分解纖維素的微生物的分離

第第頁分解纖維素的微生物的分離專題課題3

二微生的培物養(yǎng)與應用分解纖維素的生物的分微離

.基一礎識㈠知.維纖素與纖維酶1素.纖素維纖維素是種由葡一糖萄尾首連相成而的分子化合物高是，含最量豐的多糖類富質(zhì)物。

考思纖維素：是球上含地最豐量的富多類物質(zhì)糖，植每物產(chǎn)年生的維纖素超過70億噸但卻不會在地球，大量上積的，為累什？

么纖維能素土壤被某些中微物生分解利用這，由于是它們能產(chǎn)生纖維夠素。酶人可應類分用解維纖的微素生將秸物稈等棄物轉變成酒廢，用纖維精素處酶理服面料裝。

棉花等是自界中然纖維含量素高的最然產(chǎn)天。物

一

.礎知識基.㈠維素與纖維素纖酶2.維素纖酶纖維素酶是一復種合，一酶般認它為少至包三種括分組，C即酶1(外酶)切、C酶(內(nèi)切*)酶和葡萄糖苷酶前，種酶兩纖使素分維成纖解二糖維第，種酶將三維纖二分解成糖萄葡糖

纖。維素

1酶、C*酶

纖C維糖

二葡糖苷酶

葡萄萄

糖一.

基知礎識㈠.纖素維與纖維素酶.纖維3的分解：素分解纖維的微素物生，各種細有、菌真菌少和放線菌數(shù)。

實:纖驗維素酶解分維纖的實素驗①取支二02mL的試管各②入一加張濾紙條③加各pH4.入，物質(zhì)8為量.01om/lL醋的酸-醋酸緩沖液1鈉1ml1和m0l④乙在試管中入加1Lm纖素酶維⑤兩支管固定在錐形瓶試，中放在10r/m4ni搖的床振蕩1h⑥結上果乙：試的濾紙管消逝條甲乙

討：乙論試管的濾紙為條么什消逝會？試管的作用甲是什么?

一基礎知.識㈡.維纖分解細菌的素選：1.方法：篩剛果染紅法。色.2原：理剛果紅可以與纖素維形成紅色復物合當，維素被纖維纖素分酶后解紅，復色合無法形物，涌現(xiàn)成纖維以分解素菌為中的心透圈明，們可我以過是否通生透產(chǎn)明來篩圈選纖素分維解菌。3.優(yōu)點該方：法以通可顏色反應過徑直選。篩

操作

步

驟1、土壤樣?。焊焕w維素的環(huán)含中境分布環(huán)①境②緣由由于生物適一應定環(huán)的境環(huán)，境生對有選物擇用作在，富纖維含素環(huán)的境，纖中素分解菌維的量含相對高，提此因從種這土樣中獲目得微的物的幾生率要于一般高境。環(huán)③實：例樹中多林年葉落成的形殖腐，土多年累積的枯枝敗等。葉④

論:討果找如不到適合的境環(huán)可以將，濾紙在埋壤中土，將紙埋濾在壤中土有么作用？你認什為紙應當埋在土壤中濾深多

答？將濾：埋在土壤紙中能纖使素維分解菌相集對中事實上，是人工置設纖維素分解菌生的相宜環(huán)境存。一應般將紙濾埋于約1深cm0右的左土中壤

。.實二驗設與操作計.試驗㈠設計土：取樣壤擇選養(yǎng)培度稀釋

將樣品涂梯布鑒別到纖維素解菌的培分養(yǎng)基上

選擇生產(chǎn)明圈的菌透落

2選、擇培①養(yǎng)目的：加纖維素分增解菌濃的度，確保以能夠從品樣分別所中要的微需生。

物

、選2培擇②制養(yǎng)選備培擇養(yǎng)：閱讀書基P29本纖維素解菌的分擇選培育基方配回，問題。

答A、旁欄的中方是配液培育基還體是體固培育基？為什？B么這、培個基養(yǎng)微生物對是具否有擇選用？如作果有具，是如何進行擇選的？C你能否、設一計個照試驗對說，明擇選養(yǎng)培的基用

答作有：擇選作用，配方本以纖維中作為答：素是體液養(yǎng)培基，原是配因中方無凝固劑答：牛肉用蛋膏白胨養(yǎng)基與培之照對或。唯一源，只有能分解碳維纖素的微生可以物(瓊脂)者纖維將素改為葡萄。大量繁糖殖

。2、

選培育③操擇作：稱取樣土20g在，無條菌件加入裝下30m有L培育基的瓶搖中將。搖置瓶搖于床上，3在℃0振下蕩培1~2養(yǎng)，至培d基變混濁養(yǎng)吸取一。的培養(yǎng)定(約液m5L)轉，至另移瓶新鮮一的擇選培基中，養(yǎng)同樣以方法培的養(yǎng)到培育液變濁。渾也可重復選擇培。養(yǎng)

〖旁思欄考題〗什為么選培育能夠“擇縮濃所”的需生物微

在選擇？養(yǎng)的培條件下，以可使些能那適應這種營養(yǎng)條件的夠微物生得到快速繁殖，而那不些適這種應養(yǎng)條營的件微物的生繁殖被抑，制因可此起到以濃“縮”的作。用

二.試驗

計與設操㈠作試驗設.計：土壤取樣選擇培育梯稀釋度將樣品涂布到別鑒纖維素解分的菌培養(yǎng)基上選產(chǎn)生挑明圈透菌落

3的梯度稀釋.照課按題1稀的操作釋方法將選擇培育，后培育的進基行比稀釋等11010~7倍

。101

120

103

14015

100

6

.4將品涂布到鑒別纖樣維分素解菌的養(yǎng)培基上鑒別培基養(yǎng)—在培育—基中入某種指示加或化劑學品藥用,以⑴備制鑒別培基養(yǎng):別不鑒同類的種微物。生配方見書本92頁操。作過見課題1程(2涂)平布：板將稀度為釋104106的菌~懸液各取.01m涂l布到平板養(yǎng)基上培，30倒置培育?！?/p>

5剛果紅.色法染

法一方先：養(yǎng)培生微物再，加入果剛進行顏紅色應。反法二：在方倒平板就加時入剛果。紅〖欄思旁題〗考兩這方種各有法哪優(yōu)些點與足？染色法不優(yōu)點色反應顏基本方法一是上維素纖分菌的作用解操作簡不便存在菌落混雜問題缺點作操繁瑣剛果紅會使菌落之間生混發(fā)雜產(chǎn)淀粉生的酶生物也產(chǎn)生微模透糊圈，明有些微物生降能色素解，成形明的顯透亮圈。方二

法思索：

方一法中NCla溶的液作？用漂洗作用，洗去與纖素結合維不的牢剛果紅，以免涌現(xiàn)的透亮圈夠清不晰用。這方可以法判斷酶力的大活小，實上剛際紅是結果合培育基到多糖的底物，但分解纖素維的細菌以產(chǎn)生纖可維酶素能分，這解個多糖物成為單底糖，樣這果紅剛就能不結合上了，去化氯鈉液溶就以使結合可牢的剛不紅果洗去這樣，留下大大