常壓室溫等離子體誘變選育高產(chǎn)脂肪酶解脂耶氏酵母

常壓室溫等離子體誘變選育高產(chǎn)脂肪酶解脂耶氏酵母本期為您推薦常熟理工學(xué)院生物與食品工程學(xué)院齊斌研究員研究團(tuán)隊(duì)發(fā)表在《食品與機(jī)械》上的一篇文章：常壓室溫等離子體誘變選育高產(chǎn)脂肪酶解脂耶氏酵母。文章摘要內(nèi)容如下：維生素A是人體必需的微量營(yíng)養(yǎng)素之一，其性質(zhì)非常不穩(wěn)定，可以合成性質(zhì)更為穩(wěn)定的維生素A棕櫚酸酯。脂肪酶是一種可以催化三酰甘油酯水解釋放脂肪酸、甘油單酯、甘油二酯和甘油，并催化合成各種酯類的酶，由于具有高的專一性和選擇性等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于多種工業(yè)生產(chǎn)及商業(yè)應(yīng)用中。野生菌株某些特性無(wú)法滿足越來(lái)越高的工業(yè)需求，因此需要對(duì)菌株進(jìn)行誘變育種，目前尚未見(jiàn)通過(guò)ARTP篩選高產(chǎn)脂肪酶的解脂耶氏酵母的報(bào)道。本研究采用常壓室溫等離子體(Atmosphericroomtemperatureplasma,ARTP)對(duì)產(chǎn)脂肪酶的解脂耶氏酵母菌株YL］進(jìn)行誘變;通過(guò)三丁酸甘油酯平板法、-NPP法以及酸堿滴定法等篩選得到高產(chǎn)脂肪酶的目標(biāo)菌株C4,并研究其遺傳穩(wěn)定性。結(jié)果表明，解脂耶氏酵母菌株YL］的最佳誘變時(shí)間為60s，菌株致死率達(dá)97.45%;突變株C4的脂肪酶酶活為13.4U/mL,較出發(fā)菌株提高了82.6%,多代培養(yǎng)后遺傳穩(wěn)定;與出發(fā)菌株相比，突變株脂肪酶可使維生素A棕櫚酸酯的合成轉(zhuǎn)化率提高36.9%。常壓室溫等離子體誘變是一種新興的誘變技術(shù)，與傳統(tǒng)的誘變方法如紫外誘變、化學(xué)誘變相比，ARTP可以在室溫常壓下高效誘導(dǎo)DNA雙鏈斷裂，引發(fā)細(xì)胞SOS修復(fù)機(jī)制并得到大量高突變體樣本，其操作安全、方便，因此已成為微生物誘變育種領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。本試驗(yàn)以一株解脂耶氏酵母菌株YL］為研究對(duì)象,

通過(guò)ARTP誘變，對(duì)其進(jìn)行改造，以期篩選獲得高產(chǎn)脂肪酶且遺傳性能穩(wěn)定的目標(biāo)解脂耶氏酵母菌株，并將其應(yīng)用于維生素A棕櫚酸酯的合成，以提高維生素A棕櫚酸酯的轉(zhuǎn)化率，為維生素A棕櫚酸酯的工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。文章精彩內(nèi)容如下：圖2誘變處理時(shí)間對(duì)菌株YL］致死率的影響i.firslj^^rra.6e.d￡i??:ac<r=:v^':-yE■:-t=:-r=-pl二tffE一c°8.'-r-slj^^rra.6e.d￡i??:ac<r=:v^':-yE■:-t=:-r=-pl二tffE一c°8.'-r-.2,0.Ba61l0.0B要養(yǎng)養(yǎng)創(chuàng)母MG富看養(yǎng)蓼h込H-垃童直Em錯(cuò)燔劇能"関曙宵帰齊筋"兔叨廉筋肚繆陽(yáng)“序廠H篦穢護(hù)說(shuō)莎M.藥褒〔負(fù)窘去爰養(yǎng)老蟲(chóng)專第電^9H著竄顯.F:----Itf.lfcl餐齡聲曼爲(wèi)芝4芻摻匿菱冢逐昜密參務(wù)爰銹落勢(shì)1饋翼0暫200.0,翔I-::負(fù)罷暑k-:.負(fù)％n:■題.洱專裁F-=:苗舊r-r-1E■匱幕置篋蔓專霞亠蜃隊(duì)^G」養(yǎng)寥S番爲(wèi)諮舅妾迄髪龜2UE護(hù)$食茲辛舅r:a養(yǎng)詈爰餐t?:]r:-J實(shí)r::JE-:ll:-]t:1r::J..F=J”Ml:::JL:.ll:J如Qj岀“^曆窗銹屬曆筍踐謬&證專-聲萇3“汨用豺勿訪“心Q“參篋移2.f^^"tlJ57?wi?'--3^:.:J.--:-:3?!K7^p^5^J5^J55?9pz5K.X^.--^K.Z55e1-^■一沱|~:|.|:<|..￡:莫-1^.KBdbaaa竇迄套食囂驛舊豎總竇Bk移簷絲谿參邕蕃專洗超蜜綾簷遂曇嚴(yán)二"須詼篦"蜒鎧須踴曹證毎唸彩怨蜩魔筋刃產(chǎn)黛錢斷謬發(fā)：襲蠶毬.爲(wèi)屢翌弱專矗17.瓏.毘"*.~-;:-.:.”::!.”怨藥群:~"”.~.”鎔::!,.尖產(chǎn)fill駢焉JJH:::=?:?:■■:..^--.-v:-:-..--.--.::.:.::>-::-!■::■■:■■■?:■■:=宀0H蔓^l^l^l^_l^IMl^wltgll^IKMlraIF?1IF:3ll:-:-llr:ll^I