實(shí)驗(yàn)三-病原性球菌

注意:不要打開(kāi)培養(yǎng)皿!!!實(shí)驗(yàn)三病原性球菌病原生物學(xué)教研室涂增實(shí)驗(yàn)?zāi)康模毫私獠≡郧蚓姆蛛x鑒定程序掌握常見(jiàn)病原性球菌（三種葡萄球菌、三型鏈球菌）的形態(tài)染色特征、菌落特征及致病性鑒定熟悉血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)原理、方法及結(jié)果判定實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：病原性球菌（錄像）革蘭染色觀察乙型鏈球菌的形態(tài)特征三種葡萄球菌、三型鏈球菌的菌落特征觀察細(xì)菌致病性鑒定----凝固酶試驗(yàn)1、病原性球菌（錄像）

2、病原性球菌的分離鑒定程序臨床癥狀膿液、痰、咽分泌物血液、腦脊液、穿刺液涂片，革蘭染色，鏡檢根據(jù)形態(tài)、染色性、排列進(jìn)行初步診斷分離、培養(yǎng)根據(jù)菌落特征進(jìn)行進(jìn)一步診斷增菌生化反應(yīng)最終鑒定致病性鑒定、藥敏試驗(yàn)由腦脊液標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞內(nèi)外有G-雙球菌，可初步診斷為腦膜炎球菌由泌尿、生殖系統(tǒng)來(lái)源的標(biāo)本中分離出的G-雙球菌，可初步診斷為淋球菌3、病原性球菌革蘭染色觀察菌種：鏈球菌步驟：制片（涂片、干燥、固定）

涂片:液體培養(yǎng)基，沉淀生長(zhǎng)，取管底1-2環(huán)染色（初染、媒染、脫色、復(fù)染）觀察（染色性、形態(tài)、排列）4.常見(jiàn)病原性球菌的菌落觀察

菌種：葡萄球菌、鏈球菌葡萄球菌菌落主要特性金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌色素金黃色白色檸檬色溶血環(huán)β-溶血無(wú)無(wú)其它中等大小，圓形，光滑，濕潤(rùn)菌落.鏈球菌菌落主要特性甲型溶血性鏈球菌乙型溶血型鏈球菌

丙型鏈球菌色素?zé)o無(wú)無(wú)溶血環(huán)

-溶血（草綠色，半透明溶血環(huán)）

-溶血（寬大，透明溶血環(huán)）無(wú)其它圓型，光滑，濕潤(rùn)，細(xì)小菌落.注意:不要打開(kāi)平板金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌乙型溶血性鏈球菌丙型鏈球菌甲型溶血性鏈球菌5.凝固酶試驗(yàn)（玻片法）原理：血漿凝固酶主要由致病性的金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的，能使含有肝素或枸櫞酸鈉等抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝固的物質(zhì)。它是鑒定葡萄球菌有無(wú)致病性的重要指標(biāo)。游離凝固酶結(jié)合凝固酶方法：（1）講臺(tái)取一張玻片;（2）劃分3個(gè)位置;（3）挑取3-5環(huán)兔血漿到1、2位置，3-5環(huán)生理鹽水到3位置;（4）無(wú)菌操作，挑取1環(huán)細(xì)菌（菌種如右圖