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蛋白質(zhì)連接技術(shù)1可編輯課件PPT蛋白質(zhì)交聯(lián)系指將小分子物質(zhì)(如藥物、半抗原等)或大分子物質(zhì)(如酶、蛋白毒素等)以共價(jià)鍵的方式連接于蛋白質(zhì)分子,以制備人工抗原、酶標(biāo)抗體、載體釋放藥物、抗體導(dǎo)向藥物和免疫毒素等。2可編輯課件PPT交聯(lián)方法游離氨基

游離羧基

苯基

酚基巰基

羥基

咪唑基

吲哚基

胍基3可編輯課件PPT重氮化法:

蛋白質(zhì)連接分子酚羥基的鄰位、咪唑環(huán)、吲哚環(huán)

含芳香胺的化合物副反應(yīng)多,故一般限于人工抗原的制備4可編輯課件PPT戊二醛法:連接兩個(gè)伯胺最溫和的交聯(lián)反應(yīng)之一,可在4~40℃溫度范圍,pH6.0~8.0的緩沖水溶液中進(jìn)行,但是緩沖組份中不得含有氨基化合物,本交聯(lián)方法易形成相同蛋白間的連接;產(chǎn)物的均二性較差。因此,多用于酶標(biāo)抗體的制備。5可編輯課件PPT過(guò)碘酸鹽氧化法:蛋白質(zhì)連接分子氨基鄰二醇比較溫和,可在常溫和中性pH的條件下進(jìn)行6可編輯課件PPT混合酸酐法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基羧基7可編輯課件PPT碳二亞胺法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基羧基由于碳二亞胺的縮合反應(yīng)沒(méi)有選擇性;易形成蛋白分子間的自身聚合,產(chǎn)生非均一性產(chǎn)物;先將含羧基的藥物或半抗原分子與EDC反應(yīng),活化羧基后,再加入蛋白反應(yīng)物,可以減少蛋白分子交聯(lián)8可編輯課件PPT活潑酯法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基羧基9可編輯課件PPT多元酸酐法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基氨基、羥基10可編輯課件PPT二異氰酸酯法:

蛋白質(zhì)連接分子伯氨基氨基11可編輯課件PPT偶氮苯甲酸法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基苯基12可編輯課件PPTO—羧甲基羥胺法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基酮基13可編輯課件PPT對(duì)-肼基苯甲酸法:14可編輯課件PPT疊氮化法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基羧酸甲酯衍生物15可編輯課件PPT氯乙酸鈉法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基羥基16可編輯課件PPT亞胺酸酯法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基氨基17可編輯課件PPT鹵代硝基苯法:蛋白質(zhì)連接分子氨基、羥基、巰基氨基、羥基、巰基18可編輯課件PPTMannich反應(yīng)法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基酮、酚類19可編輯課件PPT苯醌法:蛋白質(zhì)連接分子氨基、羥基、巰基氨基、羥基、巰基20可編輯課件PPTE11man試劑法:兩分子蛋白的連接E11man試劑即5.5’—二硫—2,2’—雙硝基苯甲酸(DTNB),該試劑可以與巰基作用21可編輯課件PPT馬來(lái)酰亞胺基類活潑酯法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基巰基22可編輯課件PPTSPDP試劑法:異型雙功能交聯(lián)劑N-羥基琥珀亞胺基-3—(2-吡啶基二硫)—丙酸酯(SPDP)蛋白質(zhì)連接分子伯氨基巰基、氨基23可編輯課件PPT苯丁酸氮芥衍生物法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基氨基24可編輯課件PPT鹵代乙酰衍生物法:連接基團(tuán):氨基、巰基25可編輯課件PPT雙馬來(lái)酰亞胺試劑法:連接兩個(gè)巰基26可編輯課件PPT三氯三嗪試劑法:蛋白質(zhì)連接分子伯氨基

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