生物技術(shù)綜合大實驗教學大綱

PAGEPAGE2生物技術(shù)綜合大實驗教學大綱課程編號：233211課程名稱：生物技術(shù)綜合大實驗實驗學時：96一、本實驗課的性質(zhì)、任務(wù)與目的生命科學要為人類造福轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力，必然與技術(shù)相結(jié)合，才能在生產(chǎn)上發(fā)揮巨大作用。于是在20世紀70年代，隨著生命科學理論的不斷發(fā)展，與工程技術(shù)相結(jié)合，開辟了生物技術(shù)（也叫生物工程）新領(lǐng)域。例如，通過基因重組技術(shù)，PCR技術(shù)、DNA和蛋白質(zhì)序列分析技術(shù)、分子雜交技術(shù)、細胞和組織培養(yǎng)技術(shù)、細胞融合技術(shù)、核移植技術(shù)等等，促進了基因工程、蛋白質(zhì)工程、細胞工程、發(fā)酵工程、酶工程、染色體工程、組織工程、胚胎工程等生物工程的誕生與發(fā)展，已在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)療衛(wèi)生和環(huán)境保護等方面得到了廣泛應用，并取得了突破性進展。本課程以學生動手操作為主，講授為輔,教給學生細胞生物學實驗的基本方法、原理、數(shù)據(jù)和圖象處理、結(jié)果分析、儀器使用等，要求學生課前預習，實驗過程中認真操作和記錄，寫好每項實驗總結(jié)報告。本實驗課程的開設(shè)結(jié)合了我系實驗教學教改項目，實驗內(nèi)容的選擇充分考慮了我系的實驗設(shè)備條件和指導老師的業(yè)務(wù)專長。教學內(nèi)容選擇了工業(yè)分離純化技術(shù)、基因工程領(lǐng)域中具有代表性的實驗內(nèi)容。以β-葡萄糖苷酶基因的重組表達為主線，分析和掌握誘導時間和劑量對重組蛋白表達的影響，通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行重組蛋白質(zhì)表達量的鑒定和分析。學生通過該課程的培訓，將具有初步駕馭綜合大實驗的設(shè)計、組織能力和較強的實驗操作、結(jié)果分析能力，為本科論文和將來的工作打下堅實的素質(zhì)基礎(chǔ)。二、本實驗課所依據(jù)的課程基本理論生物化學，天然藥物化學，儀器分析，細胞生物學，細胞工程，普通生物學，遺傳學。三、實驗類型與要求序號實驗名稱實驗內(nèi)容實驗學時實驗類型實驗要求1等電點沉淀法粗提取溶菌酶通過沉淀、離心、透析等方法能到粗酶液。4綜合性必修2考馬斯亮藍G-250制作蛋白質(zhì)標準曲線按Bradfor的測定方法，繪制標準曲線。6綜合性必修3層析柱裝填及柱效的測定使用G-75進行層析柱裝填，平衡12h。4綜合性必修4離子交換層析法純化溶菌酶對粗酶液進行洗脫，對得到的酶液進行活性測定。8綜合性必修5SDS法測定溶菌酶分子量、二維電泳簡介對層析得到的樣品進行上樣前處理，進行SDS電泳，對比分子量確定是否為溶菌酶。同時介紹一下二維電泳的基本原理。12綜合性必修基因誘導表達誘導外源基因表達及優(yōu)化。12綜合性必修產(chǎn)物檢測分析SDS檢測表達的重組蛋白。12綜合性必修巖藻多糖的分離掌握多糖類物質(zhì)的提取原則，理解并掌握熱水浸提法、酸提法和超聲波助提法的原理；掌握巖藻多糖的提取操作技術(shù)。6綜合性必修巖藻多糖的純化了解超濾的原理及應用；掌握Minipore超濾器的基本操作技術(shù)。8綜合性必修巖藻多糖分子量測定理解瓊脂糖凝膠電泳測定巖藻多糖分子量的原理；掌握瓊脂糖凝膠電泳的操作方法12綜合性必修巖藻多糖硫酸根取代度、旋光度理解旋光法測定旋光物質(zhì)純度的原理；掌握自動旋光儀的使用方法，掌握旋光法測樣品純度的方法；掌握比濁法測量硫酸根取代度方法。12綜合性必修四、每組人數(shù)與實驗學時數(shù)每組6-7人；96學時五、考核方式與評分辦法本課程實驗設(shè)置基本按照本學科研究的基本環(huán)節(jié)設(shè)計，因此整個教學環(huán)節(jié)實行模擬研究型方式，每次實驗學生進行詳細觀察記載，實驗結(jié)束后形成完整實驗報告，作為實驗考核的主要依據(jù)；同時，每次實驗由指導老師對操作環(huán)節(jié)進行等級評定。最后的實驗成績按照操作成績和報告成績分別占40%和60%進行綜合評分。六、本實驗課配套教材或?qū)嶒炛笇鴱埼┙苤骶?糖復合物生化研究技術(shù),第二版,杭州:浙江大學出版社,2001《生物技術(shù)綜合大實驗》，自編實驗指導書，肖厚榮、陳群、闞勁松七、實驗報告要求實驗報告要用規(guī)定的實驗報告紙寫，實驗報告的內(nèi)容包括：實驗名稱、學生姓名、班號和實驗日期；課程名稱；實驗目的和