動(dòng)物機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)

第四章動(dòng)物機(jī)能學(xué)試驗(yàn)試驗(yàn)4.1 神經(jīng)干動(dòng)作電位及其傳導(dǎo)速度的測(cè)定【試驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位〔actionpotential〕的記錄方法和神經(jīng)興奮傳導(dǎo)速度的測(cè)定方法；了解蛙類坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的根本波形〔單相和雙相動(dòng)作電位；觀看不同刺激強(qiáng)度對(duì)神經(jīng)干動(dòng)作電位的影響?！驹囼?yàn)原理】經(jīng)干動(dòng)作電位。用電生理學(xué)方法可引導(dǎo)出此電位差及其變化，并加以顯示。相動(dòng)作電位。變化。動(dòng)作電位在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)具有肯定的速度。不同類型的神經(jīng)纖維，其傳A35m/s~40m/s。測(cè)定神經(jīng)沖動(dòng)在α神經(jīng)干上傳導(dǎo)的距離d〕與通過(guò)這些距離所需的時(shí)間t，即可依據(jù)v=d/t神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)速度?！驹囼?yàn)對(duì)象】蟾蜍或蛙【試驗(yàn)器材和藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、蛙類手術(shù)器械一套、神經(jīng)干標(biāo)本屏蔽盒、動(dòng)作電位引導(dǎo)輸入線、電刺激輸出線、棉球、任氏液(Ringersolution)?！驹囼?yàn)方法和步驟】制備坐骨神經(jīng)-腓神經(jīng)標(biāo)本〔sciaticnerve-peronealnervespecimen〕圖4-1 破壞蛙腦、脊髓的方法破壞腦、脊髓取蛙一只，用自來(lái)水沖洗干凈。左手握蛙，用食指下壓頭部前端，拇指按壓背部，使頭前俯。右手持探針由頭端沿正中線向尾端觸劃，觸到凹陷處即枕骨大孔所在部位〔圖4-1。將探針由此垂直刺入枕骨大孔，再將針圖4-1 破壞蛙腦、脊髓的方法0.5cm~1cm住脊柱下方斷端，使頭與內(nèi)臟自然下垂，右手持粗剪刀，沿脊柱兩側(cè)剪除一切內(nèi)臟及頭胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及緊貼于脊柱兩側(cè)的坐骨神經(jīng)〔圖4-。圖4-2 剪除軀干上部和內(nèi)臟圖4-3 剝掉后背及后肢皮膚剝皮左手握緊脊柱斷端，右手捏住斷端邊緣皮膚，用力向下剝掉全部后肢的皮膚〔圖4-3圖4-3 剝掉后背及后肢皮膚分別兩腿用鑷子夾住脊柱將標(biāo)本提起，反面朝上，剪去向上突起的尾〔勿損傷神經(jīng)。將標(biāo)本浸入盛有任氏液的培育皿內(nèi)。制作坐骨神經(jīng)-腓神經(jīng)標(biāo)本取一腿放置蛙板中心，腹側(cè)向上用蛙釘固定。用玻璃分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)，并于近脊柱端用任氏液浸泡過(guò)的棉線結(jié)扎。再將標(biāo)本反面朝上放置，剪去梨狀肌及其四周的結(jié)締組織。循坐骨神經(jīng)溝找出坐骨神經(jīng)大腿段，用玻璃分針留神剝離，然后從脊柱端將坐骨神經(jīng)剪斷，手持結(jié)扎線輕輕提起，剪斷坐骨神經(jīng)全局部支，游離神經(jīng)至腘窩處。坐骨神經(jīng)在腘窩上方分為脛神經(jīng)和腓神經(jīng)兩支。在分叉下剪斷內(nèi)側(cè)的脛神經(jīng)。沿腓腸肌溝分別腓神經(jīng)直至足部，用線結(jié)扎并剪斷。也可剪斷腓神經(jīng)而分別脛神經(jīng)，制備坐骨神經(jīng)-脛神經(jīng)標(biāo)本。將制備好的神經(jīng)標(biāo)本浸泡在任氏液中數(shù)分鐘，待其興奮性穩(wěn)定后開(kāi)頭實(shí)驗(yàn)。標(biāo)本安裝和儀器連接按圖4-4BL-420E系統(tǒng)刺激輸出端口上連接一S1S2，地線接地。R1和R3上，負(fù)極分別連接在R2和R4上，引導(dǎo)電氏液的棉球擦拭，從任氏液中取出坐骨神經(jīng)-腓神經(jīng)標(biāo)本，用濾紙吸去過(guò)多液體，置于標(biāo)本盒內(nèi)各電極上，粗的一端放在刺激電極上，細(xì)的一端放在記錄電極上。BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)。RR23R4神經(jīng)干標(biāo)本屏蔽盒1SRR23R4神經(jīng)干標(biāo)本屏蔽盒1BL-420E圖4-4 神經(jīng)干動(dòng)作電位及其傳導(dǎo)速度測(cè)定裝置示意圖觀看工程觀看不同刺激強(qiáng)度對(duì)神經(jīng)干動(dòng)作電位的影響 由菜單項(xiàng)選擇取“試驗(yàn)工程-肌-神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)。啟動(dòng)刺激器，刺激強(qiáng)度從零開(kāi)頭漸漸增加，當(dāng)刺激強(qiáng)度增加到剛能引起微小動(dòng)作電位時(shí)，此刺激強(qiáng)度稱為閾強(qiáng)度〔thresholdintensity，記錄其數(shù)值。連續(xù)增加刺激強(qiáng)度，觀看神經(jīng)干動(dòng)作電位是否也相應(yīng)增加大。當(dāng)刺激強(qiáng)度引起的動(dòng)作電位的幅值達(dá)最大時(shí)，再增加刺激強(qiáng)度，動(dòng)作電位的幅值不再增加，該刺激強(qiáng)度稱為最大刺激強(qiáng)度，記錄其數(shù)值。觀看雙向動(dòng)作電位 ①動(dòng)作電位幅值不再增大時(shí)，記錄埋伏期〔latencyperio，從刺激偽跡到動(dòng)作電位起始點(diǎn)的時(shí)間、雙相動(dòng)作電位上下相的幅度和個(gè)動(dòng)作電位持續(xù)的時(shí)間。②將神經(jīng)干標(biāo)本放置方向倒換后，觀看動(dòng)作電位的變。③把引導(dǎo)電極R1和R2調(diào)換位置后，觀看動(dòng)作電位的變化。動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度的測(cè)定點(diǎn)擊“試驗(yàn)工程-肌肉神經(jīng)試驗(yàn)-神經(jīng)干傳導(dǎo)速R1R3的距離〔d1、22道的波形處于最正確。計(jì)算時(shí)機(jī)計(jì)算出兩個(gè)動(dòng)作電位的埋伏期差值〔t2-1。依據(jù)v=d/t2-t1，即可計(jì)算出神經(jīng)干動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度。觀看單向動(dòng)作電位在記錄電極R1、R2之間，用小鑷子夾傷神經(jīng)干或用藥物〔如普魯卡因〕阻斷，可見(jiàn)第一通道動(dòng)作電位的其次相消逝，變?yōu)閱蜗鄤?dòng)作【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】剪除軀干和內(nèi)臟時(shí)，勿損傷神經(jīng)?！?cm以上。神經(jīng)標(biāo)本應(yīng)與每個(gè)電極親熱接觸，尤要留意與中間接地電極的接觸。成短路。刺激強(qiáng)度由弱到強(qiáng)，漸漸增加到適宜強(qiáng)度以免損傷標(biāo)本。【爭(zhēng)論思考題】這是否與動(dòng)作電位的“全或無(wú)”特征相沖突？本試驗(yàn)所測(cè)出來(lái)的傳導(dǎo)速度能否代表神經(jīng)干中全部神經(jīng)纖維的傳導(dǎo)速度？雙相動(dòng)作電位上下兩相幅值是否一樣，為什么？〔李建華〕試驗(yàn)4.2 神經(jīng)干動(dòng)作電位不應(yīng)期的測(cè)定【試驗(yàn)?zāi)康摹苛私馔茴愖巧窠?jīng)干興奮后興奮性的周期性變化?！驹囼?yàn)原理】神經(jīng)纖維在一次興奮過(guò)程中，其興奮性可發(fā)生周期性變化，依次經(jīng)過(guò)確定不應(yīng)期absoluterefractoryperiod、相對(duì)不應(yīng)期(relativerefractoryperiod)(supranormalperiod)和低常期(subnormalperiod)，然后再回到正常的興奮水平。為了測(cè)定坐骨神經(jīng)發(fā)生一次興奮后的興奮性變化，承受雙脈沖刺激。即先給神經(jīng)施測(cè)試刺激大小，來(lái)反映神經(jīng)興奮性的變化，測(cè)出神經(jīng)干動(dòng)作電位的不應(yīng)期?！驹囼?yàn)對(duì)象】蟾蜍或蛙【試驗(yàn)器材和藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、蛙類手術(shù)器械一套、神經(jīng)干標(biāo)本屏蔽盒、動(dòng)作電位引導(dǎo)輸入線、電刺激輸出線、棉球、任氏液?！驹囼?yàn)方法和步驟】制備坐骨神經(jīng)腓神經(jīng)標(biāo)本〔4.1。標(biāo)本安裝和儀器連接〔4.1。觀看工程之差為相對(duì)不應(yīng)期?！驹囼?yàn)留意事項(xiàng)】同試驗(yàn)4.1【爭(zhēng)論思考題】神經(jīng)干在承受一次刺激產(chǎn)生興奮以后，為什么會(huì)消滅不應(yīng)期？依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，能否求出此神經(jīng)的最大興奮頻率？神經(jīng)一次興奮后興奮性轉(zhuǎn)變的離子根底是什么？〔李建華〕試驗(yàn)4.3 肌梭放電【試驗(yàn)?zāi)康摹砍惺茏巧窠?jīng)-縫匠肌標(biāo)本，觀看肌肉被拉長(zhǎng)的程度與肌梭〔musclespindle〕感受器的傳入沖動(dòng)之間的關(guān)系?！驹囼?yàn)原理】當(dāng)有神經(jīng)支配的骨骼肌受外力牽拉時(shí)引起受牽拉的同一塊肌肉收縮的反射活動(dòng)，即為牽張反射stretchreflex變化或感受肌肉牽拉刺激的梭形感受器。當(dāng)肌肉受到牽拉時(shí)，興奮肌梭，沿傳入神經(jīng)到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)。因此，在傳入神經(jīng)中可記錄肌梭的興奮勉放。【試驗(yàn)對(duì)象】 蟾蜍或青蛙【試驗(yàn)器材和藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、蛙類手術(shù)器械一套、蛙板，玻璃板、有機(jī)玻璃〔1g〕假設(shè)干、銀或鉑金電極、屏蔽導(dǎo)線、音箱、滴管、任氏液。【試驗(yàn)方法和步驟】制備坐骨神經(jīng)-縫匠肌標(biāo)本(sciaticnerve-sartoriusmusclespecimen)從破壞腦脊髓至分別兩腿等步驟均與坐骨神經(jīng)-腓神經(jīng)標(biāo)本的制備一樣。取一側(cè)下肢，背位固定于蛙板上。用玻璃分針從骨盆端分一小段縫匠肌，并切下一小片附著的骨片。用鑷子夾住此骨片輕輕提起縫匠肌，由上而下分別縫匠肌外側(cè)，1/3兩小支。沿此細(xì)小分支逆向分別坐骨神經(jīng)直到其起始點(diǎn)，在脊椎旁穿線結(jié)扎并于遠(yuǎn)端剪斷坐骨神經(jīng)。此后，在縫匠肌緊貼膝關(guān)節(jié)的肌腱下穿一線，結(jié)扎后在遠(yuǎn)端可開(kāi)頭試驗(yàn)。儀器連接和標(biāo)本放置用以固定坐骨神經(jīng)-盆端的結(jié)扎線固定在斜板的下端，斜板上端裝有一滑輪，縫匠肌近膝關(guān)節(jié)端結(jié)扎BL-420E1整個(gè)有機(jī)玻璃浴槽置屏蔽籠內(nèi)。用音箱監(jiān)聽(tīng)神經(jīng)放電。試驗(yàn)觀看縫匠肌在不加負(fù)荷時(shí),觀看并監(jiān)聽(tīng)其根底放電水平。增加1g負(fù)荷,10s時(shí)放電頻率和聲音的變化。1g，觀看加負(fù)荷前、加負(fù)荷馬上時(shí)、加負(fù)荷后10s時(shí)放電頻率及聲音的變化〔1s10g為止。【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】常常滴任氏液潮濕標(biāo)本分別神經(jīng)時(shí)應(yīng)避開(kāi)用力牽拉神經(jīng)或用金屬器械夾捏神經(jīng)，以防損傷神經(jīng)?！緺?zhēng)論思考題】在肌肉每次加負(fù)荷時(shí)馬上和加負(fù)荷10s后肌梭放電頻率有何不同？為什么？〔李建華〕試驗(yàn)4.4 終板電位【試驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)終板電位的記錄方法，觀看其電生理特性。【試驗(yàn)原理】神經(jīng)肌肉接頭處是由接頭前膜、接頭后膜和接頭間隙三局部組成。當(dāng)神經(jīng)沖動(dòng)沿著神經(jīng)纖維傳至末梢時(shí)，接頭前膜去極化，電壓門(mén)控性Ca2+通道開(kāi)放，Ca2+內(nèi)流觸發(fā)囊泡移動(dòng)，囊泡膜與接頭前膜融合，囊泡內(nèi)的乙酰膽堿〔acetylcholine，〔終板膜〕時(shí)，馬上與終板膜上Na+、K+等離子的跨膜N+內(nèi)流為主，從而產(chǎn)生終板電位〔endplatepotential，EPP。在正常狀況用肯定濃度箭毒〔tubocurarineChloride〕阻滯神經(jīng)-肌肉接頭處的興奮傳遞，則可EPP?！驹囼?yàn)對(duì)象】 蟾蜍或青蛙【試驗(yàn)器材和藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、蛙類手術(shù)器械一套、鋅銅弓、有機(jī)玻璃縫匠肌浴槽、滴管、1：100,000箭毒任氏液、任氏液。【試驗(yàn)方法和步驟】制備坐骨神經(jīng)-縫匠肌標(biāo)本 法同試驗(yàn)4.3。終板區(qū)的定位1/31/3BL-420E1通道連接，選擇信號(hào)輸入菜單“動(dòng)作電位上單脈沖電刺激坐骨神經(jīng)，留意觀看由刺激引起肌動(dòng)作電位的埋伏期變化。引導(dǎo)1mm，記錄一次肌動(dòng)作電位，記錄到埋伏期最小的區(qū)域就是終板區(qū)。試驗(yàn)觀看觀看終板電位和肌動(dòng)作電位 閾上單脈沖電刺激坐骨神經(jīng)，終板區(qū)記錄到終板電位和肌動(dòng)作電位。終板電位上升緩慢，坡度比肌動(dòng)作電位大，持續(xù)時(shí)間愈近終板區(qū)，終板電位上升愈快，振幅愈大，終板集中處振幅最大。在終板電位上升相的彎曲之上的電位曲線就是肌纖維的動(dòng)箭毒滴加終板區(qū)，經(jīng)20~30min后，刺激坐骨神經(jīng)，可見(jiàn)隨作用時(shí)間的延長(zhǎng)，終板電位漸漸減小。當(dāng)削減到肯定程度時(shí)，動(dòng)作電位亦隨之消逝，但終板電位仍存在。終板電位的總和現(xiàn)象經(jīng)1：100,000箭毒浸泡過(guò)的神經(jīng)-肌肉標(biāo)本，先用鋅銅弓檢查不起反響后，再用先后兩個(gè)雙脈沖刺激坐骨神經(jīng)，則終板電位發(fā)生總和作用，當(dāng)總和到達(dá)肯定程度時(shí)，又可引起動(dòng)作電位。強(qiáng)直后強(qiáng)化現(xiàn)象 停頓后肯定時(shí)間內(nèi)，終板對(duì)隨之而來(lái)的單脈沖刺激的反響較前大為增加。【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】分別標(biāo)本時(shí)，盡可能將神經(jīng)分別干凈，并加任氏液潮濕。處固定不動(dòng)，近膝關(guān)節(jié)端處的引導(dǎo)電極可移動(dòng)。【爭(zhēng)論思考題】終板電位有何特點(diǎn)？-肌肉接頭處興奮傳遞的根本過(guò)程?！怖罱ㄈA〕試驗(yàn)4.5 蟾蜍縫匠肌細(xì)胞膜電位的測(cè)量【試驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)微電極細(xì)胞內(nèi)電位記錄的方法，加深對(duì)跨膜靜息電位和動(dòng)作電位的理解?！驹囼?yàn)原理】細(xì)胞未承受刺激時(shí)，膜內(nèi)外存在電位差，膜內(nèi)為負(fù)，膜外為正，稱靜息電位〔restingpotential，RP可逆的膜電位變化，稱動(dòng)作電位〔actionpotential，AP。將微電極插入細(xì)胞內(nèi)即可記錄到細(xì)胞的上述電學(xué)變化?！驹囼?yàn)對(duì)象】蟾蜍或蛙【試驗(yàn)器材和藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、蛙類手術(shù)器械一套、有機(jī)玻璃縫匠肌浴槽、玻3mol/LKCl任氏液、30mol/LKCl任氏液?！驹囼?yàn)方法和步驟】-縫匠肌標(biāo)本，方法同前。儀器連接和標(biāo)本安裝將標(biāo)本移入盛有任氏液的有機(jī)玻璃縫匠肌浴槽內(nèi)，縫匠肌內(nèi)側(cè)面對(duì)上，肌肉1.2~1.4倍。將縱器的夾子上，一根細(xì)的乏極化銀絲插入玻璃微電極，另一端與微電極放大器的探頭正極相連，無(wú)關(guān)電極與標(biāo)本槽內(nèi)任氏液相通并連接到微電極放大器探頭的負(fù)BL-420E試驗(yàn)觀看測(cè)量電極電位 標(biāo)本槽置于雙目解剖顯微鏡下，鏡下將微電極操縱器緩緩降下，尖端浸入任氏液內(nèi)。屏幕掃描線在-60mV四周。該直流電位的成因一是尖端玻璃對(duì)離子的選擇性吸附，二是與銀絲電極浸入不同的鹽溶液有關(guān)。拉制的微電極用之前，照此法測(cè)量總電極電位。靜息電位測(cè)定 微電極尖端進(jìn)入任氏液后，調(diào)整掃描線至零位線，在鏡下輕緩操作調(diào)整微電極尖端的位置。當(dāng)微電極尖端穿刺肌肉外表時(shí)，可見(jiàn)由壓迫而消滅的一凹窩。一旦微電極刺穿肌纖維進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，掃描線跳到-40~-90mV，停頓下插。調(diào)整微電極操縱器的細(xì)調(diào)，可見(jiàn)隨著電極尖端進(jìn)出細(xì)胞，基線突然上下跳動(dòng),即為靜息電位。待測(cè)量完該條肌纖維的跨膜靜息電位后，退出電極，另選一處，重復(fù)上述過(guò)程。將3次所得電位值平均，求得靜息電位。用30mmol/L KCl任氏液替換原來(lái)任氏液，20min后，觀看膜電位的變化。動(dòng)作電位的測(cè)量另取一縫匠肌，先測(cè)跨膜靜息電位，然后用單脈沖電刺激神經(jīng)并漸漸增加刺激強(qiáng)度，觀看動(dòng)作電位的波形，測(cè)量動(dòng)作電位的幅值和持續(xù)時(shí)間?！驹囼?yàn)留意事項(xiàng)】0.5~1μm，拉制好的電極可在顯微鏡下觀看。消逝。所以，肌肉要固定牢靠，使其進(jìn)展等長(zhǎng)收縮?！緺?zhēng)論思考題】試述靜息電位產(chǎn)生的離子機(jī)制。試述動(dòng)作電位產(chǎn)生的離子機(jī)制?！怖罱ㄈA〕試驗(yàn)4.6 大腦皮層誘發(fā)電位【試驗(yàn)?zāi)康摹坑^看大腦皮層誘發(fā)電位的引出和藥物對(duì)大腦皮層誘發(fā)電位的抑制?！驹囼?yàn)原理】大腦皮層的電活動(dòng)包括兩種形式：在無(wú)明顯刺激的狀況下，大腦皮層常常性自發(fā)產(chǎn)生節(jié)律性電位變化稱之為自發(fā)腦電活〔spontaneouselectricactivityofthebrai；另一種是感覺(jué)傳入系統(tǒng)〔包括感覺(jué)器官，感覺(jué)神經(jīng)或是感覺(jué)傳導(dǎo)途徑〕刺激時(shí)，在皮層某一局限區(qū)域引出的電位變化，稱之為皮層誘發(fā)電位〔 evokedcorticalpotential。常見(jiàn)的皮層誘發(fā)電位有軀體感覺(jué)誘發(fā)電位，聽(tīng)覺(jué)誘發(fā)電位和視覺(jué)誘發(fā)電位。在頭皮外表可記錄到的自發(fā)腦電活動(dòng)稱為腦電圖〔 halogram,EEG。翻開(kāi)顱骨直接從皮層外表記錄到的電位變化稱為皮層電圖〔electrocorticogram用于皮層感覺(jué)機(jī)能的定位。各種誘發(fā)電位均有肯定的反響形式，軀體感覺(jué)誘發(fā)的電位一般可區(qū)分為主反響投射有特定的中心區(qū)。主反響消滅在肯定的埋伏期之后，即與刺激有鎖時(shí)關(guān)系。5～12ms。由于誘發(fā)電位常常消滅于自發(fā)腦電波的背景上，因此較難區(qū)分。記錄誘發(fā)電位可用以下兩種方法使其于自發(fā)腦電波背景中突顯出來(lái)。一種是承受計(jì)算機(jī)進(jìn)展疊加平均計(jì)算，突出自發(fā)腦電波背景噪聲中的誘發(fā)電位。由于主反響與刺激有鎖時(shí)關(guān)系，而誘發(fā)電位的其他成分和自發(fā)腦電則無(wú)此關(guān)系，所以經(jīng)過(guò)計(jì)算機(jī)疊加和平均后，其他成分會(huì)相互抵消，而使主反響突顯出來(lái)。另外一種是通過(guò)持續(xù)較深度麻醉，降低自發(fā)腦電活動(dòng)，也會(huì)使誘發(fā)電位突出出來(lái)。本試驗(yàn)在持續(xù)麻醉狀態(tài)中，承受計(jì)算機(jī)疊加平均記錄誘發(fā)電位。【試驗(yàn)器材與藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)，定位儀，哺乳動(dòng)物手術(shù)器械，兔手術(shù)臺(tái)，牙科,10氯醛糖，0.5%戊巴比妥鈉，38℃生理鹽水，38℃石蠟油【試驗(yàn)對(duì)象】家兔【試驗(yàn)方法和步驟】手術(shù)操作抓取家兔稱重麻醉用10%氨基甲酸乙酯和1%氯醛糖的混合溶液，按5ml/kg0.5ml/kg的維持量20-24次/min小。動(dòng)物固定將麻醉家兔俯臥位固定于兔手術(shù)臺(tái)上。用定位儀將頭固定。在左右顴骨的骨突處作一小切口，鉆一小孔，將定位儀兩側(cè)的尖頭金屬棒嵌于小孔中，將前方的尖頭金屬棒插在兩上門(mén)齒齒縫之間固定。使兔頭處于水平位并略高于軀干。電極的安放引導(dǎo)電極的安放：剪去頭頂部手術(shù)區(qū)的兔毛，沿正中線切開(kāi)3～4cm，暴露頭骨。鈍性分別骨膜，暴露矢狀縫，冠狀縫和人字縫。在冠7～10毫米。假設(shè)有出血，可用骨蠟止血。腦表面滴加381毫米。太深易傷及大〔圖4-。刺激電極的安放：在安放引導(dǎo)電極的大腦皮層的對(duì)側(cè)肢體，后肢大腿外側(cè)中38℃石蠟油的棉花保護(hù)神經(jīng)，并夾閉傷口備用。圖4-5 大腦皮層誘發(fā)電位引導(dǎo)區(qū)示意圖儀器連接引導(dǎo)電極引導(dǎo)出來(lái)的誘發(fā)電位經(jīng)引導(dǎo)聯(lián)線接至BL-420E生物。單擊頂級(jí)菜單條上的“輸入信號(hào)”菜單項(xiàng)，1通道，在子菜單欄中選擇“腦電”一項(xiàng)。CH1CH2CH3CH4CH1CH2CH3CH4隔離器圖4-6 家兔大腦皮層誘發(fā)電位儀器連接圖觀看工程觀看大腦皮層自發(fā)電位的幅度和頻率。0.1～0.5ms20ms，串開(kāi)頭漸漸增加刺激強(qiáng)度，開(kāi)頭采樣疊加，1通道顯示誘發(fā)電位，同時(shí)顯示疊加次數(shù)，認(rèn)真觀看識(shí)別誘發(fā)電位。誘發(fā)電位主反響分為正波和負(fù)波，其正波向下，波形尖而窄，負(fù)波向上，波形寬而圓鈍。隨著刺激強(qiáng)度的增加，可在刺激偽跡后觀看到大腦皮層誘發(fā)電位。主反響與其前面的刺激偽跡具有鎖時(shí)關(guān)系。即從刺激偽跡到主反響消滅的埋伏期是固定的。觀看到誘發(fā)電位后停頓刺激。他設(shè)定同上，啟動(dòng)刺激，采樣疊加，觀看誘發(fā)電位的幅度大小。0.5戊巴比妥鈉〔1ml/k電位幅度的轉(zhuǎn)變。【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】引導(dǎo)電極不要壓得太緊，以免損傷皮層。神經(jīng)和皮層留意保溫順?lè)乐箍菰?。干擾?！緺?zhēng)論思考題】它是怎樣形成的？誘發(fā)電位代表的生理意義是什么？戊巴比妥鈉抑制大腦皮層誘發(fā)電位的機(jī)制。簡(jiǎn)述軀體感覺(jué)，視覺(jué)和聽(tīng)覺(jué)傳入系統(tǒng)的通路和皮層代表區(qū)?！脖R佳怡〕試驗(yàn)4.7 蛙心室肌細(xì)胞的動(dòng)作電位【試驗(yàn)?zāi)康摹坑^看蛙心室肌細(xì)胞動(dòng)作電位(actionpotential)的特征和腎上腺素的影響；學(xué)習(xí)微電極細(xì)胞內(nèi)紀(jì)錄的方法?！驹囼?yàn)原理】心肌細(xì)胞具有興奮性，在有效刺激作用下可發(fā)生興奮。靜息狀態(tài)下，心肌細(xì)胞膜內(nèi)、外兩側(cè)跨膜電位呈內(nèi)負(fù)、外正的極化狀態(tài)，此即靜息電位 (resting。興奮時(shí)，由于細(xì)胞膜多種離子通道依次的開(kāi)放和關(guān)閉，導(dǎo)致細(xì)胞膜內(nèi)、外兩側(cè)跨膜電位發(fā)生規(guī)律性地去極化和復(fù)極化，從而產(chǎn)生一次快速、可傳導(dǎo)的跨膜電位變化，稱為動(dòng)作電位。心室肌細(xì)胞動(dòng)作電位屬于快反響細(xì)胞動(dòng)作電位，由0化)1期(快速?gòu)?fù)極初期)2期(平臺(tái)期)3期(快速?gòu)?fù)極末期)和4期(靜息期)構(gòu)成。本試驗(yàn)承受細(xì)胞內(nèi)微電極記錄方法觀看蛙心室肌細(xì)胞在電刺激引起興用尖端極細(xì)(一般尖端外直徑在1Pm以下)的玻璃微(吸管)電極，刺入細(xì)胞膜內(nèi)引導(dǎo)膜內(nèi)電信號(hào)，信號(hào)電壓(或電流)輸入微電極放大器，再經(jīng)過(guò)生物電放大和記錄系統(tǒng)，得以直接測(cè)定跨膜靜息膜電位和跨膜電位差大小的轉(zhuǎn)變。微極尖端的高電阻，從而引導(dǎo)出最接近實(shí)際大小的信號(hào)電壓。【試驗(yàn)對(duì)象【試驗(yàn)器材與藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、電子刺激器及隔離器、微電極放大器、微電極操縱器、刺激電極操縱器、監(jiān)聽(tīng)器(非必需)、雙筒解剖顯微鏡及照明裝置。防震試驗(yàn)容積的標(biāo)本槽及硅橡膠塊(或石蠟作底平面的培育皿)、蛙類手術(shù)器(3mol/LKCI1030Mn)Ag—AgCImol/LKCI溶液、1:10，000腎上腺素溶液?！驹囼?yàn)方法和步驟】離體蛙心室肌制備破壞腦、脊髓，暴露心臟，剪快活包，摘出心臟，置于任氏液中。沿動(dòng)脈干剪快活室，在心室腔內(nèi)剪下一條較長(zhǎng)的肌肉柱。用小鋼針將〔不行過(guò)分牽拉。槽內(nèi)任氏1mm。Ag—AgCl電極絲插入微電極內(nèi)，電極絲另一端連接微電極放大器探頭正極，探頭的負(fù)極連接在與標(biāo)本線應(yīng)盡量短，避開(kāi)增大分布電容而減弱高頻響應(yīng)。儀器連接 到BL-420E系統(tǒng)。選擇信號(hào)輸入菜單“循環(huán)系統(tǒng)—心肌細(xì)胞動(dòng)作電位。將刺激器頻率調(diào)到30次/分，波寬～1ms10V1/錄時(shí)置于工作位置，校正時(shí)置于校正位置。在略大于閾強(qiáng)度的位置。觀看工程：刺入心室肌細(xì)胞內(nèi)。在刺入細(xì)胞膜內(nèi)的瞬間，掃描線會(huì)突然跳動(dòng)到-70~-90mV，且監(jiān)聽(tīng)器會(huì)發(fā)出響聲，馬上停頓推動(dòng)，即為靜息電位。在微電極尖端剛觸及細(xì)胞10μm以上，電極尖端便可刺入細(xì)胞內(nèi)。心室肌細(xì)胞動(dòng)作電位在靜息電位穩(wěn)定的狀況下，刺激標(biāo)本，即可觀看到動(dòng)作電位波形、波幅準(zhǔn)時(shí)程。1100003～5滴，觀看動(dòng)作電位波形、幅值、時(shí)程及平臺(tái)高度的變化。【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】走動(dòng)，避開(kāi)碰撞、搖動(dòng)試驗(yàn)臺(tái)及臺(tái)上的試驗(yàn)裝置，并保持室內(nèi)安靜。應(yīng)避開(kāi)牽拉對(duì)標(biāo)本的損傷。紀(jì)錄不穩(wěn)定?！緺?zhēng)論思考題】試述心室肌細(xì)胞靜息電位的形成機(jī)制？心室肌細(xì)胞動(dòng)作電位分期及其形成機(jī)制？腎上腺素對(duì)心室肌細(xì)胞動(dòng)作電位的影響及其機(jī)理？〔胡景鑫〕試驗(yàn)4.8 減壓神經(jīng)放電【試驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)哺乳動(dòng)物神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)方法；觀看家兔在體減壓神經(jīng)傳入沖動(dòng)的發(fā)放及影響因素?！驹囼?yàn)原理】壓力感受性反射(baroreceptorreflex)是調(diào)整心血管活動(dòng)的重要反射，其感受器位于頸動(dòng)脈竇和主動(dòng)脈弓血管壁外膜下的感覺(jué)神經(jīng)末梢，對(duì)動(dòng)脈壁的牽張刺激敏感,稱動(dòng)脈壓力感受器(baroreceptor)。當(dāng)動(dòng)脈血壓〔急性〕變化時(shí)，如上升到肯定程度，就引起傳入沖動(dòng)增加，使心迷走緊急加強(qiáng)，心交感緊急和交感縮血管緊急減弱，效應(yīng)是心率減慢、動(dòng)脈血壓下降。因此，該反射又稱為減壓反射。其生理意義是保持血壓的相對(duì)穩(wěn)定。兔的主動(dòng)脈弓壓力感受器傳入神經(jīng)纖維自成一束，與迷走神經(jīng)和頸交感神經(jīng)伴行，稱為減壓神經(jīng)(depressornerve)?！驹囼?yàn)動(dòng)物】家兔【試驗(yàn)器材和藥品】BL-420E生理試驗(yàn)系統(tǒng)、血壓換能器、三向可調(diào)支架、監(jiān)聽(tīng)器、兔手術(shù)臺(tái)、哺乳類動(dòng)物手術(shù)器械一套、動(dòng)脈插管、注射器及針頭、玻璃分針、紗布、有色絲線。生理鹽水、20%氨基甲酸乙酯、0.5%肝素生理鹽水、1:10,000去甲腎上腺素、1:100,000乙酰膽堿?！驹囼?yàn)方法和步驟】動(dòng)物手術(shù)經(jīng)耳緣靜脈注入，待動(dòng)物麻醉后，背位固定在兔臺(tái)上?？梢?jiàn)一側(cè)的血管神經(jīng)叢，即為頸總動(dòng)脈鞘，其中包括了頸總動(dòng)脈、迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)和減壓神經(jīng)。分別左側(cè)頸總動(dòng)脈并插管術(shù)。〔另兩條為迷走神經(jīng)和交感神經(jīng)。用玻璃分針認(rèn)真分別出右側(cè)的減壓神經(jīng)。游離2～3cm左右，穿兩根經(jīng)生理鹽水潮濕的絲線于神經(jīng)下方備用。并用38C生理鹽水潮濕神經(jīng)(或滴少許石蠟油防止神經(jīng)枯燥)。BL-420E系統(tǒng)的前面板上。觀看工程：翻開(kāi)計(jì)算機(jī)，啟動(dòng)BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)。選擇工程“循電極上。神經(jīng)不要拉扯過(guò)緊，避開(kāi)損傷，電極不行觸及四周組織，頸部切口處妥當(dāng)接地。適當(dāng)調(diào)整引導(dǎo)部位、增益、濾波等，以獲得最正確放電曲線。一簇群集放電的波形呈三角形，幅度先大后小，且隨血壓凹凸而變(4-7)。通過(guò)監(jiān)聽(tīng)器能聽(tīng)到火車開(kāi)動(dòng)的“隆隆”聲音。圖4-7 減壓神經(jīng)放電及血壓曲線血壓變化對(duì)減壓神經(jīng)放電的影響：①向耳緣靜脈注射乙酰膽堿溶液0.3～正常或不再消滅大的升降時(shí)，向耳緣靜脈注射去甲腎上腺素溶液0.5～1ml，觀看血壓與減壓神經(jīng)群集放電頻率的變化及兩者的關(guān)系。端神經(jīng)放電?！驹囼?yàn)留意事項(xiàng)】將引導(dǎo)電極向外周端移動(dòng)。電極不行觸及四周組織。頸部切口應(yīng)用導(dǎo)線接地?！緺?zhēng)論思考題】減壓神經(jīng)放電與動(dòng)脈血壓有何關(guān)系？刺激減壓神經(jīng)中樞端及外周端，神經(jīng)放電如何？為什么？(董頎)試驗(yàn)4.9膈神經(jīng)放電【試驗(yàn)?zāi)康摹渴湛s節(jié)律來(lái)源的生疏?！驹囼?yàn)原理】節(jié)律性呼吸運(yùn)動(dòng)〔respiratorymovement〕和肋間神經(jīng)〔傳出神經(jīng)〕引起膈肌和肋間肌〔效應(yīng)器〕的節(jié)律性舒縮活動(dòng)，從而引起節(jié)律性呼吸運(yùn)動(dòng)?！驹囼?yàn)器材和藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、引導(dǎo)電極、壓力換能器、三向可調(diào)支架、兔手術(shù)臺(tái)、哺乳類動(dòng)物手術(shù)器械一套、氣管插管、注射器及針頭、玻璃分針、紗布、20%CO2的氣囊。尼可剎米注射液?！驹囼?yàn)動(dòng)物】家兔【試驗(yàn)方法和步驟】動(dòng)物手術(shù)固定在兔臺(tái)上。的切口。分別皮下組織及肌肉，找到氣管，并作氣管插管術(shù)。3、4、51～2cm4、51/5處與臂叢穿插，在斜方肌的腹緣進(jìn)入胸腔。在臂叢上方用玻璃分針?lè)謩e膈神經(jīng)約2cm，穿線于外周端(近心臟)備用。分別頸部?jī)蓚?cè)迷走神經(jīng)并穿線備用。儀器連接和系統(tǒng)操作能器。選擇“試驗(yàn)工程”菜單的“呼吸試驗(yàn)－膈神經(jīng)放電”。依據(jù)監(jiān)聽(tīng)器發(fā)出的聲音和信號(hào)窗口顯示的波形，適當(dāng)調(diào)整膈神經(jīng)引導(dǎo)電極的位置或調(diào)整增益、濾波等參數(shù)獵取最正確試驗(yàn)效果。觀看工程拉扯過(guò)緊，避開(kāi)損傷，電極不行觸及四周組織，頸部切口處妥當(dāng)接地。觀看正常呼吸運(yùn)動(dòng)與膈神經(jīng)群集放電兩者的幅度和節(jié)律的關(guān)系。屏幕同4-8所示。CO2氣囊上CO2CO2進(jìn)入氣管內(nèi)。觀看膈神經(jīng)放電和呼吸運(yùn)動(dòng)的變化。當(dāng)呼吸恢復(fù)后，由兔耳緣靜脈注入稀釋尼可剎米1m〔50m，觀察膈神經(jīng)放電和呼吸運(yùn)動(dòng)的變化。作肺牽張反射時(shí)膈神經(jīng)放電的觀看30ml注射器，觀看一段呼吸運(yùn)動(dòng)。看準(zhǔn)在吸氣相之末，先將氣管套管的另一側(cè)管堵塞，然后馬上將注射器內(nèi)事先裝好的空氣約20ml快速注入肺內(nèi)，使肺維持在擴(kuò)張狀態(tài)，觀看呼吸運(yùn)動(dòng)和膈神經(jīng)放電有何變化？當(dāng)呼吸運(yùn)動(dòng)恢復(fù)后，開(kāi)放堵塞口。休息片刻，待呼吸運(yùn)動(dòng)平穩(wěn)15～20ml使肺維持在萎縮狀態(tài)。觀看呼吸運(yùn)動(dòng)和膈神經(jīng)放電的變化。當(dāng)呼吸運(yùn)動(dòng)恢復(fù)后，開(kāi)放堵塞口。以上觀看工程可反復(fù)進(jìn)展幾次。觀看膈神經(jīng)放電有何變化？剪斷右側(cè)迷走神經(jīng)，膈神經(jīng)放電又有何變化？在切斷兩側(cè)迷走神經(jīng)后，重復(fù)上述向肺內(nèi)注氣或從肺內(nèi)抽氣試驗(yàn)。觀看呼吸運(yùn)動(dòng)及膈神經(jīng)放電有否轉(zhuǎn)變?！驹囼?yàn)留意事項(xiàng)】

4-8膈神經(jīng)放電及呼吸曲線假設(shè)覺(jué)察50Hz及其倍頻干擾嚴(yán)峻，檢查電極是否接觸良好或動(dòng)物、儀器是否正確接地。即要有前后比照。用注射器自肺內(nèi)抽氣時(shí)，切勿過(guò)多，以免引起動(dòng)物死亡。【爭(zhēng)論思考題】膈神經(jīng)的放電形式與減壓神經(jīng)相比，有何不同？解釋每項(xiàng)試驗(yàn)的結(jié)果。試述黑—伯反射的反射弧及其生理意義?！苍S繼德〕試驗(yàn)4.10 胃腸運(yùn)動(dòng)觀看【試驗(yàn)?zāi)康摹坑^看兔在淺麻醉狀況下胃腸運(yùn)動(dòng)的各種形式；神經(jīng)和某些藥物對(duì)胃腸道運(yùn)動(dòng)的影響?！驹囼?yàn)原理】胃腸道各種形式的運(yùn)動(dòng)都是由胃腸平滑肌〔gastrointestinalsmoothmuscle〕的活動(dòng)實(shí)現(xiàn)的。胃腸平滑肌運(yùn)動(dòng)的形式包括緊急性收縮(toniccontraction)、蠕動(dòng)contraction〕等。其主要作用在于對(duì)食物進(jìn)展機(jī)械性消化〔mechanicaldigestion，并使食物與消化液充分混合，有利于食物的化學(xué)性消化chemicaldigestio〕和吸取〔absorption。在體內(nèi)，消化管的運(yùn)動(dòng)受神經(jīng)(包括各種神經(jīng)末梢釋放的遞質(zhì))和激素〔hormone〕的調(diào)整。當(dāng)交感神經(jīng)興奮時(shí)，胃腸道運(yùn)動(dòng)減弱；而迷走神經(jīng)興奮時(shí)，胃腸道運(yùn)動(dòng)加強(qiáng)?！驹囼?yàn)對(duì)象】兔【試驗(yàn)器材和藥品】兔手術(shù)臺(tái)、哺乳類動(dòng)物手術(shù)器械、保護(hù)電極、BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、在體胃腸張力換能器、注射器、蒂羅德液〔即臺(tái)氏液、3％戊巴比妥鈉溶液、1：10,000腎上腺素〔epinephrine〕溶液、1:100,000乙酰膽堿〔acetylcholine，Ach〕溶液、斯的明〔neostigmine〕注射液、阿托品〔atropine〕注射液?！驹囼?yàn)方法和步驟】手術(shù)操作麻醉、固定試驗(yàn)前23％戊巴比妥(1ml/kg)進(jìn)展淺麻醉。氣管插管淺麻醉之后馬上作頸部正中切口，分別出氣管，行氣管插管術(shù)。暴露胃腸將兔腹部毛剪掉，從胸骨劍突下沿腹正中線剖開(kāi)腹壁，長(zhǎng)約10cm，暴露胃腸。備用。用溫?zé)猁}水紗布將小腸推向右側(cè)，在左側(cè)腎上腺的上方腹后壁處，找出左側(cè)內(nèi)臟大神經(jīng)，分別并穿線備用。(在體胃腸張力換能器)縫合在胃腸壁上，固定。38℃溫?zé)岬纳睇}水灌入腹腔，再用一塊拱形的透亮塑連接試驗(yàn)裝置在體胃腸張力換能器連接BL-420E系統(tǒng)的通道，BL-420E系統(tǒng)的刺激輸出連接保護(hù)電極。翻開(kāi)計(jì)算機(jī)，啟動(dòng)BL-420E生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)。BL-420E系統(tǒng)主菜單“輸入信號(hào)／1BL-420E系統(tǒng)放大器、采樣和刺激器參數(shù)設(shè)置：刺激強(qiáng)度在5V以上，30s～1min50ms20：150～200。觀看工程(胃腸有無(wú)蠕動(dòng)，如有蠕動(dòng)，記錄蠕動(dòng)頻率，行走的方向及起源；然后每隔幾分鐘賜予以下刺激，觀看胃腸運(yùn)動(dòng)有何變化。刺激強(qiáng)度，并反復(fù)刺激直至反響明顯。加刺激強(qiáng)度，并反復(fù)刺激直至反響明顯。在一段腸管上滴加1:100,000Ach溶液5～10滴，觀看胃腸運(yùn)動(dòng)變化。待反響明顯后，馬上用生理鹽水沖洗干凈。1:10,0005～10。待反響明顯后，馬上用生理鹽水沖洗干凈。由耳緣靜脈注射斯的明0.2～0.3mg，或滴加在腸管上，觀看胃腸運(yùn)動(dòng)的變化。【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】麻醉動(dòng)物要保溫，手術(shù)操作要輕松。電刺激強(qiáng)度要適中，不行過(guò)強(qiáng)。動(dòng)，應(yīng)隨時(shí)用溫鹽水潮濕胃腸?！緺?zhēng)論思考題】試比較平滑肌、心肌和骨骼肌生理特性的異同點(diǎn)?各有何生理意義??〔涂永生〕試驗(yàn)4.11 大白鼠的胃液分泌【試驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)測(cè)定胃液分泌的試驗(yàn)方法〔連續(xù)灌注法〕;通過(guò)對(duì)麻醉大鼠進(jìn)展急性灌流，測(cè)定其灌流流出液胃酸排出量；響?！驹囼?yàn)原理】的主要成分之一。由胃腺的壁細(xì)胞〔parietalcell,oroxynticcel〕分泌。胃酸的分泌受神經(jīng)與體液的調(diào)整。乙酰膽堿〔acetylcholin而刺激胃酸分泌的內(nèi)源性物質(zhì)，其作用可被各自的受體阻斷劑所對(duì)抗。乙酰膽堿是迷走神經(jīng)和局部?jī)?nèi)在神經(jīng)從釋放的遞質(zhì)，可直接作用于壁細(xì)胞上的膽堿能受體〔M3〕而刺激胃酸分泌；促胃液素是由胃竇和上段小腸粘膜中的G細(xì)胞合成和釋放的肽類物質(zhì)，主要通過(guò)血液循環(huán)作用于壁細(xì)胞引起胃酸分泌增加。組胺是由胃泌酸區(qū)粘膜中腸嗜鉻細(xì)胞分泌，通過(guò)旁分泌的方式，與壁細(xì)胞膜上H2受體結(jié)合而促使胃酸的分泌。腸嗜鉻細(xì)胞上存在促胃液素受體和膽堿能受體，促胃液素和乙酰膽堿可通過(guò)作用于各自的受體引起腸嗜鉻細(xì)胞釋放組胺而調(diào)整胃酸分泌。H2受體的阻斷劑如西咪替丁〔cimetidine〕可阻斷組胺刺激引起的胃酸分泌。【試驗(yàn)對(duì)象】大鼠【試驗(yàn)器材和藥品】pH〔1ml10ml、2.0mm20cm之塑料管〔食管插管、直徑3％戊巴比妥鈉、0.01NNaOH、0.1％五肽促胃液素、1％阿托品、25替丁、1％酚肽、10-5氨甲酰膽堿、10-4磷酸組織胺。【試驗(yàn)方法和步驟】手術(shù)操作試驗(yàn)前動(dòng)物預(yù)備取體重18～24h，自由飲水。麻醉、固定用(也可用烏拉坦麻。背部固定在大鼠臺(tái)上1.5～2.0cm的皮膚切口，用止血鉗分開(kāi)頸部腺體和肌肉，暴露并分別氣管，吸凈氣管內(nèi)分泌物，行氣管插管術(shù)。食管插管分別食管，留意勿傷及頸部的血管和神經(jīng)。剪開(kāi)食管，將食暴，否則可能刺破食管或胃壁。將插管與食管一并結(jié)扎固定。將食管插管另一端連至恒速灌注泵或恒壓灌流瓶。幽門(mén)插管再由劍突下剪開(kāi)皮膚，沿腹白線翻開(kāi)腹腔，約3厘米長(zhǎng)，用溫?zé)嵘睇}水潮濕的紗布留神牽出十二指腸，特別留意勿傷及胃和十二指腸的神1.5腸側(cè)線進(jìn)展結(jié)扎，幽門(mén)側(cè)線做一松結(jié)。在兩線之間剪開(kāi)十二指腸，將幽門(mén)插管經(jīng)十二指腸通過(guò)幽門(mén)，順勢(shì)插入胃內(nèi)，快速結(jié)扎固定，盡可能削減出血及對(duì)胃竇部的刺激。然后用指尖輕輕將胃夾起進(jìn)展檢查(切忌牽拉大小網(wǎng)膜)，假設(shè)胃內(nèi)沒(méi)有固體物，灌流液流出通暢，胃切開(kāi)步驟可略去，只須用生理鹽水稍加沖洗即可。假設(shè)胃(胃底部)大彎側(cè)進(jìn)展切開(kāi)，取出胃內(nèi)37℃生理鹽水，通過(guò)食道套管緩緩注入胃內(nèi)，一邊輕輕按壓胃部，檢查流出是否通暢，流出液有無(wú)血跡殘?jiān)⑽赣拈T(mén)套管另端放置體外不動(dòng)，用生理鹽水潤(rùn)濕的棉花掩蓋腹部切口以防枯燥。仰臥位改為側(cè)臥位，以便使胃灌流通暢進(jìn)展。對(duì)側(cè)肢體的縛繩也應(yīng)放松。〔4-9〕手術(shù)完畢后，使動(dòng)物穩(wěn)定半小時(shí)可開(kāi)頭收集樣品。用注射器將10m13710min10min1個(gè)胃液樣品，第一個(gè)胃液樣品棄去。0.01NNaOH10min胃酸排出量，換算成微克當(dāng)量(Eq)／10min來(lái)表示。觀看工程個(gè)樣品數(shù)值接近后，再進(jìn)展以下各項(xiàng)試驗(yàn)。5s，間隔20s，30s后按上法收集樣品和測(cè)定胃酸排出量。組織胺的泌酸作用切斷迷走神經(jīng)，待20min后，收集一次比照樣品，0.11ml/kg6～8個(gè)樣品，測(cè)其胃酸排出量。30.11ml/kg6～8個(gè)樣品，測(cè)定1個(gè)樣品中的胃酸排出量。10-4五肽胃泌ml/kg6～8個(gè)樣品，測(cè)定其胃酸排出量。氨甲酰膽堿的泌酸作用收集比照樣品后，肌肉注射10-51ml/kg6～8個(gè)樣品，測(cè)定其胃酸排出量。10-51ml/kg6～8個(gè)樣品，測(cè)定其胃酸排出量。7pHpH值。將結(jié)果繪制成坐標(biāo)圖?！驹囼?yàn)留意事項(xiàng)】

4-9收集大鼠胃酸的試驗(yàn)裝置關(guān)鍵。l0s以上為準(zhǔn)。每次滴定顏色要全都，不行有時(shí)深有時(shí)淺。手術(shù)后要放松對(duì)四肢的束縛，以免大鼠因苦痛而掙扎。【爭(zhēng)論思考題】體內(nèi)Ach、組織胺分別來(lái)自何處？以何方式調(diào)整胃液分泌？?〔涂永生〕試驗(yàn)4.12 蛙心起博點(diǎn)期前收縮代償間歇【試驗(yàn)?zāi)康摹?pacemaker)和蛙心不同部位的自律性凹凸。學(xué)習(xí)在體蛙心跳曲線的記錄方法，通過(guò)對(duì)期前收縮(prematuresystole)和代償間歇(compensatorypause)的觀看，了解心肌興奮性的變化特點(diǎn)。【試驗(yàn)原理】心房?jī)?nèi)傳導(dǎo)組織，傳播到整個(gè)心房，竇房結(jié)的興奮通過(guò)三條結(jié)間束傳到房室交界區(qū)，然后通過(guò)房室束和左右束支傳到浦肯野纖維網(wǎng)引起心室肌興奮，再直接通過(guò)心室肌將興奮由內(nèi)膜測(cè)向外膜測(cè)心室肌擴(kuò)布，引起整個(gè)心室興奮心肌的興奮過(guò)程分為有效不應(yīng)期(effectiverefractoryperiod)，相對(duì)不應(yīng)期(relativerefractoryperiod)和超常期(supranormalperiod)，在有效不應(yīng)期內(nèi)，再賜予任何刺激心肌不會(huì)起反響，在相對(duì)不應(yīng)期內(nèi)，可以對(duì)刺激起反響產(chǎn)生一次興奮和收縮，分別稱為期前興奮和期前收縮。當(dāng)緊接在期前興奮后的一次竇房結(jié)興奮正前收縮之后消滅的一段較長(zhǎng)的心室舒張期稱為代償間歇?！驹囼?yàn)動(dòng)物】蛙或蟾蜍【試驗(yàn)器材和藥物】生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)，機(jī)械-電換能器，刺激電極，蛙類手術(shù)器械，蛙心夾，滴管，線，離心管，任氏液，鐵支架?！驹囼?yàn)方法與步驟】觀看蛙心起博點(diǎn)部皮膚并沿中線剪開(kāi)骨，再剪開(kāi)胸包，暴露心臟。4-10識(shí)別靜脈竇、心房和心室。觀看它們的跳動(dòng)狀況并計(jì)算它們?cè)趩挝粫r(shí)間內(nèi)的跳動(dòng)次數(shù)。圖4-10 蛙心〔竇房溝。然后將預(yù)先穿好的線沿著半月形白線的近心尖側(cè)進(jìn)展結(jié)扎，以阻斷靜脈竇和心房的傳導(dǎo)。觀看心房的跳動(dòng)是否停頓？靜脈竇是否仍正常跳動(dòng)？它們的節(jié)律是否全都？期前收縮、代償間歇另取蛙一只，用刺針破壞腦和脊髓，暴露心臟。BL-420E試驗(yàn)系統(tǒng)要求連接張力換能器和刺心夾上的絲線系于張力換能器的受力片上，并使線拉力適當(dāng)。③刺激電極固定于支架上并使心室恰好處于刺激電極的兩極之間，保證無(wú)論心室處在收縮期或舒張波。期前收縮及代償間歇①選擇適當(dāng)強(qiáng)度的閾上刺激用同等強(qiáng)度的單刺激分別在心室舒張的早、中、晚期刺激心室。觀看心跳曲線有何變化？大刺激強(qiáng)度后，心跳曲線又有何變化？否發(fā)生變化？④對(duì)心跳曲線加以分析，比照心室收縮期和舒張期的興奮性變化。【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】破壞腦和脊髓要完全，以免肢體的活動(dòng)干擾記錄。試驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)常常用任氏液潮濕心臟。安放在心室上的刺激電極應(yīng)避開(kāi)短路。能器倒向。選擇刺激強(qiáng)度大小時(shí)可先用刺激電極刺激蛙腹壁肌肉，以檢查強(qiáng)度是有效?！緺?zhēng)論思考題】出什么結(jié)論？思考期前收縮和代償間歇產(chǎn)生的緣由。心肌的有效不應(yīng)期有何意義？留神率過(guò)速或過(guò)緩時(shí)，期前收縮后是否會(huì)消滅代償間歇？為什么？〔胡景鑫〕試驗(yàn)4.13 動(dòng)脈血壓的調(diào)整【試驗(yàn)?zāi)康摹坑^看神經(jīng)和體液因素對(duì)血壓和心率的影響；學(xué)習(xí)哺乳動(dòng)物動(dòng)脈血壓〔bloodpressure〕的直接描記方法?！驹囼?yàn)原理】(reflex)的形式實(shí)現(xiàn)的，包括壓力感受性反射 (baroreceptorreflex)、心肺容量感受性(cardiopulmonaryreceptor)反射、化學(xué)感受性(chemoreceptor)反射等，通過(guò)轉(zhuǎn)變交感及副交感傳出神經(jīng)的緊急性活動(dòng)，調(diào)整心血管機(jī)能；體液調(diào)整則涉及腎素－血管緊急素系統(tǒng)〔RAS、腎上腺素和去甲腎上腺素、加壓素、內(nèi)皮縮血管因子〔EDC、內(nèi)皮舒血管因子〔EDR、激肽、前列腺素〔PGs〕等多個(gè)方面。3個(gè)方面，調(diào)整動(dòng)脈血壓。【試驗(yàn)動(dòng)物】家兔【試驗(yàn)器材和藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)，血壓換能器，兔手術(shù)臺(tái)，哺乳動(dòng)物手術(shù)器械11個(gè)，絲線〔黑色、白色粗線〕假設(shè)干。3％戊巴比妥鈉，生理鹽水，0.3％肝素，1：10,000去甲腎上腺素5：100,000腎上腺素，1：100，000乙酰膽堿。【試驗(yàn)方法和步驟】3%1ml/kg麻醉，固定。手術(shù)：分別右側(cè)減壓神經(jīng)、迷走神經(jīng)和頸總動(dòng)脈作頸部正中切口6～7cm，分別皮下組織及肌肉，將頸部氣管旁軟組織外翻，可見(jiàn)與氣管平行的一側(cè)血管神經(jīng)叢,即為頸總動(dòng)脈鞘，包括了頸總動(dòng)脈和伴行的三條神經(jīng)——最粗的迷走神經(jīng)、最細(xì)的減壓神經(jīng)、交感神經(jīng)。用玻璃分針?lè)謩e出右側(cè)減壓神經(jīng)、迷走神經(jīng)和頸總動(dòng)脈，各穿兩根不同顏色的絲線備用。左側(cè)頸總動(dòng)脈分別、插管：在氣管左側(cè)用玻璃分針?lè)謩e出一段至少長(zhǎng)3~4cm的頸總動(dòng)脈，穿兩根線備用。結(jié)扎遠(yuǎn)心端，在近心端夾上動(dòng)脈夾〔二者距2~3cmV動(dòng)脈插管，用絲線固定。BL-420EBL-420E系統(tǒng)，選擇工程“循環(huán)試驗(yàn)－兔動(dòng)脈觀看工程〔1〕正常血壓曲線描計(jì)：血管運(yùn)動(dòng)中樞周期性的緊急性變化有關(guān)。神經(jīng)體液因素對(duì)血壓、心率的影響①牽拉頸總動(dòng)脈：手持左側(cè)頸總動(dòng)脈遠(yuǎn)心端結(jié)扎線，向心臟方向以2~5次/5~10秒，觀看血壓、心率變化。5~10秒，觀看血壓、心率變化。化。再用雙線結(jié)扎減壓神經(jīng)，在結(jié)扎線中間剪斷神經(jīng)，以一樣刺激參數(shù)分別刺激其中樞端和外周端，觀看血壓、心率的變化。觀看血壓、心率變化。1∶10,0000.2~0.3ml，觀看血壓、心率變化。⑥腎上腺素 腎上腺素0.2~0.4ml，觀看血壓、心率變化。⑦乙酰膽堿 乙酰膽堿0.2~0.3ml，觀看血壓、心率變化?！驹囼?yàn)留意事項(xiàng)】保護(hù)耳緣靜脈，先從耳尖部進(jìn)針。分別血管、神經(jīng)時(shí)要盡可能去除四周組織。每項(xiàng)試驗(yàn)后，應(yīng)等血壓、心率恢復(fù)并穩(wěn)定后再進(jìn)展下一工程的觀看。每次注射藥品后，均需用注射器推注少量生理鹽水，以防藥物殘留于針頭及局部靜脈內(nèi)?！緺?zhēng)論思考題】化？為什么？機(jī)理？〔董頎〕試驗(yàn)4.14 呼吸運(yùn)動(dòng)的調(diào)整【試驗(yàn)?zāi)康摹课\(yùn)動(dòng)的影響?！驹囼?yàn)原理】呼吸運(yùn)動(dòng)能夠有節(jié)律地進(jìn)行，并與機(jī)體代謝相適應(yīng)，是由于呼吸中樞〔respiratorycenter〕調(diào)整的原因。體內(nèi)外各種刺激均可以作用于呼吸中樞或通過(guò)不同的感受器反射性地影響呼吸運(yùn)動(dòng)?！驹囼?yàn)器材和藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、壓力換能器、保護(hù)電極、刺激器。哺乳類動(dòng)物手1套、兔手術(shù)臺(tái)、注射器、布滿CO21個(gè)、鈉石灰瓶。3％戊巴比妥鈉、生理鹽水、3%乳酸、尼克剎米注射液?！驹囼?yàn)動(dòng)物】2.5kg?！驹囼?yàn)方法和步驟】動(dòng)物手術(shù)1ml/Kg體重劑量從兔耳緣靜脈注射，待麻醉后，仰臥位,自胸骨上端向頭部作一正中切口，約6cm。分別皮儀器連接和系統(tǒng)操作將壓力換能器連接在BL-420E1通道“試驗(yàn)工程”效果。觀看工程觀看正常呼吸運(yùn)動(dòng)，見(jiàn)圖4-11。CO2CO2氣囊上的注射器針頭CO2進(jìn)入氣管內(nèi)，觀看呼吸運(yùn)動(dòng)的變化。缺O(jiān)2當(dāng)呼吸恢復(fù)后，將氣管插管的側(cè)管通過(guò)鈉石灰與盛有肯定容量空CO2可被鈉石灰吸取，故隨著呼O2愈來(lái)愈少，觀看呼吸運(yùn)動(dòng)的變化。長(zhǎng)的橡皮管連接在側(cè)管，家兔通過(guò)這根長(zhǎng)管進(jìn)展呼吸，觀看經(jīng)一段時(shí)間后呼吸運(yùn)動(dòng)有何變化，呼吸發(fā)生明顯變化后即去掉橡皮管，使其恢復(fù)正常。5ml3%2ml，觀看呼吸運(yùn)動(dòng)的變化。1ml〔50m，觀看呼吸運(yùn)動(dòng)的變化。剪斷迷走神經(jīng)當(dāng)呼吸恢復(fù)后，結(jié)扎左側(cè)迷走神經(jīng)，在結(jié)扎線近心端剪斷左側(cè)迷走神經(jīng)，觀看呼吸運(yùn)動(dòng)有何變化。剪斷右側(cè)迷走神經(jīng)，觀看呼吸運(yùn)動(dòng)又有何變化。刺激迷走神經(jīng)中樞端觀看呼吸運(yùn)動(dòng)的變化?！驹囼?yàn)留意事項(xiàng)】

4-11兔呼吸曲線再進(jìn)展插管。前后比照。外漏，引起動(dòng)物躁動(dòng)。用保護(hù)電極刺激迷走神經(jīng)中樞端之前要先檢查刺激器的輸出?！緺?zhēng)論思考題】O2、CO2及乳酸增多時(shí)對(duì)呼吸的影響機(jī)制有何不同？迷走神經(jīng)在節(jié)律性呼吸運(yùn)動(dòng)中起何作用？增大無(wú)效腔對(duì)呼吸運(yùn)動(dòng)有何影響？其作用機(jī)制如何？〔許繼德〕試驗(yàn)4.15 胸內(nèi)壓和氣胸【試驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)測(cè)定胸內(nèi)壓〔intrapleuralpressure〕的方法，并觀看影響胸內(nèi)壓變化的因素。【試驗(yàn)原理】安靜呼吸時(shí)，胸膜腔內(nèi)的壓力〔胸內(nèi)壓〕雖隨呼氣 (expiration)和吸氣而升降，但始終低于大氣壓，稱為胸內(nèi)負(fù)壓。假設(shè)因創(chuàng)傷或其他緣由使胸膜與大氣相通，因外界空氣進(jìn)入胸腔形成氣胸〔pneumothorax，此時(shí)胸內(nèi)壓便和大氣壓相等，不再呈現(xiàn)負(fù)壓，肺亦隨之萎縮?！驹囼?yàn)動(dòng)物】家兔【試驗(yàn)器材和藥品】BL-420E〔或粗的穿刺針頭、氣管套管、50厘米長(zhǎng)橡皮管一條、20毫升注射器、固定架，壓力換能器?！驹囼?yàn)方法和步驟】1．預(yù)備手術(shù)及試驗(yàn)裝置1ml/Kg體重劑量從兔耳緣靜脈注射，待麻醉后，仰臥位3cm長(zhǎng)的橡皮管。一側(cè)管連接到壓力換能器上。在兔右腋前線第4-5肋骨之間作一長(zhǎng)約2入點(diǎn)處用止血鉗稍稍分別，經(jīng)此點(diǎn)將胸內(nèi)套管快速插入胸腔內(nèi)，旋動(dòng)套管螺旋將胸內(nèi)套管固定于胸壁。用膠布將針尾固定在胸部皮膚上，防止針頭的移位或滑脫。胸內(nèi)套管〔或穿刺針頭尾端〕連接到壓力換能器上。4-12安靜呼吸時(shí)胸內(nèi)壓和呼吸運(yùn)動(dòng)曲線儀器連接和系統(tǒng)操作將上述壓力換能器分別連接在BL-420E12通道輸入接口上。選擇“輸入”菜單中的“1選擇“輸入”菜單中的“2適當(dāng)調(diào)整增益、濾波等參數(shù)，以獵取最正確試驗(yàn)效果。3．觀看工程安靜呼吸時(shí)胸內(nèi)壓和呼吸運(yùn)動(dòng)曲線,4-12。胸內(nèi)壓曲線，觀看此時(shí)的胸內(nèi)壓與安靜呼吸時(shí)的胸內(nèi)壓有何異同。氣胸沿第lcm長(zhǎng)的創(chuàng)口，使胸膜腔與大氣相通，引起氣胸。觀看胸內(nèi)壓曲線是否仍隨呼吸而升降？【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】插胸內(nèi)套管時(shí)，切口不宜過(guò)大，動(dòng)作要快速，以免空氣漏入胸膜腔過(guò)多。血過(guò)多。胸內(nèi)壓可重呈現(xiàn)負(fù)壓。【爭(zhēng)論思考題】分析胸內(nèi)壓的形成機(jī)制。安靜呼吸時(shí)，胸內(nèi)壓為何始終低于大氣壓？〔許繼德〕試驗(yàn)4.16 影響尿生成的因素【試驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)用膀胱插管法記錄尿量的方法，觀看各因素對(duì)尿生成的影響?！驹囼?yàn)原理】試驗(yàn)條件下施加影響上述過(guò)程的因素，觀看尿量及尿成分的變化。【試驗(yàn)器材與藥品】BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、壓力換能器、記滴器、保護(hù)電極、恒溫水浴箱、〔含動(dòng)脈夾〔2ml、20ml〕及針頭、頭皮針、糖試紙、生理鹽水、3％戊巴比妥鈉、20％葡萄糖溶液、1：10,000去甲腎上腺素、速尿、垂體后葉素?！驹囼?yàn)對(duì)象】家兔【試驗(yàn)方法和步驟】手術(shù)操作麻醉及固定 稱家兔體重，沿耳緣靜脈注入3％戊巴比妥鈉〔1ml/kg體重，待動(dòng)物麻醉后仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上。分別迷走神經(jīng)和頸總動(dòng)脈 切開(kāi)皮膚，暴露氣管；在氣管的兩側(cè)，分別右側(cè)迷走神經(jīng)和左側(cè)頸總動(dòng)脈，穿線備用。頸總動(dòng)脈插管 分別3-4cm長(zhǎng)的左側(cè)頸總動(dòng)脈，穿雙線備用。用絲線結(jié)扎遠(yuǎn)心端，近心端用動(dòng)脈夾夾閉。在緊靠結(jié)扎處稍下方剪一斜口〔大小約為動(dòng)的一半，前端朝向近心端。將注滿肝素生理鹽水的動(dòng)脈插管〔排盡氣泡〕由切口向近心端插入，以備用線結(jié)扎固定。最終松開(kāi)動(dòng)脈夾。膀胱插管收集尿液 自恥骨聯(lián)合上緣向上沿正中線作3-4cm長(zhǎng)的皮膚切口，再沿腹白線剪開(kāi)腹壁及腹膜〔勿傷及腹腔臟器，找到膀胱并翻至體外〔外露，以免血壓下降。再于膀胱底部找到輸尿管，從兩側(cè)輸尿管下方穿一絲線，將膀胱上翻結(jié)扎尿道。在膀胱頂部血管較少處剪一小口，插入膀胱插管并結(jié)扎固定，插管前插管內(nèi)應(yīng)注滿生理鹽水。儀器連接將記滴器的輸入線和壓力換能器連入BL-420E“試驗(yàn)工程”－“泌尿試驗(yàn)－影響尿生成試驗(yàn)”。觀看指標(biāo)記錄正常尿量和血壓。38℃的生理鹽水，觀看尿量和血壓的變化。刺激其外周端，“設(shè)刺激器”：刺激方式連續(xù)刺激；強(qiáng)度-2.5v；波寬-0.05ms；波間隔-30ms。使血壓維持在低水平〔6.65kPa,50mmHg〕左右15-20秒，觀看尿量和血壓的變化。238℃20％葡萄糖溶液5ml，1:10,0000.5ml，觀看尿量和血壓的變化。靜注速尿〔5mg/kg體重，觀看尿量和血壓的變化。靜注垂體后葉素2單位，觀看尿量和血壓的變化。【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】2～3kg之間，試驗(yàn)前多喂青菜葉?；蛴脤?dǎo)尿管向胃內(nèi)40～50ml清水，以增加其根底尿量。試驗(yàn)中需屢次行靜脈注射，可用頭皮針留置，留意防止凝血塊堵塞針頭。量削減的根底上進(jìn)展促進(jìn)尿生成的試驗(yàn)，后面的試驗(yàn)工程應(yīng)待前面的試驗(yàn)工程效應(yīng)消逝后再開(kāi)頭。每項(xiàng)試驗(yàn)前后均應(yīng)設(shè)比照。，或更換刺激部位?！緺?zhēng)論思考題】本試驗(yàn)中，各項(xiàng)處理因素分別是通過(guò)什么機(jī)制來(lái)轉(zhuǎn)變尿量的？影響尿生成的因素有哪些？〔顏建云〕試驗(yàn)4.17 腎上腺摘除動(dòng)物的觀看【試驗(yàn)?zāi)康摹坑^看小鼠摘除腎上腺后，在存活時(shí)間及應(yīng)激反響時(shí)的功能變化?！驹囼?yàn)原理】后對(duì)機(jī)體影響相對(duì)較小?！驹囼?yàn)器材與藥品】27510％NaCl、大玻璃缸、動(dòng)物秤、秒表?！驹囼?yàn)對(duì)象】小鼠【試驗(yàn)方法和步驟】腎上腺摘除對(duì)生命維持的影響。動(dòng)物分組：取雄性小鼠15-30只，隨機(jī)分為數(shù)目相等的三組，編號(hào)并分12、3組摘除雙側(cè)腎上腺。3cm，將皮膚拉向一側(cè)后，在脊長(zhǎng)肌與最下肋角處向下作1.5cm切口，鈍性分別肌肉，暴露腎臟，在腎臟上方可見(jiàn)一淡黃色綠豆大小的腎上腺，用線結(jié)扎通往腎上腺的血管，然后用眼科剪摘除腎上腺。用同樣的方法1組不摘除腎上腺，其余操作一樣。術(shù)后觀看動(dòng)物的姿勢(shì)、活動(dòng)狀況和肌肉緊急度。1、2310％NaCl作飲料，在同樣環(huán)境下飼養(yǎng)。腎上腺摘除動(dòng)物在應(yīng)激狀態(tài)時(shí)的變化取雄性小鼠8只，隨機(jī)分為兩組，按上述方法手術(shù)和飼養(yǎng)。第1組為假手術(shù)比照組，術(shù)后給清水作飲料；第2組摘除雙側(cè)腎上腺，術(shù)后給10％NaCl作飲料。將兩組動(dòng)物各取4只置于盛有4℃以下清水的大玻璃缸內(nèi)，同時(shí)計(jì)時(shí)，觀看兩組動(dòng)物的溺水狀況。當(dāng)一組動(dòng)物全部溺水下沉?xí)r，記錄時(shí)間，然后撈出全部動(dòng)物，觀看其恢復(fù)狀況?！驹囼?yàn)留意事項(xiàng)】由于腎上腺血供豐富，手術(shù)時(shí)應(yīng)當(dāng)留神，動(dòng)作輕柔，切勿損傷血管。術(shù)后動(dòng)物留意保溫，并供給充分的飼料和水。【爭(zhēng)論思考題】為什么用鹽水喂養(yǎng)可延長(zhǎng)腎上腺摘除動(dòng)物的生命？〔顏建云〕試驗(yàn)4.18 缺氧【試驗(yàn)?zāi)康摹坑^看乏氧性缺氧、血液性缺氧對(duì)小白鼠呼吸、中樞神經(jīng)及血液系統(tǒng)的影響。把握乏氧性缺氧、血液性缺氧的常見(jiàn)病因、發(fā)生氣制。把握乏氧性缺氧時(shí)耗氧壓的測(cè)定方法；了解耗氧量，耗氧率的計(jì)算方法。了解美蘭在搶救高鐵血紅蛋白血癥中的作用機(jī)理?！驹囼?yàn)原理】缺氧是臨床多種疾病共有的病理過(guò)程。大氣中的氧通過(guò)呼吸進(jìn)入肺泡，并彌散入血液，與血紅蛋白相結(jié)合，由血液循環(huán)輸送到全身，最終被組織、細(xì)胞攝取利用。其中任一環(huán)節(jié)發(fā)生障礙都能引起缺氧。據(jù)發(fā)生環(huán)節(jié)的不同，缺氧可分為低張性缺氧、血液性缺氧、循環(huán)性缺氧及組織性缺氧四種類型，其緣由和血氧變化缺氧的治療方案主要是針對(duì)病因治療和訂正缺氧。起著復(fù)原作用，臨床上可用于治療亞硝酸鈉中毒?！驹囼?yàn)器材和藥品】1套，1ml注射器，2.5%亞硝酸鈉，0.5%美蘭，鈉石灰，凡士林。:CO1套，濃硫酸，甲酸。【試驗(yàn)對(duì)象】 小白鼠。【試驗(yàn)方法和步驟】一.乏氧性缺氧耳廓、掌底、唇周和尾巴的顏色。5g鈉石灰的缺氧瓶?jī)?nèi)，再將少許凡士林均勻涂于瓶口內(nèi)面，塞上接通了水銀檢壓計(jì)的瓶塞，轉(zhuǎn)動(dòng)瓶塞使凡士林均勻涂抹于瓶塞和瓶口(耗氧壓測(cè)定裝置參見(jiàn)本節(jié)附錄，。從開(kāi)頭缺氧起〔水銀面被缺氧瓶?jī)?nèi)負(fù)壓吸引而有上升〕記錄時(shí)間，并每隔3?分鐘記錄缺氧瓶?jī)?nèi)動(dòng)物的呼吸頻率、幅度及節(jié)律，活動(dòng)狀態(tài)，皮膚變化，以及水銀面上升的高度,直到動(dòng)物死亡，記錄總耗氧壓，計(jì)錄存活時(shí)間。將總耗氧壓換算成總耗氧量，再計(jì)算出耗氧率(見(jiàn)本試驗(yàn)附錄)。二.亞硝酸鹽中毒性缺氧廓、掌底、唇周和尾巴的顏色。2.5%0.3ml。此后，其中一只再注3分鐘，記錄兩鼠呼吸頻率、幅度及節(jié)律，活動(dòng)狀態(tài)，皮膚粘膜顏色變化等，記錄死亡時(shí)間。三.示教內(nèi)容CO中毒性缺氧圖圖4-13 CO發(fā)生裝置(4-13)。2ml甲酸，倒入大試管中，后參加濃硫酸1ml，馬上塞緊大試管。反響式如下:HCOOH H2SO4 H2O+CO↑CO產(chǎn)生速度不宜太快。留意觀看小白鼠一般狀態(tài)，呼吸，皮膚、粘膜顏色的變化。動(dòng)物死亡后尸體留作統(tǒng)一四.動(dòng)物作尸檢液顏色，分析爭(zhēng)論不同類型缺氧發(fā)生的機(jī)制及鑒別方法。【結(jié)果記錄】〔4-1〕4-1缺氧對(duì)小白鼠呼吸頻率、中樞神經(jīng)、血液系統(tǒng)的影響───────────────────────────────缺氧類型呼吸頻率(次/min)─────────── 中樞神經(jīng)病癥皮膚、粘膜及肝臟顏色存活時(shí)間缺氧前缺氧3’6’9’...(分)──────────────—─────────────────────乏氧性缺氧NaNO2中毒NaNO2+美蘭───────────────────────────────4-14：耗氧壓〔mmHg〕 耗氧率耗氧率】

0 3 6 9 12 15 18 存活時(shí)間〔min〕圖4-14 耗氧壓、耗氧量隨時(shí)間變化的關(guān)系曲線耗氧壓測(cè)定裝置肯定要密閉。入腹腔的落空感，要避開(kāi)將藥液注入膀胱，腸腔，肝臟或左下肢肌肉上。抽取美蘭的劑量要準(zhǔn)確，且勿讓美蘭沾污四周環(huán)境?！緺?zhēng)論思考題】乏氧性、血液性缺氧對(duì)呼吸、中樞神經(jīng)、血液系統(tǒng)的影響有何異同?為什么?美蘭對(duì)亞硝酸鈉中毒小鼠的作用是什么?亞硝酸鈉導(dǎo)致缺氧的機(jī)制是什么?【附錄】 用耗氧壓測(cè)定裝置測(cè)定耗氧壓以及換算為耗氧量、耗氧率的方法原理小白鼠在密閉的缺氧瓶?jī)?nèi)，不斷消耗氧氣，而產(chǎn)生的CO2又被鈉石灰吸取[NaOH-CaO+CO2+H2ONaHCO3+Ca(OH)2]，缺氧瓶?jī)?nèi)氧分壓漸漸降低而水銀液面上升的刻度即為耗氧壓的大小，耗氧壓愈大則耗氧量愈大。方法與步驟n0(mol)P×VR×T為耗氧壓760毫米汞柱為缺氧瓶氣體體積8.21×10-5，T為確定溫度，tn0:P×0.125×10-3(mol/g/min)=n0/體重(g)/存活時(shí)間(min)mmol作單位，耗氧率則用mmol/g/min3．耗氧壓測(cè)定裝置圖4-15 缺氧瓶及耗氧壓測(cè)定裝置試驗(yàn)4.19 pH對(duì)藥物排泄的影響

〔吳衛(wèi)〕【試驗(yàn)?zāi)康摹縫H，觀看其轉(zhuǎn)變對(duì)藥物排泄的影響?！驹囼?yàn)原理】解離常數(shù)的負(fù)對(duì)數(shù)〕和所在溶液的pH而定。各藥有其固定的pKa值。但pH是一個(gè)影響藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的可變因素。因而轉(zhuǎn)變液體環(huán)境的pH，以轉(zhuǎn)變其中離子型藥物和非離子型藥物的比率，能轉(zhuǎn)變藥物的吸取或排泄速率。由于非離子型藥物易于通過(guò)生物膜轉(zhuǎn)運(yùn)，離子型則相反。本試驗(yàn)通過(guò)轉(zhuǎn)變尿液pH，使弱酸性藥物——水楊酸鈉(pKa=3.0)的排出在單位時(shí)間內(nèi)增多或削減。由于水楊酸鈉與氯化高鐵試劑(5％)能產(chǎn)生一種暗紫色反響，故依據(jù)其反響生成物顏色的深淺，就可推斷出水楊酸鈉的量之多少?！驹囼?yàn)器材和藥品】2%水楊酸鈉，5%氯化高鐵，5％碳酸氫鈉，0.5％氯化銨?！驹囼?yàn)對(duì)象】大白鼠【試驗(yàn)方法和步驟】、40.50.5ml/100g。記錄給藥時(shí)間。2ml/100g4ml/15min后，每鼠腹腔注50ml量筒，上面放一漏斗馬上收集尿液。3．30min后，換同容量的量筒連續(xù)收集尿液，記錄各次尿量，并用周密試紙pH30ml，參加氯化高鐵溶深淺，并觀看哪一組水楊酸鈉排泄較多。30min尿液標(biāo)本的測(cè)試和比較。【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】試驗(yàn)前24小時(shí)開(kāi)頭多給大白鼠喂水，喂菜，以保證有尿。大白鼠灌胃給藥，留意勿灌入呼吸道?！緺?zhēng)論思考題】用Handerson-Hasselbalch公式，推想水楊酸鈉在胃腸道和腎小管中的解離狀況。你的試驗(yàn)結(jié)果是否與推想相符？并進(jìn)展解釋。?在弱酸或弱堿性藥物急性中毒的處理中，調(diào)整尿液pH有何有用價(jià)值?〔宜全〕試驗(yàn)4.20 有機(jī)磷農(nóng)藥中毒及挽救【試驗(yàn)?zāi)康摹繖C(jī)理，并觀看有機(jī)磷農(nóng)藥中毒的病癥，把握有機(jī)磷農(nóng)藥中毒的挽救方法。【試驗(yàn)原理】(AchE)結(jié)合，生成難以水解的磷?；憠A酯酶，結(jié)果使膽堿酯酶〔AchE〕失去水解乙酰膽堿的力量，造成乙酰膽堿〔Ach〕在體內(nèi)大量積存，與膽堿能神經(jīng)上M、N受體結(jié)合，是M、N受體興奮，引起一系列中毒病癥?！驹囼?yàn)器材和藥品】1％碘解磷定?！驹囼?yàn)對(duì)象】家兔【試驗(yàn)方法和步驟】(次數(shù)，有無(wú)呼吸困難，呼吸道有無(wú)分泌物等)，瞳孔大小，唾液，大小便，肌張力，肌震顫等，并記錄之。將兔固定于兔箱內(nèi)，由耳緣靜脈注射0.11ml/kg，記錄給藥時(shí)間，然后觀看上述各項(xiàng)指標(biāo)的變化，待中毒病癥明顯后，再記錄時(shí)間，并按以下安排給藥救治。0.11ml/kg，觀看上述各項(xiàng)指標(biāo)的轉(zhuǎn)變。11ml/kg。連續(xù)觀看上述各項(xiàng)指標(biāo)的轉(zhuǎn)變。5．試驗(yàn)完畢前給兔再注射解磷定一次〔劑量同上。留意:檢查唾液分泌可用吸水紙抹兔口看紙濕否，萬(wàn)一被敵敵畏污染皮膚，請(qǐng)用自來(lái)水沖洗。【病癥指標(biāo)的觀看】光線強(qiáng)弱應(yīng)一樣。:用濾紙或草紙按兔嘴，看紙上水印大小，以文字無(wú)、少、較多、多表示。+，++，+++4-2。4-2糞便量、尿量和肌肉活動(dòng)程度比較標(biāo)準(zhǔn)—+ ++ +++糞便量無(wú)少量 較多 很多尿量無(wú)少量 較多 很多肌肉活動(dòng)無(wú)肌震顫局部間有肌震顫全身肌震顫全身肌震顫并站立不穩(wěn)或癱臥【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】在注射敵敵畏之前，應(yīng)將待注射的阿托品和另一耳緣靜脈預(yù)備好。在注射敵敵畏的過(guò)程中，因敵敵畏刺激性較強(qiáng)，應(yīng)留意固定好兔，以免兔掙扎導(dǎo)致注射失敗。耳尖部的靜脈開(kāi)頭漸漸向上，以滿足屢次注射的需要。【爭(zhēng)論思考題】?為什么會(huì)消滅這些病癥?其作用機(jī)制，臨床上對(duì)中毒程度不同病人如何用藥?〔宜全〕試驗(yàn)4.21 鏈霉素的急性毒性反響【試驗(yàn)?zāi)康摹坑^看鏈霉素的急性中毒病癥，學(xué)習(xí)解毒方法?！驹囼?yàn)原理】肌肉接頭阻滯，導(dǎo)致肌肉麻痹。因而可用氯化鈣或斯的明搶救?！驹囼?yàn)器材和藥品】1ml注射器，7.5%鏈霉素，生理鹽水，5%氯化鈣，斯的明?！驹囼?yàn)對(duì)象】小白鼠【試驗(yàn)方法和步驟】3只，稱重，并分三組。結(jié)果。7.5%鏈霉素0.1ml/10g7.5%鏈霉素0.1ml/10g，5%氯化鈣或斯的明。丙鼠：腹腔注射生理鹽水0.1ml/10g。比較三組小白鼠的表現(xiàn)及結(jié)果有何不同？【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】留意小白鼠腹腔注射方法，不要注入內(nèi)臟。【爭(zhēng)論思考題】鏈霉素中毒引起的肌肉麻痹用鈣離子或斯的明搶救的機(jī)理？〔宜全〕試驗(yàn)4.22 藥物的蓄積作用【試驗(yàn)?zāi)康摹坑^看某些藥物的蓄積作用。【試驗(yàn)原理】隨后自腦組織重分布到脂肪組織中，再由肝臟氧化失效。故其作用發(fā)生快，維持時(shí)間短〔幾分鐘~十余分鐘。如連續(xù)屢次給藥，藥物在脂肪組織中大量積存，以后再緩慢釋放入血，則藥物實(shí)際血藥濃度高于單次給藥后的血藥濃度?！驹囼?yàn)器材和藥品】兔固定箱，5ml注射器，0.6％硫賁妥鈉，1％硫賁妥鈉?！驹囼?yàn)動(dòng)物】 家兔【試驗(yàn)方法和步驟】1ml/kg。乙兔：11ml/kg。觀看各兔有無(wú)產(chǎn)生麻不產(chǎn)生麻醉作用的，則重復(fù)注射一次，直至消滅作用為止?！驹囼?yàn)留意事項(xiàng)】耳緣靜脈注射應(yīng)劑量準(zhǔn)確，且注射速度均勻全都〔半分鐘內(nèi)注射完畢。硫賁妥鈉起效快，作用時(shí)間短，注射后應(yīng)留意觀看?！緺?zhēng)論思考題】?〔宜全〕試驗(yàn)4.23 藥物的協(xié)同作用【試驗(yàn)?zāi)康摹坑^看戊巴妥鈉(SodiumPentobarbital)與氯丙嗪(Chlorpromazine)的協(xié)同作用?！驹囼?yàn)原理】分別單獨(dú)應(yīng)用時(shí)的作用增加?！驹囼?yàn)器材和藥品】1ml注射器，0.03％氯丙嗪，0.35％戊巴比妥鈉?！驹囼?yàn)動(dòng)物】小白鼠【試驗(yàn)方法和步驟】0.030.1ml/10g0.35％戊巴比妥鈉0.1ml/10g，觀看各鼠的入睡時(shí)間并記錄睡眠持續(xù)時(shí)間(即翻正反射消逝和恢復(fù)之間的時(shí)間)?！驹囼?yàn)留意事項(xiàng)】留意小白鼠腹腔注射方法，不要注入內(nèi)臟。【爭(zhēng)論思考題】(藥)和乙藥(藥)是否有協(xié)同作用或?qū)棺饔?臨床上聯(lián)合用藥有何意義？〔宜全〕試驗(yàn)4.24 給藥途徑對(duì)藥物作用的影響【試驗(yàn)?zāi)康摹坑^看不同給藥途徑對(duì)小鼠用戊巴比妥鈉誘導(dǎo)睡眠時(shí)間的影響。學(xué)習(xí)藥物劑量和按體重給藥的計(jì)算方法。依據(jù)試驗(yàn)?zāi)康呐c提示，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)出該試驗(yàn)方案?！驹囼?yàn)原理】【試驗(yàn)動(dòng)物】小白鼠【試驗(yàn)提示】戊巴比妥鈉濃度。60mg/kg計(jì)算出該藥物的百分比10g體重的用量。動(dòng)物:18～22g的小白鼠?！驹囼?yàn)要求】每組同學(xué)需先擬出試驗(yàn)方案。告。解釋試驗(yàn)中得到的不同結(jié)果?！惨巳吃囼?yàn)4.25 鈣鎂對(duì)抗【試驗(yàn)?zāi)康摹苛私怄V離子的作用及中毒救治?！驹囼?yàn)原理】傳遞和骨骼肌的收縮，而使肌肉松弛。【試驗(yàn)器材和藥品】10ml1支，5%硫酸鎂，5%氯化鈣?！驹囼?yàn)動(dòng)物】家兔【試驗(yàn)方法和步驟】取家兔一只，稱重，記錄正常活動(dòng)狀況；肌肉緊急度；呼吸次數(shù)；深度；耳血管狀況，然后耳靜脈注射5%0.7～3.5ml/kg，觀看其變化，待作用顯著時(shí)5%1ml/kg，觀看有何變化。【試驗(yàn)留意事項(xiàng)】2min內(nèi)注射完，否則中毒嚴(yán)峻難以挽救。脈暴露好，注射氯化鈣時(shí)也必需緩慢?！緺?zhēng)論思考題】鈣離子的生理意義及在興奮-收縮偶聯(lián)中的作用?！惨巳吃囼?yàn)4.26 硝酸甘油對(duì)血管的作用【