《動物防治員崗位培訓》課件-培養(yǎng)基

培養(yǎng)基人工配制的，適合細菌等微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基的概念培養(yǎng)基的類型按成分分類天然培養(yǎng)基（非化學限定培養(yǎng)基）：含有化學成分還不清楚或化學成分不恒定的天然有機物。如，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。--成本較低，是微生物實驗室和工業(yè)化生產(chǎn)中常用的培養(yǎng)基。天然有機物來源主要成分牛肉浸膏/粉瘦牛肉組織浸出汁濃縮干燥而成的膏狀或粉末狀物質(zhì)富含水溶性糖類、有機氮化合物、維生素、鹽等蛋白胨將肉、酪素或明膠用酸或蛋白酶水解后干燥而成的淡黃色粉末狀物質(zhì)富含有機氮化合物，也含有一些維生素和糖類酵母浸膏/粉酵母細胞的水溶性提取物經(jīng)濃縮干燥制成的膏狀或粉末狀物質(zhì)富含B族維生素，也含有有機氮化合物和糖類培養(yǎng)基的類型按成分分類合成培養(yǎng)基（也稱化學限定培養(yǎng)基）：根據(jù)目標微生物所需營養(yǎng)物質(zhì)的種類和數(shù)量，精確設計并由已知成分的純化學藥品人工配制而成。如，葡萄糖銨培養(yǎng)基--成本較高；微生物生長緩慢；適用于微生物營養(yǎng)代謝、分類鑒定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究。葡萄糖銨培養(yǎng)基配方氯化鈉5g硫酸鎂0.2g磷酸二氫銨1g磷酸氫二鉀1g葡萄糖2g麝香草酚藍0.08g瓊脂15g蒸餾水1000mL最終pH6.8+0.2培養(yǎng)基的類型按物理狀態(tài)分類液體培養(yǎng)基：--大規(guī)模培養(yǎng)微生物時常用，在培養(yǎng)需氧菌或兼性菌時，通過通氣、振蕩或攪拌可以增加培養(yǎng)基的溶氧量，同時使細菌和營養(yǎng)物質(zhì)分布均勻，從而提高細菌或其產(chǎn)物的產(chǎn)量。固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基凝固劑凝固劑（賦形劑）明膠：使用最早，由動物膠原組織制備而成，目前已不作為賦形劑使用，而是用于制備鑒別培養(yǎng)基，觀察細菌能否液化明膠。瓊脂：目前最常用，是從海藻中提取的一種高度分支的復雜多糖。瓊脂明膠常用濃度（%）1.5—25—12熔點（℃）9625凝固點（℃）4020pH微酸酸性灰分（%）1614—15氧化鈣（%）1.150氧化鎂（%）0.770氮（%）0.418.3微生物利用能力絕大多數(shù)微生物不能利用許多微生物能利用培養(yǎng)基的類型按物理狀態(tài)分類半固體培養(yǎng)基：瓊脂含量0.2%-0.5%。--常用于細菌動力試驗→判斷鞭毛有無。固體培養(yǎng)基：瓊脂含量2%-3%。--為微生物提供一個營養(yǎng)表面，單個細菌在上面生長繁殖形成菌落。--常用于細菌的分離、鑒定、活菌計數(shù)及菌種保藏等。平板斜面培養(yǎng)基的類型按用途分類基礎培養(yǎng)基：含有一般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)。--應用：一些對營養(yǎng)要求不高的細菌的純培養(yǎng)；作為一些特殊培養(yǎng)基的基礎成分。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基的類型按用途分類營養(yǎng)培養(yǎng)基（加富培養(yǎng)基）：在基礎培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)（如，血液、血清、酵母浸液等）。--應用：培養(yǎng)營養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物。血瓊脂平板培養(yǎng)基的類型按用途分類選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長。--兩類：①加入某種特殊營養(yǎng)物質(zhì)。如，明膠培養(yǎng)基，以蛋白質(zhì)為唯一氮源，分離產(chǎn)胞外蛋白酶的微生物。②加入某種抑菌物質(zhì)，抑制或殺死其他微生物。如，染料亮綠或結(jié)晶紫，抑制革蘭陽性菌，從分離革蘭陰性菌；亞硫酸鉍，抑制革蘭陽性菌和絕大多數(shù)革蘭陰性菌，而革蘭陰性的沙門菌可以生長。培養(yǎng)基的類型按用途分類鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種底物和指示劑，根據(jù)細菌能否利用這一底物產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物，依據(jù)指示劑的顏色變化，將不同類型的微生物區(qū)分開來。--應用：細菌的生化鑒定（生化培養(yǎng)基）培養(yǎng)基底物指示劑代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基特征變化主要用途糖發(fā)酵培養(yǎng)基各種糖類溴甲酚紫乳酸、醋酸、丙酸等由紫色變成黃色鑒別腸道細菌伊紅美藍培養(yǎng)基乳糖伊紅、美藍酸形成帶金屬光澤深紫色菌落鑒別大腸桿菌伊紅美藍瓊脂平板各種糖發(fā)酵培養(yǎng)基選擇鑒別培養(yǎng)基：用于細菌的分離培養(yǎng)麥康凱瓊脂培養(yǎng)基配方蛋白胨20g乳糖10g3號膽鹽1.

5g

氯化鈉5g中性紅0.03g結(jié)晶紫0.001g瓊脂15g蒸餾水1000mL最終pH7.2+0.2麥康凱平板培養(yǎng)基的類型按用途分類增菌培養(yǎng)基：給微生物的繁殖提供特定的生長環(huán)境，促進目的微生物的大量生長。--根據(jù)培養(yǎng)目標分為兩類：①通用增菌培養(yǎng)基（非選擇性增菌培養(yǎng)基）：在基礎培養(yǎng)基中加入合適的營養(yǎng)元素（如，生長因子），以促進目的菌的生長繁殖。能保證大多數(shù)微生物的生長。②專用增菌培養(yǎng)基（本質(zhì)為選擇培養(yǎng)基）：含有特殊的抑菌物質(zhì)，抑制雜菌的生長，有利于特定微生物的生長。特別適合病原菌含量少，很難直接分離培養(yǎng)的病料。亞硒酸鹽胱氨酸（SC）增菌液（專用增菌培養(yǎng)基）亞硒酸氫鈉：抑制革蘭氏陽性菌和非沙門氏菌的大多數(shù)革蘭氏陰性腸道菌。培養(yǎng)基的類型按用途分類厭氧培養(yǎng)基：專門用來培養(yǎng)基厭氧微生物。含有還原性物質(zhì)，液體培養(yǎng)基表面常覆蓋凡士林或石蠟。庖肉培養(yǎng)基配方蛋白胨30g牛肉膏粉5g