實(shí)驗(yàn)二影響酶促反應(yīng)的因素

關(guān)于實(shí)驗(yàn)二影響酶促反應(yīng)的因素一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?．通過(guò)實(shí)驗(yàn)，觀察溫度、pH值、激活劑與抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響。2．能運(yùn)用所學(xué)的生化知識(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行正確的分析。第2頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、實(shí)驗(yàn)原理利用淀粉及其水解產(chǎn)物的顏色反應(yīng)，來(lái)比較唾液淀粉酶在不同條件下催化淀粉水解的程度，從而判斷溫度、pH、激動(dòng)劑和抑制劑對(duì)酶的活性影響。淀粉糊精麥芽糖和葡萄糖藍(lán)色碘紫色→紅色→無(wú)色無(wú)色碘碘＋＋＋↓↓↓第3頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、實(shí)驗(yàn)原理在低溫時(shí)，酶活性降低，酶促反應(yīng)速度較慢，甚至停止；隨著溫度升高，酶的活性恢復(fù)，反應(yīng)速度加快；當(dāng)達(dá)到最適溫度時(shí)，酶的活性最大，酶促反應(yīng)速度達(dá)到最大。人體內(nèi)大多數(shù)的酶的最適溫度在37℃左右。溫度過(guò)高，酶變性失活，酶促反應(yīng)速度下降，甚至停止。每種酶都有最適的pH值，在最適pH值時(shí)，酶的活性最大，酶促反應(yīng)速度最快；偏離酶的最適pH均可引起酶蛋白變性而降低或失去活性。唾液淀粉酶的最適pH值為6.8。氯離子對(duì)唾液淀粉酶有激活作用；銅離子對(duì)唾液淀粉酶有抑制作用。第4頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、實(shí)驗(yàn)材料1.1%淀粉溶液取可溶性淀粉1g,加5ml蒸餾水,調(diào)成糊狀,再加80ml蒸餾水,加熱并不斷攪拌,使其充分溶解,放冷,最后用蒸餾水稀釋至100ml。2.pH3.0緩沖液取0.2mmol/LNa2HPO4溶液205ml，0.1mol/L檸檬酸溶液795ml,混合即成.3.pH6.8緩沖液取0.2mmol/LNa2HPO4溶液772ml，0.1mol/L檸檬酸溶液228ml,混合即成.4.pH8.0緩沖液取0.2mmol/LNa2HPO4溶液972ml，0.1mol/L檸檬酸溶液28ml混合即成.第5頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天5.0.9%NaCl溶液6.1%CuSO4溶液7.碘液9.試管架11.試管夾12.滴管13.白瓷板14.恒溫水浴箱15.電爐16.燒杯第6頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天【注意事項(xiàng)】1.注意實(shí)驗(yàn)器材的干凈，避免雜質(zhì)影響反應(yīng)結(jié)果2.各管反應(yīng)時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格控制，保證一致。第7頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、實(shí)驗(yàn)方法稀釋唾液制備用水漱口，含蒸餾水咀嚼2分鐘后，把唾液吐進(jìn)燒杯中備用。（注：唾液淀粉酶活性具有個(gè)體差異，按下述各實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，有部分同學(xué)可能失敗，可重新操作，但在重做過(guò)程中，要根據(jù)第一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果改變稀釋唾液的用量，反應(yīng)太慢，則增加稀釋唾液用量，如果反應(yīng)太快，則減少稀釋唾液的用量）煮沸唾液的制備取上述唾液約5ml，放入沸水中煮沸5分鐘，取出備用。第8頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響管號(hào)123緩沖液（pH6.8）20滴20滴20滴1%淀粉溶液10滴10滴10滴把三支管溶液搖勻，然后分別放至相應(yīng)的溫度中水浴預(yù)溫預(yù)溫溫度0℃37℃37℃預(yù)溫5分鐘后取出，繼續(xù)向各管加入相應(yīng)唾液稀釋唾液10滴10滴—煮沸唾液——10滴把三支管搖勻，然后分別放至相應(yīng)的溫度中水浴10分鐘，加碘2滴水浴溫度0℃37℃37℃結(jié)果與分析第9頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天取白瓷板一塊，向各凹分別加1滴碘液，每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號(hào)管取溶液1滴，加到已加有碘液的小凹中，觀察顏色變化，直至與碘不呈色時(shí)（即只顯棕黃色時(shí)），向各管加碘液1滴，搖勻觀察顏色變化(切記勿搖動(dòng))。搖勻再觀察。第10頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響管號(hào)1231%淀粉溶液10滴10滴10滴pH5.0緩沖液10滴——pH6.8緩沖液10滴—pH8.0緩沖液——10滴稀釋唾液5滴5滴5滴把三支管搖勻，然后放至37℃水浴10分鐘，加碘2滴搖勻結(jié)果與分析第11頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天將各管混勻，放進(jìn)37℃水浴箱中保溫。取白瓷板一塊，向各凹分別加1滴碘液，每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號(hào)管取溶液1滴，加到已加有碘液的小凹中，觀察顏色變化，直至與碘不呈色時(shí)（即只顯棕黃色時(shí)），向各管加碘液1滴，搖勻觀察顏色變化。第12頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）激活劑與抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響管號(hào)12341%淀粉溶液10滴10滴10滴10滴pH6.8緩沖液10滴10滴10滴10滴蒸餾水2滴———氯化鈉溶液—2滴——CuSO4溶液——2滴—Na2SO4溶液———2滴稀釋唾液5滴5滴5滴5滴把三支管搖勻，然后放至37℃水浴10分鐘，加碘2滴搖勻結(jié)果與分析第13頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天將各管搖勻，放進(jìn)37℃水浴箱中保溫。取白瓷板一塊，向各凹分別加1滴碘液，每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號(hào)管取溶液1滴，加到已加有碘液的小凹中，觀察顏色變化，直至與碘不呈色時(shí)（即只顯棕黃色時(shí)），向各管加碘液1滴，搖勻，觀察各管顏色變化。

激活劑與抑制劑第14頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天激活劑與抑制劑五、思考題1.什么是酶的最適溫度？2.什么是酶的最適pH?3.激活劑與抑制劑對(duì)酶活性影響實(shí)驗(yàn)中設(shè)置第四管的作用是什么？4.什么是酶的特異性？第15頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天（四）酶的專(zhuān)一性對(duì)酶促反應(yīng)的影響。加入物1號(hào)管2號(hào)管3號(hào)管PH值6.8緩沖液20滴20滴20滴1%的淀粉10滴10滴——1%的蔗糖————10滴煮沸唾液——5滴——

稀釋唾液5滴——5滴結(jié)果與分