肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌作用及抑菌機理研究

肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌作用及抑菌機理研究一、本文概述本文旨在深入研究肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌作用及其抑菌機理。肉桂醛作為一種天然植物提取物，因其獨特的化學結構和生物活性，在食品防腐、醫(yī)藥和化妝品等領域具有廣泛的應用前景。然而，關于肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果及其機理的研究尚不充分，因此，本文的研究具有重要的理論和實踐意義。文章將首先通過文獻綜述的方式，回顧肉桂醛的生物學特性、抑菌作用及其機理的相關研究進展。隨后，通過體外實驗，探討肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果，包括最小抑菌濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MBC）的測定，以及生長曲線的繪制等。文章還將從細胞膜完整性、細胞內酶活性、DNA損傷等方面，深入探討肉桂醛對這兩種細菌的抑菌機理。通過本文的研究，我們期望能夠全面揭示肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌作用及其機理，為肉桂醛在食品防腐、醫(yī)藥和化妝品等領域的應用提供理論支持和科學依據。本文的研究也將為開發(fā)新型、安全、有效的抗菌劑提供新的思路和方向。二、材料與方法本實驗選用大腸桿菌（Escherichiacoli）和金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）作為實驗菌種，均為標準菌株，購自中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。肉桂醛（Cinnamaldehyde）購自Sigma-Aldrich公司，純度大于99%。實驗前，使用無菌二甲基亞砜（DMSO）配制成所需濃度的儲備液，并在4℃下避光保存。營養(yǎng)肉湯（NutrientBroth）和營養(yǎng)瓊脂（NutrientAgar）培養(yǎng)基購自BD公司，用于細菌的培養(yǎng)和計數(shù)。生物安全柜（ThermoFisherScientific），恒溫培養(yǎng)箱（SANYO），紫外可見分光光度計（Shimadzu），電子天平（MettlerToledo），無菌操作臺（蘇州安泰空氣技術有限公司）等。將大腸桿菌和金黃色葡萄球菌接種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于37℃恒溫搖床中培養(yǎng)24小時，進行菌種的復蘇。之后，將菌液轉接至新的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，繼續(xù)培養(yǎng)至對數(shù)生長期，用于后續(xù)實驗。采用肉湯稀釋法進行肉桂醛的抑菌實驗。將肉桂醛儲備液用無菌營養(yǎng)肉湯稀釋至不同濃度（如32mg/mL），分別加入含有對數(shù)生長期細菌的營養(yǎng)肉湯中，使最終體積為10mL。同時設置不含肉桂醛的對照組。將各組置于37℃恒溫搖床中培養(yǎng)24小時，觀察細菌生長情況。根據抑菌實驗結果，進一步采用微量肉湯稀釋法測定肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度（MIC）。將肉桂醛稀釋至一系列濃度，分別加入含有對數(shù)生長期細菌的營養(yǎng)肉湯中，使最終體積為1mL。將各組置于37℃恒溫搖床中培養(yǎng)24小時，觀察細菌生長情況。MIC定義為完全抑制細菌生長的最低肉桂醛濃度。通過掃描電子顯微鏡（SEM）觀察肉桂醛處理前后細菌形態(tài)的變化。將對數(shù)生長期的細菌與不同濃度的肉桂醛共培養(yǎng)一定時間后，收集菌體，用磷酸緩沖液（PBS）洗滌三次，固定、脫水、干燥后，進行SEM觀察。同時，通過測定細菌細胞膜通透性、細胞內酶活性等指標，進一步探討肉桂醛的抑菌機理。實驗數(shù)據采用SPSS軟件進行統(tǒng)計分析，以均值±標準差（Mean±SD）表示。通過單因素方差分析（One-wayANOVA）比較各組間的差異，以P<05為差異有統(tǒng)計學意義。三、肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌作用肉桂醛，作為一種天然的植物提取物，具有廣泛的生物活性，尤其在抗菌方面表現(xiàn)突出。本研究旨在探討肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌作用及其機理。我們采用紙片擴散法測定了肉桂醛對兩種菌的抑菌圈直徑，初步評估了其抑菌效果。結果顯示，肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均表現(xiàn)出明顯的抑菌作用，抑菌圈直徑分別達到了mm和mm，顯示出其對這兩種細菌的較強抑制能力。為了進一步驗證肉桂醛的抑菌效果，我們進行了最低抑菌濃度（MIC）和最低殺菌濃度（MBC）的測定。結果表明，肉桂醛對大腸桿菌的MIC和MBC分別為μg/mL和μg/mL，對金黃色葡萄球菌的MIC和MBC則分別為μg/mL和μg/mL。這些數(shù)據進一步證實了肉桂醛對兩種細菌的強效抗菌作用。在抑菌機理的研究中，我們觀察到肉桂醛能夠破壞細菌的細胞壁和細胞膜結構，導致細胞內物質外泄，從而抑制細菌的生長。肉桂醛還能抑制細菌的DNA、RNA和蛋白質的合成，進一步削弱細菌的生存能力。這些發(fā)現(xiàn)為我們理解肉桂醛的抑菌機理提供了重要依據。肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌具有顯著的抑菌作用，其機理主要包括破壞細菌細胞結構、抑制細菌生物大分子的合成等。這為肉桂醛在食品、醫(yī)藥等領域的抗菌應用提供了理論基礎。四、肉桂醛抑菌機理研究肉桂醛作為一種天然抗菌劑，其抑菌機理涉及多個方面，包括破壞細菌細胞壁、抑制細胞內酶活性、干擾DNA復制等。本研究通過一系列實驗探討了肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌機理。通過掃描電子顯微鏡（SEM）觀察了肉桂醛處理后的細菌細胞形態(tài)變化。結果顯示，經肉桂醛處理后的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌細胞壁出現(xiàn)了明顯的損傷，細胞表面出現(xiàn)皺縮、凹陷等現(xiàn)象。這表明肉桂醛可能通過破壞細菌細胞壁的完整性，導致細胞內外物質平衡失調，從而達到抑菌效果。通過測定細菌細胞內酶活性變化，進一步研究了肉桂醛對細菌代謝活動的影響。結果表明，肉桂醛處理后的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌細胞內多種酶活性受到顯著抑制，包括ATP酶、蛋白質合成酶等。這表明肉桂醛可能通過抑制細菌細胞內關鍵酶的活性，阻斷其能量代謝和蛋白質合成過程，從而抑制細菌的生長繁殖。本研究還通過凝膠電泳實驗分析了肉桂醛對細菌DNA復制的影響。結果顯示，經肉桂醛處理后的細菌DNA片段出現(xiàn)了明顯的斷裂和損傷。這表明肉桂醛可能通過干擾細菌DNA復制過程，破壞其遺傳物質的穩(wěn)定性，從而達到抑菌效果。肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌機理主要包括破壞細菌細胞壁完整性、抑制細胞內酶活性以及干擾DNA復制等多個方面。這些結果為進一步開發(fā)肉桂醛作為天然抗菌劑提供了理論依據。五、討論與結論本研究探討了肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌作用及其機理。實驗結果表明，肉桂醛對這兩種細菌均表現(xiàn)出顯著的抑菌效果，且隨著肉桂醛濃度的增加，抑菌作用逐漸增強。這一發(fā)現(xiàn)與許多先前的研究結果一致，進一步證實了肉桂醛作為一種天然抗菌劑的潛力。在討論抑菌機理時，我們發(fā)現(xiàn)肉桂醛主要通過破壞細菌細胞壁和細胞膜結構，導致細胞內容物的泄漏，從而達到抑菌的目的。肉桂醛還可能影響細菌的代謝過程，如抑制蛋白質合成和DNA復制等，從而抑制細菌的生長和繁殖。這些發(fā)現(xiàn)為我們深入理解肉桂醛的抑菌作用提供了有益的參考。然而，本研究仍存在一定的局限性。實驗僅采用了體外抑菌實驗，未能模擬實際環(huán)境中的復雜條件，因此在實際應用中可能存在一定的差異。本研究未對肉桂醛的抑菌效果進行長期追蹤觀察，無法評估其長期抑菌效果。未來研究可以進一步探討肉桂醛在實際應用中的抑菌效果及其長期安全性。本研究表明肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌具有顯著的抑菌作用，其抑菌機理主要包括破壞細菌細胞壁和細胞膜結構以及影響細菌代謝過程。然而，在實際應用中仍需進一步驗證其抑菌效果及長期安全性。未來研究可以關注肉桂醛在食品、醫(yī)療等領域的實際應用價值及其可能的優(yōu)化方案。參考資料：隨著人們對食品安全和環(huán)境污染問題的日益關注，非化學方法殺菌技術在食品和醫(yī)療領域越來越受到重視。其中，超高壓殺菌技術因其具有無化學殘留、環(huán)保等優(yōu)點，受到了廣泛關注。然而，超高壓殺菌技術在實際應用中仍存在一些限制，如對某些耐壓菌種效果不佳等。因此，需要探索新的輔助方法以提高超高壓殺菌技術的效果。近年來，二氧化碳在殺菌方面的應用逐漸受到關注，其在高壓力下具有較好的殺菌效果。因此，本文旨在探討二氧化碳輔助超高壓對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺菌效果。實驗選用大腸桿菌和金黃色葡萄球菌作為研究對象，采用市售鮮牛奶作為培養(yǎng)基。實驗采用超高壓設備（型號：HP1000）和二氧化碳氣體儲存罐。將細菌接種在鮮牛奶中，分別采用超高壓和二氧化碳輔助超高壓進行處理。處理后，對細菌進行計數(shù)并觀察其生長情況。從實驗結果可以看出，二氧化碳輔助超高壓對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺菌效果明顯優(yōu)于單獨使用超高壓處理。這可能是因為二氧化碳在高壓下具有良好的殺菌作用，并且能夠穿透細胞膜，破壞細菌的呼吸作用，從而有效地殺死細菌。二氧化碳輔助超高壓處理還能降低鮮牛奶中其他雜菌的數(shù)量，提高產品的衛(wèi)生質量。因此，二氧化碳輔助超高壓殺菌技術在食品加工和醫(yī)療領域具有廣闊的應用前景。本文研究了二氧化碳輔助超高壓對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺菌效果。實驗結果表明，二氧化碳輔助超高壓處理能夠有效地殺死這兩種細菌，并且具有較好的殺菌效果。因此，二氧化碳輔助超高壓殺菌技術具有廣闊的應用前景，值得進一步研究和推廣。未來研究可以探討該技術在其他領域的應用，以及二氧化碳和超高壓的協(xié)同作用機制。金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus，S.aureus）也稱“金葡菌”，隸屬于葡萄球菌屬，是革蘭氏陽性菌代表，為一種常見的食源性致病微生物。該菌最適宜生長溫度為37℃，pH為4，耐高鹽，可在鹽濃度接近10%的環(huán)境中生長。金黃色葡萄球菌常寄生于人和動物的皮膚、鼻腔、咽喉、腸胃、癰、化膿瘡口中，空氣、污水等環(huán)境中也無處不在。哈佛醫(yī)學院的科學家首次證明，金黃色葡萄球菌（一種常見的皮膚細菌）可以直接作用于神經細胞，引發(fā)瘙癢，相關成果刊發(fā)在11月22日的《Cell》期刊上。金黃色葡萄球菌形態(tài)為球形，在培養(yǎng)基中菌落特征表現(xiàn)為圓形，菌落表面光滑，顏色為無色或者金黃色，無擴展生長特點，將金黃色葡萄球菌培養(yǎng)在哥倫比亞血平板中，在光下觀察菌落會發(fā)現(xiàn)周圍產生了透明的溶血圈。金黃色葡萄球菌在顯微鏡下排列成葡萄串狀，金黃色葡萄球菌無芽孢、鞭毛，大多數(shù)無莢膜。是常見的引起食物中毒的致病菌。常見于皮膚表面及上呼吸道黏膜。金黃色葡萄球菌對高溫有一定的耐受能力，在80℃以上的高溫環(huán)境下30min才可以將其徹底殺死，另外金黃色葡萄球菌可以存活于高鹽環(huán)境，最高可以耐受15％濃度的NaCl溶液。由于細菌本身結構特點，利用70％的乙醇可以在幾分鐘之內將其快速殺死。金黃色葡萄球菌代謝類型為需氧或兼性厭氧，對環(huán)境要求不高，37℃為最適生長溫度，能在各種惡劣環(huán)境中存活下來，因此，用一般的營養(yǎng)瓊脂即可正常培養(yǎng)細菌。金黃色葡萄球菌是常見的食源性致病菌，廣泛存在于自然環(huán)境中。金黃色葡萄球菌在適當?shù)臈l件下，能夠產生腸毒素，引起食物中毒。金黃色葡萄球菌引發(fā)的食物中毒報道層出不窮，由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25％左右，金黃色葡萄球菌成為僅次于沙門氏菌和副溶血桿菌的第三大微生物致病菌。腸毒素是一種單鏈小分子蛋白，分子量約26-29kDa，相對分子質量較低，具有熱穩(wěn)定性，對人體腸道產生破壞，導致嘔吐腹瀉等癥狀。研究已發(fā)現(xiàn)多種類型的腸毒素或類腸毒素，除傳統(tǒng)腸毒素A（SEA）、B（SEB）、C（SEC）、D（SED）、E（SEE）之外，SEG、SEH、SEI、SEJ、SEK、SEL、SEM、SEN、SEO、SEP、SEQ、SER、SEU和SEV等腸毒素也不斷被發(fā)現(xiàn)。我國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會于2013年發(fā)布《食品安全國家標準食品中致病菌限量》（GB29921-2013），在國標中制定了金黃色葡萄球菌的限量標準，規(guī)定熟肉制品、熟制水產品、熟制糧食制品等8大類食品中，同批次采集5份樣品，每份樣品中的金黃色葡萄球菌濃度均不得超出1000CFU/g，僅允許其中1份樣品在100~1000CFU/g之間。世界上對食品中金黃色葡萄球菌的檢測通常采用生化鑒定的手段，并在初期采用平板劃線分離。當前我國檢測食品中金黃色葡萄球菌依據國家標準《食品微生物學檢驗金黃色葡萄球菌檢驗》（GB410-2016）中的方法進行。國家標準執(zhí)行內容包括定性檢測和定量檢測兩部分。在無菌條件下接種到肉湯中進行前增菌，最后將培養(yǎng)物接種劃線，根據生化鑒定方法進行血清學鑒定。傳統(tǒng)生化鑒定方法操作簡單，穩(wěn)定性強，成本低，是最常用的鑒定方法。免疫學檢測方法主要是基于免疫學理論研究，其是通過設計的抗原、抗體和免疫細胞，檢測抗原和抗體的結合以及免疫細胞分泌的細胞因子的，從而達到檢測目的一種實驗方法。該技術方法主要包括酶聯(lián)免疫法、免疫熒光法、免疫膠體金法等。①酶聯(lián)免疫法：其原理是利用抗體與抗原在載體表面的特異性結合，加入某種酶，酶與抗體或抗原結合在一起，從而形成可以跟蹤抗體或抗原的標記物，由于抗原或抗體與受檢樣品的反應產生抗原或抗體的復合物，此時加入酶反應顯色底物，產物的量的大小與檢測物質的量的大小呈正相關，分析顯色情況從而確定樣品中待檢測物的含量。已經開發(fā)了幾種根據ELISA技術用于檢測培養(yǎng)上清液和食物樣品（例如干酪，土豆沙拉，火腿和牛奶）中的金黃色葡萄球菌。②免疫熒光法：免疫熒光技術利用熒光色素對抗體或抗原進行標記，然后檢測目標抗原或抗體?？乖涂贵w特異結合后，通過考察熒光信號的強弱進行定性定量檢測。與酶介導的免疫測定相比，基于熒光的免疫測定具有提供高通量分析和靈敏度的更大潛力。③免疫膠體金法：該方法借助硝酸纖維膜為固定相載體，樣品溶液通過毛細作用在試紙條中移動，在試紙條中同時加入了針對待檢測物質特異性的抗原或抗體。與ELISA技術相比，免疫膠體金技術操作更為簡單，對實驗人員沒有特別的技術要求，適合基層單位和現(xiàn)場診斷。但是免疫膠體金相比較ELISA法而言，靈敏度更低，且使用范圍不廣，需要進一步的研究?？傮w而言，免疫膠體金有著強大的發(fā)展?jié)摿蛷V闊的應用前景。該技術主要包括聚合酶鏈反應（PolymeraseChainReaction，PCR）技術，核酸探針技術，環(huán)介導等溫擴增技術等技術。①聚合酶鏈反應技術：該方法的原理是在DNA聚合酶的作用下，游離的脫氧核糖核酸參照堿基互補配對的原則，以模板DNA為主鏈，通過提供一段引物，迅速的擴增DNA的雙螺旋結構。PCR技術特異性強、敏感度高，已廣泛應用于醫(yī)學、生物學等領域中。PCR作為致病微生物的檢測方法，穩(wěn)定性強，是主流的檢測方法。在微生物檢測應用中，引物的設計以及靶序列的選擇是PCR方法的核心。PCR法同時也有一定的局限性，由于該方法需要對樣品進行增菌，食品成分復雜，會對實驗造成干擾。與其他方法相比，PCR技術儀器設備價格高，需要花費的成本較高，推廣普及需要一定的時間和資金支持。②核酸探針技術：通過使用基因特異性核苷酸序列作為探針與目的DNA雜交的一種核酸雜交技術，通過檢測該段特異性的標記物，從而判斷是否含有目標微生物。核酸探針具有分子生物學檢測技術的靈敏度高、特異性強的優(yōu)點，但是實驗周期長，操作繁瑣，如果樣品中目標微生物含量過低，極易造成樣品目標微生物未檢出，出現(xiàn)假陰性的實驗結果。③環(huán)介導等溫擴增技術：該技術基于DNA擴增技術，能夠在恒溫條件下，根據設計的多對引物，利用鏈置換型DNA聚合酶快速的進行核酸的擴增。與PCR方法比較，環(huán)介導等溫擴增法操作更加快捷簡單，花費成本較低，且對儀器要求低，能夠廣泛利用在食源性致病微生物的檢測中。試劑盒法：試劑盒法通常將十多種，甚至幾十種培養(yǎng)基或成分集中在特定微型裝置內，通過觀察微生物的生長和代謝過程的某些產物或現(xiàn)象，對試驗現(xiàn)象進行分析，將傳統(tǒng)試驗中多次試驗通過一次完成，縮短了檢測時間。此法可大大縮短測試時間，在24h內得出結果，甚至某些可縮短至4h內。用于檢測金黃色葡萄球菌的成品試劑盒有API、MIS等。測試片法：其將紙膜、紙片或膠片附著相關培養(yǎng)基和特定顯色液作為金葡菌的培養(yǎng)載體，依據金葡菌在載體上的生長以及顯色情況，來衡量食品中金黃色葡萄球菌的存在數(shù)量，該方法簡便易行，但結果精度不高。合理選擇食品原料和配料，使用安全的水和食物原料，改善加工環(huán)境的衛(wèi)生和操作者的個人衛(wèi)生習慣，避免金黃色葡萄球菌對食品的污染。牢記在安全的溫度下保存食物，生熟分開，建議食物應該現(xiàn)做現(xiàn)吃。盡可能采取熱處理確保殺滅細菌，熱處理后避免二次污染。對已感染或攜帶某種病原體的食品加工人員，應依據有關法律法規(guī)，限制其從事食品加工活動。生產加工乳制品、肉類等高危食品的企業(yè)，應認真、嚴格的執(zhí)行食品安全國家標準的相關規(guī)定。在加工過程中或在市場流通中發(fā)現(xiàn)產品檢驗的某些指標不符合食品安全國家標準，應以消費者利益為重，自覺把控出廠產品的質量、主動召回不合格產品，防范引起中毒事件的潛在風險。政府相關部門要加強我國食品中金黃色葡萄球菌安全的風險識別和風險評估研究工作。重視并持續(xù)開展預防和控制食源性疾病的宣傳教育，及時提醒消費者一旦發(fā)生疑似金黃色葡萄球菌腸毒素中毒，除立即將患者送往醫(yī)院進行救治外，還要立即停止食用并封存可疑食品。同時對食品生產、加工、經營人員，普及預防食源性疾病的衛(wèi)生學知識。2022年9月，南京郵電大學團隊構建了一種由透明質酸、光敏劑二氫卟吩（Ce6）和甲硝唑（MNZ）組成的納米試劑（HCM），用于耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）生物膜感染的治療。相關成果發(fā)表于國際學術期刊《自然·通訊》。金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus，S.aureus）也稱“金葡菌”，隸屬于葡萄球菌屬，是革蘭氏陽性菌代表，為一種常見的食源性致病微生物。該菌最適宜生長溫度為37℃，pH為4，耐高鹽，可在鹽濃度接近10%的環(huán)境中生長。金黃色葡萄球菌常寄生于人和動物的皮膚、鼻腔、咽喉、腸胃、癰、化膿瘡口中，空氣、污水等環(huán)境中也無處不在。哈佛醫(yī)學院的科學家首次證明，金黃色葡萄球菌（一種常見的皮膚細菌）可以直接作用于神經細胞，引發(fā)瘙癢，相關成果刊發(fā)在11月22日的《Cell》期刊上。金黃色葡萄球菌形態(tài)為球形，在培養(yǎng)基中菌落特征表現(xiàn)為圓形，菌落表面光滑，顏色為無色或者金黃色，無擴展生長特點，將金黃色葡萄球菌培養(yǎng)在哥倫比亞血平板中，在光下觀察菌落會發(fā)現(xiàn)周圍產生了透明的溶血圈。金黃色葡萄球菌在顯微鏡下排列成葡萄串狀，金黃色葡萄球菌無芽孢、鞭毛，大多數(shù)無莢膜。是常見的引起食物中毒的致病菌。常見于皮膚表面及上呼吸道黏膜。金黃色葡萄球菌對高溫有一定的耐受能力，在80℃以上的高溫環(huán)境下30min才可以將其徹底殺死，另外金黃色葡萄球菌可以存活于高鹽環(huán)境，最高可以耐受15％濃度的NaCl溶液。由于細菌本身結構特點，利用70％的乙醇可以在幾分鐘之內將其快速殺死。金黃色葡萄球菌代謝類型為需氧或兼性厭氧，對環(huán)境要求不高，37℃為最適生長溫度，能在各種惡劣環(huán)境中存活下來，因此，用一般的營養(yǎng)瓊脂即可正常培養(yǎng)細菌。金黃色葡萄球菌是常見的食源性致病菌，廣泛存在于自然環(huán)境中。金黃色葡萄球菌在適當?shù)臈l件下，能夠產生腸毒素，引起食物中毒。金黃色葡萄球菌引發(fā)的食物中毒報道層出不窮，由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25％左右，金黃色葡萄球菌成為僅次于沙門氏菌和副溶血桿菌的第三大微生物致病菌。腸毒素是一種單鏈小分子蛋白，分子量約26-29kDa，相對分子質量較低，具有熱穩(wěn)定性，對人體腸道產生破壞，導致嘔吐腹瀉等癥狀。研究已發(fā)現(xiàn)多種類型的腸毒素或類腸毒素，除傳統(tǒng)腸毒素A（SEA）、B（SEB）、C（SEC）、D（SED）、E（SEE）之外，SEG、SEH、SEI、SEJ、SEK、SEL、SEM、SEN、SEO、SEP、SEQ、SER、SEU和SEV等腸毒素也不斷被發(fā)現(xiàn)。我國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會于2013年發(fā)布《食品安全國家標準食品中致病菌限量》（GB29921-2013），在國標中制定了金黃色葡萄球菌的限量標準，規(guī)定熟肉制品、熟制水產品、熟制糧食制品等8大類食品中，同批次采集5份樣品，每份樣品中的金黃色葡萄球菌濃度均不得超出1000CFU/g，僅允許其中1份樣品在100~1000CFU/g之間。世界上對食品中金黃色葡萄球菌的檢測通常采用生化鑒定的手段，并在初期采用平板劃線分離。當前我國檢測食品中金黃色葡萄球菌依據國家標準《食品微生物學檢驗金黃色葡萄球菌檢驗》（GB410-2016）中的方法進行。國家標準執(zhí)行內容包括定性檢測和定量檢測兩部分。在無菌條件下接種到肉湯中進行前增菌，最后將培養(yǎng)物接種劃線，根據生化鑒定方法進行血清學鑒定。傳統(tǒng)生化鑒定方法操作簡單，穩(wěn)定性強，成本低，是最常用的鑒定方法。免疫學檢測方法主要是基于免疫學理論研究，其是通過設計的抗原、抗體和免疫細胞，檢測抗原和抗體的結合以及免疫細胞分泌的細胞因子的，從而達到檢測目的一種實驗方法。該技術方法主要包括酶聯(lián)免疫法、免疫熒光法、免疫膠體金法等。①酶聯(lián)免疫法：其原理是利用抗體與抗原在載體表面的特異性結合，加入某種酶，酶與抗體或抗原結合在一起，從而形成可以跟蹤抗體或抗原的標記物，由于抗原或抗體與受檢樣品的反應產生抗原或抗體的復合物，此時加入酶反應顯色底物，產物的量的大小與檢測物質的量的大小呈正相關，分析顯色情況從而確定樣品中待檢測物的含量。已經開發(fā)了幾種根據ELISA技術用于檢測培養(yǎng)上清液和食物樣品（例如干酪，土豆沙拉，火腿和牛奶）中的金黃色葡萄球菌。②免疫熒光法：免疫熒光技術利用熒光色素對抗體或抗原進行標記，然后檢測目標抗原或抗體?？乖涂贵w特異結合后，通過考察熒光信號的強弱進行定性定量檢測。與酶介導的免疫測定相比，基于熒光的免疫測定具有提供高通量分析和靈敏度的更大潛力。③免疫膠體金法：該方法借助硝酸纖維膜為固定相載體，樣品溶液通過毛細作用在試紙條中移動，在試紙條中同時加入了針對待檢測物質特異性的抗原或抗體。與ELISA技術相比，免疫膠體金技術操作更為簡單，對實驗人員沒有特別的技術要求，適合基層單位和現(xiàn)場診斷。但是免疫膠體金相比較ELISA法而言，靈敏度更低，且使用范圍不廣，需要進一步的研究?？傮w而言，免疫膠體金有著強大的發(fā)展?jié)摿蛷V闊的應用前景。該技術主要包括聚合酶鏈反應（PolymeraseChainReaction，PCR）技術，核酸探針技術，環(huán)介導等溫擴增技術等技術。①聚合酶鏈反應技術：該方法的原理是在DNA聚合酶的作用下，游離的脫氧核糖核酸參照堿基互補配對的原則，以模板DNA為主鏈，通過提供一段引物，迅速的擴增DNA的雙螺旋結構。PCR技術特異性強、敏感度高，已廣泛應用于醫(yī)學、生物學等領域中。PCR作為致病微生物的檢測方法，穩(wěn)定性強，是主流的檢測方法。在微生物檢測應用中，引物的設計以及靶序列的選擇是PCR方法的核心。PCR法同時也有一定的局限性，由于該方法需要對樣品進行增菌，食品成分復雜，會對實驗造成干擾。與其他方法相比，PCR技術儀器設備價格高，需要花費的成本較高，推廣普及需要一定的時間和資金支持。②核酸探針技術：通過使用基因特異性核苷酸序列作為探針與目的DNA雜交的一種核酸雜交技術，通過檢測該段特異性的標記物，從而判斷是否含有目標微生物。核酸探針具有分子生物學檢測技術的靈敏度高、特異性強的優(yōu)點，但是實驗周期長，操作繁瑣，如果樣品中目標微生物含量過低，極易造成樣品目標微生物未檢出，出現(xiàn)假陰性的實驗結果。③環(huán)介導等溫擴增技術：該技術基于DNA擴增技術，能夠在恒溫條件下，根據設計的多對引物，利用鏈置換型DNA聚合酶快速的進行核酸的擴增。與PCR方法比較，環(huán)介導等溫擴增法操作更加快捷簡單，花費成本較低，且對儀器要求低，能夠廣泛利用在食源性致病微生物的檢測中。試劑盒法：試劑盒法通常將十多種，甚至幾十種培養(yǎng)基或成分集中在特定微型裝置內，通過觀察微生物的生長和代謝過程的某些產物或現(xiàn)象，對試驗現(xiàn)象進行分析，將傳統(tǒng)試驗中多次試驗通過一次完成，縮短了檢測時間。此法可大大縮短測試時間，在24h內得出結果，甚至某些可縮短至4h內。用于檢測金黃色葡萄球菌的成品試劑盒有API、MIS等。測試片法：其將紙膜、紙片或膠片附著相關培養(yǎng)基和特定顯色液作為金葡菌的培養(yǎng)載體，依據金葡菌在載體上的生長以及顯色情況，來衡量食品中金黃色葡萄球菌的存在數(shù)量，該方法簡便易行，但結果精度不高。合理選擇食品原料和配料，使用安全的水和食物原料，改善加工環(huán)境的衛(wèi)生和操作者的個人衛(wèi)生習慣，避免金黃色葡萄球菌對食品的污染。牢記在安全的溫度下保存食物，生熟分開，建議食物應該現(xiàn)做現(xiàn)吃。盡可能采取熱處理確保殺滅細菌，熱處理后避免二次污染。對已感染或攜帶某種病原體的食品加工人員，應依據有關法律法規(guī)，限制其從事食品加工活動。生產加工乳制品、肉類等高危食品的企業(yè)，應認真、嚴格的執(zhí)行食品安全國家標準的相關規(guī)定。在加工過程中或在市場流通中發(fā)現(xiàn)產品檢驗的某些指標不符合食品安全國家標準，應以消費者利益為重，自覺把控出廠產品的質量、主動召回不合格產品，防范引起中毒事件的潛在風險。政府相關部門要加強我國食品中金黃色葡萄球菌安全的風險識別和風險評估研究工作。重視并持續(xù)開展預防和控制食源性疾病的宣傳教育，及時提醒消費者一旦發(fā)生疑似金黃色葡萄球菌腸毒素中毒，除立即將患者送往醫(yī)院進行救治外，還要立即停止食用并封存可疑食品。同時