蛇床子素對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制的初步探討的開題報(bào)告

蛇床子素對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制的初步探討的開題報(bào)告研究背景腦缺血是指由于大腦供血不足或中斷引起的神經(jīng)細(xì)胞受損或死亡，是導(dǎo)致中風(fēng)的主要原因之一。腦缺血目前缺乏有效的治療方法，因此尋找新的治療手段具有重要的臨床意義。蛇床子素（TANS）是從葛根屬植物龍牙葛中提取的一種黃酮類化合物，已經(jīng)證實(shí)具有很強(qiáng)的抗氧化、抗炎和抗凋亡作用，對(duì)多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病具有保護(hù)作用。然而，蛇床子素對(duì)于實(shí)驗(yàn)性腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用及其作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。研究目的本研究旨在探究蛇床子素在實(shí)驗(yàn)性腦缺血中的神經(jīng)保護(hù)作用及其作用機(jī)制。研究?jī)?nèi)容1.建立實(shí)驗(yàn)性腦缺血模型：采用大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法（BCCAO）模型建立實(shí)驗(yàn)性腦缺血模型。2.藥物處理：將大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組和蛇床子素處理組，蛇床子素處理組給予TANS10mg/kg體重靜脈注射。3.觀察神經(jīng)行為學(xué)：運(yùn)用Morris水迷宮檢測(cè)認(rèn)知功能和旋轉(zhuǎn)試驗(yàn)檢測(cè)神經(jīng)功能。4.檢測(cè)神經(jīng)元凋亡和炎癥因子：采用免疫熒光及Westernblot檢測(cè)海馬區(qū)神經(jīng)元凋亡和TNF-α、IL-1β、IL-6等炎癥因子的表達(dá)水平。研究意義本研究將從實(shí)驗(yàn)角度探討蛇床子素對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制，為臨床治療腦缺血提供新的藥物選擇。此外，對(duì)于認(rèn)識(shí)蛇床子素的藥理學(xué)作用及其神經(jīng)保護(hù)機(jī)制也具有一定的科學(xué)意義。研究預(yù)期通過本次研究，我們預(yù)計(jì)能夠得到以下結(jié)論：1.蛇床子素可以減輕實(shí)驗(yàn)性腦缺血大鼠的神經(jīng)行為學(xué)損傷；2.蛇床子素可以抑制實(shí)驗(yàn)性腦缺血大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元凋亡；3.蛇床子素可以降低實(shí)驗(yàn)性腦缺血大鼠海馬區(qū)炎癥反應(yīng)。研究方法1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：Wistar大鼠，雄性，體質(zhì)量250g±30g，由南京大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。2.藥物制備：將蛇床子素粉末溶于注射用水中制備成10mg/ml的藥液。3.實(shí)驗(yàn)操作：（1）手術(shù)操作大鼠取坐位，面向左，頸部放在麻醉桶內(nèi)，用去皮的小鋸骨鋸開右側(cè)頸側(cè)面，找到頸總動(dòng)脈及其分支后頸動(dòng)脈。結(jié)扎后頸動(dòng)脈及其上頸總動(dòng)脈。再在頸總動(dòng)脈下端地方縫合止血。結(jié)扎過程中注意頸總動(dòng)脈小動(dòng)脈要避免損傷。（2）神經(jīng)行為學(xué)檢測(cè)Morris水迷宮檢測(cè)大鼠空間記憶功能，旋轉(zhuǎn)試驗(yàn)檢測(cè)大鼠神經(jīng)系統(tǒng)損傷情況。（3）組織取樣取大鼠海馬組織，制備蛋白質(zhì)，Westernblot檢測(cè)神經(jīng)元凋亡和炎癥因子表達(dá)水平，免疫熒光染色檢測(cè)神經(jīng)元凋亡。4.數(shù)據(jù)處理：使用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，差異性采用ANOVA分析，P<0.05為顯著性差異。研究計(jì)劃本次研究計(jì)劃為期6個(gè)月，具體進(jìn)度如下：第1-2個(gè)月：熟悉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)、建立大鼠BCCAO模型；第3-4個(gè)月：分組、藥物處理以及相關(guān)的生物學(xué)檢測(cè)；第5-6個(gè)月：數(shù)據(jù)處理和分析，撰寫論文。參考文獻(xiàn)1.ZhangZ,SunB,GaoX,etal.TanshinoneIIAAttenuatesNeuroinflammationinExperimentalIschemicStrokeinthePC12CellLinebySuppressingNF-κBActivation[J].CellMolNeurobiol,2020,40(4):629-640.2.LeeHG,WonKJ,LimSW,etal.NeuroprotectiveEffectsofTanshinoneIIAonHypoxic-ischemicBrainInjuryinNeonatalRats[J].KoreanJPhysiolPharmacol,2012,16(4):255-262.3.DingY,ChenM,WangM,etal.TanshinoneIIAprotectsbrainmicrovascularendothelialcellsagainstoxygen-glucosedeprivation/reperfusion-inducedbarrierdysfun