糖類蛋白質(zhì)脂肪的鑒定

關(guān)于糖類蛋白質(zhì)脂肪的鑒定檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)

1.實驗原理第2頁,共32頁，2024年2月25日，星期天

斐林試劑蘇丹Ⅲ橘黃色紅色磚紅色沉淀紫色蘇丹Ⅳ

雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)試劑實驗現(xiàn)象還原性糖脂肪蛋白質(zhì)淀粉

碘

藍色生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗原理第3頁,共32頁，2024年2月25日，星期天方法步驟：

1．實驗材料、儀器和試劑的選擇

2．設(shè)計記錄表格，記錄預(yù)測結(jié)果

3．檢測的方法步驟

(1)還原糖的檢測和觀察;(2)脂肪的檢測和觀察;(3)蛋白質(zhì)的檢測和觀察;第4頁,共32頁，2024年2月25日，星期天第5頁,共32頁，2024年2月25日，星期天第6頁,共32頁，2024年2月25日，星期天第7頁,共32頁，2024年2月25日，星期天選材：含糖量較高的白色或近于白色的植物組織(排除色素對顯色的干擾)，蘋果、梨最好

。

實驗流程(步驟)1.可溶性還原糖

制備組織樣液：制漿：去皮、切塊、研磨，過濾：（用單層紗布）取液：（２mL）顯色反應(yīng)

２mL組織樣液剛配制的斐林試劑２mL現(xiàn)象：

呈現(xiàn)藍色變成磚紅色(用前混勻)50～65.C水浴加熱2min第8頁,共32頁，2024年2月25日，星期天還原糖的檢測和觀察：第9頁,共32頁，2024年2月25日，星期天還原糖的檢測結(jié)果第10頁,共32頁，2024年2月25日，星期天第11頁,共32頁，2024年2月25日，星期天第12頁,共32頁，2024年2月25日，星期天2.脂肪的鑒定

取材：花生種子（浸泡３－４h），去皮，將子葉削成薄片

制片：①選取最薄的薄片移至載玻片中央②在薄片上滴加蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)

染液2－3滴，染色２－３min③滴加體積分數(shù)為50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色(多余的蘇丹Ⅲ

)④吸去余液，滴1-2滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片顯微觀察：先在低倍鏡下找到已著色的薄片，后用高倍鏡觀察現(xiàn)象：有被染成橘黃色(或紅色)的脂肪微粒脂肪微粒第13頁,共32頁，2024年2月25日，星期天脂肪的檢測結(jié)果第14頁,共32頁，2024年2月25日，星期天第15頁,共32頁，2024年2月25日，星期天3.蛋白質(zhì)的鑒定選材與制備組織樣液：黃豆組織樣液（或雞蛋蛋清稀釋液）［黃豆浸泡→去皮→切片→研磨→過濾→濾液］

顯色反應(yīng)２mL組織樣液雙縮脲試劑Ａ２mL現(xiàn)象：無色雙縮脲試劑Ｂ３－４滴紫色或紫紅色(創(chuàng)設(shè)堿性條件)(提供Cu2+)第16頁,共32頁，2024年2月25日，星期天蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果第17頁,共32頁，2024年2月25日，星期天蛋白質(zhì)的鑒定----雙縮脲試劑雞蛋清溶液

NaOH溶液滴加CuSO2

溶液,每次滴加均需搖勻結(jié)果顯示:紫色第18頁,共32頁，2024年2月25日，星期天1.你的預(yù)測與實驗結(jié)果是否一致？2.小組間交流實驗結(jié)果。你有什么發(fā)現(xiàn)？3.全班共檢測了多少種生物材料？這些生物材料中有機化合物的種類、含量一樣嗎？這對我們選擇食物有什么啟發(fā)？討論第19頁,共32頁，2024年2月25日，星期天4.淀粉的鑒定取材：馬鈴薯勻漿檢測：２mL組織樣液碘液2滴現(xiàn)象：

搖勻后變成藍色第20頁,共32頁，2024年2月25日，星期天問題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實驗時，為什么要留出一部分樣液？作對照2、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加3～4滴而不能過量？

過量的雙縮脲試劑B會與試劑A反應(yīng)，使溶液呈藍色，而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能放置太久？

時間太長，Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應(yīng)。深化第21頁,共32頁，2024年2月25日，星期天比較項目試劑及成分原理溶液濃度方法加熱與否結(jié)果可溶還原糖的鑒定斐林試劑NaOH和CuSO4磚紅色沉淀蛋白質(zhì)的鑒定雙縮脲試劑NaOH和CuSO4溶液呈紫色4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同？新配制的Cu(OH)2溶液在堿性環(huán)境下的Cu2+NaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.05g/mLNaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.01g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。先加入Na0H1mL，然后再加CuS044滴，搖勻。(不能過量)水浴加熱不需要第22頁,共32頁，2024年2月25日，星期天5、實驗的材料的選擇和處理有什么要求？材料的選擇材料的處理還原性糖的鑒定脂肪的鑒定含糖高，顏色為白色的植物組織，如蘋果和梨富含脂肪的種子，如花生浸泡3~4小時/蛋白質(zhì)的鑒定富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清黃豆需浸泡1-2天，雞蛋清要先稀釋淀粉的鑒定馬鈴薯/第23頁,共32頁，2024年2月25日，星期天

各種可供實驗的材料梨黃桃胡蘿卜黃豆花生種子小麥種子①其中適合于鑒定可溶性還原糖的是

，理由是梨的組織細胞

，你打算用什么試劑鑒定?

。②小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪，這是因為

，你打算用什么試劑鑒定?

.

[例]做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗時，需要根據(jù)實驗需要選擇不同的實驗材料。請根據(jù)下表所列各種材料回答問題：梨

顏色為白色，并且糖含量較高

斐林試劑脂肪含量不如花生高，也不容易做切片

用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ試劑第24頁,共32頁，2024年2月25日，星期天③小麥種子中糖類化合物

含量很高，卻不適合用來鑒定

__________，這是因為

________________________________________。

④適合于鑒定蛋白質(zhì)的是

，理由是

，鑒定所用的試劑是

。

蛋白質(zhì)含量高

黃豆和花生

雙縮脲試劑淀粉

可溶性還原糖淀粉是非還原糖且不溶于水

第25頁,共32頁，2024年2月25日，星期天知識結(jié)構(gòu)第26頁,共32頁，2024年2月25日，星期天1、青蘋果汁遇碘液顯藍色，熟蘋果汁能與斐林試劑作用產(chǎn)生磚紅色沉淀，下列結(jié)論中最合理的是()A．青蘋果汁中有淀粉，不含還原糖

B．熟蘋果汁中含還原糖，沒有淀粉

C．蘋果轉(zhuǎn)熟時，大量淀粉水解成還原糖

D．蘋果轉(zhuǎn)熟時單糖聚合成淀粉

C例題

第27頁,共32頁，2024年2月25日，星期天２、安徽阜陽劣質(zhì)奶粉事件震驚全國，引起世人注目。鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品，肯定不需要用到的化學(xué)試劑是()A.斐林試劑B.紅墨水

C.雙縮脲試劑D.蘇丹Ⅳ染液

B例題

第28頁,共32頁，2024年2月25日，星期天3(2005.廣東)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機物的鑒定實驗中，以下操作錯誤的是()A、可溶性還原糖的鑒定，可用酒精燈直接加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀B、只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡C、用雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)不需要加熱D、使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)配現(xiàn)用A第29