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關于噬菌體侵染細菌的實驗噬菌體侵染細菌實驗你記得本實驗的基本操作嗎?考綱要求:兩個經典實驗的設計思路和結論分析考情回顧:2010、2011年江蘇卷、上海卷第2頁,共29頁,2024年2月25日,星期天赫爾希通過T2噬菌體侵染細菌的實驗證明DNA是遺傳物質,實驗包括4個步驟:①培養(yǎng)噬菌體(侵染細菌),②35S和32P標記噬菌體,③放射性檢測,④離心分離。實驗步驟的先后順序為

A.①②④③B.④②①③C.②①④③D.②①③④我能行C第3頁,共29頁,2024年2月25日,星期天深度解讀噬菌體侵染大腸桿菌的實驗1、實驗者:2、實驗方法:放射性同位素標記法:用放射性同位素(如14C)摻入正常的分子中,使該分子帶有放射性,然后用放射自顯影檢測分子的分布。拓展:四本書中使用這種方法的有哪些知識?第4頁,共29頁,2024年2月25日,星期天蛋白質外殼DNA3、實驗材料:噬菌體選擇是關鍵

第5頁,共29頁,2024年2月25日,星期天解讀實驗材料T2噬菌體:(1)結構:有何特點?所用同位素究竟標記的是這兩種物質的什么位置?請你寫出氨基酸結構通式;畫出脫氧核苷酸的結構簡圖;并標出同位素標記的部位。(2)生活方式:什么特點?怎樣培養(yǎng)?(3)增殖特點:雖無細胞結構,但為生物的原因。看書P44T2噬菌體中

60%是蛋白質,

40%是DNA.第6頁,共29頁,2024年2月25日,星期天解讀大腸桿菌1、為什么不同的噬菌體會侵染不同的大腸桿菌?2、噬菌體若想向大腸桿菌中注入物質,需要先溶解其什么結構?該結構主要成分是什么?第7頁,共29頁,2024年2月25日,星期天解讀大腸桿菌1、為什么不同的噬菌體會侵染不同的大腸桿菌?2、噬菌體若想向大腸桿菌中注入物質,需要先溶解其什么結構?該結構主要成分是什么?細胞表面的特異性受體決定。細胞壁;肽聚糖第8頁,共29頁,2024年2月25日,星期天4、實驗設計思路---不同于體外轉化實驗巧妙構思:噬菌體只有DNA和蛋白質兩種成分,沒有其它物質的干擾。S是蛋白質特有元素,P是DNA特有元素,用不同放射性同位素分別標記蛋白質和DNA,直接地、單獨地來觀察它們的作用第9頁,共29頁,2024年2月25日,星期天在“噬菌體侵染細菌”的實驗中,如果放射性同位素主要分布在離心管的沉淀物中,則獲得侵染噬菌體的方法是(

)A.用含35S的培養(yǎng)基直接培養(yǎng)噬菌體B.用含32P的培養(yǎng)基直接培養(yǎng)噬菌體C.用含35S的培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌,再用此細菌培養(yǎng)噬菌體D.用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌,再用此細菌培養(yǎng)噬菌體我能行D第10頁,共29頁,2024年2月25日,星期天5、實驗過程(如何標記噬菌體?)第一步:標記細菌(如何標記?)35S培養(yǎng)基+細菌35S標記的細菌32P培養(yǎng)基+細菌32P標記的細菌第二步:標記噬菌體(如何標記?)噬菌體+35S標記的細菌35S標記的噬菌體噬菌體+32P標記的細菌32P標記的噬菌體第11頁,共29頁,2024年2月25日,星期天第三步:標記的噬菌體侵染未標記的細菌仔細研讀課本實驗有關內容友情提示:今年高考選修三試題基本都是課本原話填空,所以看書必須仔細第12頁,共29頁,2024年2月25日,星期天第四步:放射性檢測----攪拌和離心短時間保溫、攪拌、離心目的---第13頁,共29頁,2024年2月25日,星期天第四步:放射性檢測解讀上清液:解讀沉淀物:第14頁,共29頁,2024年2月25日,星期天第四步:放射性檢測解讀上清液:上清液中含未侵染的T2噬菌體和侵染后的噬菌體外殼解讀沉淀物:沉淀物中含有被感染的細菌第15頁,共29頁,2024年2月25日,星期天

該實驗中時間應怎樣把握?過長過短放射性會集中于上清液還是沉淀?為什么?時間過長因為超過噬菌體的裂解周期,放射性集中于上清液中,過短來不及侵染細菌,從而也集中于上清液中。思考第16頁,共29頁,2024年2月25日,星期天解讀放射性檢測結果:35S標記后上清液放射性高,沉淀物放射性很低(為什么沉淀物有低放射性?)32P標記后上清液放射性很低(為什么上清液有低放射性?),沉淀物放射性很高。第17頁,共29頁,2024年2月25日,星期天解讀32P標記后上清液有低放射性原因(1)保溫時間過短,有一部分噬菌體還沒有侵染到大腸桿菌細胞內,經離心分布于上清液中,上清液中出現放射性。(2)噬菌體和大腸桿菌混合培養(yǎng)到用離心機分離,這一段保溫時間過長,噬菌體在大腸桿菌內增殖后釋放子代,經離心分布于上清液,也會使上清液有放射性。第18頁,共29頁,2024年2月25日,星期天35S標記后為什么沉淀物有低放射性?由于攪拌不充分,有少量含35S的噬菌體吸附在細菌表面,隨細菌離心到沉淀物中。第19頁,共29頁,2024年2月25日,星期天實驗分析:

結果分析:細菌體內無35S,體外有35S細菌體內有32P,體外無32P35S標記的噬菌體外殼并沒有進入細胞內部,而32P標記的噬菌體DNA進入了細菌內部實驗結論:DNA是遺傳物質。你認為該實驗還能證明什么?DNA分子具有相對穩(wěn)定性;DNA能自我復制,保持前后代一定連續(xù)性;DNA能控制蛋白質的生物合成,但不能證明DNA分子產生可遺傳的變異。第20頁,共29頁,2024年2月25日,星期天解讀子代噬菌體的組成(課本44頁)噬菌體侵染細菌后,合成子代噬菌體的外殼的原料是?而子代噬菌體的DNA來自?第21頁,共29頁,2024年2月25日,星期天注意標記對象是噬菌體還是細菌,標記對象不同,結果應不同:溫馨提醒第22頁,共29頁,2024年2月25日,星期天注意標記對象是噬菌體還是細菌,標記對象不同,結果應不同:溫馨提醒第23頁,共29頁,2024年2月25日,星期天35S標記的蛋白質32P標記的DNA1、感染2、攪拌3、離心蛋白質外殼(強放射性)細菌(強放射性)細菌蛋白質外殼第24頁,共29頁,2024年2月25日,星期天噬菌體(病毒)、大腸桿菌(原核生物)1、實驗材料:

2、實驗思路:

4、實驗結果:5、實驗分析:總結蔡斯和赫爾希的實驗設法把DNA與蛋白質分開,單獨地直接去觀察它們的作用。用放射性同位素35S和32P分別標記噬菌體的蛋白質外殼和DNA內核,后侵染細菌3、實驗操作:在新噬菌體只能檢測到32P,檢測不到35S在親子代間具備連續(xù)性的是DNA6、實驗結論:DNA是遺傳物質第25頁,共29頁,2024年2月25日,星期天試比較肺炎雙球菌轉化實驗

和噬菌體侵染細菌的實驗相同點:1、實驗思路---均使DNA和蛋白質分開,單獨處理,觀察它們各自的作用,但兩類實驗中分開方式不同。2、實驗原則---都遵循了對照原則。3、都證明了DNA是遺傳物質。不同點:1、方法不同:艾弗里---分離化合物,分別與R型菌混合培養(yǎng)同位素標記法---分別標記DNA和蛋白質的特殊元素2、結論不同:艾弗里---DNA是遺傳物質,蛋白質等不是遺傳物質同位素標記法---DNA是遺傳物質第26頁,共29頁,2024年2月25日,星期天噬菌體侵染細菌的動態(tài)過程:侵入別的細菌侵入合成吸附組裝釋放吸附侵入合成組裝釋放第27頁,共29頁,2024年2月25日,星期天(201

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