流式細(xì)胞術(shù)在白血病和淋巴瘤中的應(yīng)用

關(guān)于流式細(xì)胞術(shù)在白血病和淋巴瘤中的應(yīng)用免疫分型的作用區(qū)分淋系、髓系白血病區(qū)分淋系白血病中的T、B-ALL鑒定混合細(xì)胞性白血病的類型：T-M、B-M、T-B、T-B-M于治療過程中監(jiān)測MRD，評價(jià)療效提示某些遺傳學(xué)異常：CD56+APL---t（11；17）？CD19+AML---t（8；21）（q22；q21）？提示預(yù)后：CD7、CD11b、CD56等陽性的AML患者預(yù)后不良CD15陽性的AML患者CR率高

第2頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型的原理正常造血細(xì)胞白血病細(xì)胞

抗原表達(dá)遵循系列保守性出現(xiàn)抗原跨系表達(dá)

髓系:CD33+,T系:CD7+髓系:CD33+CD7+

抗原表達(dá)有一定的時(shí)序性出現(xiàn)抗原時(shí)序混亂表達(dá)

原始細(xì)胞:CD34+CD11B- 原始細(xì)胞:CD34+CD11B+

各階段細(xì)胞按一定的比例分布出現(xiàn)分化阻滯

原幼細(xì)胞<5%原幼細(xì)胞>20%第3頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型需要掌握什么理論知識(shí)？正常造血細(xì)胞的抗原表達(dá)規(guī)律不同系列的細(xì)胞表達(dá)的抗原？同一系列不同階段的細(xì)胞表達(dá)的抗原？每種抗原的表達(dá)強(qiáng)度？第4頁,共50頁，2024年2月25日，星期天正常B系細(xì)胞分化圖

源于王建中等編著的《臨床流式細(xì)胞分析》第5頁,共50頁，2024年2月25日，星期天正常T系細(xì)胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細(xì)胞分析》第6頁,共50頁，2024年2月25日，星期天正常粒細(xì)胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細(xì)胞分析》第7頁,共50頁，2024年2月25日，星期天正常單核細(xì)胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細(xì)胞分析》第8頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型中的重要抗原CD45正常成人骨髓標(biāo)本成熟粒細(xì)胞：約占40-60%，表達(dá)CD11b、CD13、CD33、CD15、CD16、CD10、CD64,不表達(dá)CD34、HLA-DR、CD14、CD117有核紅細(xì)胞：<50%,表達(dá)GPA成熟單核細(xì)胞：約占2-8%，表達(dá)CD11b、CD64、CD14、HLA-DR，不表達(dá)CD34、CD117成熟淋巴細(xì)胞：約占20-40%T細(xì)胞：表達(dá)CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7,不表達(dá)CD10、CD34、TDT等

B細(xì)胞：表達(dá)CD19、CD20、CD22，不表達(dá)CD10、CD34、TDT等NK細(xì)胞：CD3-(CD16+CD56)+正常幼稚B細(xì)胞：<5.0%,表達(dá)CD10、CD19、CD22、弱表達(dá)CD20，少量CD10stCD34+TDT+幼稚髓系細(xì)胞：〈5.0％第9頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型常用的抗體AMLCD34、CD117、CD33、CD13、HLA-DR、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO懷疑M6加做CD71、GPA懷疑M7加做CD61、CD41B-ALLCD34、CD10、CD19、CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79aT-ALLCD34、CD10、CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7、HLA-DR、CD1a、TDT、cCD3NK細(xì)胞CD16、CD56、CD57漿細(xì)胞CD38、CD138、cκ、cλ、CD19、CD56第10頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型的步驟一第一步：初篩，初步篩選白血病類型CD7/CD19/CD33/CD10/CD117/HLA-DR/CD34/CD45CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-疑為T-ALLCD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+疑為AML伴CD7+CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-疑為B-ALLCD19+CD7-CD33+CD10+CD117-疑為B-ALL伴CD33+CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+疑為AML伴CD19+CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+疑為AMLCD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-疑為APL第11頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型的步驟二第二步：確診，進(jìn)一步確定白血病類型，并且將某一系別的白血病根據(jù)分化程度的不同再分為不同亞型根據(jù)初篩結(jié)果加做其他系別特異性標(biāo)記T-ALL:CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD1a、TDT、cCD3B-ALL:CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79aAML:CD13、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO,懷疑M6加做CD71、GPA,懷疑M7加做CD61、CD41第12頁,共50頁，2024年2月25日，星期天B-ALL免疫亞型亞型CD19CD34TdTCD10CyIgSmIgFAB分型earlyB-precursorALL+++（－）--L1、L2CommonB-ALL++++（－）-L1、L2PreB-ALL+－/+++（+）-L1B-ALL+－－－－/+（+）L3第13頁,共50頁，2024年2月25日，星期天T-ALL免疫亞型分型CD7CD2TdTCD3c/mCD1aFAB分型急性早期T前體細(xì)胞白血病earlyT-precursorALL+－+－/+-L1、L2胸腺皮質(zhì)T-ALL+++++L1、L2急性T細(xì)胞白血病T-ALL++－+-L1、L2第14頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：T-ALL

初篩CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-第15頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：AML伴CD7+

初篩CD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+第16頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：B-ALL

初篩CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-第17頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：BALL+CD33

初篩CD19+CD7-CD33+CD10+CD117-第18頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：AML+CD19

初篩CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+第19頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：AML

初篩CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+第20頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：AML-M3

初篩CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-第21頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：AML-M3V

初篩CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-第22頁,共50頁，2024年2月25日，星期天混合細(xì)胞性白血病的免疫分型雙表型：一種白血病細(xì)胞同時(shí)表達(dá)兩個(gè)或兩個(gè)以上系列標(biāo)志。雙克隆型：同時(shí)存在兩種或兩種以上異常細(xì)胞，分別表達(dá)各自的系列特異性標(biāo)志。類型：T-M、B-M、T-B、T-B-M第23頁,共50頁，2024年2月25日，星期天白血病中各種抗原的積分情況PointsB-lymphoidT-lymphoidMyeloid2CD79acCD22cIgMCD3TCRa/bTCRg/dMPO1CD19CD10CD20CD2CD5CD8CD10CD117CD65CD13CD330.5TdTCD24TdTCD7CD1aCD14CD15CD64混合細(xì)胞性白血病判斷標(biāo)準(zhǔn)：每個(gè)系列積分>或=2.5分第24頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：B-M型AL第25頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：T-M型AL第26頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：T-B-M型AL第27頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫表型的預(yù)后價(jià)值第28頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第29頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第30頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第31頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第32頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第33頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型在慢淋、淋巴瘤中的應(yīng)用簡介腫瘤性B細(xì)胞鑒別關(guān)鍵：κ、λ輕鏈出現(xiàn)單克隆表達(dá)或雙陰性或表達(dá)強(qiáng)度明顯異常。腫瘤性T細(xì)胞鑒別關(guān)鍵：CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7中出現(xiàn)抗原表達(dá)缺失或抗原表達(dá)強(qiáng)度的改變；CD45RA、CD45RO的表達(dá)情況出現(xiàn)異常；表達(dá)TDT、CD10等幼稚抗原；TCRVβ系列抗原出現(xiàn)單克隆表達(dá)。漿細(xì)胞腫瘤鑒別關(guān)鍵：CD138+細(xì)胞表達(dá)CD56，不表達(dá)CD19，出現(xiàn)cyκ、cyλ輕鏈的單克隆表達(dá)。NK細(xì)胞腫瘤鑒別關(guān)鍵：出現(xiàn)CD16、CD56、CD7、CD2等抗原的缺失，CD45表達(dá)強(qiáng)度的改變每種類型都必須關(guān)注異常細(xì)胞CD45表達(dá)強(qiáng)度、SSC、FSC的變化。第34頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：正常淋巴細(xì)胞正常T細(xì)胞正常B細(xì)胞正常NK細(xì)胞第35頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：B-CLL/SLL第36頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：MCL第37頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：HCL第38頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：Burkkit淋巴瘤第39頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：FL第40頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：脾邊緣區(qū)淋巴瘤第41頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：NK-T淋巴瘤第42頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：T-NHL82.5%15.6%第43頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：細(xì)針穿刺B-NHL第44頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例