ABO血型鑒定的注意事項(xiàng)

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ABO血型正反定型及結(jié)果

正定型：用已知抗-A和抗-B分型血清來(lái)測(cè)定RBC上有無(wú)相應(yīng)的A抗原和（或）B抗原。

反定型：用已知A細(xì)胞和B細(xì)胞來(lái)測(cè)定血清中有無(wú)相應(yīng)的抗-A和（或）抗-B。

正反定型注意事項(xiàng)

更換新批號(hào)抗血清或?qū)υ囼?yàn)有懷疑時(shí)，可設(shè)陽(yáng)性、陰性和自身對(duì)照?？笰管的陽(yáng)性對(duì)照用抗A標(biāo)準(zhǔn)血清加已知A型RBC；抗B管的陽(yáng)性對(duì)照用抗B標(biāo)準(zhǔn)血清加已知B型RBC；陰性對(duì)照用AB型血清加正常人O型RBC；自身對(duì)照用被檢者血清加被檢者RBC。為避免交叉污染，尖吸管、玻棒只能一次性使用。RBC懸液濃度過(guò)高或離心力過(guò)大可造成假凝集，操作時(shí)須注意。操作環(huán)境應(yīng)在20～25℃下進(jìn)行。操作中心嚴(yán)格查對(duì)制度，觀察后要立即正確記錄結(jié)果。嬰幼兒RBC抗原末發(fā)育完全，老年體弱者抗原較弱，最好用試管法鑒定。白血病、惡性腫瘤等嚴(yán)重疾病時(shí)RBC上的抗原可能減弱甚至消失，要結(jié)合反定型綜合判斷結(jié)果。亞型RBC（如A3型）的抗原性較弱有時(shí)會(huì)出現(xiàn)混合外觀，甚至與較低效價(jià)的血清抗體不出現(xiàn)凝集反應(yīng)，要用抗-（A+B）標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行鑒定。

反定型注意事項(xiàng)

不宜用玻片法，因?yàn)楂I(xiàn)血者或患者血清有時(shí)凝集力較弱，必須經(jīng)過(guò)離心使RBC緊密接觸，否則，不足以使RBC凝集。試管離心后，應(yīng)先觀察上清液有無(wú)溶血，然后搖動(dòng)底層RBC進(jìn)行觀察，若出現(xiàn)溶血現(xiàn)象表明存在抗原抗體反應(yīng)并有補(bǔ)體激活，應(yīng)視為凝集。因?yàn)榛颊咝迈r血清作反定型時(shí)，由于補(bǔ)體作用發(fā)生溶血，如不檢查有無(wú)溶血現(xiàn)象，會(huì)使結(jié)果判斷錯(cuò)誤或遺漏。反定型必要時(shí)加一管“O”型RBC，用以查出盂買型抗-h抗體，同時(shí)可查是否有緡錢狀形成和血清中偶可見(jiàn)到的少數(shù)與血型抗原無(wú)關(guān)但能使陽(yáng)比發(fā)生凝集的物質(zhì)。血清中存在免疫性血型抗體，冷凝集素效價(jià)增高，多發(fā)性骨髓瘤免疫球蛋白異常均可造成反定型困難。

正反定型結(jié)果不一致常見(jiàn)情況

分型血清效價(jià)太低，親和力不強(qiáng)。如抗-A血清效價(jià)不高，可將A型誤定為0型。分型血清未滅活產(chǎn)生溶血，血型鑒定時(shí)誤認(rèn)為陰性。

RBC懸液過(guò)濃、過(guò)淡，抗原抗體比例不適當(dāng)，使反應(yīng)不明顯出現(xiàn)假陰性。

受檢者RBC上抗原位點(diǎn)太少或抗原性減弱以及類B或cisAB等。

受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗-A、抗-B。

各種原因引起的RBC溶解，誤判為不凝集，部分溶血時(shí)可溶性血型物質(zhì)中和了相應(yīng)的抗體。

受檢者血清中蛋白紊亂或?qū)嶒?yàn)室溫度過(guò)高，常引起RBC呈緡錢狀排列。

細(xì)茵污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。

血清中有意外抗體如自身抗-I，存在免疫性抗體如抗-PI、抗-M、抗-H等常干擾試驗(yàn)。

新生兒、老年人、低免疫球蛋白血癥患者的血清中的抗-A、抗-B效價(jià)太低甚至缺乏，可出現(xiàn)正反定型不一致。

非特異性反應(yīng)：被檢血清中可出現(xiàn)與血型無(wú)關(guān)的，同部分人血細(xì)胞均可發(fā)生凝集樣反應(yīng)的現(xiàn)象，可能系免疫性抗體所致。

正反定型結(jié)果不一致的處理方法

首先重復(fù)試驗(yàn)1次，嚴(yán)格操作規(guī)程，使用合格的試劑及細(xì)心觀察和解釋結(jié)果。

另從受檢者采取一份新鮮血標(biāo)本，可糾正因污染或搞錯(cuò)標(biāo)本造成的不符。

將RBC洗滌數(shù)次，配成5%鹽水細(xì)胞懸液，用抗-A、抗-B、抗-A1、抗-（A+B）及抗-H做試驗(yàn)可以得到其它有用的信息。

對(duì)受檢者RBC作直接抗人球蛋白試驗(yàn)，如結(jié)果呈陽(yáng)性，表示RBC已被抗體致敏。

用A1、A2、B、O型RBC及自身RBC檢查受檢血清。加懷疑是抗-I，用O型（或ABO相合的）臍血RBC檢查。

若試驗(yàn)結(jié)果未見(jiàn)凝集，應(yīng)將細(xì)胞及血清試驗(yàn)至少在室溫和4℃放置30分鐘，用顯微鏡核實(shí)。

如疑為A抗原或B抗原減弱，則可將受檢RBC與抗-A或抗-B血清作吸收及放散試驗(yàn)以及受檢者唾液作A、B、H血型物質(zhì)測(cè)定。后者只對(duì)80%HAB分