《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》實驗教學(xué)大綱

《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》實驗教學(xué)大綱一、課程編號：14050041 適用專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)課程類別：學(xué)科專業(yè)基礎(chǔ)必修開課學(xué)期：3實驗學(xué)時：20二、開課實驗室：形態(tài)學(xué)實驗室三、實驗教材及參考書教材：黃慶紅主編，《形態(tài)實驗學(xué)》，第1版，世界圖書出版公司，2010.9參考書目：[1]鄔國軍，戴橄，譚宇蓉主編，《實驗醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》，中南大學(xué)出版社，2006[2]任同明、付升旗主編，《人體解剖實驗學(xué)》，第一版，世界圖書出版公司，2006.6[3]倪語星主編，《微生物學(xué)和微生物學(xué)檢驗實驗指導(dǎo)》，人民衛(wèi)生出版社，1997[4]劉運德，樓永良主編，《微生物學(xué)檢驗》，人民衛(wèi)生出版社，1998四、實驗教學(xué)目的和要求醫(yī)學(xué)微生物學(xué)是研究與醫(yī)學(xué)有關(guān)的病原微生物的生物學(xué)性狀、感染與免疫機理、特異性診斷與防治的學(xué)科。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)是臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)的專業(yè)基礎(chǔ)課和橋梁學(xué)科，本課程的任務(wù)是通過對本課程的學(xué)習(xí)使學(xué)生初步掌握臨床常見的病原微生物的基本特征、致病特性，機體對病原微生物感染的免疫以及臨床的有效診斷方法和防治措施，為后續(xù)專業(yè)基礎(chǔ)課、臨床課打下理論和實踐基礎(chǔ)。實驗教學(xué)可以讓學(xué)生加深和鞏固對課堂內(nèi)容的理解和體會；在掌握系統(tǒng)理論知識的基礎(chǔ)上，理解并掌握醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的基本操作技術(shù)，樹立無菌觀念。掌握實驗室常用的消毒滅菌方法，掌握常見病原微生物的生物學(xué)性狀、分離培養(yǎng)、鑒定及常用血清學(xué)檢查方法。樹立科學(xué)思維的意識，培養(yǎng)獨立思考、獨立操作和獨立解決問題的能力，為今后免疫性疾病、傳染性疾病的診治和研究打下堅實的基礎(chǔ)。具體要求：1.為提高實驗課教學(xué)效果，學(xué)生每次實驗前必須認(rèn)真預(yù)習(xí)。了解實驗原理、材料與方法、注意事項以及預(yù)期的實驗結(jié)果。2.加強基礎(chǔ)訓(xùn)練，每次實驗過程中應(yīng)注意基本技術(shù)、基本操作的正確性。堅持實驗的嚴(yán)肅性、嚴(yán)格性和嚴(yán)謹(jǐn)性。3.示教實驗和錄像實驗要仔細(xì)觀察。4.自行操作項目要認(rèn)真、仔細(xì)、準(zhǔn)確。5.為提高科學(xué)思維和分析總結(jié)能力，每次實驗結(jié)束后必須認(rèn)真、如實地記錄結(jié)果，進行分析，得出結(jié)論，完成實驗報告。6.聯(lián)系臨床應(yīng)用，提高學(xué)習(xí)積極性，加強學(xué)生的動手能力，進一步提高實驗教學(xué)質(zhì)量。五、考核形式要求《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》是一門實踐性較強的學(xué)科，實驗操作技能在本課程中十分重要。在期末進行實驗操作考試，按百分制記分，實驗成績按20%記入該課程總成績，實驗報告及平時成績按10%計入該課程總成績。六、實驗項目及要求（一）實驗項目名稱序號實驗項目名稱實驗類型實驗學(xué)時每組人數(shù)實驗要求1細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查綜合420必修2手指皮膚的細(xì)菌學(xué)檢查設(shè)計420必修3膿汁標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢查綜合220必修4糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢查綜合220必修5弧菌屬、厭氧性細(xì)菌、白喉棒狀桿菌、螺旋體綜合420必修6分枝桿菌屬、病毒學(xué)、真菌學(xué)、實驗考核綜合420必修（二）目的要求及實驗內(nèi)容1.細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查目的要求：掌握顯微鏡油浸鏡的使用與保護法；掌握細(xì)菌的三種基本形態(tài)和四種特殊結(jié)構(gòu)及與醫(yī)學(xué)的關(guān)系；掌握細(xì)菌片制片技術(shù)；革蘭氏染色法的原理、步驟、結(jié)果、臨床意義。實驗內(nèi)容：1.實驗室規(guī)則；2.油鏡的使用（1）原理（2）使用方法（3）保護法；3.用油鏡觀察細(xì)菌的基本形態(tài)、特殊結(jié)構(gòu)(操作)；4.革蘭氏染色法(操作)2.手指皮膚的細(xì)菌學(xué)檢查目的要求：了解細(xì)菌的接種法，熟悉細(xì)菌培養(yǎng)基的種類及細(xì)菌的培養(yǎng)方法；掌握細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象；熟悉微生物在自然界及人體的分布，進一步樹立無菌觀念；掌握常用的消毒滅菌法；掌握藥敏試驗及其臨床意義。實驗內(nèi)容：1.細(xì)菌培養(yǎng)基的種類、用途、制備程序(示教)；2.接種環(huán)、針的有關(guān)知識，接種程序，接種方法(示教)；3.細(xì)菌的培養(yǎng)方法(示教)；4.細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象的觀察（操作）；5.空氣中細(xì)菌的檢查（操作）；6.咽喉部細(xì)菌的檢查（操作）；7.手指皮膚消毒前后的細(xì)菌的檢查（操作）；8.煮沸消毒試驗(示教)；9.紫外線殺菌試驗（示教）；10.藥敏試驗(示教)；11.常用消毒滅菌器的介紹(示教)3.膿汁標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢查目的要求：掌握常見化膿性細(xì)菌的形態(tài)、染色特點和培養(yǎng)特征；熟悉葡萄球菌的色素，金葡菌、甲、乙型溶血性鏈球菌的溶血現(xiàn)象；掌握血漿凝固酶試驗、ASO試驗的臨床意義；熟悉膿汁標(biāo)本中致病性葡萄球菌的分離與鑒定。實驗內(nèi)容：1.常見化膿性細(xì)菌形態(tài)的觀察(示教)；2.葡萄球菌、鏈球菌培養(yǎng)物的觀察(示教)；3.ASO試驗(膠乳法操作)；4.膿汁標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗程序及致病性葡萄球菌的分離與鑒定（含標(biāo)本涂片、革蘭氏染色、血漿凝固酶試驗等)4.糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢查目的要求：熟悉腸道桿菌形態(tài)與常用的生化反應(yīng)；熟悉肥達(dá)反應(yīng)的方法、掌握其原理、結(jié)果判斷、臨床意義；掌握糞便中致病性腸道桿菌的分離與鑒定。實驗內(nèi)容：1.腸道桿菌形態(tài)觀察(示教)；2.腸道桿菌培養(yǎng)物與生化反應(yīng)結(jié)果的觀察(示教)；3.肥達(dá)反應(yīng)的方法、原理、結(jié)果判斷(示教)；4.糞便標(biāo)本的細(xì)菌檢驗程序及致病性腸道桿菌的分離與鑒定（含SS培養(yǎng)基、EMB培養(yǎng)基生長現(xiàn)象；KIA中生長現(xiàn)象；玻片凝集等）5.弧菌屬、厭氧性細(xì)菌、白喉棒狀桿菌、螺旋體目的要求：掌握弧菌、厭氧菌、白喉桿菌、炭疽桿菌、螺旋體的形態(tài)、染色、培養(yǎng)等生物學(xué)特性；實驗內(nèi)容：1.弧菌、厭氧菌、白喉桿菌培養(yǎng)物的觀察（示教）；2.弧菌、厭氧菌、白喉桿菌、炭疽桿菌、梅毒螺旋體、鉤體的形態(tài)觀察(操作)；3.口腔中奮森氏螺旋體的檢查（革蘭氏染色法）(操作)6.分枝桿菌屬、病毒學(xué)、真菌學(xué)、實驗考核目的要求：掌握分枝桿菌的形態(tài)、染色、培養(yǎng)等生物學(xué)特性；掌握抗酸染色法的原理、操作方法及臨床意義；掌握病原性真菌的形態(tài)；熟悉病原性真菌的培養(yǎng)與觀察；掌握淺部真菌檢查法、墨汁負(fù)染色法技術(shù)；了解病毒的動物接種、雞胚接種、PCR技術(shù)在病毒性疾病診斷中的應(yīng)用，實驗內(nèi)容：1.分枝桿菌培養(yǎng)物的觀察（示教）；2.抗酸染色法(Acid-faststain)(操作)；3.病原性真菌的培養(yǎng)與觀察（示教）；4.淺部真菌檢查法(操作)；5.深部真菌——新型隱球菌墨汁負(fù)染色法(操作)；6.病毒的動物接種（示教）；7.雞胚接種（示教）；8.PCR技術(shù)在病毒性疾病診斷中的應(yīng)用（示教）七、基本設(shè)備與器材配置序號儀器名稱數(shù)量序號儀器名稱數(shù)量1LD4-2低速水平離心機12BCM-1000生物凈化工作臺13DNP-781電熱恒溫培養(yǎng)箱14海爾冰箱15DHW-600三用電熱恒溫水箱16DYY-4電泳儀17DG3022A酶聯(lián)免疫檢測儀18DNX-9620電腦洗板機19奧林巴斯熒光顯微鏡1101000W電爐111TX-27-3型臺式高壓蒸汽消毒器112CH-MO45-T生物顯微鏡313棉質(zhì)擦鏡紙2張14無水酒精10ml15香柏油0.1ml16500ml/瓶生理鹽水10ml17500ml/瓶乙酸乙酯1ml1810ml一次性塑料試管1支19水弧菌1株20白色葡萄球菌1株21革蘭染色液結(jié)晶紫、95%酒精、盧戈碘液、稀釋復(fù)紅各0.2ml22250g/瓶營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基45g23無菌牙簽1根24250g/瓶來蘇消毒液5ml25細(xì)菌形態(tài)結(jié)構(gòu)片球菌、桿菌、弧菌、鞭毛、芽孢、莢膜各1片26試管架1個27酒精燈1個28打火機1支29接種環(huán)1支3012mm載玻片1片31500ml/瓶絡(luò)合碘0.1ml32家兔1只33藥敏紙片1片34500ml/瓶巴士消毒液10ml35醫(yī)用棉簽1根36過濾器1只37一次性塑膠手套1雙3815ml/支玻璃試管1支39直徑6cm、4cm、9cm培養(yǎng)皿各1只40人血漿0.1ml41金色葡萄球菌1株42人血清0.1ml43ASO試劑盒1盒44沙門氏傷寒桿菌1株45250g/瓶克氏雙糖鐵培養(yǎng)基5g46志賀氏痢疾桿菌1株47250g/瓶乳糖5g48埃希氏大腸桿菌1株49250g/瓶葡萄糖5g5010ml/瓶甲型副傷寒“H”抗原10ml5110ml/瓶乙型副傷寒“H”抗原10ml52250g/瓶EMS培養(yǎng)基10g5310ml/瓶沙門氏菌“O”抗原10ml54250g/瓶SS培養(yǎng)基10g5510ml/瓶傷寒桿菌“H”抗原10ml56兔血清1ml57500ml/瓶對甲基氨基酚二甲苯50ml58厭氧培養(yǎng)箱1臺5915ml/支玻璃試管1支60牙簽1根61破傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、肉毒桿菌、水弧桿菌、棒狀桿菌菌種各1株62破傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、肉毒桿菌、棒狀桿菌染色形態(tài)片各1片631400g/包脫脂牛奶1包64250g/瓶凡士林165