消毒滅菌與病原微生物實驗室安全

第三章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全

細菌的生命活動與環(huán)境密切相關.適宜的環(huán)境,能促進細菌的生長繁殖.環(huán)境不適宜時,可引起細菌的變異或抑制其生長,甚至殺滅細菌.制作人：蔣小平1消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024

微生物無處不在，醫(yī)療中如何創(chuàng)造無菌的條件？2消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024第一節(jié)消毒滅菌一、概念：

1、消毒（disinfection）：

2、滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物的方法

3、防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細菌生長繁殖的方法，不一定殺死微生物

:殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物,不能殺死細菌芽胞或非病原微生物的方法

3消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024第一節(jié)消毒滅菌一、概念：

4、無菌（asepsis）：無菌是無活菌的意思，多是滅菌的結(jié)果

。

5、無菌操作：防止細菌進入人體或其它物品的操作技術(shù)。

4消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024

熱力滅菌法輻射滅菌法物理方法

濾過除菌法超聲波殺菌法干燥和低溫抑菌法等

高效消毒劑-含氯、醛類消毒劑環(huán)氧乙烷等化學方法

中效消毒劑-含碘消毒劑醇類（異丙醇）

低效消毒劑-季銨鹽類氯已定高錳酸鉀

第二節(jié)消毒滅菌的方法5消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024第二節(jié)消毒與滅菌二、物理消毒滅菌法：（一）熱力消毒滅菌法：1、干熱滅菌法：焚燒燒灼干烤6消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024第二節(jié)消毒與滅菌二、物理消毒滅菌法：（一）熱力消毒滅菌法：2、濕熱消毒滅菌法：巴氏消毒法

61.1/62.8℃15-30min71.7℃15-30秒

煮沸法

100℃5分鐘間歇蒸氣消毒法

100℃15—30分鐘過夜（循環(huán)3次）7消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024高壓蒸汽滅菌法：最有效的滅菌方法，為一密閉容器中，可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物。第二節(jié)消毒與滅菌8消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024高壓蒸汽滅菌基本原理：

加熱密閉容器中水至沸騰產(chǎn)生蒸汽，排盡原鍋內(nèi)的冷空氣后，閉閥升壓，使水沸點升高，從而導致菌體蛋白質(zhì)凝固變性失活。第二節(jié)消毒與滅菌9消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024

高壓蒸汽滅菌主要對象：牛肉膏蛋白胨、營養(yǎng)肉湯等培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械及耐高溫、濕熱的物品。第二節(jié)消毒與滅菌10消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024同溫度下濕熱滅菌較干熱效果好的原因：（1）濕熱中菌體吸水，蛋白質(zhì)易凝固，因蛋白質(zhì)含水量增加，所需凝固點降低。（2）濕熱穿透力明顯大于干熱。（3）濕熱蒸汽有潛熱存在，能迅速提高被滅物體的溫度，從而增加滅菌效力。第二節(jié)消毒與滅菌11消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024高壓滅菌幾點注意事項：12消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024第二節(jié)消毒與滅菌二、物理消毒滅菌法：（二）電磁波輻射殺菌法：

紫外線波長在265-266nm殺菌能力最強,它能干擾DNA復制,導致細菌變異或死亡,但穿透力弱,故只能用于房間空氣和物品表面的消毒.1、日光與紫外線：13消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/20242、電離輻射

包括β和γ射線，電離射線具有較高的能量，對各種細菌均有致死作用，機制是干擾DNA合成、破壞細胞膜、引起酶系統(tǒng)紊亂等，主要用于一次性醫(yī)用塑料制品消毒，食品、藥品等消毒滅菌，而不破壞其營養(yǎng)。第二節(jié)消毒與滅菌14消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/20243、微波

波長1-1000mm的電磁波，可穿透玻璃、陶瓷和塑料，但不能穿透金屬表面。主要用于食品、非金屬器械、檢驗室用品等消毒，原理是極性分子摩擦生熱，內(nèi)外升溫達到殺毒滅菌的目的。第二節(jié)消毒與滅菌15消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024第二節(jié)消毒與滅菌二、物理消毒滅菌法：（三）濾過除菌法：

主要用于不耐高溫的血清、抗毒素、抗生素、藥液的除菌。16消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024第二節(jié)消毒與滅菌三、化學消毒滅法：（一）常用化學消毒劑的種類及用途（二）化學消毒劑的殺菌機制：

1、使菌體蛋白變性或凝固；

2、干擾微生物的酶系統(tǒng)和代謝；

3、損傷細胞膜；17消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024種類常用濃度用途作用機制1.高效消毒劑含氯消毒劑；漂白粉次氯酸鈉

過氧乙酸

過氧化氫

戊二醛甲醛（福爾馬林）

有效氯量:4g/L

有效氯量:100-1000g/L0.2%-1%

3%-25%

2%

35%-40%飲水消毒皮膚、物體表面、排泄物、污水皮膚、物表面、空氣

皮膚、物表面、空氣

醫(yī)療器械

醫(yī)療，防腐氧化作用,蛋白質(zhì)變性與沉淀,滅活酶類

氧化作用,蛋白質(zhì)沉淀菌體蛋白質(zhì)及核酸烷基化

常用消毒劑的種類、濃度、用途及作用機制18消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024常用消毒劑的種類、濃度、用途及作用機制（一）種類常用濃度用途作用機制2.中效消毒劑乙醇

碘酊

碘伏3.低效消毒劑苯扎溴銨（新潔爾滅）

氯已定（洗必泰）高錳酸鉀

70%-75%

20g碘/L75%乙醇

1-2mg游離/L0.4%-1.6%溶液

0.5%-4.0%1-10g/L

醫(yī)療器械、皮膚

皮膚、黏膜、物表面皮膚、黏膜、物表面皮膚、黏膜、物體表面皮膚、黏膜、物體表面皮膚、黏膜、食具、蔬菜、水果

蛋白質(zhì)變性凝固、干擾代謝

19消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024第三節(jié)

消毒滅菌的運用

皮膚、黏膜、空氣、飲水、環(huán)境、醫(yī)療器械、病人污染物品、病人排泄物與分泌物的消毒滅菌。（具體自己看書）20消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024影響消毒滅菌效果的因素：1、消毒劑的性質(zhì)、濃度和作用時間2、細菌的種類與生活狀態(tài)（P44）3、溫度4、酸堿度5、有機物第四節(jié)影響消毒滅菌效果的因素21消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024第五節(jié)

病原微生物實驗室生物安全

一、生物安全（biosafety）即生物技術(shù)安全（safetyofbiotechnology）指與生物有關的各種因素對社會、經(jīng)濟、人類健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風險。22消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024

在安全的實驗室內(nèi)使用安全的方法從事與病原微生物菌（毒）種、樣本有關的教學、檢測、診斷、研究等活動，達到保護實驗室工作人員和公眾健康的目的。核心是防感染和防擴散！23消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024二、病原微生物的分類

根據(jù)傳染性和危害程度，病原微生物分為四類：

第一類是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。

第二類是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。24消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024

第三類是指能夠引起人或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。第四類是指在通常情況下不會引起人或動物疾病的微生物。25消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024病原微生物實驗室生物安全防護水平（BSL）分級級別安全裝備處理對象一級無特別需求，開放式實驗桌、洗手槽對人體、動植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人、動植物致病的致病因子。二級一級或二級生物安全柜、滅菌壓力鍋、防護衣、手套、面罩等對人體、動植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險的致病因子，對健康成人、動植物和環(huán)境不會造成嚴重危害，具有有效的預防和治療措施。三級除上述，還增加特殊防護衣、進入管制、定向氣流對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴重的甚至是致命的疾病，或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預防治療措施。四級三級生物安全柜，隔離區(qū)域，有送風、排風、真空、消毒系統(tǒng)，正壓防護衣對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險的致病因子。沒有預防治療措施。26消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/2024復習思考題1.殺滅芽孢最常用和有效的方法是（）A、紫外線照射B、煮沸5minC、巴氏消毒法D、高壓蒸汽滅菌法2.滅菌方法錯誤的是（）A、手術(shù)室空氣-紫外線B、排泄物-漂白粉C、飲水-氯氣D、含血清培養(yǎng)基-高壓蒸汽滅菌DD27消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/20243.常用于基礎培養(yǎng)基滅菌（）A、高壓蒸汽滅菌法B、紫外線照射法C、濾過除菌法D、巴氏消毒法4、常用于手術(shù)器械的滅菌（）A、紫外線照射法B、高壓蒸汽滅菌C、濾過除菌法D、巴氏消毒法AB28消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/20245.關于紫外線，說法錯誤的是____________。(第03章)a.其殺菌作用與波長有關b.可損壞細菌的DNA構(gòu)型c.265-266nm殺菌作用最強d.其穿透力弱，故對人體無損害e.紫外線適用空氣和物體表面的消毒6.常用于空氣或物體表面的消毒____________。(第03章)a.高壓蒸氣滅菌法b.紫外線照射法c.濾過除菌法d.巴氏消毒法e.干烤法

db29消毒滅菌與病原微生物實驗室安全5/9/20247.將牛奶加熱62℃30分鐘的目的是____________。a.使牛奶中的蛋白質(zhì)變性，易于吸收b.殺滅牛奶中的所有微生物c.殺死牛奶中的病原菌d.使牛奶不含活菌e.防止或抑制微生物在牛奶中生長和繁殖8.乙醇消毒劑常用的濃度是：____________。a.100％b.95％c.75％d.50％e.30％cc30消