藥物的雜質(zhì)檢查全面

關(guān)于藥物的雜質(zhì)檢查全面一、藥物的純度

指藥物純凈程度，反映了藥物質(zhì)量的優(yōu)劣，含有雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素。

§3-1藥物的雜質(zhì)與限量第2頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天

是指藥物中存在的①無治療作用或②影響藥物的穩(wěn)定性和療效,甚至③對(duì)人體健康有害的微量物質(zhì).2.藥物的雜質(zhì)

為保證藥品質(zhì)量,確保用藥安全、有效,必須檢查雜質(zhì),控制藥物純度.第3頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天1.有毒副作用的物質(zhì)

2.本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì)

3.本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)第4頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天純度：藥物的純凈程度。雜質(zhì)：ChP規(guī)定任何影響藥品純度的物質(zhì)，是影響藥物純度的主要因素。藥物的純度檢查也可稱為雜質(zhì)檢查。

需要從藥物的外觀性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定等方面進(jìn)行綜合評(píng)定。第5頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天藥物純度與化學(xué)試劑純度：藥物純度：從雜質(zhì)對(duì)用藥安全、有效和對(duì)藥物穩(wěn)定性的影響等方面來限定。只有合格品和不合格品兩個(gè)等級(jí)。化學(xué)試劑純度：從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對(duì)使用的影響方面來限定，不考慮雜質(zhì)對(duì)生物體的生理作用及毒副作用。純度等級(jí)包括色譜純、光譜純、優(yōu)級(jí)純、分析純、化學(xué)純等。第6頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）生產(chǎn)過程中引入二、藥物雜質(zhì)的來源（1）所用原料不純；（2）合成工藝中未反應(yīng)完全的原料、反應(yīng)中間體、副產(chǎn)物等；（3）藥物在制成制劑的過程中產(chǎn)生的新雜質(zhì)；（4）合成工藝中使用的試劑、溶劑等；（5）合成工藝中使用的設(shè)備、器皿可能引入重金屬。第7頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天例：阿斯匹林由水楊酸乙酰化制得乙?；煌耆畻钏?雜質(zhì))++H2SO470~75oC++第8頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天例：鹽酸普魯卡因注射液的制備

制備過程中加熱滅菌鹽酸普魯卡因注射液

進(jìn)一步脫羧轉(zhuǎn)化對(duì)氨基苯甲酸

苯胺

引起毒性反應(yīng)?第9頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）貯藏過程中引入（1）保管不善或貯存時(shí)間過長(zhǎng)（2）包裝不當(dāng)

產(chǎn)生雜質(zhì)型轉(zhuǎn)化、潮解、發(fā)霉聚合、異構(gòu)化、晶水解、氧化、分解、在外界條件藥品氣、微生物溫度、濕度、日光、空T???????????第10頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天例：麻醉乙醚在日光、空氣及濕氣作用下，易氧化分解為醛及有毒的過氧化物。CH3CH2OCH2CH3

CH3CHO+CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3（二羥乙基過氧化物）藥典規(guī)定：?jiǎn)⒎夂?4小時(shí)內(nèi)使用第11頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天96：131．在藥物生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)的途徑為

A.原料不純或部分未反應(yīng)完全的原料造成

B.合成過程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成

C.需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造成

D.所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì)

E.由于操作不妥，日光曝曬而使產(chǎn)品發(fā)生分解引入的雜質(zhì)第12頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、藥物雜質(zhì)的分類按來源分為：

檢查方法收載在ChP正文各品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。檢查方法收載在ChP的附錄中。

特殊雜質(zhì)：一般雜質(zhì)：在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏中容易引入的雜質(zhì)。在特定藥物的生產(chǎn)和貯藏中引入的雜質(zhì)。第13頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天按毒性分為：

本身一般無害，但其含量多少可反映藥物純度水平，指示生產(chǎn)工藝是否合理。如：氯化物、硫酸鹽等。對(duì)人體有毒害的雜質(zhì)。在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中嚴(yán)加控制，以保證用藥安全。如：重金屬、砷鹽、氰化物、氟化物等。信號(hào)雜質(zhì)：毒性雜質(zhì)：第14頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天按化學(xué)類別和特性分為：

無機(jī)雜質(zhì)

——Cl-、S2-、CN-、重金屬等有機(jī)雜質(zhì)

——中間體、副產(chǎn)物、降解物、異構(gòu)體等殘留溶劑第15頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（1）具有光學(xué)異構(gòu)體的藥物，生物活性有很大差異；如：腎上腺素為左旋體，其升壓作用是右旋體的12倍。（2）順式體與反式體藥物，生物活性也不相同；如：VA以全反式的生物活性為最高。（3）多晶型藥物，晶型不同生物活性也有差異；如：驅(qū)蟲藥甲苯咪唑，有A、B、C三種晶型。其中C晶型的驅(qū)蟲率為90%，B晶型的驅(qū)蟲率為40~60%，A晶型的驅(qū)蟲率小于20%。無效或低效雜質(zhì)第16頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天按結(jié)構(gòu)可分為2類無機(jī)雜質(zhì)

——Cl-、S2-、CN-、As、重金屬.有機(jī)雜質(zhì)

——中間體、副產(chǎn)物、分解物、異構(gòu)體、殘留溶劑.第17頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天按性質(zhì)可分為3類信號(hào)雜質(zhì)

——指本身一般無害,但其含量多少可反映藥物純度水平,指示生產(chǎn)工藝是否合理.

如：氯化物、硫酸鹽等.有害雜質(zhì)

——對(duì)人體有毒害的雜質(zhì).在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中嚴(yán)加控制,以保證用藥安全.

如：重金屬、砷鹽、氰化物、氟化物等.第18頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天無效或低效雜質(zhì)a具有立體異構(gòu)體的藥物,其生物活性有很大差異;如：腎上腺素為左旋體,其升壓作用是右旋體的12倍.b異構(gòu)體中,其順式體與反式體的生物活性也不相同;如：VA以全反式的生物活性為最高.第19頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天c藥物的晶型不同,其理化常數(shù),溶解性穩(wěn)定性、體內(nèi)的吸收和療效也有差異.

如：驅(qū)蟲藥甲苯咪唑,有A、B、C三種晶型.

其中C晶型的驅(qū)蟲率90%,B晶型的驅(qū)蟲率40~60%,A晶型的驅(qū)蟲率小于20%.必須重視異構(gòu)體和多晶型對(duì)藥物有效性和安全性的影響.控制藥物中低效、無效以及具有毒性的異構(gòu)體和多晶型,在藥物純度研究中日益受到重視第20頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、藥物的純度與化學(xué)試劑的純度

藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理作用，藥品只有兩個(gè)等級(jí)：合格或不合格?；瘜W(xué)試劑有很多等級(jí)，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純（GR）、分析純（AR）、化學(xué)純（CP）、色譜純、光譜純。第21頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天99x：85．中國(guó)藥典中規(guī)定的一般雜質(zhì)檢查中不包括的項(xiàng)目是

A.硫酸鹽檢查

B.氯化物檢查

C.溶出度檢查

D.重金屬檢查

E.砷鹽檢查

第22頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天限量表示方法：百分之幾（%）百萬分之幾（ppm）對(duì)照法靈敏度法比較法四、雜質(zhì)的限量雜質(zhì)限量：藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。雜質(zhì)定量測(cè)定法雜質(zhì)限量控制方法限量檢查法（ChP）第23頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天例:平行試驗(yàn)

比較兩比色管的顏色或濁度，判斷雜質(zhì)含量是否符合規(guī)定。對(duì)照管樣品管對(duì)照法：取限度量的待檢雜質(zhì)對(duì)照品配成的對(duì)照溶液，與一定量供試品配成的供試品溶液，在相同條件下處理，比較反應(yīng)結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過限量。第24頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天靈敏度法：在供試品溶液中加入一定量的試劑，在規(guī)定條件下反應(yīng)，不得出現(xiàn)正反應(yīng)。即以檢測(cè)條件下的反應(yīng)靈敏度來控制雜質(zhì)限量。例：乳酸中枸櫞酸的檢查水供試品(0.5g)

5mL溶液氨試液調(diào)微堿性1ml氯化鈣試液水浴△5min不得產(chǎn)生渾濁第25頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天比較法：取一定量供試品，在規(guī)定條件下測(cè)定待檢雜質(zhì)的特定參數(shù)（如：吸光度等），與規(guī)定限量比較，不得更大。例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查

供試品溶液(2.0mg/ml)鹽酸溶液供試品

(0.05mol/L)A310nm規(guī)定：A310nm≯0.05第26頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天限量計(jì)算公式注意:①單位是否統(tǒng)一②供試品是否有稀釋③表示方法%或ppm寫成：或第27頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天例1.對(duì)乙酰氨基酚中氯化鈉的檢查對(duì)照溶液：標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液（10

gCl-/ml），取5.0ml

同法操作比較，濁度不得更大。計(jì)算：氯化物限量是多少（%）？供試品溶液：第28頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天例2.腎上腺素中酮體的檢查取本品0.20g，置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9→2000)溶解并稀釋至刻度，搖勻，在310nm處測(cè)定吸光度不得超過0.05，已知酮體的百分吸收系數(shù)為435，求酮體的限量。第29頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、雜質(zhì)的研究規(guī)范（一）有機(jī)雜質(zhì)在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的項(xiàng)目名稱1.以雜質(zhì)的化學(xué)名稱作為項(xiàng)目名稱如：阿司匹林中的游離水楊酸2.以某類雜質(zhì)的總稱作為項(xiàng)目名稱如：硝酸毛果蕓香堿中的其它生物堿黃體酮中的有關(guān)物質(zhì)3.以檢測(cè)方法作為項(xiàng)目名稱如：雜質(zhì)吸光度、溶液透光率§3-2雜質(zhì)的檢查方法第30頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的確定（三）雜質(zhì)限量的確定在確保用藥安全有效的前提下，應(yīng)考慮到生產(chǎn)的可行性、批與批之間的正常波動(dòng)、藥品本身的穩(wěn)定性。根據(jù)起始原料、生產(chǎn)工藝及穩(wěn)定性情況確定。藥物在質(zhì)量研究中和穩(wěn)定性考察中檢出的，并在批量生產(chǎn)中出現(xiàn)的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物單一對(duì)映體藥物：檢查其它對(duì)映體消旋體藥物：旋光度檢查第31頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天雜質(zhì)檢查方法包括化學(xué)法、光譜法、色譜法等。有機(jī)雜質(zhì)多采用色譜法，特別是HPLC。檢查方法要求專屬、靈敏，應(yīng)驗(yàn)證方法的專屬性。分析方法的檢測(cè)限應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)雜質(zhì)限度的要求。（四）雜質(zhì)檢查方法的選擇與驗(yàn)證第32頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、雜質(zhì)的常用檢查方法顯色反應(yīng)檢查法沉淀反應(yīng)檢查法生成氣體的檢查法滴定法（一）化學(xué)方法第33頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天NHCH2CH2NH2+顯色（比色法檢查）如：氯硝柳胺中2-氯-4-硝基苯胺的檢查

顯色反應(yīng)檢查法2雜質(zhì)：2-氯-4-硝基苯胺O2NNHClClOHCONO2NHClO+NaNO2+2HCl2NN2Cl++NaCl2H2O+-ClO2NNNNHCH2CH2NH2Cl第34頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天如：鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查沉淀反應(yīng)檢查法鹽酸肼屈嗪雜質(zhì)：游離肼比濁法或重量法檢查第35頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天如：硫酸亞鐵片劑中高鐵鹽的檢查滴定法2Fe3+2KI2Fe2+I22K++++++I22Na2S2O32NaINa2S4O6與藥典規(guī)定限量進(jìn)行比較第36頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）色譜方法薄層色譜法高效液相色譜法氣相色譜法毛細(xì)管電泳法難以采用化學(xué)法、光譜法對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行檢查時(shí)，多采用色譜法。色譜法是檢查藥物中有關(guān)物質(zhì)的首選方法。第37頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天1.薄層色譜法（1）雜質(zhì)對(duì)照品法：適用于雜質(zhì)已知并有雜質(zhì)對(duì)照品的情況。方法：根據(jù)雜質(zhì)限量，取供試品溶液和一定濃度的雜質(zhì)對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一薄層板上展開，定位后進(jìn)行檢查。供對(duì)供試品溶液除主斑點(diǎn)外的其它斑點(diǎn)與相應(yīng)雜質(zhì)對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)比較。示例3-8第38頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（2）供試品溶液自身稀釋對(duì)照法：適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)未知或無雜質(zhì)對(duì)照品的情況，且雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)顏色應(yīng)相同或相近。方法：先配制一定濃度的供試品溶液，然后按限量要求將其稀釋至一定濃度作為對(duì)照溶液，將兩溶液分別點(diǎn)于同一薄層板上展開，定位后進(jìn)行檢查。供試品溶液的雜質(zhì)斑點(diǎn)與自身稀釋對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較。示例3-11供對(duì)第39頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（3）雜質(zhì)對(duì)照品與供試品溶液自身稀釋對(duì)照并用法：

適用于藥物中存在多個(gè)雜質(zhì)的情況。有對(duì)照品的雜質(zhì)：雜質(zhì)對(duì)照品法檢查；未知雜質(zhì)或沒有對(duì)照品的雜質(zhì)：供試品溶液自身稀釋對(duì)照法檢查。供對(duì)對(duì)第40頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（4）對(duì)照藥物法：適用于無合適的雜質(zhì)對(duì)照品，或雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)顏色有差異而難以判斷限量的情況。方法：選用與供試品相同的藥物作為對(duì)照。對(duì)照藥物中所含待檢雜質(zhì)應(yīng)符合限量要求，穩(wěn)定性好。供對(duì)第41頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.高效液相色譜法使用高效液相色譜法測(cè)定含量的藥物，可采用同一色譜條件進(jìn)行雜質(zhì)檢查。

采用此法檢查雜質(zhì)時(shí)，ChP規(guī)定應(yīng)進(jìn)行色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以保證儀器系統(tǒng)達(dá)到雜質(zhì)檢查要求。

第42頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（1）外標(biāo)法（雜質(zhì)對(duì)照品法）：適用于有雜質(zhì)對(duì)照品，而且進(jìn)樣量能夠精確控制的情況。雜質(zhì)對(duì)照品溶液供試品溶液（雜）（對(duì)）第43頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（2）加校正因子的主成分自身對(duì)照法：適用于已知雜質(zhì)的控制。雜質(zhì)的校正因子（f）和相對(duì)保留時(shí)間收載在ChP各品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。雜質(zhì)對(duì)照品+藥物主成分對(duì)照品溶液自身稀釋對(duì)照溶液（主）（雜）（主）（雜）供試品溶液第44頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（3）不加校正因子的主成分自身對(duì)照法：適用于沒有雜質(zhì)對(duì)照品，且雜質(zhì)結(jié)構(gòu)與主成分相似的情況。自身稀釋對(duì)照溶液（主）供試品溶液（雜）第45頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（4）面積歸一化法：適用于供試品中結(jié)構(gòu)相似、相對(duì)含量較高，且限度范圍較寬的雜質(zhì)含量的粗略考察。雜質(zhì)限量（%）=A雜/A總×100%A總=A雜1＋A雜2＋A主供試品溶液（雜1）（雜2）（主）第46頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天檢查方法：同高效液相色譜法用于藥物中揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查，如藥物中殘留溶劑、農(nóng)藥殘留量等。3.氣相色譜法4.毛細(xì)管電泳法用于酶類藥物中酶類雜質(zhì)的檢查。檢查方法：同高效液相色譜法第47頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天利用藥物與雜質(zhì)對(duì)光選擇吸收性質(zhì)的差異進(jìn)行檢查。（三）光譜方法1.紫外-可見分光光度法例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查

方法：規(guī)定雜質(zhì)最大吸收波長(zhǎng)（藥物在此無吸收）處的吸光度；利用雜質(zhì)的呈色反應(yīng)對(duì)其進(jìn)行定量測(cè)定。

第48頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.紅外分光光度法主要用于藥物中無效或低效晶型的檢查。例：甲苯達(dá)唑中A晶型的檢查晶型640cm-1662cm-1

A型（無效）強(qiáng)

弱

C型弱

強(qiáng)方法：比較供試品溶液與含一定量A晶型的對(duì)照品溶液在兩波數(shù)處的吸光度比值。第49頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.原子吸收分光光度法主要用于藥物中金屬雜質(zhì)的檢查。方法：標(biāo)準(zhǔn)加入法供試品溶液：吸光度為b對(duì)照溶液：吸光度為a（供試品+限度量的待測(cè)元素）要求：b<a-b第50頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（四）其它方法1.熱分析法熱重分析（TGA）：利用熱天平在程序控制溫度下，測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量隨溫度的變化關(guān)系。WT反應(yīng)區(qū)間=Tf–Ti減失重量=W1-W2ABCTiTfW1W2用于藥物中結(jié)晶水和吸附水的區(qū)分，以及干燥失重測(cè)定。第51頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天在溫度T3時(shí)

CaCO3CaO+CO2

ΔG1ΔG2ΔG310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T(℃)在溫度T1時(shí)

CaC2O4·H2OCaC2O4+H2O在溫度T2時(shí)

CaC2O4CaCO3+CO草酸鈣(CaC2O4·H2O)的熱重曲線第52頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天差熱分析（DTA）：在程序控制溫度下，測(cè)量樣品與參比物（一種在測(cè)量溫度范圍內(nèi)不發(fā)生任何熱效應(yīng)的物質(zhì)）之間的溫度差△T隨溫度的變化關(guān)系。T△T+－放熱峰吸熱峰根據(jù)峰的個(gè)數(shù)、形狀和位置進(jìn)行藥物鑒別、晶型鑒別、純度檢查、熔點(diǎn)及水分等的測(cè)定。第53頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（3）pH測(cè)定法：用電位法測(cè)定供試液的pH，衡量其酸堿性雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定。2.酸堿度檢查法利用藥物與雜質(zhì)酸堿性的差異進(jìn)行檢查。（1）酸堿滴定法：在一定指示液下，用規(guī)定濃度的

酸或堿滴定液滴定供試液中的堿性或酸性雜質(zhì)，以消耗酸或堿滴定液的體積作為限度指標(biāo)。（2）指示劑法：將一定量指示液的變色pH范圍作為供試液中酸堿性雜質(zhì)的限度指標(biāo)。第54頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.物理性狀檢查法1.臭味和揮發(fā)性差異2.顏色的差異3.溶解行為的差異4.旋光性質(zhì)的差異例：ChP對(duì)硫酸阿托品中莨菪堿的檢查：供試品水溶液（50mg/mL）的旋光度不得過-0.4°有旋光性無旋光性第55頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、氯化物檢查法§3-3一般雜質(zhì)的檢查方法藥物：對(duì)照：原理：介質(zhì)：稀硝酸(10ml/50ml溶液)反應(yīng)試劑：硝酸銀試液對(duì)照溶液：標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液(10μgCl/ml)靈敏度范圍：50~80μgCl/50ml溶液條件：第56頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天

暗處放置5min(避免AgCl分解)操作方法：稀HNO310mlH2OAgNO31ml供試品H2O供試溶液40mlH2O50ml稀HNO310mlH2OAgNO31ml對(duì)照溶液40ml標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液H2O50ml（規(guī)定量）（規(guī)定量）25ml第57頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天供試液有色，采用內(nèi)消色法處理無氯化物雜質(zhì)，與供試溶液顏色相同暗處放置5min后比較供試溶液放置10minAgNO31ml反復(fù)濾過標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液H2O對(duì)照溶液50mlAgNO31mlH2O供試溶液50ml討論:第58頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、硫酸鹽檢查法介質(zhì)：稀HCl(2ml/50ml溶液)反應(yīng)試劑：25%BaCl2溶液對(duì)照溶液：標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液(100μgSO42-/ml)藥物：對(duì)照：2ml40mlHCl25%BaCl25mlH2O50mlH2O供試品標(biāo)準(zhǔn)溶液第59頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、鐵鹽檢查法硫氰酸鐵法（ChP和USP采用）介質(zhì)：稀HCl(4ml/50ml溶液)氧化劑：過硫酸銨((NH4)2S2O8)反應(yīng)試劑：30%硫氰酸銨溶液對(duì)照溶液：標(biāo)準(zhǔn)硫酸鐵銨溶液(10μgFe/ml)藥物：對(duì)照：第60頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天操作方法：供試品顯色，立即與同法制成的對(duì)照溶液比較加水溶解25ml稀HCl4ml過硫酸銨50mg加水稀釋35ml30%硫氰酸銨溶液3ml加水定容50ml第61頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天討論:（1）加過量的硫氰酸銨，使反應(yīng)向正向進(jìn)行。（2）過硫酸銨的作用：氧化供試品中Fe2+成Fe3+；防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。（3）某些藥物（如葡萄糖等）檢查時(shí)需加硝酸處理，硝酸也可將Fe2+氧化為Fe3+，剩余硝酸必須加熱煮沸除去。第62頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（4）若供試液管與對(duì)照液管色調(diào)不一致，或所呈硫氰酸鐵的顏色深淺不便比較時(shí)，可用正丁醇或異戊醇提取后，分取醇層比色。（5）具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)熾灼破壞處理后再依法檢查。第63頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、重金屬檢查法重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬雜質(zhì)，如：Ag、Pb、

Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、Ni、Co、Zn等。在藥品生產(chǎn)中遇到鉛的機(jī)會(huì)較多，且鉛易在體內(nèi)積蓄中毒，以Pb為重金屬代表，用鉛的限量表示重金屬限度。第64頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。介質(zhì)：醋酸鹽緩沖液

(pH3.5)2ml/25ml溶液

反應(yīng)試劑：硫代乙酰胺(CH3CSNH2)對(duì)照溶液：標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(10μgPb/ml)黃色至棕黑色混懸液第一法：硫代乙酰胺法第65頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天操作方法：2ml硫代乙酰胺試液25ml規(guī)定溶劑醋酸緩沖液標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2ml供試品25ml規(guī)定方法第66頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（1）金屬離子與硫化氫的呈色受溶液pH的影響較

大。pH在3.0~3.5時(shí)，沉淀較完全。酸度增大，

呈色變淺甚至不呈色。討論:（2）供試品溶液如帶顏色，采用外消色法處理，在對(duì)照溶液管中滴加少量稀焦糖溶液調(diào)節(jié)顏色。（3）供試品中如含微量高鐵鹽，可加入抗壞血酸使

Fe3+還原為Fe2+。第67頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天第二法：熾灼后的硫代乙酰胺法將供試品熾灼破壞后，使有機(jī)結(jié)合的重金屬游離，再按第一法檢查。適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇的有機(jī)藥物。1.原理第68頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.操作方法對(duì)照溶液的配制：取上述同樣量試劑置瓷皿中蒸干后，用于配制對(duì)照溶液，依法檢查。

緩緩熾灼

放冷H2SO40.5-1.0ml供試品完全炭化

加熱

HNO32ml

500-600℃H2SO4蒸氣除盡放冷完全灰化

蒸干熾灼HCl2ml水15ml

中性，即供試溶液按第一法檢查蒸干氨試液第69頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.討論

（1）HNO3處理后，必須蒸干除盡氧化氮。（2）熾灼溫度要嚴(yán)格控制：500-600℃。（3）含鈉鹽或氟的有機(jī)藥物在熾灼時(shí)腐蝕瓷坩堝，改用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿。第70頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天適用于溶于堿而難溶于稀酸或在稀酸中產(chǎn)生沉淀的藥物。第三法：硫化鈉法介質(zhì)：氫氧化鈉試液

反應(yīng)試劑：硫化鈉對(duì)照溶液：標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液第71頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天五、砷鹽檢查法

1.古蔡氏法原理：藥物中的微量砷鹽與金屬鋅在酸性條件下反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑。第72頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天HCl供試品溶液標(biāo)準(zhǔn)砷溶液KI試液酸性SnCl2三價(jià)砷Zn粒AsH3↑過Pb(Ac)2棉花遇HgBr2試紙砷斑（比較顏色）操作方法：供試品溶液按各品種規(guī)定方法制備；標(biāo)準(zhǔn)砷斑采用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液(1μgAs/ml)制備。第73頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天生成砷斑吸收硫化氫氣體防止形成HgS色斑古蔡檢砷裝置溴化汞試紙醋酸鉛棉花(60mg)HCl碘化鉀試液酸性氯化亞錫試液Zn粒中空?qǐng)A面旋塞導(dǎo)氣管AsH3發(fā)生瓶8cm還原五價(jià)砷為三價(jià)砷第74頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（1）供試品為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí)，在酸中生成H2S或SO2，與HgBr作用生成HgS或Hg，干擾砷斑檢查，可先用硝酸將其氧化成硫酸鹽。（2）供試品為鐵鹽（Fe3+）時(shí)，消耗KI、SnCl2，并氧化砷化氫，可先加酸性氯化亞錫試液還原高鐵。（3）砷以共價(jià)鍵結(jié)合的有機(jī)藥物，進(jìn)行有機(jī)破壞后再檢查。討論：

第75頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）紅色膠態(tài)銀As(DDC)3+6Ag+3吡啶·HDDCAsH3+

6Ag(DDC)+3吡啶目視比色法510nm測(cè)定A值（定量）同古蔡氏法C2H5C2H5NCSSAgAg(DDC)結(jié)構(gòu)：吡啶吸收HDDC第76頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（1）USP采用0.5%Ag-DDC的吡啶溶液，ChP采用0.25%

Ag-DDC的三乙胺-三氯甲烷溶液，靈敏度略低于吡啶溶液。（2）銻化氫與Ag-DDC的反應(yīng)靈敏度較低，本法受銻的干擾較小。討論：

Ag-DDC溶液產(chǎn)生AsH3Ag-DDC法檢砷裝置第77頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.其它方法（1）白田道夫法原理：氯化亞錫在鹽酸溶液中將砷鹽還原成棕褐色的膠態(tài)砷。特點(diǎn)：用于含銻藥物的砷鹽檢查時(shí)，不產(chǎn)生干擾，但靈敏度低。（2）次磷酸法原理：次磷酸在鹽酸溶液中將砷鹽還原成棕色的游離砷。特點(diǎn)：用于硫化物、亞硫酸鹽及含銻藥物的砷鹽檢查時(shí)，不產(chǎn)生干擾，但靈敏度比古蔡氏法低。第78頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天ChP規(guī)定干燥失重的量應(yīng)恒重，即供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0.3mg以下。六、干燥失重測(cè)定法檢查藥物中的水分及其它揮發(fā)性物質(zhì)。干燥失重：藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的量，以百分率表示。第79頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）干燥劑干燥法適用于受熱分解或易升華的藥物干燥器（室溫）常用干燥劑：硅膠、濃硫酸、五氧化二磷（一）常壓恒溫干燥法適用于受熱較穩(wěn)定的藥物干燥箱（105℃）（二）減壓干燥法與恒溫減壓干燥法適用于熔點(diǎn)低或受熱分解的藥物減壓干燥器（室溫）、恒溫減壓干燥器（60oC）

常用干燥劑：無水氯化鈣、硅膠、五氧化二磷第80頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天七、水分測(cè)定法費(fèi)休氏法是一種測(cè)定物質(zhì)中水分的容量分析法，屬于碘量法，可以準(zhǔn)確測(cè)定藥物中的結(jié)晶水、吸附水和游離水。原理：利用I2氧化SO2為SO3時(shí)，需要有定量的水分參與反應(yīng)，根據(jù)消耗碘的量來測(cè)定水分的量。ChP、USP和BP均收載了費(fèi)休氏法和甲苯法。第81頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天費(fèi)休氏試液由碘、二氧化硫、無水吡啶和無水甲醇組成。I2SO2H2ONNHINO2SO3++++2NO2SOCH3OHNHSO4CH3+I2SO2H2ONNHI3++++2NHSO4CH3CH3OH+總反應(yīng)式：第82頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天A——供試品消耗費(fèi)休氏試液的體積(ml)B——空白消耗費(fèi)休氏試液的體積(ml)F——每1ml費(fèi)休氏試液相當(dāng)于水的重量(mg)W——供試品的重量(mg)取供試品適量（約消耗費(fèi)休氏試液1-5ml），加入無水甲醇2-5ml，不斷攪拌下，用費(fèi)休氏試液滴定至溶液由淺黃色變?yōu)榧t棕色，或用永停滴定法指示終點(diǎn)；另取無水甲醇2-5ml用同法進(jìn)行空白試驗(yàn)。測(cè)定方法：第83頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天八、熾灼殘?jiān)鼨z查法方法：規(guī)定量供試品置坩堝中→精密稱定→熾灼炭化+H2SO4濕潤(rùn)→低溫加熱至硫酸蒸氣除盡→700～800℃熾灼灰化→精密稱定→700～800℃熾灼至恒重→熾灼殘?jiān)蛩峄曳郑?。熾灼殘?jiān)河袡C(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機(jī)藥物經(jīng)加熱分解后，再經(jīng)高溫?zé)胱扑a(chǎn)生的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。第84頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天注意事項(xiàng)

（1）供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)蘖亢头Q量誤差決定。一般應(yīng)使熾灼殘?jiān)繛?~2mg，殘?jiān)?/p>

限量一般為0.1%～0.2%。

（2）含氟的藥物對(duì)瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。（3）若殘?jiān)枇糇髦亟饘贆z查，應(yīng)在500～600℃熾灼至恒重。第85頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天九、易炭化物檢查法易炭化物：藥物中遇H2SO4易炭化或易氧化呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。方法：供試品用硫酸溶解后，靜置15min，與規(guī)定對(duì)照溶液目視比色。

對(duì)照液：（1）標(biāo)準(zhǔn)比色液；（2）由比色用氯化鈷液、比色用高錳酸鉀液和比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配制而成的溶液；（3）高錳酸鉀液。第86頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天殘留溶劑：在合成原料藥、輔料或制劑生產(chǎn)的過程中使用的，但在工藝中未能完全除去的有機(jī)溶劑。十、殘留溶劑測(cè)定法1.毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法2.毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣程序升溫法3.溶液直接進(jìn)樣法（一）測(cè)定方法（GC）

第87頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天頂空分析法也稱液上氣相色譜分析，是指用氣相色譜法來分析封閉系統(tǒng)中與液體或固體樣品相平衡的氣體的一種方法。恒溫水浴樣品10-20ml玻璃瓶（具有硅橡膠隔墊片蓋）1-5ml液體或1-2g固體（平衡30-60min）恒溫水浴樣品特點(diǎn)：可免去樣品萃取、濃集等步驟，并可避免非揮發(fā)性組分對(duì)色譜柱的污染，但要求待測(cè)物有足夠的揮發(fā)性。第88頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天雜質(zhì)對(duì)照品+內(nèi)標(biāo)（對(duì)照品溶液）（雜）（內(nèi)）（雜）（內(nèi)）供試品+內(nèi)標(biāo)（供試品溶液）2.外標(biāo)法（二）計(jì)算法1.內(nèi)標(biāo)法第89頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天1.用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算，填充柱的N>1000；毛細(xì)管色譜柱的N>5000。2.待測(cè)物色譜峰與相鄰色譜峰R>1.5。3.以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的RSD≤5%；以外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，待測(cè)物峰面積的RSD≤10%。（三）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)第90頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天十一、溶液顏色檢查法檢查藥物中的有色雜質(zhì)。ChP附錄收載了三種檢查方法：第一法：目視比色法，即與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法。第二法：分光光度法，即控制藥物溶液在某波長(zhǎng)處的吸光度。第三法：色差計(jì)法，即用色差計(jì)對(duì)藥物溶液的顏色進(jìn)行定量表述和分析。第91頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天十二、溶液澄清度檢查法檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。

檢查方法：比濁法從水平方向觀察、比較供試品溶液濁度標(biāo)準(zhǔn)液

暗室內(nèi)垂直同置傘棚燈下（照度1000lx）置配對(duì)的比濁管中第92頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天(CH2)6N4+6H2O6HCHO+4NH3HCHO+H2N-NH2H2C=N-NH2+H2O

甲醛腙白色混濁濁度標(biāo)準(zhǔn)液制備原理：1.00％硫酸肼溶液與10％烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液

濁度標(biāo)準(zhǔn)原液濁度標(biāo)準(zhǔn)液(5個(gè)級(jí)號(hào)，0.5、1、2、3、4）稀釋稀釋濁度標(biāo)準(zhǔn)液配制方法：第93頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天ChP規(guī)定的“澄清”，指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑或未超過0.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液。判斷：多數(shù)藥物的澄清度檢查以水為溶劑，如水溶性不好，也可采用酸、堿或有機(jī)溶劑為溶劑。有機(jī)酸的堿金屬鹽類藥物強(qiáng)調(diào)用“新沸過的冷水”。注意事項(xiàng)：第94頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天§3-4特殊雜質(zhì)的鑒定方法一、特殊雜質(zhì)的研究規(guī)范1.新原料藥和新制劑中的雜質(zhì)表觀含量≥0.1%和表觀含量<0.1%具強(qiáng)烈生物作用或毒性的雜質(zhì)，要求定性或確證其結(jié)構(gòu)。包括：藥物合成中的有機(jī)雜質(zhì)；穩(wěn)定性試驗(yàn)中的降解產(chǎn)物。

2.非新藥中發(fā)現(xiàn)的新雜質(zhì)和新降解產(chǎn)物3.手性藥物的光學(xué)異構(gòu)體第95頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）合成雜質(zhì)對(duì)照品法適用于量少，分離純化困難的雜質(zhì)。方法：比較雜質(zhì)與對(duì)照品的色譜性質(zhì)、UV曲線特征和MS信息，判斷雜質(zhì)與對(duì)照品是否是同一種化合物，從而確定雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)。（二）色譜制備雜質(zhì)對(duì)照品法適用于量較大的雜質(zhì)。方法：通過色譜分離得到特定雜質(zhì)，再通過元素分析、UV、IR、NMR和MS確定雜質(zhì)及有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。二、特殊雜質(zhì)的鑒定第96頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）最佳選擇題1.下列屬于信號(hào)雜質(zhì)的是（）

A.砷鹽B.硫酸鹽C.鉛D.氰化物

E.汞2.藥物中無效或低效晶型的檢查可以采用的方法是（）

A.高效液相色譜法B.紅外分光光度法

C.紫外-可見分光光度法D.原子吸收分光光度法

E.氣相色譜法第97頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.原子吸收分光光度法檢查藥物中金屬雜質(zhì)時(shí)，通常采用的方法是（）

A.內(nèi)標(biāo)法B.外標(biāo)法C.加校正因子的主成分自身對(duì)照法D.標(biāo)準(zhǔn)加入法

E.不加校正因子的主成分自身對(duì)照法4.藥物中氯化物雜質(zhì)檢查，是使該雜質(zhì)在酸性溶液中與硝酸銀作用生成氯化物渾濁，所用的稀酸是

()

A.硫酸

B.硝酸

C.鹽酸

D.醋酸E.磷酸第98頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天5.氯化物檢查法中，用以解決供試品溶液帶顏色對(duì)測(cè)定干擾的方法是（）

A.活性炭脫色法B.有機(jī)溶劑提取后檢查法

C.內(nèi)消色法D.標(biāo)準(zhǔn)液比色法

E.改用他法6.中國(guó)藥典收載的鐵鹽檢查，主要是檢查（）

A.FeB.Fe2+C.Fe3+

D.

Fe2+和Fe3+E.以上都不對(duì)第99頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天8.下列試液中，用作ChP重金屬檢查法中的顯色劑的是（）

A.硫酸鐵銨試液B.硫化鈉試液

C.氰化鉀試液D.重鉻酸鉀試液

E.硫酸銅試液7.采用硫氰酸鹽法檢查鐵鹽時(shí)，若供試液管與對(duì)照液管所呈硫氰酸鐵的顏色深淺不便比較時(shí)，可采取的措施是（）

A.內(nèi)消色法B.外消色法

C.標(biāo)準(zhǔn)液比色法D.正丁醇提取后比色法

E.改用他法第100頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天10.采用熾灼后硫代以酰胺法檢查重金屬時(shí)，應(yīng)控制的熾灼溫度范圍是（）

A.500~600oCB.600~700oCC.700~800oCD.800~900oCE.900~1000oC9.硫代乙酰胺法檢查重金屬時(shí)，受溶液pH影響較大，適合的pH是（）

A.11.5B.9.5C.7.5D.3.5E.1.5第101頁(yè),共110頁(yè)，2024年2月25日，星期天12.費(fèi)休氏法測(cè)定水分時(shí)，水與費(fèi)休氏試液作用的摩爾比是（）

A.水-碘-二氧化硫-甲醇-吡啶（1：1：1：1：3）

B.水-碘-二氧化硫-甲