細(xì)胞工程胚胎工程

關(guān)于細(xì)胞工程胚胎工程一、概述胚胎工程廣義的胚胎工程：或叫胚胎技術(shù),是生物工程的一個(gè)分支，是動(dòng)物生物工程的主干。它是以胚胎移植為基礎(chǔ)，以轉(zhuǎn)基因、細(xì)胞融合、干細(xì)胞技術(shù)為中心，通過(guò)人工操作胚胎，定向改變動(dòng)物性狀使之為人類(lèi)造福的一系列生物技術(shù)的總稱(chēng)。狹義的胚胎工程：俗稱(chēng)“借腹懷胎”，是指于著床前自一母體（供體）收集胚胎，移植到另一母體（受體）內(nèi)完成妊娠的過(guò)程。在畜牧業(yè)上，供體一般為優(yōu)秀母畜，而受體一般為品質(zhì)較差些的母畜。胚胎工程的操作對(duì)象：生殖細(xì)胞，受精卵及早期胚胎細(xì)胞第2頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、胚胎發(fā)育的基本過(guò)程和機(jī)制高等動(dòng)物的胚胎發(fā)育包括受精、卵裂、囊胚、原腸胚、中胚層及體腔形成、胚層分化等主要階段。低等動(dòng)物因進(jìn)化地位不同，其胚胎發(fā)育則缺少相應(yīng)的后幾個(gè)階段。第3頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）胚胎發(fā)育的基本過(guò)程1.生殖細(xì)胞的發(fā)生2.受精3.早期胚胎發(fā)育過(guò)程第4頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天哺乳動(dòng)物的生殖是一個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的生命現(xiàn)象，在胚胎早期，生殖細(xì)胞首先與體細(xì)胞分離，形成的細(xì)胞為原生殖細(xì)胞(primordialgermcell，PGCs)：卵原細(xì)胞（oogonia）和精原細(xì)胞（spermtoginia）其后，經(jīng)過(guò)性別決定和將要進(jìn)行的性別分化，形成兩種生殖細(xì)胞。

1.生殖細(xì)胞的發(fā)生第5頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天卵子的發(fā)生（oogenesis）：卵子的發(fā)育過(guò)程中，二倍體的卵原細(xì)胞(oogonia)在卵巢內(nèi)進(jìn)行幾次有絲分裂后，進(jìn)入減數(shù)分裂。進(jìn)入減數(shù)分裂后，初級(jí)卵母細(xì)胞停留在第一次減數(shù)分裂的前期，不再增殖，因此胚胎這個(gè)時(shí)期的卵母細(xì)胞數(shù)目就是一個(gè)雌性哺乳動(dòng)物一生所擁有的全部卵細(xì)胞總數(shù)。第6頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天哺乳動(dòng)物以及其他的許多脊椎動(dòng)物的卵細(xì)胞發(fā)育在出生后停止數(shù)月（鼠）或數(shù)年（人類(lèi)），直到雌性動(dòng)物發(fā)育到性成熟才繼續(xù)發(fā)育。青春期之后，卵母細(xì)胞進(jìn)一步發(fā)育，在體積上增加約1000倍，減數(shù)分裂繼續(xù)進(jìn)行。哺乳動(dòng)物減數(shù)分裂進(jìn)行至第二次減數(shù)分裂中期后再一次發(fā)生暫停，直至受精后才完成減數(shù)分裂。第7頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天哺乳動(dòng)物卵子發(fā)生的模式

第8頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天精子發(fā)生（spermatogenesis）:胚胎睪丸內(nèi)產(chǎn)生精子的生殖細(xì)胞在胚胎期不進(jìn)行減數(shù)分裂，而是停留在有絲分裂細(xì)胞周期的早期階段，稱(chēng)為精原細(xì)胞（spermatoginia），出生后繼續(xù)進(jìn)行有絲分裂。動(dòng)物性成熟后，這些精原細(xì)胞形成精母細(xì)胞。每個(gè)精母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成4個(gè)單倍體的精細(xì)胞，通過(guò)成熟過(guò)程形成4個(gè)精子。精子終生都可產(chǎn)生，體積較小，一般具有頭部、頸部和尾部，能運(yùn)動(dòng)。第9頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天精子的結(jié)構(gòu)第10頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天Thestagesofoogenesisandspermatogenesis

第11頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.受精精子的成熟與獲能(2)卵子的成熟與排放(3)頂體反應(yīng)(4)多精受精的阻斷(5)卵子的激活第12頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天(1)精子的成熟與獲能哺乳動(dòng)物的精子離開(kāi)精巢后并沒(méi)有受精能力，必須要經(jīng)過(guò)成熟和獲能才能使卵子受精。精子的成熟：精子在附睪中成熟。在附睪中多種物質(zhì)的作用下，精子質(zhì)膜的脂類(lèi)、糖蛋白、唾液酸、吸收抗原、表面ATP等許多成分發(fā)生了變化，負(fù)電荷增加，與凝集素的結(jié)合力也發(fā)生改變。第13頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天精子的獲能：精子在生殖道中停留一段時(shí)間后才具備受精能力，這一現(xiàn)象稱(chēng)為精子的獲能（capacitation）。精子的獲能過(guò)程是多時(shí)期、多步驟的復(fù)雜變化過(guò)程，一般認(rèn)為獲能的第一階段是脫出精子表面的抗原物質(zhì)和去能因子（decapacitationfactors,DF），增強(qiáng)了膜通透性。第二階段是精子細(xì)胞膜蛋白發(fā)生變化，即發(fā)生頂體反應(yīng)。精子在體外也能完成獲能（卵泡液、輸卵管分泌物、血清、房水等）。pH、Ca2+等環(huán)境條件對(duì)獲能也有影響。

精子在獲能過(guò)程中發(fā)生一系列的形態(tài)及生理生化的變化，呼吸明顯加強(qiáng)，運(yùn)動(dòng)形態(tài)和速度也發(fā)生很大變化，有直線前進(jìn)變?yōu)榍€運(yùn)動(dòng)。第14頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天精子的行進(jìn)：在正常生殖過(guò)程中，精子在陰道和子宮內(nèi)的運(yùn)動(dòng)速度很快，十幾分鐘即達(dá)到輸卵管，積聚在輸卵管峽部下2－3cm處，在此停留十幾到幾十個(gè)小時(shí)，然后繼續(xù)上行，只有少數(shù)精子可以達(dá)到輸卵管壺腹部，在此與剛排出的卵相遇，完成受精過(guò)程。第15頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天（2）卵子的成熟與排放卵母細(xì)胞的發(fā)育與卵泡細(xì)胞關(guān)系密切，卵母細(xì)胞與卵泡細(xì)胞構(gòu)成卵泡（又稱(chēng)濾泡，follicles），根據(jù)其發(fā)育程度可分為原始卵泡、初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡、成熟卵泡等。原始卵泡由一個(gè)初級(jí)卵母細(xì)胞和一層扁平的卵泡細(xì)胞構(gòu)成，位于卵巢皮質(zhì)的淺層。初級(jí)卵泡的初級(jí)卵母細(xì)胞已經(jīng)增大，由單層和多卵泡細(xì)胞構(gòu)成。次級(jí)卵泡的卵泡細(xì)胞數(shù)量和層數(shù)增加，卵泡體積增大，在卵泡細(xì)胞間出現(xiàn)腔隙，這些腔隙逐漸合并，不斷擴(kuò)大，形成一個(gè)較大的卵泡腔。第16頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天

排卵ovulation：隨著卵泡的增大，逐漸向卵巢表面突出，在膠原酶和透明質(zhì)酸酶作用下，卵泡破裂，卵細(xì)胞、透明帶和放射冠隨卵泡液一起排出，經(jīng)腹膜腔進(jìn)入輸卵管的過(guò)程。在排卵前，初級(jí)卵母細(xì)胞完成第一次減數(shù)分裂，形成一個(gè)較大的次級(jí)卵母細(xì)胞和一個(gè)很小的第一極體。次級(jí)卵母細(xì)胞立即進(jìn)行第二次減數(shù)分裂，但停止于分裂中期，若24h內(nèi)不能受精，就會(huì)退化。若24h能受精，它會(huì)很快完成第二次減數(shù)分裂，形成一個(gè)成熟的卵細(xì)胞和一個(gè)第二極體。第17頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天（3）頂體反應(yīng)頂體(acrosome)：精子頭的頂端特化的小泡，它是由高爾基體小泡發(fā)育而來(lái)。頂體含有各種水解酶類(lèi)，包括酸性磷酸酶、蛋白水解酶、透明質(zhì)酸酶等，實(shí)際上，頂體是一種特化的溶酶體。頂體反應(yīng)：是受精作用的反應(yīng)之一，受鈣離子的調(diào)節(jié)。反應(yīng)過(guò)程較長(zhǎng)，包括頂體受體的激活、頂體膜與精細(xì)胞質(zhì)膜融合、頂體中水解酶的釋放、卵細(xì)胞外被（透明帶）的水解等，最終導(dǎo)致精細(xì)胞質(zhì)膜與卵細(xì)胞質(zhì)膜的融合。

第18頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天（4）多精受精的阻斷多精受精阻斷（blocktothepolyspermy）:精子穿入激活了的卵細(xì)胞內(nèi)的一種阻斷機(jī)制，阻止另外的精子再進(jìn)入卵內(nèi)。一旦第一個(gè)精子與卵細(xì)胞質(zhì)膜融合，多精受精阻斷的主要機(jī)制立刻會(huì)發(fā)揮作用。重要性：多個(gè)精子細(xì)胞核進(jìn)入卵內(nèi)，就會(huì)有多余的染色體和中心體，最終導(dǎo)致不正常的發(fā)育。第19頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天阻止多精受精的機(jī)制——卵膜的變化精子與卵細(xì)胞質(zhì)膜融合后，會(huì)引起鈣流的變化，激發(fā)卵質(zhì)膜下皮層顆粒（皮層顆粒是卵內(nèi)一種特殊的、由膜包圍的一種分泌顆粒,它位于質(zhì)膜之下

）的釋放。皮層反應(yīng)起到阻止多精受精的結(jié)果。第20頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天（5）卵子的激活受精時(shí)，卵子被激活，組織與減數(shù)分裂某一階段的卵細(xì)胞重新啟動(dòng)，使減數(shù)分裂得以完成，精卵原核融合形成合子。同時(shí)也使受精卵發(fā)生一系列的變化，如蛋白質(zhì)的合成增加、細(xì)胞開(kāi)始分裂。作用機(jī)理：自由鈣離子的突然增加在這一過(guò)程中起到重要的作用。鈣離子波能夠激活依賴(lài)鈣調(diào)蛋白的蛋白激酶Ⅱ，此酶的活化導(dǎo)致卵細(xì)胞中周期蛋白(成熟促進(jìn)因子MPF的組分之一)的降解，使其得以完成減數(shù)分裂。第21頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.早期胚胎發(fā)育過(guò)程卵裂cleavage：受精卵不生長(zhǎng)而連續(xù)分裂，形成無(wú)數(shù)小細(xì)胞，叫分裂球blastomere。由于不同動(dòng)物卵細(xì)胞內(nèi)卵黃多少及其在卵內(nèi)分布情況的不同，卵裂方式不同。桑葚胚：動(dòng)物早期胚胎發(fā)育的一個(gè)階段，受精卵經(jīng)過(guò)多次分裂，成為由數(shù)十至數(shù)百個(gè)細(xì)胞組成的形如桑椹的實(shí)心胚胎。例如，哺乳動(dòng)物的受精卵在受精72h,分裂為12-16個(gè)細(xì)胞，形成桑葚胚。囊胚blastula：卵裂最終形成球形的中空球形胚，囊胚中間的腔稱(chēng)為囊胚（blastocoel），

囊胚壁的細(xì)胞層稱(chēng)為囊胚層（blastoderm）。第22頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天胚泡：在哺乳類(lèi)發(fā)生早期，稱(chēng)卵裂期終了的胚胎為胚泡。哺乳類(lèi)的卵進(jìn)行完全卵裂而形成卵裂球的團(tuán)塊，不久在團(tuán)塊內(nèi)部生出空腔，逐漸擴(kuò)大，最后成為由一層細(xì)胞圍成的泡狀體，并從壁的一側(cè)有一細(xì)胞團(tuán)塊向內(nèi)腔突出，這樣的泡狀體就是胚泡。胚泡由三部分構(gòu)成即①滋養(yǎng)層（trophoblast）②胚泡腔(blastocoele)③內(nèi)細(xì)胞群(innercellmass)。

胚泡吸收子宮的營(yíng)養(yǎng)迅速增大，從一直包圍的透明帶中釋放出來(lái)，開(kāi)始逐漸陷入

子宮內(nèi)膜，稱(chēng)為植入（implantation）或著床（imbed）第23頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天原腸胚gastrula

：囊胚進(jìn)一步發(fā)育進(jìn)入原腸胚形成階段，此時(shí)胚胎分化出內(nèi)，外兩胚層和原腸腔。其形成方式在各類(lèi)動(dòng)物中不同，包括內(nèi)陷、內(nèi)移、分層、內(nèi)轉(zhuǎn)外包。

中胚層及體腔的形成：絕大多數(shù)多細(xì)胞動(dòng)物除了內(nèi)、外胚層之外，在內(nèi)外胚層之間還進(jìn)一步發(fā)育，形成中胚層（mesoderm）。在中胚層胚層的分化：動(dòng)物體的組織器官都是從內(nèi)、中、外三個(gè)胚層發(fā)育分化而來(lái)的。第24頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）胚胎發(fā)育的基本機(jī)制1.細(xì)胞分化2.細(xì)胞分化3.模式形成4.形態(tài)發(fā)生5.生長(zhǎng)發(fā)育通常包括5種主要的機(jī)制：第25頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天細(xì)胞分裂：細(xì)胞分裂是胚胎發(fā)育的基礎(chǔ)，模式建立、形態(tài)發(fā)生、細(xì)胞分化及生長(zhǎng)都是通過(guò)細(xì)胞分裂過(guò)程完成的。2.細(xì)胞分化：細(xì)胞分化是發(fā)育的中心問(wèn)題。胚胎通過(guò)細(xì)胞分化在結(jié)構(gòu)和功能上出現(xiàn)差異。這種差異來(lái)自基因的差異表達(dá)、細(xì)胞的行為。外界信號(hào)和環(huán)境可誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生分化。細(xì)胞的分化命運(yùn)是在不同的時(shí)間決定的，且決定的程度早期的胚胎細(xì)胞較晚期的小。3.模式形成、形態(tài)發(fā)生以及生長(zhǎng)第26頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、體外受精體外受精（invitrofertilization,IVF），亦稱(chēng)試管動(dòng)物技術(shù)，是指把動(dòng)物的卵子和精子取出在試管內(nèi)混合，受精而形成胚胎的過(guò)程。體外受精胚胎一般在體外發(fā)育到一定時(shí)期后移植到受體雌性動(dòng)物輸卵管或子宮內(nèi)，妊娠到產(chǎn)仔?；驹恚菏侨斯つM體內(nèi)環(huán)境，包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、濕度、氣體,滲透壓、pH等，使卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體中的初級(jí)卵母細(xì)胞成熟，同時(shí)使精子獲能，完成受精。第27頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天體外受精的研究歷史：1951年，張明覺(jué)和Austin同時(shí)發(fā)現(xiàn)哺乳動(dòng)物精子獲能現(xiàn)象。1959年，張明覺(jué)從交配12h的母兔子宮沖取精子，從另外2只超數(shù)排卵處理的母兔輸卵管中收集卵子，在體外配置的溶液中完成受精過(guò)程。將正常卵裂36枚胚胎移植到6只受體兔輸卵管中，4只懷孕，產(chǎn)下15只健康子兔。這是世界上首批試管動(dòng)物，標(biāo)志著體外受精技術(shù)的建立。20世紀(jì)80年代中期，發(fā)展迅速。試管小鼠（Whittingham1968年）,大鼠（Toyoda，1974年），嬰兒（Steptoe,1978年），牛（Brackett，1982、年），山羊（Hamda，1985年），綿羊（Hanada，1985年），豬（Chang，1986年）相繼出生。英國(guó)學(xué)者Edward和Steptoe最早開(kāi)展了人類(lèi)體外受精和胚胎技術(shù)的研究，將體外受精后發(fā)育到8細(xì)胞期的人早期胚胎移植到母親子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。在1978年7月26日誕生了世界第一例“試管嬰兒”。第28頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天美籍生物學(xué)家張明覺(jué)張明覺(jué)博士是美國(guó)著名生物學(xué)家，美國(guó)科學(xué)院院士，由于在口服避孕藥和人工體外受精的科學(xué)研究中取得開(kāi)拓性的顯著成就而被人們譽(yù)為“試管嬰兒的先驅(qū)”、“避孕藥之父”。1908年出生,1933年他畢業(yè)于清華大學(xué)1938年，張明覺(jué)赴英國(guó)愛(ài)丁堡大學(xué)農(nóng)學(xué)系留學(xué)，次年轉(zhuǎn)入劍橋大學(xué)學(xué)習(xí)，主攻動(dòng)物育種和人工授精。1941年，他獲得生物學(xué)博士學(xué)位。1945年，張明覺(jué)移居美國(guó)，在麻省渥斯特生物實(shí)驗(yàn)研究所進(jìn)行卵子移殖的研究，先后擔(dān)任副研究員、高級(jí)研究員兼首席科學(xué)家，爾后他又兼任波士頓大學(xué)教授，并加入了美國(guó)籍。第29頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天體外受精技術(shù)：

1.卵母細(xì)胞的采集和體外培養(yǎng)

2.精子的獲能

3.體外受精

4.受精卵的體外培養(yǎng)

5.胚胎移植第30頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天卵細(xì)胞的采集和成熟培養(yǎng)（1）卵細(xì)胞的采集

1）超數(shù)排卵：利用促性腺激素處理，使得卵巢中有更多的卵泡發(fā)育，更多的卵被排出，這個(gè)過(guò)程就稱(chēng)為超數(shù)排卵（superovulation）。通過(guò)從輸卵管中沖取的方式獲得成熟的卵子。

2）從活體卵巢中采集卵母細(xì)胞：借助超聲波探測(cè)儀、內(nèi)鏡或腹腔鏡直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵細(xì)胞。3）從屠宰后母畜卵巢上采集卵母細(xì)胞：從剛屠宰的母畜體內(nèi)摘出卵巢，無(wú)菌條件下用注射器或真空泵抽吸卵巢表面一定直徑卵泡中的卵母細(xì)胞。第31頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天（2）卵母細(xì)胞的選擇和成熟培養(yǎng)采卵獲得的卵母細(xì)胞絕大部分與卵丘細(xì)胞形成卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體（cumulusoocytecomplesx）,根據(jù)卵母細(xì)胞的形態(tài)規(guī)則，細(xì)胞質(zhì)均勻程度及外圍卵丘細(xì)胞包圍情況，挑選A,B級(jí)卵母細(xì)胞，洗滌后，在成熟培養(yǎng)基中培養(yǎng)。觀察出現(xiàn)放射冠后，備用。超數(shù)排卵采集的卵母細(xì)胞已經(jīng)在體內(nèi)發(fā)育成熟，因而不需培養(yǎng)可直接與精子受精。第32頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.精子的獲能處理

獲能有體內(nèi)和體外方法：

?體內(nèi)獲能是從交配的母畜子宮內(nèi)沖取精子用于受精。

?體外獲能分兩步：精子洗滌除去雜質(zhì)、死精子、低活力精子、凍精保護(hù)液及稀釋液，然后使用高離子強(qiáng)度液，鈣離子載體，肝素等促使鈣離子進(jìn)入精子頂體，刺激精子內(nèi)部pH升高，誘發(fā)精子獲能。第33頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.體外受精將獲能的精子和成熟的卵子置于受精液中共同培養(yǎng)，使之完成受精過(guò)程。為了提高體外受精的成功率，可以借助顯微操作儀將精子直接注入卵母細(xì)胞質(zhì)（ICSI）或透明帶(SUZI)下，完成受精過(guò)程。顯微受精技術(shù)避免了由透明帶或卵質(zhì)膜所形成的受精障礙，使受精率和準(zhǔn)確率大大提高。第34頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天4.受精卵的體外培養(yǎng)受精卵需要在培養(yǎng)液或輸卵管中發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段，移植到受體后才能獲得較高的妊娠率。發(fā)育阻滯：在化學(xué)組分確定的培養(yǎng)基中，早期胚胎往往不能完成從受精卵到囊胚的發(fā)育全過(guò)程,而停頓在某個(gè)特定的發(fā)育時(shí)期.這種現(xiàn)象被稱(chēng)為“發(fā)育阻滯”?？朔l(fā)育阻滯的方法：1.改進(jìn)培養(yǎng)液的成分，改善培養(yǎng)條件，滿足發(fā)育所需物質(zhì)，去除不利成分。

2.利用體細(xì)胞共同培養(yǎng)體系，提供發(fā)育所需物質(zhì)條件。5.胚胎移植第35頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天體外受精的意義及用途：1.可用于研究哺乳動(dòng)物的配子發(fā)生、受精、和胚胎早期發(fā)育機(jī)制。

2.治療人類(lèi)男性和雄性動(dòng)物的生殖不育

2.在充分利用優(yōu)良品種資源、縮短家畜繁殖周期、加快品種改良速度方面有重要價(jià)值。

3.是哺乳動(dòng)物胚胎移植、克隆、轉(zhuǎn)基因和性別控制等現(xiàn)代生物技術(shù)不可缺少的組成部分。總之，體外受精技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜產(chǎn)學(xué)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域。

第36頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天體外受精存在的問(wèn)題：1.效率有待提高2.體外培養(yǎng)體系有待完善3.基礎(chǔ)理論研究有待加強(qiáng)第37頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、胚胎移植技術(shù)胚胎移植（embryotransfer)：俗稱(chēng)“借腹懷胎”，“借劣質(zhì)動(dòng)物之腹懷優(yōu)秀個(gè)體之胎”。

將良種母畜（供體）配種后的早期胚胎，移植到另外一頭與供體生理狀態(tài)相同的母畜（受體）體內(nèi)，這個(gè)來(lái)自供體的胚胎能夠在受體的子宮著床，并繼續(xù)生長(zhǎng)和發(fā)育，最后產(chǎn)下供體的后代。供體一般為優(yōu)秀母畜，而受體一般為品質(zhì)較差些的母畜。第38頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天第39頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天第40頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天羊“媽媽”帶著沒(méi)有一點(diǎn)血緣關(guān)系的羊“孩子”在曬太陽(yáng)。

第41頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)

?成年母畜卵巢上存在數(shù)千到上萬(wàn)個(gè)卵泡，在外源激素作用下，每個(gè)發(fā)情期的卵泡發(fā)育和排卵數(shù)可達(dá)數(shù)十個(gè)

?每個(gè)發(fā)情周期生殖器官都有一個(gè)孕向發(fā)育

?早期胚胎處于游離狀態(tài)

?胚胎發(fā)育不存在免疫問(wèn)題

?胚胎發(fā)育到一定階段會(huì)與子宮發(fā)生生理和組織聯(lián)系?胚胎的遺傳性不受受體的影響第42頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天供體和受體在分類(lèi)學(xué)上的相同屬性動(dòng)物生理上的一致性：受體和供體在發(fā)情時(shí)間上的同期性胚胎的質(zhì)量：胚胎必須是正常的，并在處理過(guò)程中不受不良因素的影響（二）胚胎移植的基本原則第43頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）胚胎移植的技術(shù)程序供體應(yīng)具有相當(dāng)高的育種價(jià)值供體生殖機(jī)能應(yīng)處于較高的狀態(tài)：產(chǎn)后60天以上，無(wú)生殖系統(tǒng)疾病，體質(zhì)強(qiáng)健受體應(yīng)容易購(gòu)買(mǎi)，繁殖性能好，對(duì)地方適應(yīng)性強(qiáng)，體型中上等，非優(yōu)良品種受體健康狀況良好，已進(jìn)入發(fā)情季節(jié)供受體發(fā)情時(shí)間應(yīng)接近或一致1.供體和受體的選擇第44頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天

超數(shù)排卵:利用促性腺激素處理，使得卵巢中有更

多的卵泡發(fā)育，更多的卵被排出。2.超數(shù)排卵處理意義：讓每個(gè)供體提供更多的胚胎

第45頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.同步發(fā)情同步發(fā)情又稱(chēng)同期發(fā)情，是指利用某些激素制劑人為地控制并調(diào)整一群母畜發(fā)情周期的進(jìn)程，使之在預(yù)訂時(shí)間內(nèi)集中發(fā)情。

常用的發(fā)情技術(shù)：a向母畜群同時(shí)施用孕激素，抑制卵泡的發(fā)育和發(fā)情，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間同時(shí)停藥，隨之引起同期發(fā)情。（原理，施藥期間，外源孕激素代替了內(nèi)源孕激素，形成人為黃體期，推遲了發(fā)情期的到來(lái)）

b利用前列腺素使發(fā)情提前到來(lái)。

第46頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天必須用優(yōu)秀的種公畜進(jìn)行多次配種，一般隔8-12小時(shí)進(jìn)行一次配種，直到發(fā)情結(jié)束。配種前應(yīng)對(duì)種公畜的精液進(jìn)行質(zhì)量檢查。也可以采用人工授精的方法，多次輸精。4.供體母畜配種第47頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天5.胚胎采集手術(shù)法收集胚胎

輸卵管沖胚（輸精后3-4d）子宮角沖胚（樹(shù)精后5d）

非手術(shù)法收集胚胎二路式?jīng)_卵器應(yīng)用第48頁(yè),共56頁(yè)，2024年2月25日，星期天6.胚胎的檢查與鑒定檢胚：收集到的沖洗液靜置，移去沖洗液，檢查胚胎數(shù)量，觀察胚胎質(zhì)量。無(wú)卵裂現(xiàn)象（未受精）和異常卵（外膜破裂、卵裂球破裂等）都不能用于移植。揀胚：將正常發(fā)育的胚胎移至培養(yǎng)液或保