNA復(fù)制檢驗點,G2/M檢驗點,M中期至M后期又稱紡錘體組
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