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文檔簡介
動物營養(yǎng)學
第冰一--版dLr-
王康寧
四川農業(yè)大學動物營養(yǎng)研究所
二OO二年十月
目錄
第一章序言
第二章動物營養(yǎng)研究方法概論
第一節(jié)前言.........................................................1
一.研究內容................................................1
二.研究方法................................................1
第二節(jié)化學分析法..................................................2
飼料成分.................................................2
二.動物組織和血液成分.....................................2
三.動物糞便及成分........................................2
第三節(jié)消化試驗.....................................................2
一.進展...................................................2
二.試驗要點...............................................3
第四節(jié)平衡試驗.....................................................4
一.作用...................................................4
二.能量平衡...............................................4
三.N平衡.................................................7
第五節(jié)飼養(yǎng)試驗(生長效應法)......................................7
—.作用.....................................................7
二.原理....................................................7
三.使用原則................................................7
四.試驗設計的注意事項.....................................7
第六節(jié)試驗技術.....................................................9
一.同位素示蹤及同位素稀釋技術.............................9
—.外科造疹技術及吻合術....................................9
第三章飼料養(yǎng)分營養(yǎng)價值的評定
第一節(jié)飼料蛋白質營養(yǎng)價值的評定...................................11
引言....................................................11
二.評定方法的歷史回顧....................................11
三.AA生物效價的評定....................................12
四.反芻動物蛋白質質量評定新體系..........................15
五.國際上推行的反芻動物蛋白質新體系.....................17
第二節(jié)礦物元素和維生素生物效價的評定.............................17
第三節(jié)飼料能值的評定..............................................19
一.概況...................................................19
二.飼料有效能的實測......................................19
三.用可消化養(yǎng)分間接推算飼料有效能.......................21
四.根據(jù)飼料化學成分預測飼料有效能.......................24
第四章動物養(yǎng)分需要量的評定
第一節(jié)能量需要量的測定...........................................30
一.反芻動物..............................................30
二.豬能量需要量的確定....................................32
三.禽能量需要量的確定....................................34
第二節(jié)蛋白質和氨基酸需要量的評定.................................35
一.反芻動物蛋白質需要量的評定...........................35
二.豬蛋白質、氨基酸需要量的評定.........................37
三.禽的蛋白質、氨基酸需要量的估計.......................43
第三節(jié)維生素及礦物元素需要量的評定.............................51
飼糧配合的技巧及示范................................................55
-飼糧配合的技巧.........................................55
二.飼糧配方試例..........................................55
三.可以添加合成氨基酸時的配方方法.......................56
四.合理確定維生素和微量元素添加量.......................56
飼料原料價格的合理估計方法.........................................56
估計方法的原理..........................................56
二.現(xiàn)在我們計算菜籽粕的適宜價格...........................57
第一章序言
一、動物營養(yǎng)學的目的、任務
動,*葬一韌物攝取、消化、吸收、利用飼料中管券物質的全過程,是一系列
化學、物理及生理變化過程的總稱。它是動物一翎生命活動《生存、生長、繁殖、產
奶、戶蠶、兔疫等)的基礎,整個生命過程都離不開營薄;
31?鷲葬堂一確究前物營端的科學;
幼,善葬幸的修,一碉究動物對養(yǎng)分的需求、養(yǎng)分的作用及功靡、飼料養(yǎng)分的
利用效率一形成營養(yǎng)需要或飼林標準;
31?ff¥KHN—。最少的投入獲得最大的產出一實現(xiàn)高效飼養(yǎng)。
二、am善葬學研究的內,
1、對營養(yǎng)物質的需求:需要什么營養(yǎng)物質,營養(yǎng)物質的作用及功第,營養(yǎng)不足密
來的危害,、確定營就需要量的方法,營蒜需要量的確定及其影響因素。
2、飼料營養(yǎng)價值的評定:飼料中含有哪暨動物需要的營端物質,各種營養(yǎng)物質在
體內的消化、吸收、代調特點、效率及其影響國泰。
3、作為模型動物砒究營點物質代調及調控:從分子水平上(酶、激素和除)確究
營就物質代謝的基本德理及其調控——為客學、獸客學、營就學的碉究提供基本的參皴,
為營就的調控提供新的途徑和方法。
4、向其它學科拓展:與其它學科超結合,如兔瘦學、微生物學、生態(tài)學等,倭動
物營養(yǎng)學能夠怫調的發(fā)展——拓展自己的確究領域。
三、*?S£KiMMS
1、動物營薛需要及需要量評定方法;
2、飼料就分生物效價的評定及評定方法。
1動物營點學講義
2.孰物營募學《楊屬主編,2001)
3.AnimallNutrition(Maynard,1979,)
4.NutritionrequirementsofPoultry(1994f第九版)
5.NutritionrequirementsofSwine(1998,第十版)
6.NutritionrequirementsofDairyCattle(20019第7版)
第二章動物營養(yǎng)研究方法概論
第一節(jié)前言
一、研究內容
C能值
營養(yǎng)物質的需要量的評定,蛋白質、氨基酸
礦物元素
〔維生素
「能值
養(yǎng)分生物效價的評定J蛋白質、氨基酸
礦物元素
I維生素
二、研究方法
1.化學分析、物理測試
綜合法——飼養(yǎng)試驗
析因法——平衡試驗(屠宰試驗)
(斜率法
2.動物試驗<(飼養(yǎng)試驗——生長效應法\平行線法
三點法
【標準曲線法
「體內
消化試驗J
生物效價Wi體外
代謝試驗
生物效價的幾種表示方法:
1)表觀、真實消化率
2)表觀、真實利用率
3)表觀、真實代謝率
4)沉積率(扣除周轉的凈沉積)
"同位素示蹤法
3.外科造屢
I無菌技術
第二節(jié)化學分析法
一飼料成分
1.Weender法1860年,BeiGoettingenDM.GE.CP.EE.CF.NFE.Ash;
2.VanSoest1967的纖維分析法CP.EE.OR.Ash.NDF(hemicellulose+
cellulose+ADL)>ADF(cellulose+ADL);
①NDF分析:100mlAD加1克樣品
NDF(中性洗滌液)=1升+30g12烷基硫酸鈉+18.6克乙二胺四乙酸二氫鈉鹽+4.56g
Na2HPO4+10mla一乙氧基乙醇(或乙二醇乙酸)pH(6.9-7.1)。
注意:過濾杯的孔徑不要太小,粗孔40-50mL孵化時加淀粉酶,便于過濾。5-10min
煮沸,微沸一小時。
②ADF分析:要用16烷基甲基溪化胺,易過濾,不必加淀粉酶,測定較NDF容
易。
3.礦物元素、維生素、脂肪酸、抗營養(yǎng)因子、重金屬、霉菌毒素、藥物殘留。
二動物組織和血液成分
1.各種營養(yǎng)物質
2.與營養(yǎng)物質有關的功能酶或相關酶以及由此引起的代謝中間產物的積累,尾產
物減少,如:Se-GSH-px(glutathioneperoxidase),Zn.血清堿性磷酸酶,Cu.血漿銅藍蛋
白氧化酶,Mo-黃喋吟氧化酶,Bi-磷酸硫胺素(輔酶),B2-谷胱甘肽還原酶,生物素-
血漿丙酮酸竣化酶,B6-轉氨酶(血漿或紅細胞中酪氨酸或天門冬氨酸)、血漿尿素N等o
三動物糞便及成分
(1)糞,主要是消化、代謝和平衡試驗測能、氮、AA、鈣、磷及其它礦物元素和
維生素的效價及存留量。
(2)尿、能、氮、AA、代謝產物。如:
葉酸缺乏一一古胺甲基谷氨酸(FIGLV)排泄增加(中間產物)
煙酸缺乏——尿中N-甲基煙酰胺減少(尾產物)
B6缺乏——尿中黃尿酸或犬尿酸的量增加(中間產物)
第三節(jié)消化試驗
-、進展
傳統(tǒng)的全收糞法測DE、可消化養(yǎng)分一離體消化一瘦管技術(測AA消化率、蛋白
質降解率)。
尼龍袋離體消化
瘤胃消化道消化液人工消化液
小腸
二.試驗要點
1.影響飼料養(yǎng)分消化率測定的因素:動物種類、年齡、性別、飼喂量、飼糧成分。
2.動物選擇:一般公畜。
3.頭數(shù)或只數(shù):一般4頭(只)以上,AA消化率可多到16-24只。
4.預飼期和試驗期的長短:取決于動物消化道食糜排空時間的長短。一般大動物
長,小動物短;難消化的長,易消化的短。
牛羊馬豬家禽
10—147-105-103-5天
5.試驗(或被測)飼料或日糧的準備(配合原則)
取樣均勻,干物質測定準確(注意測定時間),盡可能補充維生素、微量元素等,
測氨基酸消化率可補充能量(葡萄糖)。在不影響試驗的情況下,盡可能接近全價日糧
需要營養(yǎng)水平。
強飼飼料應粗一點,能通過20目即可,便于通過強飼管,縮短強飼時間。
6.糞(便)收糞
采用集糞袋,家禽肛門縫合中空的瓶蓋,縫合時每針穿的皮膚要深(0.2cm)、寬
(0.5-0.8cm)>密一點(4-5個固定點密
豬用皮帶或布條固定,注意前腿前和后腿前兩圈的固定,背中線,兩側,3根與集
糞袋口3根線相連;集糞袋口用0.3cm粗的鐵絲,做成直徑為12-15cm的圓圈,必要部
下凹,鐵絲可用塑料包雙層,以免鐵絲擦傷尾部,長25-30cm,寬12-15cm,下部10cm
或三角形。
糞樣按總量1/10-1/50取,每100g力口10%的硫酸(鹽酸)5-10ml固定N,甲苯數(shù)滴
防腐。計算樣品量時應扣加入H2so4的重量和能量。
家禽因糞便少可全部用作樣品,盡量少用水洗糞袋,也可在糞袋中混交取50-80%
樣,以減少樣品總量和干燥的時間。
7.消化率計算方法
①排空強飼法(收集4048小時排泄物,強飼量為體重的3-5%)
消化率=吟等
②頂替套算法
測試日糧可消化物量-測試日糧中基礎日糧可消化量
消化率(%)=(g)(g)
被測飼料頂替基礎日糧的量(g)
③指示劑法
飼料中指示劑含量%糞中養(yǎng)分含量%lnn
消化率(%)=100-
糞中指示劑含量%飼料中養(yǎng)分含量
8.頂替量
一般30-50%,適口性很差的不低于15%。
9.指示劑的回收率
一般要求85%以上;內源指示劑注意飼料雜質和均勻度的影響。
第四節(jié)平衡試驗
一.作用
研究營養(yǎng)物質的收支平衡,獲得需要量和利用率等基本參數(shù)。
二.能量平衡
研究能量代謝的方法
(一)直接法
直接測畜體產熱,原理簡單、設備儀器昂貴。
1.絕熱式:在水溫4℃時1毫升水上升1℃為1卡。
2.梯度型測熱裝置:測熱的傳導速率,即:
dH/dt=XSL(Ti-T0)
入:卡/cm.秒.℃
S:室的表面積
L:室壁厚度
例子:閹牛每日的能量平衡(動物營養(yǎng)學教材表12-3),直接測畜體產熱,糞、尿、
皮屑、甲烷,增重都測其熱量。
表2-1閹牛每日的能量平衡(kJ)(弓自Maynard,L.A.,1979)
項目能量攝入能量支出
6988g梯牧草(貓尾草)116065
(timotyhhay)
400g亞麻籽7581
16619g糞59621
4357g尿5065
37g皮屑脫落物368
142g甲烷7937
畜體產熱48110
機體增重2545
合計123646123646
(-)間接法
CO
1.原理:根據(jù)呼吸蠟(RQ)=*
°2
全脂氧化(克分子):CI6H32O2+23O2=16CO2+16H2O
RQ=—=0.7產熱10.033MJ
23
全糖氧化(克分子):C6HI2O6+6O2=6CO2+6H2O
RQ=-=\產熱2.816MJ
6
表2?2不同的呼吸熠所對應的耗。2和CO2生成的產熱量(kJ)引自Maynrad,L.A.,1979)
RQ1LO21LCO2Igco2
0.7017.09628.00814.259
0.7519.82826.43913.460
0.8020.08725.10812.782
0.8520.34723.93712.213
0.9020.60222.89111.652
0.9520.85721.95411.175
1.0021.11721.11710.749
表2-3根據(jù)24h的耗氧、二氧化碳生成量和尿氮估計產熱(引自maynard,L.A.,1979)
基礎數(shù)據(jù)
耗氧392L
二氧化碳生成量310.7L
尿氮14.8g
蛋白質代謝數(shù)據(jù)
蛋白質氧化量(14.8gX6.25)a92.5g
產熱(92.5gX18kJ/g)a1665kJ
O2消耗(92.5gX0.96Ug)a88.8L
CO2生成(92.5gX0.77L/g)a71.2L
碳水化合物和脂肪代謝數(shù)據(jù)
耗氧(392L-88.8L)303.2L
二氧化碳生成量(310.7~71.2L)239.5L
非蛋白RQ(239.5/303.2)b0.79
RQ為0.79時消耗303.2L氧產熱6079kJ
總產熱(1665+6079)7744kJ
注:a.每克蛋白質體內氧化產熱18KJ,消耗0.96L和產生0.77L二氧化碳;
b.當RQ為0.79時,每消耗產熱是20.05KJ。
例方程組:r-6O2+6CO2=2.816
l_2302+16C02=10.033
解方程組可求得每克分子。2產熱0.3609MJ,每克分子CO2產熱0.1084MJo
HP(產熱?兆焦)=0.360902+0.1084CO2
如果考慮蛋白質氧化和CH4:
HP(產熱)=3.866X02+1.200XCO2+0.518XCH4-1.431XN
(千焦)(升)(升)(升)(克)
2.儀器
(1)密閉式:全密閉,。2計量進入,廢氣抽出CO2、H2。經(jīng)H2s。4和堿石灰吸收循
環(huán)加熱再進入。
(2)開放式:進入的是加熱(與室內平衡)的空氣,廢氣抽出計量,一部分取樣分
析。2和C02(也可扣CH4),然后與進入空氣。2和C02比較可算出。2、co2的變化量。
(3)面具式:原理類似開放式測熱裝置,根據(jù)進出氣體。2和C02的含量計算消耗的
。2和呼出的C02。
例:根據(jù)24小時耗。2和C02生成量及尿氮估計產熱(動物營養(yǎng)學教材174頁表
12-5)o
(三)C、N平衡法
1.原理體內沉積是脂肪和蛋白質,根據(jù)每克脂肪和蛋白質的C、N含量和產熱量
可計算出沉積能,糞、尿、甲烷能可測得,從攝入飼料總能,就可計算出畜體產熱。
2.方法用呼吸裝置測C02和CH4產生量,并收集糞尿測C、N含量;然后根據(jù)每
克脂肪含C76.7%,N為零,產熱39.7KJ;每克蛋白質含C52%、N16%,產熱23.8KJ,
再從C、N沉積量算出沉積能。
例:用C、N平衡法測飼料沉積能(動物營養(yǎng)學教材122頁,表12-4)。
表2-4用碳、氮平衡法估計飼料沉積能(g)(弓自Kirchgessner,M.,1987)
第一階段(基礎飼糧)第二階段(基礎飼糧+被測飼糧)
CNCN
飼料25001603600200
糞6003570050
尿100120130140
CH4130-160-
--
CO215702110
相差+100+5+500+10
一、二階段相差--+400+5
沉積400gC和5gN其能量為:
400-0.52X—
39.7x區(qū)西+23.8x——=20607(KJ)
0.7670.16
如果以每克C的脂肪產熱51.83KJ,每克N的蛋白質比每克C的脂肪少產熱
19.40KJ,沉積400gC和5gN的能量可計算如下:
51.83X400-19.40X5=20635(KJ)
(四)屠宰法
1.原理通過屠宰直接測沉積組織的能量,也可推算出畜體產熱(維持)。
食入能=糞能+尿能+皮屑能+甲烷能+沉積能+畜體產熱
2.測定方法屠宰不放血,心臟或靜脈注入麻醉藥和凝血劑。除去消化道內容物,
冷凍、粉碎(胴體粉碎機),取樣測組織燃燒熱。
凡是CH4產量較高的,用屠宰法估計的畜體產熱不準確,應扣除CH4能。一些試
驗結果表明,此法測得值低于測畜體產熱推算的沉積能,有可能是間接推算比直接測沉
積能多了一些其它損耗如CH,、皮屑以及胴體多次處理測定帶來的誤差等。
三.N平衡
主要用于研究蛋白質的代謝。難在進食含N日糧時,維持N(內源N排泄)的測
定,不同于維持能可直接測。用同位素稀釋技術可以直接測定進食含N日糧時的維持N
(內源N排泄),但方法有待完善,測定值還不太可靠。
測定方法在消化試驗基礎上,增加尿N的測定,當然也可測機體沉積N,所以N
平衡試驗有時也包括屠宰試驗。
第五節(jié)飼養(yǎng)試驗(生長效應法)
一.作用
綜合評定養(yǎng)分的需要量和養(yǎng)分的相對生物效價(可利用性)。
二.原理
養(yǎng)分劑量變化對機體增重,組織被測養(yǎng)分含量及有關的各種理化指標,如脛、股骨
強度,功能酶,代謝產物異常及缺乏癥。
三.使用原則
1.用于需要量的確定有過量水平,生長快速期,即愈小愈敏感,當然要根據(jù)試驗
目的確定。
2.評定效價(對比法),應低于最大需要量。
四.試驗設計的注意事項
L唯一差異原則除考察因素外,其它條件完全一致(血緣、性別、體重、年齡、
健康、環(huán)境溫度(局部有效溫度)、空氣流速及清潔度、飲水、光照、聲響等,特別是
飼糧組成中的各種對考察因子能產生影響的物質。
2.考察因素水平間差異愈小,對條件的一致性要求愈高,重復數(shù)要求也愈多,即群
體(樣本)變大。各處理間和組內間的差異(由于試驗動物本身及條件不一致所引起的
誤差)不能比考察因素產生的真實差異還大。即誤差方差的均方與處理間的均方之比(F
值)能達到顯著標準為宜。因此,條件的控制的嚴格程度隨試驗考察因素效應大?。ú?/p>
異大?。┒悺T瓌t上是在保證能達到試驗目的前提下,愈一致愈好,但太嚴了難于實
現(xiàn)。
表2-5方差分析示例:
變差來源df平方之和均方F
各培養(yǎng)液間5847.05169.4114.37**
各培養(yǎng)液內24282.9311.79
總的291129.98
3.隨機分組
動物隨機(年齡、體重、血緣)分組,再隨機到試驗場地的具體位置(環(huán)境條件的
一致)。
4.常用試驗設計方法
①多用單因子設計,多做兩個小試驗比做一個大的復因子試驗,即容易控制條件,
試驗結果也更令人信服,可靠。
②在動物數(shù)量不多,體重差異較大的情況下,為了獲得較滿意的結果,除了用協(xié)方
差分析,也可按配對試驗的原理進行設計、檢驗(T檢驗),只是檢驗要麻煩一點。
③慎用旋轉通用組合設計
考察因素的效果,有加性(疊加)作用的情況下較合理,如考察化學反應的溫度、
時間、酶(催化劑)。
④群飼與單個飼養(yǎng)、任食與限食
群食有利采食,但對死亡動物攝食的飼料扣除麻煩。
單個飼養(yǎng)采食受影響,從而影響增重。但飼料消耗好統(tǒng)計。
一般用生長效應確定氧分的需要量,采用任食;評定養(yǎng)分生物效價的消化和代謝試
驗用限食。
5.純合日糧與實驗動物
Sem-Purifleddiet
①作用(功績):確定必需養(yǎng)分
確定最低需要量
毒性試驗
②優(yōu)點:試驗動物(小白鼠、大鼠)血緣純、周期快、成本低(試驗動物)。缺點:
費用高,對飼糧純度要求嚴。
第六節(jié)試驗技術
一.同位素示蹤及同位素稀釋技術
1.同位素示蹤技術:標記跟蹤物質的代謝過程、流向及流量。
2.同位素稀釋技術:標記機體物質代謝庫,達到全身各部組織含有與標記同樣的該
物質的標記元素(物質)占該物質總量的比例相同。用于物質代謝速率的測定,內源排
泄量的測定。但內源N或氨基酸的測定受腸道微生物和腸粘膜代謝的影響,有悖于稀
釋的原理。
另因同位素用量大,有污染,一般采用穩(wěn)定同位素Nt但測定穩(wěn)定同位素需質譜
儀。
二.外科造瘦技術及吻合術
1.作用用于養(yǎng)分消化率的測定,如過瘤胃(通過瘤胃微生物作用)的飼料蛋白的
能量(回腸末端氨基酸)消化率的測定。
2.方法
①屢管種類
A.簡單T型嘍管:可安放在瘤胃、十二指腸,測反芻動物飼料蛋白質的降解率;
安放在回腸末端、盲腸測氨基酸消化率。
缺點是食糜樣品收集缺乏代表性。
簡單T型屢管由于安裝在回-盲瓣前后的位置不同,有多種形式和叫法。
B.橋式屢管:實際上是兩個瘦管,一個讓食糜流出,取樣,取樣后剩下的又從另
一嘍管送回消化道。樣品有代表性,但很繁瑣。
C.可操縱(可移動)回-盲矮管術:是簡單T型嘍管的衍生,即在與回盲瓣相對的
對側盲腸壁和相應的腹壁安一個瘞管,并導入一根尼龍線,線頭系一個不銹鋼圈,圈的
直徑比回盲瓣處回腸的內徑稍大(約3-3.5cm),并置入回-盲瓣前的回腸內。在回-盲瓣
交接處的腸壁外套一直徑小于內環(huán)的不銹鋼圈,放在內環(huán)與回盲瓣交接處之間。尼龍線
另一頭,通過屢管,引出體外,即嘍管頭外,并固定在嘍管頭上,以免頭縮回腹腔盲腸
內。由集食糜爛時,拉緊尼龍線,使回-盲瓣緊貼在瘦管腹壁頭端,食糜就可流出疹管
外。
②回-直腸吻合術
將回腸近端,回盲瓣前(5cm左右)切斷,靠回-盲瓣端進行荷包縫合;然后將直
腸距肛門的2/3-3/4處切斷,將回腸斷端與近肛門直腸斷端吻合,直腸距結腸端同樣用
荷包縫合封閉,在結腸與直腸交接處腸壁切一口安裝瘦管,排泄大腸殘留的食糜。
回腸與直腸吻合有端-端吻合,也有端-側吻合,但以端-端吻合效果好,手術成功率
高。屢管也可在直腸近結腸斷端直接安裝。如果T型瘦管兩翼太短,隨著腸管的長大,
屢管易脫落。腸端開口易與腹壁粘合,如果大腸殘留食糜已排空完,腹壁切口愈合后沒
有什么危險,對試驗也無影響。
回-直腸吻合術安裝矮管的另一作用是為了在手術頭幾周,灌注電解質容液。術后
頭1-2周對N、AA的消化率無影響,但對礦物元素的影響較大。第一周大多數(shù)礦物元
素的消化率降低,有資料報導,鈉、鎂、鎰消化率為負值,以后逐漸升高。但鋅回升緩
慢,到第五周,仍為負值。
■=?mmssiittanffc
第一節(jié)飼料蛋白質營養(yǎng)價值的評定
—.引言
蛋白質營養(yǎng)價值(質量)的評定一直是營養(yǎng)學研究的重點和熱點。從1841年法國
生理學家(FrancoisMagendie)發(fā)現(xiàn)明膠不能代替肉蛋白以來,營養(yǎng)學家一直沒有停止
過這方面的研究。但是,由于對蛋白質營養(yǎng)機理的正確認識本身就是一個漫長的過程,
對其營養(yǎng)價值的認識和評定方法也經(jīng)歷一個漫長的進化過程,至到理想蛋白模式和可消
化氨基酸的提出與實踐,使蛋白質營養(yǎng)價值的評價,才真正實現(xiàn)了分子水平的需要和供
給的較精確的統(tǒng)一。
二.評定方法的歷史回顧
LN與CP
各種蛋白質含氮是15.5-18.0,平均取16,取NX6.25為CP。由于動物和消化利用
的是氨基酸或肽的形式,而不是氮,所以平均乘6.25求得的CP也只是蛋白質及含氮化
合物的量的一種表示形式,不是生物可利用值。
2.DCP(DigestibleCrudeprotein)
曾經(jīng)盛行一時,因不能反映蛋白質是以氨基酸、肽消化吸收的實質,對于評定單胃
動物飼料蛋白質的營養(yǎng)價值已無多大意義,但對反芻動物意義較大。
3.BV(BiologioalValue)
thomas(1909)提出,Michell(1924)修訂
八黑=*。
TBV-IN-FN-UN+FNe+UNe+VN
1N-FN+FNe
4.NPU(Netproteinutilization)
凈蛋白利用率,BenderandMiller1953年提出,其原意為:
MD,,體N-無N日糧體N
、食入N
相當于=絆”或8Vx消化率(CP)
食入N
5.NPV(凈蛋白質Netprotoinvalue)
NPV=食入NXNPUX6.25
6.PER(蛋白質效率比Proteinefficiencyratio)
OsborneandMendel1919年提出,其定義為:
PER=體增重/食入CP
7.NPR(凈蛋白比Netproteinratio)
BenderandDoll1957年提出,其意義為:
=測定蛋白增重(克)-無N日糧失重(克)
"進食蛋白(克)
式中CP換成N即為NPU
8.GPV(總氮價值Grossproteinvalue)
?D1/增重克/每克測試"PER/樣
增重無/每克標準CPPER/標
9.RS(斜率比Sloperatio)
HegstedandChang1965年以生長大鼠為實驗動物,多用于測定人的食物蛋白質量。
_測定蛋白增重回歸直線的斜率
一標準蛋白增重回歸直線的斜率
又稱相對蛋白質價值(Relativeproteinvalue)?
10.化學比分(Chemicalscore)
MitchellandBlock1946提出,其實質是以一種優(yōu)質的動物蛋白的第一限制氨基酸
(如賴氨酸)含量為標準,被檢飼料所含此氨基酸相當于它的百分比值。一般是以雞蛋
蛋白為標準。例如玉米蛋白含Lys為2.79、雞蛋蛋白含Lys為7%,其玉米蛋白對于雞
蛋白的比分為:
279
^xl00=40
7
11.必需氨基酸指數(shù)EAAI
Essentialaminoacidindex,Oxer(1951)。
EAA/(%)=旭
\仇b2%
a:為被測蛋白必需氨基酸,豬為10,雞為11。
b:為標準蛋白必需氨基酸,豬為10,雞為11。
綜上所述,上面的所有方法只能比較一種飼料或飼糧蛋白質的好壞。后兩種方法雖
反映了蛋白質氨基酸的質量情況,其表示方法仍無可加性,因此仍不能與需要量直接掛
勾。在50年代確定了動物的必需氨基酸以后,結合限制性氨基酸,既可判別蛋白質量
的好壞,也可與需要量掛勾。因此從總氨基酸進入可消化氨基酸,才真正實現(xiàn)了需要與
供給較精確的統(tǒng)一。
三.AA生物效價的評定
可消化氨基酸、可利用氨基酸、有效氨基酸都屬于AA生物效價,由于評定的方法
不同,叫法有所不同,但實際都是以能否被動物消化利用為基礎的。
可消化氨基酸的最大優(yōu)點是:
1.抓住了蛋白質營養(yǎng)的實質,即以AA或肽的形式吸收和構建新的蛋白質。
2.能夠與動物的需要準確掛勾,而且使理想蛋白更具有實際意義。
(―)DAA的測定
1.豬
由于大腸微生物干擾較大,使測定值偏多(略高10%),故均采用回腸末端收取食
糜的方法。主要有以下幾種方法;
a.T型屢管(simple-T-cannulas)-由Horszcaruk等(1972)首創(chuàng),一般將痿管安在
回-盲瓣前3-10cm處。Laplace和Borgida(1976)、Darcy等(1980)認為回-盲瓣后安
瘦管對豬生理影響較小。但Moughan和Smith(1987)認為兩種T型屢管對AA消化率
的差異無顯著影響。
最大缺陷是必須用指示劑,因不可能收集全部糞尿,由此也帶來取樣缺乏代表性,
而且較麻煩。
b.橋式屢管(重進屢管)(r-entrantcannulas)
1973年由Horszcaruk和Zebrowska首創(chuàng)。有以下幾種形式:
回-回橋式矮管(ileo-ileo)
回-盲橋式疹管(ileo-caecal)
瓣后回I-結腸橋式瘦管(ileo-colic-post-valve)
不同部位橋式屢管測干物質消化率有差異(DenHartog等,1988)。Darcy等(1980)
的研究表明,瓣后回-結腸橋式痿管對荷術豬的生理影響較小,手術成功率較高。
橋式屢管的缺點是糞樣(食糜)取后又要送回消化道,相當繁瑣。
c.回-直腸吻合術
(ileo-rectalanastomosistehnique)
1984年Pioard提出,后經(jīng)演變,由于回-直腸斷端的位置和結合方式的不同,又有
以下幾種形式。
端-端吻合(end-to-end)
端-側吻合(end-to-side)
但以端-端吻合手術成功率高些。一般在回盲瓣前切斷回腸,在直腸與結腸交結處
前的直腸部位切斷。
回-直腸吻合術的最大優(yōu)點是收糞簡便,而且可收集全部糞樣。不足之處是手術較
復雜,手術成功率相對較低,但也取決于技術的熟練的程度。術后對豬的護理也較麻煩。
d.可移動(可操縱)的回-盲瘦管術
(steeredileo-caecalvalve)
Morz(1989)提出,手術具體作法前已敘及。此法的最大優(yōu)點是手術簡單,荷術
豬生理影響小。不足之處仍需指示劑。
上述各種方法的測值并無太大的差異,加上AA分析測定的誤差本身較大,所以很
難說那一個方法測值最準確。目前主要是看那種方法最簡便,包括取樣手術和對術荷豬
的影響。相對說來,回-直腸吻合術還較可取,雖手術麻煩,但糞樣(食糜)收集簡單,
而且可做到有代表性。
2.禽
禽飼料氨基酸消化率的測定相對較簡單。因禽大腸較短,而且主要是盲腸,所以不
必安裝屢管。為減少盲腸的影響,可切除盲腸。但大多數(shù)飼料切除盲腸與否對AA消化
率無顯著影響,只少數(shù)飼料?,如肉骨粉等切除盲腸AA消化率降低。
關于切不切除盲現(xiàn)有爭議,一些人認為盲腸在氮代謝中對尿中尿酸的二次利用以及
對消除NH3的不利影響有重要作用。未經(jīng)小腸吸收的氨基酸和短肽也可為盲腸微生物
充分利用,因此不宜切除。但盲腸切除與否對大多數(shù)飼料AA消化率無影響,盲腸對
AA的吸收只有在通過其頸部時才存在極有限的吸收。而且切除盲腸主要是減少微生物
的影響,因此切除盲腸只是測定少數(shù)飼料(如肉骨粉等)的AA消化率可能更準確,對
于大多數(shù)飼料切與不切影響不大。
由目前AA分析儀的測定值誤差較大,必然會影響到飼料氨基酸的消化率測值的準
確性,一次試驗測得的值很難說準確、可靠,一般取平均值較合理。
(二)內源氨基酸的測定方法
氨基酸真消化率的準確測定關鍵在于內源氨基酸的準確測定,特別是近似正常含氮
日糧情況下內源氨基酸的準確測定至今還沒有理想的方法。
1、傳統(tǒng)方法
饑餓法
無氮日糧法
回歸法
2、I?基化法(同型精氨酸法)(Moughan等,1990)
原理:該方法通過將日糧中的賴氨酸全部胭基化后轉變?yōu)橥途彼?,消化道?/p>
的賴氨酸全部為內源氨基酸。
同型精氨酸吸收進入機體后可降解成賴氨酸參與機體蛋白質合成,而不影響機體賴
氨酸的需要。家禽由于體內缺乏將同型精氨酸轉變?yōu)橘嚢彼岬拿福詫е履蛞褐杏写?/p>
量的同型精氨酸排出,影響該方法的應用。
弧基化其它氨基酸,影響消化率
飼喂胭基化蛋白日糧采食量下降
胭基化不完全,影響計算準確性。
3、酶解酪蛋白(EHC)/超濾法(Darragh等,1990)
原理:以EHC作為唯一氮源,假定分子量(MW)<10KDa可完全被吸收,食糜中
排出的N和AA全部為內源。
不足處:MWvlOKDa作為完全吸收標準證據(jù)不夠充分。
食糜中含有MW<10KDa的內源含N物占總含N的10-27%
4、同位素標記法
原理:(1)標記飼料(Vanleeuwen等,1994)
食糜外源N/食糜總N=食糜N15豐度/飼料N15豐度
食糜內源N=食糜總N-食糜外源N?
不足:隨食入后時間的延長(7-8h),筑“N經(jīng)再循環(huán)進入消化道。
(2)內源物標記(動物標記)(deLange等,1990)
原理:血液i^N-Leu/血液總Leu=食糜&N-Leu/食糜內源總Leu
食糜l5N-Leu
食糜內源總Leu=-----------------------------------X血液總Leu
血液,5N-Leu
不足:(1)N和AA前體池的存在與否及穩(wěn)定性
(2)腸粘膜利用微生物合成的AA合成蛋白質,并分泌進入腸道,影響其內源
N及AA的測定。
(3)一次性注射少劑量3H-Leu(姚軍虎,2000)
原理:根據(jù)稀釋原理,注射后一定時間,下式可能成立或近似相等。
食糜3H-Leu豐度(內源)血液3H-Leu豐度
食糜中Leu血液中Leu
不足:等式成立的時間難確定準確
5、差量法(Ammerman,1957)
原理:假設在動物進食正常日糧粗蛋白范圍內,內源氮或內源AA的排泄量不隨日
糧CP水平的升高而變化或者變化很小可忽略不記,下式成立。
前后兩次食入量之差一前后兩次排泄物之差
真消化率二------------------------------------------------
前后兩次食入量之差
內源N或AA=食入N或AAX(真消化率一表觀消化率)
不足:內源N或AA排泄量較穩(wěn)定或變化很小的日糧CP水平范圍的確定較困難。
(三)有效賴氨酸的測定
1.原理
主要是基于美拉德氏或褐變反應(Maillardorbrowningreactiong)反應后還原糖與
肽鏈中的e-NH3結合,使胰蛋白酶無法切開,從而不能被消化吸收,
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