《枸杞中枸杞多糖的測定 離子色譜法》國家標準編制說明

《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》國

家標準編制說明

1任務來源

本國家標準的制定任務是根據(jù)國家標準化管理委員會下達的國家標準制定

計劃《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》項目（計劃號為20205072-T-424）

起草。本項目為2017年國家重點研發(fā)計劃NQI項目《主要農業(yè)廢棄物提取加

工與功效評價標準研究》（2017YFF0207800）中一個任務。國家標準計劃《枸

杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》由中國科學院蘭州化學物理研究所上報，中

國標準化研究院歸口及執(zhí)行，主管部門為國家市場監(jiān)督管理總局。本標準由中

國科學院蘭州化學物理研究所、蘭州市食品藥品檢驗檢測研究院、中國標準化

研究院、北京林業(yè)大學、寧夏中杞生物科技有限公司共同起草。本標準主要起

草人：邸多隆、裴棟、邱國玉、席興軍、王寧麗、劉笑笑、蘭韜、雷建都、賈

占魁。

2起草的目的意義

枸杞子是被列入我國《既是食品又是藥品的物品名單》，廣泛的應用于食品、

保健食品和中成藥等大健康產(chǎn)業(yè)。我國枸杞種植面積達到400多萬畝，總產(chǎn)量

27萬噸，相關產(chǎn)品的產(chǎn)值達到200億元。近年來，隨著歐美等發(fā)達國家和地區(qū)

市場對枸杞的逐步了解，枸杞的營養(yǎng)保健功效在西方國家逐漸得到證實和認可。

枸杞的國外市場需求逐漸從亞洲地區(qū)和華裔市場拓展到了歐盟、美國、澳大利

亞等地。在國際市場需求的帶動下，國內從事枸杞進出口業(yè)務的企業(yè)逐漸增多，

枸杞的進出口美貿易規(guī)模也在不斷擴大。根據(jù)海關的統(tǒng)計數(shù)據(jù)，2019年我國枸

杞進出口貿易總量11587噸，其中：枸杞出口總量11563噸，出口金額9446萬

美元。

枸杞多糖是枸杞中的主要活性成分和指標成分之一，現(xiàn)代研究表明：枸杞多

糖具有免疫調節(jié)作用、延緩衰老作用、眼部保護作用、肝臟保護作用、抗腫瘤

作用、降血糖作用、抗疲勞等多種生理、藥理活性。與日益增長的枸杞需求相

比，國內外枸杞多糖的相關標準一直未得到很好的提升。

2.1枸杞質量控制的需要

準確測定枸杞多糖的含量，將有利于客觀的評價枸杞的質量，有利于引導質

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量提升、規(guī)范市場秩序、促進公平貿易、實現(xiàn)優(yōu)質優(yōu)價、和維護消費者權益。

目前全國最大的枸杞交易中心為“中寧國際枸杞交易中心”，每年枸杞交易量約

15萬噸，占到全國枸杞交易量的一半，其質量安全檢測中心每年平均需要檢測

枸杞多糖5萬余批次，全國具有CMA資質的食品檢測機構總計1299家，包括

省市級食品藥品檢驗檢測研究院/所、省市級疾控中心，大部分均可開展枸杞中

枸杞多糖的檢測。這些機構按照目前的產(chǎn)品標準QB/T5176-2017《枸杞多糖》，

每家每年檢測機構約檢測以枸杞原料的藥品、食品或枸杞原藥材約200次，每

年共需要檢測枸杞多糖26萬余批次。民營的食品檢測機構116家，如華測、譜

尼、萊茵、諾安、SGS等，枸杞相關食品、保健食品中枸杞多糖的檢測約11600

批次。枸杞提取物生產(chǎn)企業(yè)，枸杞中成藥生產(chǎn)企業(yè)、枸杞保健食品和食品的生

產(chǎn)企業(yè)每年，如中杞等枸杞加工企業(yè)，其企業(yè)的質檢部每年平均需要檢測枸杞

多糖15.3萬余批次，主要是包括每批次枸杞原料的采購入庫、加工產(chǎn)品的質量

監(jiān)控和終端產(chǎn)品的檢測。枸杞出口檢測，每年出口量約為20000噸，檢測約10000

余次。因此，我國的枸杞國內外市場均急需制定準確、先進、綠色的枸杞多糖

的檢測方法國家標準。

2.2完善國家標準的需要

目前，我國關于枸杞多糖的標準主要有QB/T5176-2017枸杞多糖。該方法

是通過多糖類成分在濃硫酸作用下水解，與苯酚縮合成有色化合物，然后利用

分光光度法測其多糖含量。經(jīng)過幾年的應用和實施，檢驗和生產(chǎn)行業(yè)領域對該

標準當中規(guī)定的檢測方法，公認該標準存在兩個不足：一是檢測結果準確性差，

準確性差主要是由于該方法專屬性差、重現(xiàn)性差、干擾嚴重。二是檢測方法操

作繁瑣、不能實現(xiàn)高通量檢測、危險。因為該方法是顯色反應，檢測結果與顯

色時間有直接相關性，所以較難實現(xiàn)自動化、大批量的檢測。此外，該方法標

準使用大量的濃硫酸和苯酚衍生化等高腐蝕、有毒試劑，對環(huán)境和實驗人員均

有較大負面影響，屬于應淘汰的技術方法。

《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》采用的離子色譜方法，通過對枸杞

多糖的水解，利用離子色譜技術對組成多糖的單糖進行分離和含量測定，可以

很好的克服硫酸苯酚法對枸杞多糖檢測的缺陷，方法具有專屬性強、穩(wěn)定、無

雜質干擾，此外方法簡單、可實現(xiàn)自動化檢測、操作安全等優(yōu)點。

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3枸杞多糖研究、應用與標準現(xiàn)狀

3.1枸杞多糖研究

國內外對枸杞多糖的研究已經(jīng)十分廣泛，可查詢到大量的論文與專利，研究

范圍包括提取分離、成分分析、藥理活性、結構表征、質量評價及工業(yè)應用等

方面。

3.2枸杞多糖檢測方法

目前，枸杞多糖的含量測定常用方法是比色法（如蒽酮硫酸法、苯酚硫酸法）。

劉萬倉等[1]采用換算因子（利用LBPs和葡萄糖標曲）校正的苯酚硫酸法測定

了不同產(chǎn)地及不同品質枸杞中多糖含量。近年來，有研究人員建立了通過PMP

衍生，再利用高效液相色譜技術測定多糖含量的方法，例如，Wu等[2]建立了一

種高效液相凝膠排阻色譜法聯(lián)用多角度激光光散射檢測器和示差檢測器

（HPSEC-MALLS-RID）測定枸杞多糖及其不同組分含量的方法。上述兩種方

法都能實現(xiàn)枸杞多糖含量的測定，但經(jīng)典的硫酸-苯酚法是顯色反應，檢測結果

與顯色時間有直接相關性，所以較難實現(xiàn)自動化、大批量的檢測；該方法專屬

性差、重現(xiàn)性差、干擾嚴重；此外，該方法標準使用大量的濃硫酸和苯酚衍生

化等高腐蝕、有毒試劑，對環(huán)境和實驗人員均有較大負面影響。PMP-HPLC法

需要衍生化，操作繁瑣。而離子色譜法具有較高的靈敏度且無需衍生前處理，

如李靜等[3]建立了毛細管型離子色譜－脈沖安培法檢測枸杞多糖組成的方法，

該方法中10種單糖成分標準曲線線性關系良好，相關系數(shù)均大于99.9%，檢出

限在2.5~75μg/L之間，可以實現(xiàn)枸杞多糖中單糖含量的準確測定。因此，制定

簡單靈敏、準確性高的枸杞中枸杞多糖含量的離子色譜檢測方法具有十分重要

的現(xiàn)實意義和緊迫性。

3.3枸杞多糖標準

目前，國內關于枸杞多糖檢測相關的標準有GB/T18672-2014、GB/T

19742-2008、QB/T5176-2017均是采用硫酸苯酚法測定所含的總多糖。而國外

包括美國、歐盟、日本等國家目前還沒有制訂枸杞多糖的相關標準。硫酸苯酚

法測定枸杞多糖的方法，雖然較為經(jīng)典，但普遍存在兩個不足：一是檢測結果

準確性差，準確性差主要是由于該方法專屬性差、重現(xiàn)性差、干擾嚴重。二是

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檢測方法操作繁瑣、不能實現(xiàn)高通量檢測、危險。因為該方法是顯色反應，檢

測結果與顯色時間有直接相關性，所以較難實現(xiàn)自動化、大批量的檢測。此外，

該方法標準使用大量的濃硫酸和苯酚衍生化等高腐蝕、有毒試劑，對環(huán)境和實

驗人員均有較大負面影響，屬于應淘汰的技術方法。

本標準采用的離子色譜方法，通過對枸杞多糖的水解，利用離子色譜技術對

組成多糖的單糖進行分離和含量測定，然后通過加和得到枸杞多糖的總含量，

可以很好的克服硫酸苯酚法對枸杞多糖檢測的缺陷，方法具有專屬性強、穩(wěn)定、

無雜質干擾，此外方法簡單、可實現(xiàn)自動化檢測、操作安全。

合理準確的枸杞多糖測定方法，將有利于客觀的評價枸杞的質量，維護消費

者權益，有利于應對國際貿易發(fā)展和統(tǒng)一監(jiān)測的需求。同時，制定枸杞中枸杞

多糖的檢測方法也是完善國家標準，提升我國枸杞產(chǎn)業(yè)的國際影響力的需求。

因此，本標準的制定具有十分重要的現(xiàn)實意義和緊迫性。

4主要起草過程

4.1成立標準制定工作組

國家重點研發(fā)項目立項后，2017年11月10日在北京市西藏大廈召開了國

家標準《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》第一次工作會。參加單位有中國

科學院蘭州化學物理研究所、蘭州市食品藥品檢驗檢測研究院、中國標準化研

究院、北京林業(yè)大學、寧夏中杞生物科技有限公司等。會議成立了由中國科學

院蘭州化學物理研究所、蘭州市食品藥品檢驗檢測研究院、中國標準化研究院、

北京林業(yè)大學、寧夏中杞生物科技有限公司等單位參加的標準工作組，主要由

從事標準制修訂、儀器分析、具有豐富技術經(jīng)驗的專業(yè)研究人員組成，工作組

制定了初步的標準編制工作計劃。

4.2確定工作計劃和標準制定原則

按照工作任務要求，工作組制定了標準起草工作計劃和任務分工。

在充分研究與討論的基礎上，制定了標準制定原則：

（1）先進性：其準確度、精密度和靈敏度達到較高水平。

（2）適用性：要適應我國植物提取物產(chǎn)業(yè)發(fā)展的要求，滿足植物提取物現(xiàn)

代化的需要。

I}

（3）可操作性：符合我國目前檢測儀器設備和試劑、材料的供應條件。

（4）實用性：符合檢測從業(yè)人員的技術水平，能被國內主要的環(huán)境分析實

驗室所使用并達到所規(guī)定的要求。要有利于提高枸杞原料的質量，為醫(yī)藥、食

品等質量控制部門、有關企業(yè)和三農服務。

4.3查詢國內外相關標準和文獻資料

2020年，開始開展“枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法”方法研究。由于

在現(xiàn)行國家標準、行業(yè)標準、地方標準、團體標準和企業(yè)標準中，關于枸杞多

糖的標準主要是QB/T5176-2017枸杞多糖。該方法是通過多糖類成分在濃硫酸

作用下水解，與苯酚縮合成有色化合物，然后利用分光光度法測其多糖含量。

經(jīng)過幾年的應用和實施，檢驗和生產(chǎn)行業(yè)領域對該標準當中規(guī)定的檢測方法，

公認該標準存在兩個不足：一是檢測結果準確性差，準確性差主要是由于該方

法專屬性差、重現(xiàn)性差、干擾嚴重。二是檢測方法操作繁瑣、不能實現(xiàn)高通量

檢測、危險。因為該方法是顯色反應，檢測結果與顯色時間有直接相關性，所

以較難實現(xiàn)自動化、大批量的檢測。此外，該方法標準使用大量的濃硫酸和苯

酚衍生化等高腐蝕、有毒試劑，對環(huán)境和實驗人員均有較大負面影響，屬于應

淘汰的技術方法。

離子色譜方法通過對枸杞多糖的水解，利用離子色譜技術對組成多糖的單糖

進行分離和含量測定，然后通過校正因子的計算與加和得到枸杞多糖的總含量，

可以很好的克服硫酸苯酚法對枸杞多糖檢測的缺陷，方法具有專屬性強、穩(wěn)定、

無雜質干擾，此外方法簡單、可實現(xiàn)自動化檢測、操作安全。借鑒《藥典（2015

版）枸杞子》中枸杞多糖的提取方法，以枸杞為樣品，經(jīng)過初步試驗，證明方

法是可行的。而后對方法進行優(yōu)化，對方法進行驗證，結果表明方法的準確性、

回收率、精密度等方面都能達到國家可標準的要求，并且基本符合制定國家標

準的條件，并于2020年向國家標準化管理委員會提出立項申請。

4.4研究建立標準方法，開展條件實驗

標準工作組按照計劃任務書的要求，結合制定標準的要求，研究建立標準方

法的實驗方案，并進行方法前處理條件的選擇、儀器條件的確定和方法精密度、

準確度及檢出限的測定等試驗。

2018年4月開始，標準起草工作組赴寧夏回族自治區(qū)中寧縣進行枸杞主產(chǎn)

I}

地調研，獲取了大量相關信息與數(shù)據(jù)。2018年7月18日從寧夏中杞枸杞種植

基地采集大量枸杞果實，曬干后作為枸杞多糖提取的原料。

原料樣品采集后，開始開展實驗室驗證工作，建立枸杞中枸杞多糖的離子色

譜分析方法，包括線性范圍、相關系數(shù)、加標回收率、準確度、精密度、檢出

限、定量限等，以及枸杞中枸杞多糖的提取條件的摸索與優(yōu)化，如提取時間、

三氟乙酸濃度、微波消解時間等。

4.5方法驗證

2021年5～7月，由5家單位對“枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法”進

行驗證，分別是.。。。，通過統(tǒng)計檢驗技術確認外部實驗室試驗結果的準確性。

4.6形成標準討論稿和編制說明

2019年7月5日，起草工作組組織相關單位和專家，在中國科學院蘭州化

學物理研究所青島研究發(fā)展中心召開第二次標準起草工作會。參會單位包括中

國標準化研究院、中國科學院蘭州化學物理研究所、北京林業(yè)大學、北京市理

化分析測試中心、中國熱帶農業(yè)科學院、寧夏中杞生物科技有限公司等。

與會專家對《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》標準草案中的英文名稱、

范圍、術語和定義、基本要求、主要技術指標、附錄等章條提出了詳細的意見，

會后根據(jù)修改意見形成了《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》標準討論稿及

其編制說明。

4.7形成標準草案

標準起草工作組查閱、收集和整理了國內外有關研究進展和專利、標準、法

規(guī)等文獻資料，掌握了相關標準的現(xiàn)狀；對文獻中枸杞多糖測定方法進行了對

比和總結，為標準文本的編制奠定理論基礎。在《枸杞中枸杞多糖的測定離子

色譜法》國家標準第一次起草工作會議的基礎上，起草工作組相關單位共同討

論起草形成了《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》國家標準的技術框架和主

要內容，初步形成了《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》標準草案。

4.8形成標準征求意見稿和編制說明

在前期工作的基礎上，起草工作組組織相關單位和專家于2019年10月22

日在北京中國標準化研究院召開第三次標準起草工作會。參會單位包括中國科

學院蘭州化學物理研究所、中國標準化研究院、北京林業(yè)大學、北京理化分析

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測試中心等。與會成員認真討論《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》標準討

論稿后，根據(jù)討論結果修改形成了《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》征求

意見稿及編制說明。會議同時討論了下一階段征求意見的單位和專家名單。

4.9征求意見并形成標準送審稿和編制說明

2021年3月1日-2020年4月30日，起草工作組根據(jù)討論的專家和單位名

單，分別向相關的行業(yè)主管部門、科研機構、檢測部門和企業(yè)等X個單位和專

家發(fā)出了標準征求意見稿，向相關單位和專家征求標準修改意見。截止到2020

年X月X日，共收集到…等X家科研機構、檢測機構、管理部門、生產(chǎn)企業(yè)

等單位提出的反饋意見X條。

5本標準與國內外分析方法的關系

本標準研究旨在建立一項滿足我國枸杞中枸杞多糖含量檢測的要求，在質量

控制目標和技術手段上與國際接軌，適應我國大部分質控實驗室儀器設備和技

術能力的檢測方法標準。通過查閱國內外相關文獻資料，制定條件優(yōu)化方案，

確保本方法前處理所采用的裝置操作簡便，能夠滿足國內實驗室的條件要求。

本標準擬采用離子色譜法測定枸杞多糖中的各個單糖。樣品的前處理，即提取

采用加熱回流法，水解采用微波消解法；檢測方法參考文獻資料，選擇合適的

色譜柱以及儀器條件。力求方法在穩(wěn)定、可靠和實用的基礎上，達到國際先進

水平，以適應我國枸杞中枸杞多糖含量檢測、質控與管理的需要。

6主要技術指標依據(jù)與說明

6.1標準名稱

本標準主要解決枸杞中枸杞多糖含量測定的技術問題，所以將本標準的名稱

定為：《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》，翻譯為“Determinationofwolfberry

polysaccharidesinwolfberry--Ionchromatography”。

6.2前言

明確了本標準的歸口單位及主要起草單位、起草人。

6.3主體內容

標準的主體內容包括：范圍、規(guī)范性引用文件、原理、試劑和材料、儀器和

I}

設備、枸杞中枸杞多糖的提取與測定方法、結果計算與表示、精密度和回收率

等。

6.4“范圍”的界定

本標準規(guī)定了基于離子色譜法的枸杞中枸杞多糖含量測定方法的范圍、規(guī)范

性引用文件、原理、試劑和材料、儀器和設備、枸杞中枸杞多糖的提取與測定

方法、結果計算與表示、精密度和回收率。

本標準適用于枸杞種植、加工、銷售等質量控制環(huán)節(jié)中枸杞多糖含量的測定。

6.5原理

樣品分別經(jīng)乙醚提取、80%乙醇提取，除去小分子化合物，然后用水回流提

取、水解后制備得到枸杞多糖水解液。水解液中單糖以離子交換色譜柱，氫氧

化鈉/醋酸鈉溶液梯度洗脫，脈沖安培檢測器(Au為工作電極，Pd為參比電極)

檢測，測定枸杞多糖水解產(chǎn)生的單糖組成及含量，以各單糖的加和含量為基準

計算出枸杞樣品中枸杞多糖的含量。

6.6試劑和材料

6.6.1標準物質：D-葡萄糖，D-木糖，D-半乳糖，D-甘露糖，L-阿拉伯糖，L-

鼠李糖，D-果糖，L-巖藻糖，D-核糖，D-半乳糖醛酸，D-葡萄糖醛酸，純度≥99%。

6.6.2氫氧化鈉（NaOH）：色譜純。

6.6.3醋酸鈉（CH3COONa）：色譜純。

6.6.4三氟乙酸（C2HF3O2）：分析純。

6.6.54mol/L三氟乙酸溶液：準確移取30mL三氟乙酸，用水稀釋至100mL。

6.6.6單糖標準溶液：準確稱取經(jīng)真空干燥至恒重的D-葡萄糖，D-木糖，D-半

乳糖，D-甘露糖，L-阿拉伯糖，L-鼠李糖，D-果糖，L-巖藻糖，D-核糖，D-

半乳糖醛酸，D-葡萄糖醛酸對照品各100mg，置于同一100mL容量瓶中，加水

適量使溶解并稀釋至刻度，配制成質量濃度為1000μg/mL的單糖標準溶液，搖

勻，即得。

6.6.7去離子水為實驗室自制，符合GB/T6682中的要求。

6.6.8氮氣（N2）：氮氣（≥99.995%）

6.6.9濾膜：0.22μm水系濾膜

6.6.10圓底燒瓶：250mL。

I}

6.6.11濾紙：定性濾紙（直徑15cm）。

6.6.12容量瓶：25mL，100mL。

6.7儀器和設備

6.7.1離子色譜儀：配脈沖安培檢測器(Au為工作電極，Pd為參比電極)。

6.7.2分析天平：感量0.0001g。

6.7.3十萬分之一分析天平：感量0.00001g。

6.7.4微波消解儀：配有聚四氟乙烯消解罐。

6.7.5電熱恒溫鼓風干燥箱。

6.7.6超聲波清洗儀。

6.7.7渦旋混合器。

6.7.8恒溫電熱套。

6.7.9索氏提取器。

6.7.10旋轉蒸發(fā)儀。

6.7.11氮吹儀。

6.7.12pH計。

6.7.13微量移液槍及配套槍頭。

6.7.14小型粉碎機。

6.8枸杞中枸杞多糖的提取與測定方法

6.8.1樣品處理

取干燥枸杞子，去除果蒂、葉子等雜質，粉碎，混勻備用。

準確稱取樣品粉末(0.5±0.05)g，加乙醚100mL，加熱回流1小時，靜置，

放冷，小心棄去乙醚液，殘渣置水浴上揮盡乙醚。加入80%乙醇100mL，加熱

回流1小時，趁熱濾過，濾渣與濾器用熱80%乙醇30mL分次洗滌，濾渣連同

濾紙置燒瓶中，加水150mL，加熱回流2小時。趁熱濾過，用少量熱水洗滌濾

器，合并濾液與洗液，旋轉蒸發(fā)濃縮溶劑后，移至25mL容量瓶中，用少量熱

水洗滌旋蒸瓶，合并濃縮液與洗液，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，即得樣品

溶液。

量取樣品溶液5mL，置微波消解罐中，加入4mol/L三氟乙酸（TFA）5mL，

于110℃微波中水解30min后，冷卻至室溫，氮吹完全除去三氟乙酸，加水定

I}

容至5mL，搖勻，0.22μm濾膜過濾，供離子色譜分析用。試樣中各單糖的

響應值應在標準曲線線性范圍內，超過線性范圍則應稀釋后再進行離子色譜分

析。

6.8.2檢測條件

按照制造商操作手冊運行離子色譜儀。以下分析條件可供參考，采用其他條

件應驗證其適用性：

色譜條件如下：

色譜柱：MetrosepCarb2–250/4.0色譜柱和MetrosepCarb2Guard/4.0保護

柱，或性能相當者。

進樣量：20μL

流速：0.6mL/min

流動相：以氫氧化鈉和醋酸鈉溶液梯度洗脫(A:1mmol/L氫氧化鈉和1.5

mmol/L醋酸鈉混合溶液;B:100mmol/L氫氧化鈉和150mmol/L醋酸鈉混合溶

液)

梯度洗脫程序見表1。

檢測器：脈沖安培檢測器，Au工作電極，Pd參比電極，檢測器電位波形程

序見表2。

表1梯度洗脫程序

時間/minAB

0.001000

30.01000

30.10100

55.00100

55.11000

75.01000

表2檢測器電位波形程序

時間/s電位/V積分

0.00+0.05—

0.20+0.05開始

0.30+0.05結束

0.35+0.55—

0.55-0.10—

I}

圖1單糖標準溶液色譜圖

圖2枸杞多糖溶液色譜圖

6.8.3標準曲線

分別取單糖系列配制成0.1、0.25、0.5、1.0、2.5、5.0μg/mL的混合標準溶液

及待上機試樣溶液，按照上述列出的條件進行離子色譜分析測定。由保留時間

對各單糖進行定性，根據(jù)混標溶液中各單糖響應信號，建立標準工作曲線，工

作曲線線性相關系數(shù)R2≥0.998，對試樣的各單糖含量進行定量計算，通過加

和求得試樣中多糖的含量。

待測樣液中各單糖的響應值應在標準曲線線性范圍內，超過線性范圍則應稀

釋后再進行分析。分析過程中，每20次樣品測定后應加入一個與樣品峰面積相

I}

近的混合標準工作液，如果測得的值與原值相對平均偏差超過5%，則應重新進

行標準曲線的制作。

表3各單糖線性方程

目標物線性方程線性范圍(μg/mL)相關系數(shù)(R2)

巖藻糖A=0.573818+3.04610×Q0.1-5.00.9996

半乳糖A=-10.1559+9.92044×Q0.1-5.00.9998

阿拉伯糖A=-8.42698+3.54039×Q0.1-5.00.9989

葡萄糖A=-8.85801+4.11363×Q0.1-5.00.9992

鼠李糖A=2.09622+2.59049×Q0.1-5.00.9994

木糖A=1.01363+3.49460×Q0.1-5.00.9997

甘露糖A=-3.71325+2.51509×Q0.1-5.00.9994

果糖A=-5.57897+2.30125×Q0.1-5.00.9988

A=-6.67067+2.43576×

核糖0.1-5.00.9986

Q

半乳糖醛酸A=-2.56207+1.13913×Q0.1-5.00.9997

葡萄糖醛酸A=-4.75262+2.92380×Q0.1-5.00.9994

6.8.4檢出限和定量限

檢出限是指一種分析方法在給定的可靠程度內可從樣品中檢測到待測物質

的最小濃度或者最小量。檢出限為物質引起檢測器產(chǎn)生的響應信號是噪聲值的

三倍時，即信噪比為S/N=3時的量。定量限是指樣品中被檢測物能被定量檢測

到的最低量，其測定結果應具有一定的準確度。定量限表現(xiàn)的是某一分析方法

是否具備敏捷的定額檢測能力。檢測器產(chǎn)生的響應信號為噪聲值十倍，即信噪

比S/N=10時的量為定量限。

表4各單糖的檢出限和定量限

目標物檢出限(μg/mL)定量限(μg/mL)

巖藻糖0.010.025

半乳糖0.0050.01

阿拉伯糖0.0250.05

葡萄糖0.010.05

I}

鼠李糖0.0250.05

木糖0.010.05

甘露糖0.050.1

果糖0.050.1

核糖0.050.1

半乳糖醛酸0.050.1

葡萄糖醛酸0.050.1

6.8.5精密度

精密度指的就是當對多個量進行多次測量時，各個量測結果之間的離散程

度。

要求所加工的零件的尺寸達到的準確程度,也就是容許誤差的大小，容許誤

差大的精密度低，容許誤差小的精密度高，簡稱“精度”,常用相對標準偏差

(relativestandarddeviation，RSD)表示。

相對標準偏差的計算公式如下：

s

RSD100%

x

其中S為標準偏差(也可以表示為SD)。

配制各單糖濃度范圍為0.5μg/mL的混合溶液，按6.8.2色譜條件進行檢測，

分別得到其峰面積(nA)xmin，計算其RSD值，具體實驗結果如表5所示，實

驗相對標準誤差在0.40%~2.81%之間，實驗偏差較小，精密度符合要求。

表5精密度實驗結果（n=6）

試驗號123456RSD%

巖藻糖32.5231.9331.9732.2832.1332.781.03

半乳糖93.2092.9493.1693.7993.8793.570.40

阿拉伯糖28.7729.1028.3629.3029.2529.201.26

葡萄糖32.6332.2531.1632.6332.1132.011.69

峰

面鼠李糖25.1725.0825.6926.3226.0025.981.92

積

木糖35.0134.9035.5735.7135.4835.290.91

甘露糖22.2522.4121.4922.8122.2222.642.06

果糖17.1116.8317.3717.3616.8016.951.48

核糖19.0918.8218.2419.0218.6318.571.68

I}

半乳糖醛

12.0011.8512.6012.2912.0511.922.31

酸

葡萄糖醛

16.3316.7516.5615.5115.9615.972.81

酸

6.8.6穩(wěn)定性

配制濃度為1.0μg/mL的各單糖混合溶液，按6.8.2色譜條件進行檢測，得

到其峰面積，如此反復每隔1h進樣1次，共進樣5次，計算5次峰面積的相

對標準偏差（即RSD值），5次重復進樣的相對標準偏差在0.97%~2.99%之間，

測定穩(wěn)定性良好。

6.8.7重復性

配制濃度為1.0μg/mL的各單糖混合溶液6份，按6.8.2色譜條件進行檢測，

分別得到其峰面積，計算其RSD值，具體實驗結果如表6所示，其RSD值在

1.1%~3.6%之間，誤差小于規(guī)定的4%，由此判斷其重復性良好，實驗方案可行，

實驗人員的操作相對規(guī)范。

表6重復性實驗結果（n=6）

試驗號123456RSD%

濃度μg/mL1.01.01.01.01.01.0

巖藻糖75.3676.7077.3077.2281.7080.843.20

半乳糖228.56232.95235.69234.64249.71242.273.17

阿拉伯糖87.2187.7087.5486.9689.7487.381.15

葡萄糖116.34116.58117.19112.15113.97109.082.76

鼠李糖62.2562.9763.4863.2167.7165.473.17

峰

面木糖98.3897.6798.4797.27100.6095.141.82

積

甘露糖56.1055.7656.0454.6456.0054.411.37

果糖47.9048.0848.9050.2451.7951.413.38

核糖56.4456.4357.2857.2261.1156.963.08

半乳糖醛酸31.3030.9631.6330.7331.0033.803.60

葡萄糖醛酸55.6954.8656.6955.3055.5557.901.98

I}

6.8.8加標回收率

本研究同時也進行了加標回收率的測定，以檢測該法對枸杞中不同含量的

枸杞多糖的檢測精度。以各單糖濃度一定的枸杞多糖提取液為本底進行加標，

各單糖添加量分別為枸杞多糖提取液中各單糖濃度的0.5倍、1倍和1.5倍，按

照6.8.2的色譜條件每個加標量檢測6次，其具體結果如表7所示。其低濃度加

標平均回收率在為86.25~109.62%之間、中濃度加標平均回收率在

80.48~103.13%之間、高濃度加標平均回收率在82.96~108.06%之間，其回收率

均滿足要求。

表7枸杞多糖提取液加標回收率實驗結果

提取液本底樣品加標濃度（μg/mL）加標平均回收率（%）

枸杞多糖

濃度（μg/mL）123123

巖藻糖0.020.010.020.0288.9580.48108.06

半乳糖1.260.631.261.89103.3388.75106.17

阿拉伯糖7.583.797.5811.3886.25102.9882.96

葡萄糖2.631.322.633.95106.66103.1395.36

鼠李糖0.750.370.751.1296.7594.8199.93

木糖1.280.641.281.9297.2793.69105.23

甘露糖0.920.460.921.39109.6288.46101.22

果糖1.050.531.051.5887.8994.13104.13

核糖0.550.280.550.83102.3483.1598.51

半乳糖醛酸0.550.270.550.8292.6394.5795.58

葡萄糖醛酸0.220.110.220.33105.5794.8189.96

6.8.9小結

上述結果表明，離子色譜測定枸杞中枸杞多糖，實驗室內方法檢出限在

0.025~0.05μg/mL之間，定量限在0.025~0.1μg/mL之間。對枸杞多糖實際樣品進

行加標回收實驗，回收率在80%~110%之間，相對標準偏差為8.2%~9.1%，說

明方法的精密度和準確度良好。

綜上所述，本標準方法能夠滿足枸杞中枸杞多糖含量測定要求。

6.9方法驗證

選擇5家具有資質的實驗室參加方法的驗證工作。向驗證單位提供方法草

案、驗證方案、標準溶液和驗證報告格式。驗證單位按照方法草案準備實驗用

品，在規(guī)定時間內完成驗證實驗并反饋驗證結果報告。在方法驗證前，參加驗

證的操作人員應熟悉和掌握方法原理、操作步驟及流程。方法驗證過程中所用

I}

的試劑和材料、儀器和設備及分析步驟應符合方法相關要求。

7采用國際標準和國外先進標準程度，以及與國際、國外同類標準

水平的對比情況

目前枸杞多糖含量測定方法無國際標準和國外先進標準可參照。本標準在制

訂過程中對枸杞原料的質量、檢測和市場進行了充分的調查研究，并廣泛征求

和采納了國內相關領域專家的意見和建議，所制定的標準適合我國國情，具有

先進性、科學性、實用性和可操作性，

8與現(xiàn)行法律法規(guī)和強制性標準的關系

標準所確定的各項技術指標和內容符合我國現(xiàn)行的有關方針、政策，并與相

關法律、法規(guī)、標準吻合。

本標準頒布實施后，更有利于行業(yè)應用；與現(xiàn)行的法律、法規(guī)及其他國家標

準沒有矛盾。

9標準作為強制性或推薦性標準的意見

建議本標準作為推薦性國家標準發(fā)布。

10實施標準的建議

如果本標準被批準并發(fā)布，為了貫徹好本標準，使其有效發(fā)揮作用，建議在

標準發(fā)布后，在相關企業(yè)和檢測機構進行宣傳和貫徹，并組織有關部門和人員

進行學習和培訓。

11參考文獻

[1]劉萬倉,孫磊,喬善義,等.不同產(chǎn)地枸杞藥材中多糖的含量測定[J].國際藥學研究雜志,

2011,38(003):229-231.

[2]WuDT,LamSC,CheongKL,etal.Simultaneousdeterminationofmolecularweights

andcontentsofwater-solublepolysaccharidesandtheirfractionsfromLyciumbarbarum

collectedinChina.[J].JournalofPharmaceutical&BiomedicalAnalysis,2016,129:210-218.

I}

[3]李靜,李仁勇,梁立娜.毛細管型離子色譜-脈沖安培法檢測枸杞多糖的單糖組成[J].分析

化學,2012,40(09):1415-1420.

I}

目錄

1任務來源.......................................................................................................................................2

2起草的目的意義...........................................................................................................................2

2.1枸杞質量控制的需要........................................................................................................2

2.2完善國家標準的需要........................................................................................................3

3枸杞多糖研究、應用與標準現(xiàn)狀...............................................................................................4

3.1枸杞多糖研究....................................................................................................................4

3.2枸杞多糖檢測方法............................................................................................................4

3.3枸杞多糖標準....................................................................................................................4

4主要起草過程...............................................................................................................................5

4.1成立標準制定工作組........................................................................................................5

4.2確定工作計劃和標準制定原則........................................................................................5

4.3查詢國內外相關標準和文獻資料....................................................................................6

4.4研究建立標準方法，開展條件實驗................................................................................6

4.5方法驗證............................................................................................................................7

4.6形成標準討論稿和編制說明............................................................................................7

4.7形成標準草案....................................................................................................................7

4.8形成標準征求意見稿和編制說明....................................................................................7

4.9征求意見并形成標準送審稿和編制說明........................................................................8

5本標準與國內外分析方法的關系...............................................................................................8

6主要技術指標依據(jù)與說明...........................................................................................................8

6.1標準名稱............................................................................................................................8

6.2前言....................................................................................................................................8

6.3主體內容............................................................................................................................8

6.4“范圍”的界定................................................................................................................9

6.5原理....................................................................................................................................9

6.6試劑和材料........................................................................................................................9

6.7儀器和設備......................................................................................................................10

6.8枸杞中枸杞多糖的提取與測定方法..............................................................................10

6.8.1樣品處理...............................................................................................................10

6.8.2檢測條件...............................................................................................................11

6.8.3標準曲線...............................................................................................................12

6.8.4檢出限和定量限...................................................................................................13

6.8.5精密度...................................................................................................................14

6.8.6穩(wěn)定性...................................................................................................................15

6.8.7重復性...................................................................................................................15

6.8.8加標回收率...........................................................................................................16

6.8.9小結.......................................................................................................................16

6.9方法驗證..........................................................................................................................16

7采用國際標準和國外先進標準程度，以及與國際、國外同類標準水平的對比情況.........17

8與現(xiàn)行法律法規(guī)和強制性標準的關系.....................................................................................17

9標準作為強制性或推薦性標準的意見.....................................................................................17

10實施標準的建議.......................................................................................................................17

11參考文獻...................................................................................................................................17

1任務來源

本國家標準的制定任務是根據(jù)國家標準化管理委員會下達的國家標準制定

計劃《枸杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》項目（計劃號為20205072-T-424）

起草。本項目為2017年國家重點研發(fā)計劃NQI項目《主要農業(yè)廢棄物提取加

工與功效評價標準研究》（2017YFF0207800）中一個任務。國家標準計劃《枸

杞中枸杞多糖的測定離子色譜法》由中國科學院蘭州化學物理研究所上報，中

國標準化研究院歸口及執(zhí)行，主管部門為國家市場監(jiān)督管理總局。本標準由中

國科學院蘭州化學物理研究所、蘭州市食品藥品檢驗檢測研究院、中國標準化

研究院、北京林業(yè)大學、寧夏中杞生物科技有限公司共同起草。本標準主要起

草人：邸多隆、裴棟、邱國玉、席興軍、王寧麗、劉笑笑、蘭韜、雷建都、賈

占魁。

2起草的目的意義

枸杞子是被列入我國《既是食品又是藥品的物品名單》，廣泛的應用于食品、

保健食品和中成藥等大健康產(chǎn)業(yè)。我國枸杞種植面積達到400多萬畝，總產(chǎn)量

27萬噸，相關產(chǎn)品的產(chǎn)值達到200億元。近年來，隨著歐美等發(fā)達國家和地區(qū)

市場對枸杞的逐步了解，枸杞的營養(yǎng)保健功效在西方國家逐漸得到證實和認可。

枸杞的國外市場需求逐漸從亞洲地區(qū)和華裔市場拓展到了歐盟、美國、澳大利

亞等地。在國際市場需求的帶動下，國內從事枸杞進出口業(yè)務的企業(yè)逐漸增多，

枸杞的進出口美貿易規(guī)模也在不斷擴大。根據(jù)海關的統(tǒng)計數(shù)據(jù)，2019年我國枸

杞進出口貿易總量11587噸，其中：枸杞出口總量11563噸，出口金額9446萬

美元。

枸杞多糖是枸杞中的主要活性成分和指標成分之一，現(xiàn)代研究表明：枸杞多

糖具有免疫調節(jié)作用、延緩衰老作用、眼部保護作用、肝臟保護作用、抗腫瘤

作用、降血糖作用、抗疲勞等多種生理、藥理活性。與日益增長的枸杞需求相

比，國內外枸杞多糖的相關標準一直未得到很好的提升。

2.1枸杞質量控制的需要

準確測定枸杞多糖的含量，將有利于客觀的評價枸杞的質量，有利于引導質

I}

量提升、規(guī)范市場秩序、促進公平貿易、實現(xiàn)優(yōu)質優(yōu)價、和維護消費者權益。

目前全國最大的枸杞交易中心為“中寧國際枸杞交易中心”，每年枸杞交易量約

15萬噸，占到全國枸杞交易量的一半，其質量安全檢測中心每年平均需要檢測

枸杞多糖5萬余批次，全國具有CMA資質的食品檢測機構總計1299家，包括

省市級食品藥品檢驗檢測研究院/所、省市級疾控中心，大部分均可開展枸杞中

枸杞多糖的檢測。這些機構按照目前的產(chǎn)品標準QB/T5176-2017《枸杞多糖》，

每家每年檢測機構約檢測以枸杞原料的藥品、食品或枸杞原藥材約200次，每

年共需要檢測枸杞多糖26萬余批次。民營的食品檢測機構116家，如華測、譜

尼、萊茵、諾安、SGS等，枸杞相關食品、保健食品中枸杞多糖的檢測約11600

批次。枸杞提取物生產(chǎn)企業(yè)，枸杞中成藥生產(chǎn)企業(yè)、枸杞保健食品和食品的生

產(chǎn)企業(yè)每年，如中杞等枸杞加工企業(yè)，其企業(yè)的質檢部每年平均需要檢測枸杞

多糖15.3萬余批次，主要是包括每批次枸杞原料的采購入庫、加工產(chǎn)品的質量

監(jiān)控和終端產(chǎn)品的檢測。枸杞出口檢測，每年出口量約為20000噸，檢測約10000

余次。因此，我國的枸杞國內外市場均急需制定準確、先進、綠色的枸杞多糖

的檢測方法國家標準。

2.2完善國家標準的需要

目前，我國關于枸杞多糖的標準主要有QB/T5176-2017枸杞多糖。該方法

是通過多糖類成分在濃硫酸作用下水解，與苯酚縮合成有色化合物，然后利用

分光