30單元七 微生物的生長與控制　項(xiàng)目二 微生物生長的控制（三、項(xiàng)目實(shí)訓(xùn)：環(huán)境因素對(duì)微生物生長的控制）

微生物學(xué)基礎(chǔ)單元七微生物的生長與控制

１目的要求三、項(xiàng)目實(shí)訓(xùn)：環(huán)境因素對(duì)微生物生長的控制

項(xiàng)目二微生物生長的控制了解不同環(huán)境中微生物的存在；掌握物理因素、化學(xué)因素及生物因素抑制或殺死微生物的作用。

２基本原理三、項(xiàng)目實(shí)訓(xùn)：環(huán)境因素對(duì)微生物生長的控制

不同環(huán)境因素對(duì)微生物的生長影響不同；同一因素因其濃度或作用時(shí)間不同，對(duì)微生物的影響也不同；有的因素是微生物生長繁殖所必須的條件,有的表現(xiàn)為抑制作用,有的表現(xiàn)為殺菌作用；掌握物理的、化學(xué)的和生物的環(huán)境因素對(duì)微生物生長或抑制或殺死的影響,以便對(duì)有利的微生物創(chuàng)造其生長的條件，而對(duì)有害微生物則設(shè)法加以控制或殺死。

３實(shí)訓(xùn)用品三、項(xiàng)目實(shí)訓(xùn)：環(huán)境因素對(duì)微生物生長的控制

菌種：枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌；培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白脈瓊脂及液體培養(yǎng)基、而碼糖蛋白脈液體培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基；藥品：土霉素、新潔爾滅、復(fù)方新諾明、汞溴紅(紅藥水)、結(jié)晶紫(紫藥水)；儀器或其他用具：水浴鍋、黑紙、紫外線燈、接種工具。

４操作步驟－環(huán)境中微生物的檢查三、項(xiàng)目實(shí)訓(xùn)：環(huán)境因素對(duì)微生物生長的控制

環(huán)境中微生物的檢查：檢查項(xiàng)目及要求：微生物在自然界廣泛分布,為了進(jìn)行純種培養(yǎng)，必須進(jìn)行無菌操作；本實(shí)驗(yàn)是檢查空氣、土壤、手指、錢幣等處微生物的存在,以加強(qiáng)無菌觀念；方法:

?制備牛肉膏蛋白胨平板培養(yǎng)基,在培養(yǎng)皿的底部，用紅蠟筆劃分幾個(gè)區(qū)域,用手指、錢幣等輕輕在平板上涂抹，37℃培養(yǎng)；?檢查空氣中雜菌時(shí)，則將培養(yǎng)皿蓋打開,在空氣中暴露5-10min,再蓋上皿蓋,37℃培養(yǎng)24h。

４操作步驟－物理因素影響微生物生長的檢查三、項(xiàng)目實(shí)訓(xùn)：環(huán)境因素對(duì)微生物生長的控制

物理因素影響微生物生長的檢查：紫外線照射的影響：?原理：紫外燈的瓦數(shù)、照射時(shí)間及照射距離的不同,對(duì)微生物產(chǎn)生不同的影響效果；功率大、時(shí)間長、距離短時(shí)容易殺死微生物；功率小、時(shí)間短、距離長時(shí)就會(huì)有微生物個(gè)體殘存下來,其中有個(gè)體發(fā)生了變異；可被利用來進(jìn)行滅菌和誘變選育；?方法：吸取0.1mL培養(yǎng)18h的金黃色葡萄球菌或大腸桿菌或枯草芽孢桿菌菌液于牛肉膏蛋白胨平板上，以無菌涂布棒涂布均勻；打開皿蓋，用無菌黑紙遮住部分平板，置紫外燈下照射30min，取出黑紙，蓋上皿蓋。37℃培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果。

４操作步驟－物理因素影響微生物生長的檢查三、項(xiàng)目實(shí)訓(xùn)：環(huán)境因素對(duì)微生物生長的控制

物理因素影響微生物生長的檢查：微生物對(duì)高溫的抵抗能力：

?原理：根據(jù)微生物最適生長的溫度范圍，可分為高溫菌、中溫菌、低溫菌，自然界中絕大部分微生物屬于中溫菌,但不同的微生物對(duì)高溫的抵抗力不同,特別是芽孢桿菌對(duì)溫度抵抗力強(qiáng)；

?方法：①取盛有牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的試管8支,編號(hào)；②將培養(yǎng)48h的枯草芽孢桿菌及大腸桿菌的斜面,加入無菌生理鹽水各4mL,用接種環(huán)刮下菌體,混勻,制成菌懸液,在單號(hào)試管1、3、5、7中各加人兩滴枯草芽孢桿菌菌液,在雙號(hào)試管2、4、6、8中各加人兩滴大腸桿菌菌液；③將所有試管都放入100℃水浴中,10min取出1～4管,再過10min取出5~8管。當(dāng)上述各管取出后立即用冷水沖涼或冰浴中冷卻,然后放人37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),24h后,觀察生長情況。

５操作步驟－化學(xué)因素影響微生物生長的檢查三、項(xiàng)目實(shí)訓(xùn)：環(huán)境因素對(duì)微生物生長的控制

化學(xué)因素影響微生物生長的檢查：原理：一些化學(xué)藥品對(duì)微生物的生長有抑制或殺死作用,因此在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),生產(chǎn)上或醫(yī)療上常利用適宣的化學(xué)藥品對(duì)有害菌進(jìn)行消毒或殺菌,但應(yīng)注意藥品的濃度及使用時(shí)其他因素的影響；方法：圓濾紙片法；

?第一步：在培養(yǎng)18~20h的金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌的斜面中，加人4mL生理鹽水，用接種環(huán)將菌苔刮下,振蕩，制成均勻的菌懸液；

?第二步：吸取0.2mL（或4滴）菌液,滴入無菌培養(yǎng)皿中,然后將融化而冷卻至50℃左右的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基傾入（12~15mL)，混勻,平置待冷；?第三步：用鑷子取已分別浸泡土霉素、新潔爾滅、復(fù)方新諾明、汞溴紅（紅藥水)、結(jié)晶紫（紫藥水）的藥品溶液中的圓濾紙片,置于同一含菌的平板上；

?第四步：將平板倒置于37℃恒溫箱中,培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果。記錄抑菌圈的直徑，根據(jù)其直徑的大小,可初步確定各種藥物的抑菌效能。

５操作步驟－化學(xué)因素影響微生物生長的檢查三、項(xiàng)目實(shí)訓(xùn)：環(huán)境因素對(duì)微生物生長的控制