屋塵螨特異性IgG4抗體的功能在屋塵螨特異性免疫治療中的變化及其與臨床癥狀的關(guān)系

屋塵螨特異性IgG4抗體的功能在屋塵螨特異性免疫治療中的變化及其與臨床癥狀的關(guān)系第一部分屋塵螨特異性免疫治療的IgE易化變應(yīng)原結(jié)合試驗(yàn)的檢測方法的建立和驗(yàn)證目的:建立以屋塵螨變應(yīng)原為對象的IgE易化的變應(yīng)原結(jié)合試驗(yàn)(IgE-facilitatedallergenbindingassay,IgE-FAB)的方法學(xué)以及對IgE-FAB試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證,用于對屋塵螨變應(yīng)原特異性免疫治療(specificimmunotherapy,SIT)患者血清中的阻斷抗體功能的檢測。方法:IgE-FAB是IgE-變應(yīng)原復(fù)合物結(jié)合到EBV-B細(xì)胞上低親和力受體FcεRII(CD23)上的抗原遞呈過程,按照國際醫(yī)藥法規(guī)協(xié)會(ICH)的實(shí)驗(yàn)方法學(xué)建立屋塵螨變應(yīng)原特異性IgE-FAB試驗(yàn)的方法,以及驗(yàn)證該試驗(yàn)方法的條件依賴性、批內(nèi)和批間差異、重復(fù)性、敏感度、線性度和穩(wěn)健性。結(jié)果:屋塵螨變應(yīng)原濃度在1至5μg/ml的范圍內(nèi),變應(yīng)原-IgE復(fù)合物與B細(xì)胞可出現(xiàn)較好的結(jié)合率。而變應(yīng)原濃度為2μg/ml時,SIT的血清有最佳的相對結(jié)合率,為35.0±22.0%。變應(yīng)原-IgE復(fù)合物與B細(xì)胞的結(jié)合率和指示血清中的特異性IgE濃度呈極強(qiáng)相關(guān)性(r=0.898,p<0.001)。IgE-FAB試驗(yàn)的批內(nèi)和批間差異結(jié)果顯示:陽性質(zhì)控血清結(jié)合率及陰性血清相對結(jié)合率的總變異系數(shù)分別為10.28%和11.70%均小于ICH指南要求的值15%。結(jié)論:以屋塵螨變應(yīng)原為對象的IgE-FAB試驗(yàn)有良好的可重復(fù)性和穩(wěn)定性,對SIT臨床療效的判定有著良好的敏感性和特異性,可用于監(jiān)測屋塵螨SIT阻斷性抗體功能的變化及預(yù)測臨床療效,可作為屋塵螨特異性免疫治療的實(shí)驗(yàn)室檢測的免疫學(xué)指標(biāo)。第二部分屋塵螨特異性IgG4抗體的功能在屋塵螨特異性免疫治療中的變化及其與臨床癥狀的關(guān)系目的:闡明屋塵螨特異性免疫治療過程中屋塵螨特異性IgG4抗體功能的變化情況以及其與臨床療效改善的關(guān)系。方法:本研究選取在廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院變態(tài)反應(yīng)科接受屋塵螨特異性免疫治療3年的輕度-中度哮喘和/或過敏性鼻炎的患者52例,選取同期的輕度-中度哮喘和/或過敏性鼻炎接受藥物治療的患者31例作為對照。在治療前、治療4周、12周、16周、52周、104周和156周分別對患者哮喘和鼻炎癥狀及用藥情況進(jìn)行評估,計(jì)算癥狀計(jì)分與用藥計(jì)分的日均綜合評分,檢測第一秒用力肺活量預(yù)計(jì)值百分比(FEV1%)、用力肺活量預(yù)計(jì)值百分比(FVC%)及氣道高反應(yīng)性(AHR)。檢測各個治療時間的血清屋塵螨特異性IgE(DerpsIgE)、粉塵螨特異性IgE(DerfsIgE)、總IgE、屋塵螨特異性IgG4(DerpsIgG4)的濃度以及對各個治療時間的血清進(jìn)行IgE-FAB試驗(yàn)。分析臨床指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的動態(tài)變化以及對屋塵螨特異性IgG4的濃度、IgE-FAB相對結(jié)合率與綜合評分之間的關(guān)系進(jìn)行相關(guān)分析。結(jié)果:SIT組在治療12、16、52、104、156周的綜合計(jì)分與治療前比較均顯著性下降(P<0.05);對照組在治療12、16、52、104、156周較治療前顯著性下降(P<0.05);在治療16周、52周、104周、156周,SIT組綜合計(jì)分與對照組比較有顯著性差異(P<0.05)。SIT組及對照組在治療各時間點(diǎn)FEV1%預(yù)計(jì)值與治療前比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。SIT組及對照組在治療各時間點(diǎn)FVC%預(yù)計(jì)值與治療前比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。SIT組AHR級別在治療52周(1.50±1.37)、104周(1.50±1.34)、156周(1.18±1.08)與治療前(1.85±1.5)比較均顯著性下降(P<0.05);對照組無顯著性變化。SIT組血清DerpsIgG4濃度在治療12周(844.03±1103.69)、16周(4454.37±4417.18)、52周(16031.87±21457.52)、104周(27522.23±29689.03)、156周(31593.92±41203.70)較治療前(430.67±573.38)均顯著性上升(p<0.01);對照組無顯著性變化;在16,52,104和156周,SIT組Derp-IgG4水平與對照組比較均有顯著性差異(P<0.001)。SIT組治療16周(71±22%)、52周(45±22%)、104周(35±18%)、156周(31±15%)的IgE-變應(yīng)原復(fù)合物相對結(jié)合率較治療前(104±24%)均顯著性下降(P<0.001);對照組無顯著變化;在治療16周、52周、104周、156周,相對結(jié)合率與對照組比較有顯著性差異(P<0.01)。DerpsIgE濃度在治療的52周(71.25±103.75)、104周(73.79±117.67)、156周(62.75±86.50)較治療前(96.98±126.98)均出現(xiàn)顯著下降(P<0.05);對照組無顯著性差異。SIT組治療52周、104周、156周DerfsIgE濃度較治療前均出現(xiàn)顯著下降(P<0.05),對照組無顯著性差異。兩組總IgE在各時間點(diǎn)無顯著性下降(P>0.05)。SIT組DerpsIgG4水平與癥狀用藥的綜合評分在治療52周、104周、156周的維持階段均呈線性相關(guān)關(guān)系(P<0.05),在4周、12周、16周的起始階段均無相關(guān)性(P>0.05)。SIT組IgE-變應(yīng)原復(fù)合物相對結(jié)合率與癥狀用藥的綜合評分在治療52周、104周、156周的維持階段均呈線性相關(guān)關(guān)系(P<0.05),在4周、12周、16周的起始階段均無相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論:屋塵螨SIT在治療早期即