紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測技術(shù)規(guī)范

關(guān)于紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測技術(shù)規(guī)范主要內(nèi)容中國輸血技術(shù)操作規(guī)程(血站部分)1997年版中國輸血技術(shù)操作規(guī)程(血站部分)(征求意件稿)

AABBTechnicalManual14thed

AABBStandard21sted第2頁,共23頁，2024年2月25日，星期天對標(biāo)本的一般要求

實(shí)驗(yàn)室所檢測標(biāo)本須有清晰的惟一性標(biāo)識；標(biāo)本須和血液、血液成分制品來自于同一獻(xiàn)血者；所檢測的標(biāo)本可為抗凝的或不抗凝的標(biāo)本,抗凝劑推薦使用乙二胺四乙酸(EDTA)；遵守試劑/儀器使用說明書中所限定的標(biāo)本制備和保存步驟；當(dāng)說明書內(nèi)容不能涵蓋相關(guān)要求時(shí),可用經(jīng)確認(rèn)的標(biāo)本制備和保存步驟；肉眼判定標(biāo)本是否存在影響檢測結(jié)果的因素,如溶血、脂血等。第3頁,共23頁，2024年2月25日，星期天儀器設(shè)備的要求

儀器設(shè)備在安裝后，需校準(zhǔn)方可使用，校準(zhǔn)周期至少一年一次，儀器設(shè)備需有維護(hù)程序。所有的校準(zhǔn)、維護(hù)須有記錄。儀器設(shè)備所使用的軟件和實(shí)驗(yàn)室的信息系統(tǒng)須經(jīng)過確認(rèn)。第4頁,共23頁，2024年2月25日，星期天記錄的要求

所有檢測標(biāo)本具有可追溯性。核對當(dāng)前ABO/RhD定型結(jié)果與既往的血型記錄是否一致，結(jié)果不一致必須查找原因。第5頁,共23頁，2024年2月25日，星期天

ABO血型鑒定

Rh血型鑒定

紅細(xì)胞血型抗體鑒定

交叉配血試驗(yàn)

HDN血型血清學(xué)檢查檢測項(xiàng)目

第6頁,共23頁，2024年2月25日，星期天原理:根據(jù)紅細(xì)胞上和血清(或血漿)中有或無A抗原或/

和B抗原及其抗體,將血型分為A、B、AB及O型。

ABO血型鑒定

第7頁,共23頁，2024年2月25日，星期天方法:紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)

正定型用已知抗-A或抗-B定型試劑來測定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的A抗原或/和B抗原

反定型

用已知A1型細(xì)胞和B型細(xì)胞來測定血清中有無相應(yīng)的抗-A或/和抗-B

正反定型結(jié)果不一致或有疑問，需進(jìn)一步行ABO血型確認(rèn)試驗(yàn)。ABO血型鑒定

第8頁,共23頁，2024年2月25日，星期天ABO亞型鑒定A1和A2亞型鑒定原理:抗-A血清中含有抗-A和抗-A1兩種抗體，抗-A可以凝集A型和AB型紅細(xì)胞，而抗-A1只能與部分A型和AB型紅細(xì)胞反應(yīng)，據(jù)此凡與抗-A1強(qiáng)反應(yīng)者被定為A1或A1B型，不與抗-A1反應(yīng)，而與抗-A強(qiáng)反應(yīng)者被定為A2或A2B型。第9頁,共23頁，2024年2月25日，星期天鑒定其他弱A或弱B亞型紅細(xì)胞與抗-A、抗-A1、抗-B及抗-AB的凝集程度紅細(xì)胞上的H物質(zhì)活性的強(qiáng)弱血清中是否存在抗-A1和不規(guī)則抗-B分泌型人唾液中A、B、H物質(zhì)方法:凝集反應(yīng)、吸收放散、血凝抑制試驗(yàn)(唾液試驗(yàn))新生兒紅細(xì)胞ABO血型抗原較弱，不宜作亞型鑒定。ABO亞型鑒定第10頁,共23頁，2024年2月25日，星期天Rh血型鑒定原理:

Rh血型系統(tǒng)最常見的抗原主要有C,c,D,E,e5種?？煞謩e用抗C、抗c、抗D、抗E、抗e這5種Rh定型試劑通過血凝試驗(yàn)來檢查紅細(xì)胞上是否存在相應(yīng)抗原。在臨床輸血中，一般只做D抗原的鑒定。凡被檢紅細(xì)胞和抗D試劑凝集者為

RhD陽性，不凝集者為RhD陰性。第11頁,共23頁，2024年2月25日，星期天方法:

根據(jù)所選試劑的恃性，Rh血型的鑒定方法可采用試管直接鹽水凝集法，酶技術(shù)、抗人球蛋白技術(shù)、聚凝胺、微柱凝膠等。Rh血型鑒定第12頁,共23頁，2024年2月25日，星期天

RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)

D變異型

弱D不完全D

D抗原位點(diǎn)數(shù)減少抗原結(jié)構(gòu)產(chǎn)生變異

與常規(guī)使用的抗D定型試劑不凝集或弱凝集采用含IgG抗D抗體的采用抗不同D表位的抗D試劑進(jìn)行抗球蛋白試驗(yàn)抗體測定不同D表位

當(dāng)確定紅細(xì)胞上無D蛋白表達(dá)時(shí)，才能最終判定被檢標(biāo)本為RhD陰性RhD血型鑒定第13頁,共23頁，2024年2月25日，星期天要求:

紅細(xì)胞在直接凝集試驗(yàn)中被IgM抗-D凝集的和在RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)中被任何一種抗-D凝集的都應(yīng)標(biāo)記為RhD陽性。在直接凝集試驗(yàn)和在RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)中與任何一種抗-D都不凝集的血液需標(biāo)記為RhD陰性。紅細(xì)胞與IgM抗-D定型試劑在直接凝集試驗(yàn)中不/弱凝集的標(biāo)本，需進(jìn)一步進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)。RhD血型鑒定第14頁,共23頁，2024年2月25日，星期天原理:

用已知抗原表型的試劑紅細(xì)胞組，通過直接凝集試驗(yàn)和間接抗球蛋白試驗(yàn)，篩選標(biāo)本中可能存在的血型同種免疫性抗體。避免含有臨床意義的血型同種抗體隨血液、血液成分制品一同輸入。紅細(xì)胞血型抗體鑒定第15頁,共23頁，2024年2月25日，星期天紅細(xì)胞血型抗體鑒定方法:鹽水懸浮細(xì)胞凝集試驗(yàn)

間接抗球蛋白試驗(yàn)及各種改良的IAT免疫熒光技術(shù)、放射免疫技術(shù)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)固相紅細(xì)胞粘附試驗(yàn)以及凝膠試驗(yàn)AABB:有輸血史或/和妊娠史的獻(xiàn)血者需要進(jìn)行紅細(xì)胞血型抗體鑒定(具臨床意義的抗體)第16頁,共23頁，2024年2月25日，星期天試劑:用于篩選的試劑紅細(xì)胞必須來自至少兩名無關(guān)O型供者，要求一種細(xì)胞為R1R1，另一種為R2R2表型，且表達(dá)下列抗原:M,N,S,s,Mur,Dia,k,Fya,Fyb,Jka,Jkb,Lea。并盡可能多的包含Duffy,Kidd血型系統(tǒng)中主要抗原的純合子以及低頻率抗原。紅細(xì)胞血型抗體鑒定第17頁,共23頁，2024年2月25日，星期天要求:必須對篩選檢測出的抗體進(jìn)行鑒定，評估其臨床意義。不進(jìn)行抗體鑒定的實(shí)驗(yàn)室需將抗體篩選陽性標(biāo)本送至具有資質(zhì)的參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行最后鑒定或確證。紅細(xì)胞血型抗體鑒定第18頁,共23頁，2024年2月25日，星期天交叉配血試驗(yàn)原理:

交叉配血試驗(yàn)指檢查受血者與供血者的抗原抗體成分是否相容，以及是否含有不規(guī)則抗體等,以保證輸血安全。第19頁,共23頁，2024年2月25日，星期天方法:交叉配血分“主側(cè)”交叉試驗(yàn)，即患者血清與獻(xiàn)血者紅細(xì)胞的相容性試驗(yàn)；“次側(cè)”交叉試驗(yàn)即獻(xiàn)血者血清與患者紅細(xì)胞的相容性試驗(yàn)。

患者與獻(xiàn)血者的配血血樣，每次輸血后，4℃保存3～7天。交叉配血試驗(yàn)第20頁,共23頁，2024年2月25日，星期天新生兒溶血病血型血清學(xué)檢查原理:

新生兒溶血病(HDN)是由母嬰血型不合引起,胎兒和新生兒紅細(xì)胞被來自母體的IgG抗體致敏,并在其自身網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)受到免疫性破壞。第21頁,共23頁，2024年2月25日，星期天方法:

嬰兒及其父母ABO/RH血型鑒定