分子生物學習題與答案

第0章緒論、名詞解釋2.單克隆抗體二、填空1．分子生物學的研究內(nèi)容主要包含（ ）、（ ）、（ ）三部分。三、是非題1、20世紀60年代，Nirenberg建立了大腸桿菌無細胞蛋白合成體系。研究結果發(fā)現(xiàn)poly（U）指導了多聚苯丙氨酸的合成，poly（G）指導甘氨酸的合成。（X）四、簡答題分子生物學的概念是什么？你對現(xiàn)代分子生物學的含義和包括的研究范圍是怎么理解的？分子生物學研究內(nèi)容有哪些方面？分子生物學發(fā)展前景如何？人類基因組計劃完成的社會意義和科學意義是什么？6．簡述分子生物學發(fā)展史中的三大理論發(fā)現(xiàn)和三大技術發(fā)明。簡述分子生物學的發(fā)展歷程。二十一世紀生物學的新熱點及領域是什么？21世紀是生命科學的世紀。20世紀后葉分子生物學的突破性成就，使生命科學在自然科學中的位置起了革命性的變化。試闡述分子生物學研究領域的三大基本原則，三大支撐學科和研究的三大主要領域？答案：一、名詞解釋.分子生物學：分子生物學就是研究生物大分子之間相互關系和作用的一門學科，而生物大分子主要是指基因和蛋白質兩大類；分子生物學以遺傳學、生物化學、細胞生物學等學科為基礎，從分子水平上對生物體的多種生命現(xiàn)象進行研究。.單克隆抗體：只針對單一抗原決定簇起作用的抗體。二、填空1,結構分子生物學，基因表達與調(diào)控，DNA重組技術三、是非題四、簡答題分子生物學的概念是什么？答案：有人把它定義得很廣：從分子的形式來研究生物現(xiàn)象的學科。但是這個定義使分子生物學難以和生物化學區(qū)分開來。另一個定義要嚴格一些，因此更加有用：從分子水平來研究基因結構和功能。從分子角度來解釋基因的結構和活性是本書的主要內(nèi)容。你對現(xiàn)代分子生物學的含義和包括的研究范圍是怎么理解的？分子生物學是從分子水平研究生命本質的一門新興邊緣學科，它以核酸和蛋白質等生物大分子的結構及其在遺傳信息和細胞信息傳遞中的作用為研究對象，是當前生命科學中發(fā)展最快并正在與其它學科廣泛交叉與滲透的重要前沿領域。狹義：偏重于核酸的分子生物學，主要研究基因或DNA的復制、轉錄、表達和調(diào)節(jié)控制等過程，其中也涉及與這些過程有關的蛋白質和酶的結構與功能的研究。分子生物學的發(fā)展為人類認識生命現(xiàn)象帶來了前所未有的機會，也為人類利用和改造生物創(chuàng)造了極為廣闊的前景。所謂在分子水平上研究生命的本質主要是指對遺傳、生殖、生長和發(fā)育等生命基本特征的分子機理的闡明，從而為利用和改造生物奠定理論基礎和提供新的手段。這里的分子水平指的是那些攜帶遺傳信息的核酸和在遺傳信息傳遞及細胞內(nèi)、細胞間通訊過程中發(fā)揮著重要作用的蛋白質等生物大分子。這些生物大分子均具有較大的分子量，由簡單的小分子核苷酸或氨基酸排列組合以蘊藏各種信息，并且具有復雜的空間結構以形成精確的相互作用系統(tǒng)，由此構成生物的多樣化和生物個體精確的生長發(fā)育和代謝調(diào)節(jié)控制系統(tǒng)。闡明這些復雜的結構及結構與功能的關系是分子生物學的主要任務。分子生物學主要包含以下三部分研究內(nèi)容：A.核酸的分子生物學，核酸的分子生物學研究核酸的結構及其功能。由于核酸的主要作用是攜帶和傳遞遺傳信息，因此分子遺傳學(moleculargenetics)是其主要組成部分。由于50年代以來的迅速發(fā)展，該領域已形成了比較完整的理論體系和研究技術，是目前分子生物學內(nèi)容最豐富的一個領域。研究內(nèi)容包括核酸/基因組的結構、遺傳信息的復制、轉錄與翻譯，核酸存儲的信息修復與突變，基因表達調(diào)控和基因工程技術的發(fā)展和應用等。遺傳信息傳遞的中心法則(centraldogma)是其理論體系的核心。B.蛋白質的分子生物學蛋白質的分子生物學研究執(zhí)行各種生命功能的主要大分子一蛋白質的結構與功能。盡管人類對蛋白質的研究比對核酸研究的歷史要長得多，但由于其研究難度較大，與核酸分子生物學相比發(fā)展較慢。近年來雖然在認識蛋白質的結構及其與功能關系方面取得了一些進展，但是對其基本規(guī)律的認識尚缺乏突破性的進展。分子生物學發(fā)展前景如何？21世紀是生命科學世紀，生物經(jīng)濟時代，分子生物學將取得突飛猛進的發(fā)展，結構基因組學、功能基因組學、蛋白質組學、生物信息學、信號跨膜轉導成為新的熱門領域，將在農(nóng)業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生領域帶來新的變革。社會意義：人類基因組計劃與曼哈頓原子計劃、阿波羅登月計劃并稱為人類科學史上的三大工程，具有重大科學意義、經(jīng)濟效益和社會效益。.極大地促進生命科學領域一系列基礎研究的發(fā)展，闡明基因的結構與功能關系、生命的起源和進化、細胞發(fā)育、生產(chǎn)、分化的分子機理，疾病發(fā)生的機理等，為人類自身疾病的診斷和治療提供依據(jù)，為醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)帶來翻天覆地的變化；.促進生命科學與信息科學、材料科學和與高新技術產(chǎn)業(yè)相結合，刺激相關學科與技術領域的發(fā)展，帶動起一批新興的高技術產(chǎn)業(yè)；.基因組研究中發(fā)展起來的技術、數(shù)據(jù)庫及生物學資源，還將推動對農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)(轉基因動、植物)、能源、環(huán)境等相關產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，改變?nèi)祟惿鐣a(chǎn)、生活和環(huán)境的面貌，把人類帶入更佳的生存狀態(tài)?？茖W意義：.確定人類基因組中約5萬個編碼基因的序列基因在基因組中的物理位置，研究基因的產(chǎn)物及其功能.了解轉錄和剪接調(diào)控元件的結構和位置，從整個基因組結構的宏觀水平上了解基因轉錄與轉錄后調(diào)節(jié).從總體上了解染色體結構，了解各種不同序列在形成染色體結構、DNA復制、基因轉錄及表達調(diào)控中的影響與作用.研究空間結構對基因調(diào)節(jié)的作用.發(fā)現(xiàn)與DNA復制、重組等有關的序列.研究DNA突變、重排和染色體斷裂等，了解疾病的分子機制，為疾病的診斷、預防和治療提供理論依據(jù).確定人類基因組中轉座子，逆轉座子和病毒殘余序列，研究其周圍序列的性質.研究染色體和個體之間的多態(tài)性6．三大理論發(fā)現(xiàn)DNA是遺傳物質DNA雙螺旋結構中心法則三大技術發(fā)明限制性內(nèi)切酶載體逆轉錄酶簡述分子生物學的發(fā)展歷程。答案：從1847年施旺和施萊登提出細胞學說——證明動植物是由細胞組成的，到今天人們對生物大分子——細胞的化學組成確有了深刻地認識。孟德爾的遺傳規(guī)律最先使人們對性狀遺傳產(chǎn)生了理性認識，而Morgan的基因學說則進一步將“性狀”與“基因”相偶聯(lián)，成為現(xiàn)代遺傳學的奠基石。隨著核酸化學研究的進展，Watson和Crick又提出了脫氧核糖核酸的雙螺旋模型，為充分揭示遺傳信息的傳遞規(guī)律鋪平了道路。在蛋白質化學方面，繼Sumner在1936年證實酶是蛋白質之后，Sanger利用紙電泳及層析技術于1953年首次闡明胰島素的一級結構，開創(chuàng)了蛋白質序列分析的先河。而Kendrew和Perutz利用X射線衍射技術解析了肌紅蛋白及血紅蛋白的三維結構，論證了這些蛋白質在輸送分子氧過程中的特殊作用，成為研究生物大分子空間立體構型的先驅。20世紀40年代被認為是分子生物學的孕育時期。1941年，曾在摩爾根實驗室工作過的美國遺傳學家比德爾同美國生物化學家塔特姆合作，把生物化學引進了遺傳學，推導出“一個基因一種酶”的新概念（后來有所修改），40年代中期被普遍承認，從而建立了生物化學、遺傳學。有兩項研究成果促進了分子生物學的發(fā)展。一項是由德國移居美國的物理學家M.德爾布呂克和其同事們在1946年發(fā)現(xiàn)不同種的噬菌體在一定條件下能進行基因交換重組。另一項是，1946?1947年，美國微生物學家J.萊德伯格同E.L.塔特姆合作，以大腸桿菌為材料，也發(fā)現(xiàn)了基因分離和重組現(xiàn)象。這兩項突破以及他們對噬菌體和大腸桿菌的一些基本研究，對分子生物學的發(fā)展起了十分重要的作用。1944年，美國細菌學家O.T.埃弗里發(fā)現(xiàn)DNA是不同種的肺炎雙球菌之間的轉化因子。第一次證明DNA攜帶著遺傳信息。這一十分重要的成果卻引起很大爭論，一方面受傳統(tǒng)思想的影響，很多人懷疑他所分離出的DNA不純，可能還是混雜的蛋白質在起作用；但是這一成就無疑地也刺激了人們對DNA化學組成和晶體結構的研究。1953年4月25日——DNA雙螺旋結構的分子模型。這一成就后來被譽為20世紀以來生物學方面最偉大的發(fā)現(xiàn)，也被認為是分子生物學誕生的標志。“x174噬菌體DNA的全部約5400個堿基的順序，促進了基因調(diào)節(jié)控制的研究。至于蛋白質晶體結構分析，則建立在英國的布口刺格父子及他們的學生創(chuàng)立并發(fā)展的X射線晶體衍射技術的基礎上。該實驗室的M.F.佩魯茨自30年代末開始，就系統(tǒng)地研究了血紅蛋白的結構。1969年完成了全部64種密碼的破譯。至此，基因控制蛋白質合成之謎得到了初步解答。遺傳密碼的破譯，被認為是分子遺傳學發(fā)展史上最輝煌的成果之一。1961年法國細胞遺傳學家F.雅各布和J.莫諾德共同合作，提出了乳糖操縱子理論，以后被證實為在原核細胞中基因控制的普遍方式。美國分子生物學家H.M.特明和D.巴爾的摩長期從事腫瘤病毒研究的基礎上，于1970年分別獨立地發(fā)現(xiàn)雞肉瘤病毒和白血病病毒都是RNA病毒。在此基礎上他們發(fā)現(xiàn)了依賴于RNA的DNA聚合酶即反轉錄酶。反轉錄酶能使RNA鏈上的遺傳密碼反轉錄給DNA。這一發(fā)現(xiàn)不僅對某些腫瘤的病因作了分子生物學的闡明，而且動搖了中心法則的不可逆性，成為中心法則的重要補充。真核細胞內(nèi)的調(diào)控機制要復雜得多，也是當前生物學家重點探索的問題之一。在此基礎之上，分子生物學發(fā)展的速度越來越快。二十一世紀生物學的新熱點及領域是什么？答案：結構生物學是當前分子生物學中的一個重要前沿學科，它是在分子層次上從結構角度特別是從三維結構的角度來研究和闡明當前生物學中各個前沿領域的重要學科問題，是一個包括生物學、物理學、化學和計算數(shù)學等多學科交叉的，以結構（特別是三維結構）測定為手段，以結構與功能關系研究為內(nèi)容，以闡明生物學功能機制為目的的前沿學科。這門學科的核心內(nèi)容是蛋白質及其復合物、組裝體和由此形成的細胞各類組分的三維結構、運動和相互作用，以及它們與正常生物學功能和異常病理現(xiàn)象的關系。分子發(fā)育生物學也是當前分子生物學中的一個重要前沿學科。人類基因組計劃，被稱為“21世紀生命科學的敲門磚”?！叭祟惢蚪M計劃”以及“后基因組計劃”的全面展開將進入從分子水平闡明生命活動本質的輝煌時代。目前正迅速發(fā)展的生物信息學，被稱為“21世紀生命科學迅速發(fā)展的推動力”。尤應指出，建立在生物信息基礎上的生物工程制藥產(chǎn)業(yè)，在21世紀將逐步成為最為重要的新興產(chǎn)業(yè)；從單基因病和多基因病研究現(xiàn)狀可以看出，這兩種疾病的診斷和治療在21世紀將取得不同程度的重大進展；遺傳信息的進化將成為分子生物學的中心內(nèi)容”的觀點認為，隨著人類基因組和許多模式生物基因組序列的測定，通過比較研究，人類將在基因組上讀到生物進化的歷史，使人類對生物進化的認識從表面深入到本質；研究發(fā)育生物學的時機已經(jīng)成熟。在21世紀，遺傳信息的進化研究成果，將成為解決發(fā)育問題的基礎，發(fā)育問題這一難題可望獲得突破性進展；在21世紀，生物技術產(chǎn)業(yè)化的趨勢將不斷加劇?；蚬こ碳夹g、轉基因技術和基因治療技術等將對21世紀的產(chǎn)業(yè)結構產(chǎn)生深遠的影響。當前，生命科學基礎研究中最活躍的前沿主要包括：分子生物學、細胞生物學、神經(jīng)生物學、生態(tài)學，并由這些活躍的前沿引伸出諸如：基因組學、蛋白質組學、人類基因組計劃、后人類基因組計劃、克隆羊、克隆魚、“腦的十年”、生

逐漸十髦的名詞和熱門話題。相應的應用研究或技術研究也正趨成熟并生物工程，即基因工程、蛋白質工程、發(fā)酵工程、酶工程、細胞工逐漸t紀全球關注的領域。程:、胚胎工程等。由于生命科學與人類生存、人們健康、社會發(fā)展密切相關，必t紀全球關注的領域。21世紀是生命科學的世紀。20世紀后葉分子生物學的突破性成就，使生命科學在自然科學中的位置起了革命性的變化。試闡述分子生物學研究領域的三大基本原則，三大支撐學科和研究的三大主要領域？答案：（1）研究領域的三大基本原則：構成生物大分子的單體是相同的；生物遺傳信息表達的中心法則相同；生物大分子單體的排列（核苷酸，氨基酸）導致了生物的特異性。（2）三大支撐學科：細胞學，遺傳學和生物化學。（3）研究的三大主要領域：主要研究生物大分子結構與功能的相互關系，其中包括DNA和蛋白質之間的相互作用；激素和受體之間的相互作用；酶和底物之間的相互作用。分子生物學習題集（2012版）TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"習題一 基因、基因組、基因組學和基因的化學本質 9\o"CurrentDocument"習題二DNA的復制、重組、損傷、修復以及突變 14\o"CurrentDocument"習題三DNA轉錄、逆轉錄及其轉錄后加工 19\o"CurrentDocument"習題四 翻譯及其后加工 24\o"CurrentDocument"習題五 基因表達的調(diào)控 29\o"CurrentDocument"習題六 基因工程以及其他現(xiàn)代分子生物學技術 34習題一基因、基因組、基因組學和基因的化學本質一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、SNP2、satelliteDNA3、annealing4、RFLP5、physicalmap二、填空題（每空1分，共15分）1、Tm是指DNA熱變性時候的熔點，雙鏈DNA中若 含量多，則其Tm值高。2、DNA分子中存在三類核苷酸序列，高度重復序列、中度重復序列和單拷貝序列。tRNA、rRNA以及組蛋白等由 編碼，而大多數(shù)蛋白質由 編碼。3、硝酸纖維素膜可結合單鏈核酸。將RNA變性后轉移到硝酸纖維素膜上再進行雜交，稱為 印跡法；將DNA變性后轉移到硝酸纖維素膜上再進行雜交，稱為 印跡法。4、蛋白質組是指 。5、維持DNA雙螺旋結構穩(wěn)定的主要因素是它由范德華力和疏水作用構成。6、現(xiàn)在普遍使用的測定DNA一級結構的方法是Sanger提出的 法。7、真核生物構成染色質的蛋白質有 和 兩類。染色質的一級結構為 ，二級結構是 纖維。8、DNA在酸性溶液中會發(fā)生，所以DNA應該存放在堿性溶液中；RNA在堿性溶液中發(fā)生，所以RNA應該存放在酸性溶液中。9、如果一種DNA溶液的A260A280<1.6,那么這種DNA樣品嚴重受到的污染。三、判斷題（每題1分，共10分）1、原核細胞和真核細胞的差別之一是前者無染色體結構，后者有染色體結構。（）2、基因組是指某一種生物所具有的全部基因的總稱。（）3、真核生物基因的大小通常是外顯子的數(shù)目和長度決定的。（）TOC\o"1-5"\h\z4、在所有的真核生物中，內(nèi)含子的長度和序列是高度保守的。（ ）5、酵母的基因普遍要比人的基因小，因此，酵母基因組編碼的蛋白質普遍要比人基因組編碼的蛋白質要小。（）6、在自由的四種核苷酸混合溶液中，任何堿基之間都可以形成氫鍵而發(fā)生配對。（ ）7、大幅度增加或減少溶液的pH都會導致一種雙鏈DNA的Tm下降。（ ）8、富含GC的DNA雙螺旋比富含AT的DNA雙螺旋穩(wěn)定的主要原因是GC堿基對比AT堿基對多一個氫鍵。（）9、超螺旋DNA的能量狀態(tài)總是高于相同序列的松弛型DNA。（ ）10、用氯化銫梯度超離心純化質粒DNA時，蛋白質在離心管的最上部，RNA懸浮在中間，而DNA沉在底部。（ ）四、單項選擇題（每題2分，共20分）1、有關蛋白質組不正確的敘述是（ ）A、翻譯后加工可導致同一個翻譯產(chǎn)物形成幾種不同的蛋白質B、蛋白質之間的相互作用可形成組織特異性蛋白質復合物C、環(huán)境因素對一個細胞的蛋白質組無影響D、一個病態(tài)細胞的蛋白質組可能與一個健康細胞的蛋白質組有所不同2、DNA在細胞核內(nèi)被包裝成30nm的染色質纖維。在試管里加入某種物質可以人為破壞TOC\o"1-5"\h\z這種結構（包括10nm染色質纖維），你認為這種物質是（ ）A、NaCl B、輔酶 C、核糖核酸酶 D、ATP3、序列特異性DNA結合蛋白與DNA結合的主要作用力是（ ）A、離子鍵 B、氫鍵 C、疏水作用 D、范德華力4、基因組中含有的轉座子最多的生物是（）A、細菌 B、噬菌體 C、酵母 D、玉米5、導致DNA雙螺旋具有大溝和小溝的原因是（ ）A、AT堿基對與GC堿基對的外形不同B、嘌呤堿基大，形成大溝，而嘧啶堿基小，形成小溝C、DNA結合蛋白將DNA扭曲成特定的形狀D、兩條鏈上的磷酸核糖骨架不是完全相對稱的TOC\o"1-5"\h\z6、噬菌體基因組DNA上的堿基發(fā)生糖基化和甲基化修飾的主要功能是（ ）A、促進基因組DNA整合到宿主基因組上 8、保護病毒DNA受到限制性酶的水解C、有利于核酸正確的排列 D、穩(wěn)定DNA，防止突變7、雙螺旋DNA具有的典型特征包括（ ）4沿著一條鏈是大溝，另外一條鏈是小溝 B、堿基對的排列與螺旋軸平行C、嘌呤堿基和嘧啶堿基的數(shù)目相同 D、螺旋的方向總是右手8、在許多不同物種中，具有高度保守的序列一般是（ ）A、假基因 B、特定的間隔序列C、不重要的蛋白質的基因 D、非常重要的蛋白質的基因9、以下有關染色質的敘述不正確的是（ ）A、原核生物無染色質結構，真核生物才有染色質結構8、染色質由DNA、RNA、組蛋白和非組蛋白構成0、染色質的基本結構單位是核小體D、組蛋白是一種序列特異性DNA結合蛋白10、關于一種真核生物的基因組的最佳定義是（ ）A、這種生物所有的編碼蛋白質的基因B、這種生物細胞核所有的DNAC、這種生物所有的遺傳物質D、這種生物的單倍體細胞所具有的所有染色體五、問答題（每題10分，共40分）1、如果有人在大腸桿菌細胞里發(fā)現(xiàn)一種新的蛋白質，它既含有跨膜的結構域，又含有與DNA結合的結構域，下面顯示的是這種蛋白質的部分氨基酸序列：...Ala-Leu-Phe-Ala-Gly-Ile-Val-Glu-Asn-Ser-Thr-Ala-Asp-Trp-His-Arg-Lys-His-Arg...（1）你認為哪一段氨基酸序列最有可能發(fā)現(xiàn)在跨膜的結構域？為什么？（2）如果進一步的實驗證明這種蛋白質并不是一種跨膜蛋白，而是位于細胞質。那么，你認為（1）中所指的氨基酸序列位于蛋白質三維結構的什么部分？（3）指出這種蛋白質分子中最有可能與DNA結合、發(fā)生相互作用的氨基酸序列？為什么？（4）你認為這些氨基酸更可能與堿基還是磷酸核糖骨架相互作用？（5）何種次級鍵是蛋白質與DNA之間作用最強的化學鍵？2、大腸桿菌DNA的GC含量是0.532（摩爾分數(shù)為（1）計算大腸桿菌DNA在0.05mol/LNaCl溶液中的Tm(2)你認為DNA退火溫度是大于、等于還是小于Tm?為什么？(3)嗜熱菌能夠生存在高達100℃的環(huán)境，你認為這一類細菌可以使用哪些手段維持其DNA在高溫下仍然處于雙螺旋狀態(tài)。(4)某些生物喜歡生活在熱水之中！例如，某些細菌適宜生活在近乎沸騰的熱泉中，如果將它們放在正常的溫度下(37℃左右)，反而不利于它們的生存。為什么37℃對于適宜生活在95℃下的生物體內(nèi)的蛋白質的功能是有害的？3、(1)有人在純化質粒DNA的時候，由于某種原因將部分純化的DNA在室溫下放在水里面近一個月的時間。等他想到這件事的時候，他可以接著繼續(xù)純化還是需要從頭來重新純化？為什么？如果他純化的是RNA，又該如何處理？(2)冰凍的乙醇經(jīng)常被用來沉淀DNA。乙醇溫度的重要性何在？它對短的DNA還是長的DNA更加重要？為什么？4、(1)“生命需要的必需基因的最低數(shù)目究竟有多少”一直是科學家感興趣的問題。迄今為止，最小的生物的基因組來自寄生的支原體，其大小為5x105bp。試估計這種生物最多需要多少個編碼蛋白質的基因。這些蛋白質基因的功能會是什么？如何能夠更精確的確定所需要的必需基因的數(shù)目？(2)全基因組序列分析已經(jīng)導致像大腸桿菌這樣的細菌幾乎所有的蛋白質基因得以確定。然而，如果要用類似的方法想毫不含糊的確定大多數(shù)真核生物基因組編碼蛋白質的基因，則非常困難。給出一個原因解釋以上現(xiàn)象。習題二DNA的復制、重組、損傷、修復以及突變一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、Okazakifragment2、semiconservativereplication3、NER4、nonsensemutation5、suppressormutation二、填空題（每空1分，共15分）1、體內(nèi)DNA復制一般以為引物，復制的方向總是，催化引物合成的酶稱為。而體外復制DNA通常用人工合成的為引物。2、DNA甲基化修飾的甲基供體是。原核細胞DNA上被修飾的堿基一般是—，真核細胞的DNA被修飾的堿基通常位于內(nèi)的__。3、大腸桿菌染色體DNA復制的起始區(qū)稱為，酵母染色體DNA復制的起始區(qū)稱為 ，兩者均富含 堿基對。4、大腸桿菌DNA連接酶使用 作為能源，病毒和真核細胞的DNA鏈接酶則使用 作為能源。用于基因工程的DNA連接酶一般來自。5、參與大腸桿菌染色體DNA復制的主要聚合酶是該酶在復制體上組裝成不對稱的二聚體，分別負責前導鏈和后隨鏈的合成。三、判斷題（每題1分，共10分）TOC\o"1-5"\h\z1、岡崎片段只由DNA組成。（ ）2、端粒酶帶有自己的DNA模板。（ ）3、細胞內(nèi)的DNA復制既需要DNA聚合酶，也需要RNA聚合酶。（ ）4、同源重組和位點特異性重組都形成Holliday中間體結構。（ ）5、如果HIV是一種DNA病毒，那么治療的難度將大大降低。（ ）6、轉座重組既可以導致基因的失活，也可以導致基因的激活。（）7、癌癥一般發(fā)生在人年邁的時候，其主要原因是隨著年紀的增大，人體內(nèi)的抑癌基因逐步失活。（）8、在一個基因的編碼區(qū)內(nèi)發(fā)生的核苷酸的插入或缺失總是導致移碼突變。（）9、一個正在進行雙向復制的真核細胞的DNA分子，當兩個相鄰的復制叉相遇的時候，一個復制叉的前導鏈總是跟另外一個復制叉的后隨鏈相遇。（）10、DNA損傷的修復機制完全依賴于每一個DNA具有兩個拷貝，每一個拷貝分別屬于同源染色體中的一個。（）四、單項選擇題（每題2分，共20分）TOC\o"1-5"\h\z1、原核生物DNA復制不需要（ ）A、DNA聚合酶工 B、DNA解鏈酶C、DNA連接酶 D、端粒酶2、大腸桿菌染色體DNA復制所需要的DNA聚合酶有（ ）A、DNA聚合酶工 B、DNA聚合酶口C、DNA聚合酶m D、DNA聚合酶工和印3、DNA連接酶需要被連接的兩個DNA片段分別具有（ ）A、3'-OH和5'-P B、5'-OH和3'-PC、3'-OH和5'-OH D、5'-P和3'-P4、端粒酶是一種（）4依賴于DNA的DNA聚合酶 8、依賴于DNA的RNA聚合酶0、依賴于RNA的DNA聚合酶 口、依賴于RNA的RNA聚合酶5、假定一個轉座子插入到某一個基因的可讀框內(nèi)，并產(chǎn)生11bp的靶點重復，當轉座子離開以后，留下重復序列，那么，這最終將導致（）A、轉換 B、顛換 C、移碼突變 D、易位6、將兩段寡脫氧核苷酸片段5'-ACCACGTAACGGA-3'和5'-GTTAC-3'與DNA聚合酶一起加到含有dATP、dGTP、dCTP和dTTP的反應混合物之中，預測反應的終產(chǎn)物被參入的各堿基的比例是（）A、2C：1T B、1G：1TC、3G：2TD、3G：3T：2C7、如果一個具有放射性的DNA分子在沒有放射性標記的dNTP溶液里進行兩輪復制，那TOC\o"1-5"\h\z么得到的四個子代DNA分子的放射性分布是（ ）A、兩股各有一半帶有放射性 B、所有都含有放射性C、兩個沒有放射性 D、有一個DNA分子的兩條鏈具有放射性8、細胞內(nèi)的突變主要發(fā)生在（ ）A、DNA復制 B、DNA修復 C、轉錄D、翻譯9、堿基類似物導致DNA發(fā)生突變的主要原因是（ ）4插入到堿基之間，使DNA發(fā)生斷裂 8、使C變成TC、能夠與不同的堿基配對 D、促進DNA的脫嘌呤10、人類基因組比大腸桿菌基因組大700倍左右，然而，人類基因組復制的時間僅比大腸桿菌基因組復制長6~8倍。這是因為（ ）A、組蛋白的存在提高了人染色體DNA的復制速率B、人類基因組的GC含量低，兩條鏈更容易解鏈C、人基因組的許多序列在復制中直接跳過去，因為只有3%~5%的序列編碼蛋白質D、人染色體DNA上具有多個復制起始區(qū)，大腸桿菌只有一個1、（1）在使用雙脫氧法測定DNA一級結構的時候，如果在反應系統(tǒng)中添加SSB，可以提高DNA的得率為什么？現(xiàn)在測序使用的酶一般都是耐熱的DNA聚合酶使用這樣的DNA聚合酶有什么好處？（2）大腸桿菌細胞內(nèi)的SSB的主要功能是什么？你如何確定它是不是DNA復制的一種必需成分？2、（1）有人將狗體內(nèi)的己糖激酶與狼體內(nèi)的己糖激酶的氨基酸序列進行了比對，結果發(fā)現(xiàn)兩者完全相同?；诖?，你能否認為這兩種生物體內(nèi)的己糖激酶基因從來沒有突變過嗎？為什么？（2）有人從使用羥胺誘發(fā)的突變中篩選到一種拷貝數(shù)極高的質粒，其在大腸桿菌內(nèi)的拷貝數(shù)遠高于野生型的質粒，究其原因是DNA復制頻率提高了。經(jīng)過序列分析發(fā)現(xiàn)，突變體的質粒在復制起始區(qū)周圍的一個啟動子序列發(fā)生了突變。試提出一種機制解釋質?？截悢?shù)增加的現(xiàn)象，同時設計一個實驗來證明你的解釋。3、假定你一直在尋找一個具有更高進行性的DNA聚合酶，用于PCR研究。你從幾種不同來源的細菌培養(yǎng)物中分別得到了幾種DNA聚合酶的粗品，現(xiàn)在要使用長達幾千堿基的單鏈DNA作為模板，測定酶活性。（1）除了在測活系統(tǒng)中添加DNA模板和DNA聚合酶抽提物以外，還應該加入哪些成分？（2）如果你在粗抽提物中發(fā)現(xiàn)了一種具高進行性的DNA聚合酶，需要進一步純化它。在用不同的引物一模板測定活性以后，你驚奇地發(fā)現(xiàn)，如果以短DNA引物/單鏈環(huán)狀DNA模板測定活性，進行性不高。但是，如果你以線形的模板啟動反應，然后迅速地環(huán)化模板，則發(fā)現(xiàn)延伸的進行性非常高。對此現(xiàn)象請給予合理的解釋。如果你使用上面的環(huán)狀模板、短的DNA引物測定活性，則發(fā)現(xiàn)在加入無DNA聚合酶的細胞粗抽提物以后，純化好的DNA聚合酶能像使用線形模板一樣，很好地使用環(huán)狀模板。對此你又如何解釋？如何驗證你的解釋？（3）你本以為在測活系統(tǒng)中加入大腸桿菌的SSB可能會刺激DNA的合成，但結果不然。然而，如果你加的是T4噬菌體的SSB，則能刺激DNA的合成。另外，在有ATP的情況下加入RecA，結果也能刺激DNA的合成，但如果使用不能水解的ATP類似物代替ATP，則對DNA的合成無刺激。對此，試提出合理的解釋。4、（1）DNA復制起始區(qū)一般具有哪些特征？（2）細菌染色體只有一個復制起始區(qū)，而真核細胞染色體具有多個復制起始區(qū)，為什么？（3）使用何種方法可以得到一個染色體DNA上的復制起始區(qū)序列？習題三DNA轉錄、逆轉錄及其轉錄后加工一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、Pribnowbox2、cis-actingelement3、enhancer4、corepromoter5、mRNAediting二、填空題（每空1分，共15分）1、一個基因的有意義鏈是指 ，它的序列與mRNA。2、大腸桿菌的RNA聚合酶由 和—因子組成，參與轉錄起始的是而參TOC\o"1-5"\h\z與延伸的是 。3、真核細胞核mRNA前體后加工最重要的三種方式是_____、 和。4、snRNA即是它的主要功能是參與 ；snoRNA即是它的主要功能是參與 后加工。5、使用 方法可以確定原核細胞的啟動子序列，使用 方法可以確定真核細胞基因轉錄的起始點。三、判斷題（每題1分，共10分）1、原核生物與真核生物的RNA聚合酶在結構上具有高度的同源性，構成原核生物RNA聚合酶的每一個亞基在真核細胞內(nèi)都有同源的亞基。（）2、內(nèi)含子在剪接反應中被切除，所以一種蛋白質的基因如果在內(nèi)含子內(nèi)發(fā)生突變，一般不會影響到這種蛋白質的功能。（）3、與蛋白質酶不同的是，核酶的活性不受溫度的影響。（ ）

TOC\o"1-5"\h\z4、RNA病毒因為無DNA基因組，所以其生活史省去了從DNA到RNA的過程。（ ）5、真核細胞mRNA的加帽反應需要GTP。（ ）6、mRNA的剪接總是產(chǎn)生套索結構。（ ）7、AAUAAA是真核細胞mRNA的主要加尾信號該序列在加尾反應完成以后被切除。。 ）8、多數(shù)真核生物mRNA的降解開始于“脫帽”，隨后是“去尾”。（ ）9、mRNA前體上與5'端最近的內(nèi)含子最有可能先被剪接掉。（ ）10、既然內(nèi)含子大都是遺傳“垃圾”，所以在RNA剪接的時候不必進行精確的切除。（ ）四、單項選擇題（每題2分，共20分）1、tRNA基因的轉錄不需要的轉錄因子是（ ）A、TFOA B、TFOB C、TFOC D、TFOD2、在正常的生長條件下某一細菌基因的啟動子的普里布諾框由TCGACT突變成TATACT,由此而引起該基因轉錄水平發(fā)生變化，以下幾項描述中正確的是（）A、該基因的轉錄增加 B、該基因的轉錄降低C、該基因不能轉錄 D、該基因的轉錄沒有變化3、如果你想設計一種新的抗菌藥物，其作用對象是原核細胞的RNA聚合酶，那么，你所TOC\o"1-5"\h\z設計的藥物作用的最佳靶點應該是（ ）A、a亞基 B、B亞基 C、3亞基 D、a因子4、以下不會出現(xiàn)在一個cDNA克隆中的序列是（ ）A、加尾信號 B、多腺苷酸尾巴 C、5’-非翻譯序列 D、TATA框5、DNA復制過程中合成RNA引物與細胞內(nèi)其他RNA的差別在于（ ）A、T代替U B、由DNA聚合酶催化C、C、只能以DNA-RNA雜交雙鏈形式存在D、合成的方向是3'-5’6、真核細胞的TATA框（）A、與-35區(qū)一道起作用 B、存在于所有編碼蛋白質基因的啟動子上CsWRNA聚合酶定位到啟動子上 D、存在于-10區(qū)TOC\o"1-5"\h\z7、原核細胞內(nèi)受RNA聚合酶全酶濃度的提高而加速的轉錄步驟是（ ）A、封閉的轉錄起始復合物的形成 B、啟動子清空C、轉錄延伸 D、轉錄終止8、某些發(fā)生在RNA聚合酶B亞基上的突變能夠阻止依賴于P因子的轉錄終止，你認為下列最有可能在體外恢復依賴于P因子的轉錄終止的條件是（ ）A、降低轉錄體系中的ATP濃度 B、降低轉錄體系中的GTP、CTP和UTP的濃度C、使用強啟動子啟動轉錄 D、在轉錄系統(tǒng)中加入核糖體9、RNA聚合酶和DNA聚合酶所具有的共同性質是（ ）A、都需要模板和引物 B、都具有自我校對的活性C、都需要Mg2+ D、都能夠導致DNA發(fā)生解鏈10、以下屬于轉錄后基因表達調(diào)控的機制是（ ）A、DNA分子上的C發(fā)生甲基化修飾 B、轉錄因子與啟動子結合C、RNA分子上的C脫氨基轉變成U D、基因擴增五、問答題（每題10分，共40分）1、（1）如果將由RNA聚合酶口催化轉錄的一個蛋白質的基因讓RNA聚合酶工或RNA聚合酶出來轉錄，那么，這種蛋白質的mRNA前體還能經(jīng)歷哪些后加工反應？為什么？（2）細菌體內(nèi)的轉錄和翻譯在時空上是偶聯(lián)的，但真核生物并沒有這樣的偶聯(lián)關系。然而，真核細胞內(nèi)卻有其他的過程與轉錄偶聯(lián)，你認為它們是哪些過程？產(chǎn)生這種偶聯(lián)機制的直接原因是什么？2、假定枯草桿菌基因組一共具有7300個基因，其中5125個基因在營養(yǎng)型細胞內(nèi)表達，而在芽泡形成中只有3532個基因表達(假設枯草桿菌的全基因組序列和所有基因的編碼序列均已經(jīng)被確定I(1X吏用何種技術可以快速確定這5125個在營養(yǎng)型細胞表達的基因和3532個在芽泡形成中表達的基因？(2)將營養(yǎng)型細胞內(nèi)表達的基因數(shù)和在芽泡形成中表達的基因數(shù)相加并非是7300,為什么？(3)一種枯草桿菌突變體已失去了產(chǎn)生芽泡的能力，只能以營養(yǎng)型細胞生長，你認為哪些基因的突變能產(chǎn)生這種表型？3、下圖顯示的是一種細菌的幾個相鄰的基因結構圖譜?；虻拿Q用帶有數(shù)字的ORF表示，每一個ORF似乎是一個基因，但還沒有得到專門的鑒定。某些ORF后來被證明參與Arg的合成，因此這些基因也用arg來表示，圖中彎曲的箭頭為轉錄起始點。圖中單純的數(shù)字是基因之間的核甘酸數(shù)目。OUFtiORF7ORFSORFS口的OKF2OHF3QAF4(1)已有證據(jù)表明一種調(diào)節(jié)蛋白的結合位點與argF的啟動子序列重疊。部分證據(jù)來自DNA酶工足跡實驗，受這種調(diào)節(jié)蛋白保護的區(qū)域有29nt，從-10區(qū)的中間延伸到-35區(qū)的上游。試畫出導致上升結論的足跡實驗的結果，需要同時給出對照實驗。(2)從(1)給出的信息、來看，你認為調(diào)節(jié)蛋白最有可能是激活蛋白還是阻遏蛋白?為什么?(3)下圖顯示的是靠近0印=5起點區(qū)域的一段RNA序列，這種結構有什么意義？它來自哪一個轉錄物?GCCdtiUAGCAUAGGG+CUUUVGCUCUUUUV(4)在細菌的培養(yǎng)基中加入Arg，能夠提高ORF4的轉錄。這意味著ORF4編碼的蛋白質的功能是什么？ORF4有可能參與合成Arg嗎？為什么？4、(1)有人得到一種哺乳動物的細胞系：它的一個基因的啟動子被細菌的強啟動子序列(-35區(qū)和-10區(qū)一致序列)取代，因此，可以被細菌的RNA聚合酶有效識別。然而，當他將帶有原核生物轉錄所有必需成分的質粒(獨立的實驗證明，這些質粒能夠高表達出有功能的蛋白質)導入到上述細胞系的時候，發(fā)現(xiàn)這個受原核生物啟動子驅動的基因表達的效率很低，最后只產(chǎn)生很少的mRNA。對此現(xiàn)象試提出兩種可能的機制給予解釋。(2)在真核細胞內(nèi)，RNA聚合酶口發(fā)生磷酸化修飾是基因表達十分重要和關鍵的一步。試回答:①催化磷酸化的激酶是什么？②磷酸化的具體對象是什么？③磷酸化的主要功能是什么？習題四翻譯及其后加工一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、Shine-Dalgarnosequence2、wobblerule3、signalhypothesis4、N-endrule5、translationalframeshift二、填空題（每空1分，共15分）1、翻譯的時候肽鏈延伸的方向總是 ，而閱讀mRNA模板的方向總是2、核糖體上與tRNA結合的部位有A、P和E，其中與空載tRNA結合的是—，與起始tRNA結合的部位是__。TOC\o"1-5"\h\z3、翻譯的起始密碼子通常是 ，有時也可以是 。然而，它們都編碼 。終止密碼子則有 、 和 。4、原核生物和真核生物在翻譯的時候第一個被參入的氨基酸分別是 和 。5、原核生物在蛋白質生物合成的時候，參與起始階段的起始因子有3種，其中與起始tRNA結合的是；參與延伸階段的延伸因子有3種，其中與氨酰-tRNA結合的是；終止釋放因子有3種，其中能夠水解GTP的是。三、判斷題（每題1分，共10分）1、通過封閉多肽離開通道起作用的抗生素一定結合在核糖體的小亞基上。（）2、抑制轉肽酶活性的抗生素通常與核糖體的大亞基結合。（ ）

TOC\o"1-5"\h\z3、根據(jù)擺動法則，tRNA上的反密碼子在第三個位置的核苷酸處于搖擺的位置。（ ）4、如果將細胞質中的mRNA導入到線粒體基質內(nèi)翻譯，通常得不到有功能的蛋白質產(chǎn)物。（ ）5、參與糖酵解和糖異生途徑的酶都沒有信號肽。（ ）6、甲硫氨酸的密碼子只有一個（AUG），但起始密碼子可以是AUG，也可以是GUG或UUG。由于GUG和UUG編碼的是其他氨基酸，故如果以它們作為起始密碼子的話，第一個參入的氨基酸將不再是Met。（）7、密碼子第一位堿基發(fā)生的突變要比第三位發(fā)生的突變的危害要大得多。（ ）8、催化大腸桿菌其實甲硫氨酰-tRNA合成的氨酰-tRNA合成酶識別的氨基酸是甲酰甲硫氨酸。（ ）9、核糖體大亞基的主要功能是催化肽鍵的形成，而小亞基主要是結合mRNA和tRNA。（ ）10、與tRNA相連的氨基酸本身在決定何種氨基酸參入到正在延伸的肽鏈上不起任何作用。（ ）四、單項選擇題（每題2分，共20分）1、不是通過模擬tRNA的結構與核糖體結合的蛋白質是（ ）A、IF2 B、EF-GC、RF2 D、eRF22、一種新發(fā)現(xiàn)的抗生素能夠抑制細菌的蛋白質合成。如果將這種抗生素加到以AUGUUUUUUUAG為模板的體外翻譯系統(tǒng)之中，則只形成一種二肽產(chǎn)物fMet-Phe。根據(jù)以上信息，你認為該抗生素抑制（）A、翻譯的起始 B、氨酰-tRNA進入A部位C、C、核糖體移位D、翻譯的終止3、在中度脅迫條件下，細胞內(nèi)的蛋白質發(fā)生變性或去折疊。有助于細胞度過脅迫條件而提高表達或開始表達的基因是（）A、編碼糖酵解途徑的酶 B、編碼分子伴侶C、編碼RNA聚合酶口 D、編碼核糖體亞基4、大腸桿菌16SrRNA的3'端序歹^是5'-CACCUCCUUAOH-3'，那陷mRNA分子上的SD序列是（）A、UCCUU B、UCCUCC C、GGAAUD、AGGAGG5、嘌呤霉素通過分子模擬抑制翻譯，被它模擬的分子是（ ）A、肽酰-tRNA B、氨酰-tRNA C、肽酰轉移酶 D、終止釋放因子6、假定一個編碼蛋白質（由200個氨基酸組成）的基因由2個外顯子和1個內(nèi)含子組成。以下幾種突變中最有可能阻止這種蛋白質不能合成的是（）A、第2個外顯子內(nèi)發(fā)生一個插入突變 B、基因的內(nèi)含子區(qū)域缺失5個核苷酸C、內(nèi)含子內(nèi)發(fā)生一個堿基置換 D、第2個外顯子內(nèi)發(fā)生一個無義突變7、以下有關翻譯進位的敘述正確的是（ ）A、EF-Tu在結合氨酰-tRNA的時候水解GTPB、在EF-Tu釋放以后，氨酰-tRNA必須旋轉，肽鍵才能形成C、aa-tRNA-EF-Tu在與EF-Ts結合的時候水解GTPD、EF-Tu能夠與EF-G同時與核糖體結合8、在核糖體上，mRNA的結合部位和轉肽酶的活性中心分別位于（ ）A、兩個亞基之間；大亞基B、兩個亞基之間；小亞基C、大亞基；小亞基 D、小亞基；大亞基9、在一個真核細胞內(nèi)，由一種特定的mRNA翻譯出來的蛋白質的量部分取決于（ ）

A、A、DNA甲基化的程度B、mRNA降解的速率C、某些轉錄因子的存在 D、mRNA含有的內(nèi)含子的數(shù)目10、一種轉基因突變細菌有望用于人體疫苗，為了獲得FDA的批準，突變的性質需要預先知道，而最重要的是回復突變成野生型的可能性更需要明確。你認為獲得FDA批準可能性最低的突變是（）A、點突變 8、插入突變 C、缺失突變 口、染色體重排五、問答題（每題10分，共40分）1、（1）原核生物與真核生物在識別起始密碼子的機制上有何不同？這種差別與原核生物的mRNA多數(shù)是多順反子及真核生物的mRNA絕大多數(shù)是單順反子有無某種關系？為什么？（2）在大腸桿菌細胞里表達來自嗜熱菌的基因現(xiàn)在已經(jīng)是十分普遍的實驗技術。然而，有時表達的效果不錯，有時表達得則不理想。Ishida和Oshima在研究中發(fā)現(xiàn)，在大腸桿菌細胞里表達量極低的基因在緊靠RBS附近含有回文序列。如果將此序列去除，這些基因的表達量將大大提高。為什么這種回文序列在嗜熱菌體內(nèi)對基因表達不構成問題，但在大腸桿菌卻能降低基因翻譯的效率？（3）遺傳密碼的哪些性質有利于基因從一種生物向另外一種生物的轉移（通過基因工程或自然轉移）？哪些性質不利于基因從一種生物向另外一種生物的轉移？2、如果你分離到一個病毒的400nt的DNA片段，它能編碼至少兩種不同的蛋白質，一個長度是120個氨基酸殘基，另一個的長度為80個氨基酸殘基。（1）你認為這種現(xiàn)象普遍嗎？（2）試提出兩個模型解釋以上現(xiàn)象。（3）如果你測定這兩種蛋白質的氨基酸序列，發(fā)現(xiàn)它們無序列同源性，那么，你能排除哪一個模型？為什么？3、如果你在研究某一個細菌基因的表達，發(fā)現(xiàn)這個基因能正常地轉錄，但轉錄出來的mRNA不能正常地被啟動翻譯。（1）你認為哪些突變可以產(chǎn)生這樣的后果？（2）你如何進一步確定這種細菌究竟發(fā)生了何種突變？（3）如果你得到這種突變細菌的回復突變體，即一種新的突變讓這個基因恢復正常的翻譯起始，但新突變的位點與原來突變的位點不同，那么，相對于第一次突變，第二次突變會是什么？4、某些細菌的某些蛋白質基因（如大腸桿菌乳糖操縱子的阻遏蛋白LacI）以GUG而不是AUG作為起始密碼子，對此現(xiàn)象請回答以下問題：（1）在這些基因的翻譯產(chǎn)物中，第一個參入的氨基酸仍然是甲酰甲硫氨酸嗎？（2）為什么其基因內(nèi)部的AUG不能作為起始密碼子？（3）如果將此GUG突變成AUG，這些基因的翻譯效率會有何變化？（4）起始tRNA如何識別GUG？這種現(xiàn)象可以用擺動法則解釋嗎？習題五基因表達的調(diào)控一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、antisenseRNA2、operon3、house-keepinggene4、regulon5、riboswitch二、填空題（每空1分，共15分）TOC\o"1-5"\h\z1、原核生物基因表達的“默認”狀態(tài)是表達，因此基因表達調(diào)控的方式主要是 ，而真核生物基因表達的“默認”狀態(tài)是不表達，故其基因表達調(diào)控的方式主要是 。2、操縱子一般由 、 和 三種成分組成。3、參與基因表達調(diào)控的調(diào)節(jié)蛋白分為 和 兩種，操縱子上與調(diào)節(jié)蛋白結合的核苷酸序列通常稱為 ，在正調(diào)控中起作用的是 。4、大腸桿菌的乳糖操縱子表達受到 和 兩種機制的調(diào)節(jié)，而色氨酸操縱子受到 和 兩種機制的調(diào)控。5、乳糖操縱子的天然誘導物是 ，實驗室里常用 作為乳糖操縱子的安慰誘導物，以誘導B-半乳糖苷酶的產(chǎn)生。三、判斷題（每題1分，共10分）1、某些蛋白質不僅可以作為阻遏蛋白還可以作為激活蛋白參與基因表達的調(diào)控。（）TOC\o"1-5"\h\z2、轉錄因子都具有與DNA結合的模體結構。（ ）3、真核細胞核的三種RNA聚合酶負責的基因轉錄都受到增強子的調(diào)節(jié)。（ ）4、大腸桿菌乳糖操縱子和阿拉伯糖操縱子既受到負調(diào)控，也受到正調(diào)控。（ ）5、大腸桿菌和枯草桿菌在色氨酸弱化子的結構上非常相似，都需要前導序列中含有色氨酸的密碼子。（）TOC\o"1-5"\h\z6、調(diào)節(jié)基因一般都位于操縱子的附近，這種構造有利于調(diào)節(jié)基因對操縱子的控制。（ ）7、管家基因在細胞里始終表達，因此沒有也不需要對其表達進行調(diào)控。（ ）8、激活蛋白參與正調(diào)控，其濃度越高，激活基因表達的效果就越好。（ ）9、組蛋白的乙?；揎検强赡娴?，但組蛋白的甲基化是不可逆的。（）10、細菌中弱化子的作用方式是在翻譯水平來控制轉錄。（ ）四、單項選擇題（每題2分，共20分）1、如果將大腸桿菌乳糖操縱子的啟動子換成強啟動子，那么實現(xiàn)乳糖操縱子最高表達的條件將是（）A、高乳糖，低葡萄糖 B、高乳糖，高葡萄糖C、低乳糖，低葡萄糖 D、A和B2、有一種突變株大腸桿菌即使在有高濃度葡萄糖的時候，乳糖操縱子也呈現(xiàn)高水平的表達。此突變株最有可能（）A、乳糖操縱子的阻遏蛋白因突變而失去活性B、比野生型表達較少的cAMPC、CAP發(fā)生突變，導致其沒有cAMP也有活性D、催化cAMP合成的腺苷酸環(huán)化酶喪失活性3、以下是關于大腸桿菌乳糖操縱子敘述，其中正確的是（ ）A、乳糖是天然的誘導物，IPTG是安慰誘導物B、CAP-cAMP的結合使DNA彎曲C、CAP與DNA結合的結構域含有螺旋-環(huán)-螺旋模體D、其啟動子為強啟動子4、以下關于RNAi的敘述中，錯誤的是（ ）A、可特異性地導致mRNA的降解B、可特異性地抑制mRNA的翻譯C、只存在于真核生物 D、通常抑制特定mRNA的轉錄5、下圖顯示的是大腸桿菌色氨酸操縱子前導序列的大致結構：UGGUGGAV￡_四4 （ r, 1UUUUUUU 1:IFHH1 12 3 4以下可導致色氨酸操縱子表達提高的突變是（ ）A、將兩個UGG突變成GGGB、序列3發(fā)生的突變減弱其與序列4的配對，但不影響2與3之間的配對C、序列3發(fā)生的突變減弱其與序列2的配對，但不影響3與4之間的配對D、以上都不是6、如果一個突變導致大腸桿菌色氨酸操縱子前導序列內(nèi)的SD序列不起作用，那么，色氨酸操縱子的表達受到的影響將是（ ）A、在高Trp條件下的表達升高 B、在低Trp條件下的表達升高C、在高Trp條件下的表達下降 D、在低Trp條件下的表達下降7、如果使用定點突變的手段將大腸桿菌色氨酸操縱子前導肽的起始密碼子突變成UGA，那么色氨酸操縱子將（ ）A、不管細胞內(nèi)Trp水平的高低，總是被阻遏B、不管細胞內(nèi)Trp水平的高低，總是被表達C、在有Trp的時候才表達D、在沒有Trp的時候才表達8、大腸桿菌的CRP被認為直接與RNA聚合酶相互作用，而激活很多操縱子的表達。支持這種觀點的證據(jù)是（）A、發(fā)生在RNA聚合酶a亞基上的突變可阻止CRP的激活B、某些CRP突變體（crp-）呈顯性突變C、某些CRP結合位點與啟動子的-35區(qū)序列重疊D、CRP只有結合cAMP以后才有活性9、屬于表觀遺傳變化的是（ ）A、DNA甲基化 B、DNA缺失C、DNA突變D、DNA擴增10、選擇性剪接是真核生物基因表達的一種重要手段，以下各種選擇性剪接方式中不可能發(fā)生的是（）A、外顯子跳過 B、內(nèi)含子保留C、改變外顯子連接的順序 D、可變的5’-剪接位點五、問答題（每題10分，共40分）1、酵母細胞內(nèi)有兩種蛋白質一一蛋白A和蛋白B，它們都由管家基因編碼。然而，蛋白A的量始終高于蛋白B，對此試提出兩種可能的機制給予合理的解釋。2、一些被稱為抗誘導物（anti-inducer）的化合物能夠與阻遏蛋白（例如乳糖操縱子的阻遏蛋白）結合，抑制誘導物對特定基因表達的誘導。試就此抗誘導物的作用機制給予解釋。3、如果使用DNA芯片技術分別測定酵母菌在基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基上的基因表達情況,那么，哪些基因在基礎培養(yǎng)基上生長的酵母菌內(nèi)大量表達？哪些基因在兩種不同的培養(yǎng)基上生長的酵母菌體內(nèi)都表達？4、大腸桿菌的乳糖透過酶既能運輸乳糖,也能運輸乳糖酸(lactobionicacid)。但是,B-半乳糖苷酶水解乳糖酸的效率并不高。某些大腸桿菌突變體內(nèi)的B-半乳糖苷酶發(fā)生了突變，使其能夠更好地水解乳糖酸。這樣的突變體能夠生活在以乳糖酸為唯一碳源的培養(yǎng)基上。然而，如果培養(yǎng)基中沒有IPTG，突變體就不能生長。對此你如何解釋？你如何進一步驗證你的解釋？習題六基因工程以及其他現(xiàn)代分子生物學技術一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、genetherapy2、geneknock-out3、proteinengineering4、DNAchip5、geneknock-in二、填空題（每空1分，共15分）1、制備cDNA文庫需要的工具酶有、限制性酶和。2、限制性內(nèi)切酶一般分為___類，用于基因工程的屬于第二類，這一類在組成上一般為 ，識別的序列通常具有 特征，切點位于識別序列內(nèi)部。TOC\o"1-5"\h\z3、Southern、Northern和Western印跡分別被用來檢測DNA、RNA和，它們所使用的探針分別是 、核酸和 。4、 是應用于蛋白質工程中的最主要的手段。5、實時PCR主要用于 。6、在分子克隆中，能催化黏端又能催化平端DNA連接的DNA連接酶是7、雙向電泳的第一相是進行 ，第二相是進行 。8、小的核