廣東蟲草與冬蟲夏草及蛹蟲草的成分比較

廣東蟲草與冬蟲夏草及蛹蟲草的成分比較目前,全球已發(fā)現(xiàn)的蟲草屬(Cordyceps)種類有450多種,我國已報道的就超過了100種,廣東地區(qū)約占全國的30%[1,2]。研究表明,蟲草富含腺苷、蟲草素、蟲草酸等活性成分和多種氨基酸、微量元素、維生素等營養(yǎng)成分[3~5],蟲草屬真菌具有抗腫瘤、抗病原、抗氧化、以及增強人體免疫功能等多種藥理作用[4,6,7]。盡管蟲草資源豐富且功效顯著,但被開發(fā)利用的種類還十分有限,只有冬蟲夏草(C.sinensis)和蛹蟲草(C.militaris)得到廣泛的研究和利用[8~10]。廣東蟲草(C.guangdongensisT.H.Li,Q.Y.Lin&B.Song)是作者在廣東地區(qū)采集的一種野生蟲草,經(jīng)分離純化后,成功獲得菌種并栽培獲得與野生狀態(tài)類似的蟲草子實體[11,12]。本文對栽培獲得的廣東蟲草子實體的腺苷、蟲草素、蟲草酸等有效成分和粗蛋白、水解氨基酸等營養(yǎng)成分進行了分析,并與冬蟲夏草和蛹蟲草進行比較,為其開發(fā)利用提供依據(jù)。材料與方法材料廣東蟲草和蛹蟲草子實體由廣東省微生物研究所提供 ,冬蟲夏草子實體采自西藏自治區(qū)那曲地區(qū)，均于60C烘至恒重，粉碎,過20目篩。HPLC流動相試劑為色譜純，其余試劑均為分析純。成分測定蟲草素和腺苷蟲草素和腺苷含量用HPLC島津LC-20A)檢測,測定條件:色譜柱C18(4.6mmx250mm,5卩m),流動相乙腈：水(7:93),流速1.0mL/min,柱溫30°C,二極管陣列檢測器,檢測波長260nm,進樣量10卩L。注射不同濃度的蟲草素和腺苷,根據(jù)標樣峰面積繪制標準曲線。0.5g樣品粉末置25mL容量瓶內(nèi)，加入適量50%乙醇,搖勻,超聲提取30min(AutoscienceAS5150A),用雙蒸水定容,搖勻,提取液過0.45卩m濾膜,收集濾液，按上述條件上HPLC根據(jù)標準曲線計算蟲草素和腺苷含量。蟲草酸HPLC島津LC-20A)測定條件:色譜柱為氨基柱(HRC-NH2),流動相乙腈：水(80：20),流速2.0mL/min,柱溫35C,示差折光檢測器,進樣量20卩L。注射不同濃度的甘露醇，根據(jù)標樣峰面積繪制標準曲線。2g樣品粉末置50mL離心管內(nèi)，加入適量50%乙醇,搖勻,超聲提取30min,4300g離心10min,吸出上清液,再加入20mL50%乙醇,搖勻,超聲30min,4300g離心10min,吸出上清液。合并兩次提取液,減壓濃縮,用50%乙醇定量至25mL。提取液過0.45卩m濾膜,收集濾液，按上述條件上HPLC根據(jù)標準曲線計算蟲草酸含量。粗蛋白參照楊月欣等的方法測定[13]。水解氨基酸參照GB/T5009.124-2003的方法測定[14]。維生素維生素B1和維生素B2分別按熒光法GB/T5413.11-1997和GB/T5413.12-1997測定[16,17],維生素A、D和E按GB/T5009.82、GB/T5413.9-1997和GB/T5009.82-2003測定[18~20]。微量元素及重金屬Hg用塞曼法(GB/T5009.17-2003)測定[21],其余元素按GB/T5009.11-2003處理樣品，用IPC-MS法測定[22,23]。結(jié)果與分析有效成分廣東蟲草、冬蟲夏草和蛹蟲草的腺苷、蟲草素和蟲草酸的含量見表1。這3種蟲草的腺苷含量均高于0.01%,達到《中國藥典》(2005)的要求[24],且蛹蟲草＞廣東蟲草＞冬蟲夏草。蟲草酸含量為廣東蟲草＞冬蟲夏草＞蛹蟲草,廣東蟲草蟲草酸的含量(151.00mg/g)分別是冬蟲夏草和蛹蟲草的 1.18倍和3.87倍。粗蛋白廣東蟲草、冬蟲夏草和蛹蟲草的粗蛋白含量分別為27.5%、24.3%和26.3%。廣東蟲草的粗蛋白含量比冬蟲夏草和蛹蟲草分別高了3.2%和1.2%。水解氨基酸廣東蟲草、冬蟲夏草和蛹蟲草均含有16種水解氨基酸（色氨酸在水解時受到破壞,未測得）,但各含量有一定差異,總量以冬蟲夏草最高,廣東蟲草最低（表2）。廣東蟲草、冬蟲夏草和蛹蟲草的必需氨基酸分別為4.67%、4.95%和4.88%。維生素廣東蟲草中維生素B1和B2含量分別為16.4卩g/g和9.6ug/g,其維生素B1的含量高于冬蟲夏草和蛹蟲草，維生素B2則高于蛹蟲草（表3）。維生素A、D和E的含量低于檢測最低限量，未測得準確值。微量元素表4為錳、鐵、銅、鋅等微量元素在3種蟲草中的含量。冬蟲夏草中錳和鐵的含量遠遠高于廣東蟲草和蛹蟲草,冬蟲夏草和蛹蟲草中鋅的含量高于廣東蟲草。鈷、錫和硒在3種蟲草中均未檢出。重金屬廣東蟲草、冬蟲夏草和蛹蟲草中 Pb和As的含量見表5,Hg在3種蟲草中均未檢出。討論蟲草酸即甘露醇可消除體內(nèi)的自由基,具有良好的抗氧化能力,是蟲草重要的有效成分,已用于制定蟲草類產(chǎn)品的質(zhì)量標準。研究表明,蟲草酸在冬蟲夏草和蛹蟲草中的含量差異較大,不同產(chǎn)地的野生冬蟲夏草最低為2.87%,最高為16.71%,平均含量為6%-10%[25],蛹蟲草多為6%-10%[26],很少高于10%,廣東蟲草蟲草酸含量為15.1%。大多數(shù)真菌都具有良好的金屬富集能力[27],因此生長環(huán)境對蟲草的微量元素和重金屬含量有重要的影響。野生冬蟲夏草的微量元素含量遠遠高于兩種人工栽培的蟲草很可能是由于冬蟲夏草生長環(huán)境中微量元素含量較高引起的。廣東蟲草可人工栽培