ARHI基因啟動(dòng)子甲基化與卵巢癌發(fā)生的關(guān)系的開題報(bào)告

ARHI基因啟動(dòng)子甲基化與卵巢癌發(fā)生的關(guān)系的開題報(bào)告開題報(bào)告題目：ARHI基因啟動(dòng)子甲基化與卵巢癌發(fā)生的關(guān)系研究研究背景：卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率在全球范圍內(nèi)均位居前列。ARHI（apoptosis-relatedgene,hrev）基因是一種新型腫瘤抑制基因，其編碼的蛋白可以引起細(xì)胞凋亡并抑制腫瘤細(xì)胞的生長。研究發(fā)現(xiàn)，ARHI基因啟動(dòng)子的甲基化水平增高與卵巢癌的發(fā)生密切相關(guān)。研究內(nèi)容：1.對(duì)ARHI基因啟動(dòng)子甲基化水平與卵巢癌患者臨床特征間的關(guān)系進(jìn)行分析，研究ARHI基因啟動(dòng)子甲基化水平與卵巢癌發(fā)生的相關(guān)性。2.利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）或熒光原位雜交（FISH）技術(shù)，比較ARHI基因啟動(dòng)子甲基化水平與其表達(dá)水平之間的關(guān)系，探究ARHI基因啟動(dòng)子甲基化對(duì)其轉(zhuǎn)錄表達(dá)的影響。3.借助體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，觀察ARHI基因啟動(dòng)子甲基化水平的變化對(duì)卵巢癌細(xì)胞的增殖、凋亡等作用。研究意義：本研究可為ARHI基因啟動(dòng)子甲基化與卵巢癌發(fā)生的關(guān)系提供新的證據(jù)，有助于深入了解其分子機(jī)制，為卵巢癌的早期診斷和治療提供理論基礎(chǔ)和新思路。同時(shí)，研究成果還有望為其他類型癌癥的研究提供借鑒和參考。研究方法：1.收集卵巢癌患者與正常人群的DNA樣品。2.利用甲基化敏感限制酶AvaI和MspI對(duì)ARHI基因啟動(dòng)子進(jìn)行限制酶切，PCR擴(kuò)增得到相應(yīng)的片段。3.利用亞硫酸氫鹽和硝酸鈉處理DNA樣品，使未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶（T/U），從而實(shí)現(xiàn)ARHI基因啟動(dòng)子甲基化水平的檢測。4.利用基因芯片或下一代測序技術(shù)，對(duì)ARHI基因啟動(dòng)子的甲基化水平進(jìn)行高通量測定。5.采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)或熒光原位雜交技術(shù)，檢測ARHI基因的mRNA表達(dá)量。6.利用細(xì)胞凋亡檢測試劑盒等技術(shù)，對(duì)促進(jìn)或抑制細(xì)胞凋亡的小分子化合物進(jìn)行體外篩選。進(jìn)度安排：第一年：收集ARHI基因啟動(dòng)子甲基化數(shù)據(jù)，建立ARHI基因啟動(dòng)子甲基化與卵巢癌發(fā)生的關(guān)系模型。第二年：檢測ARHI基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平，并探究其與甲基化水平之間的關(guān)系。第三年：利用體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證甲基化水平變化對(duì)卵巢癌細(xì)胞的影響，并進(jìn)行相應(yīng)的機(jī)制研究。第四年：總結(jié)分析研究結(jié)果，撰寫學(xué)位論文。參考文獻(xiàn)：1.YanLi,etal.ARHI(DIRAS-3),animprintedtumoursuppressorgene,bindstoimportinsandblocksnuclearimportofFAK.Oncogene.2005,24:450-461.2.ZhangB,etal.ThedirectinteractionbetweenARHIandST14/CMTM6isinvolvedintumorigenicityofovariancancercells.Oncogene.2016,35(22):2951-2962.3.AnshuRastogi,etal.PromoterhypermethylationinIndianprimaryoralsquamouscellcarcinoma.AsianPacJCancerPrev.2008,9:27-31.4.LuKH,etal.HighfrequencyofBRCA1andBRCA2germlinemutationsinwomenwithovari