DB32-T 2958-2016養(yǎng)殖水體中鄰苯二甲酸酯的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法

ICS65.150

B50

備案號：51405-2016DB32

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB32/T2958-2016

養(yǎng)殖水體中鄰苯二甲酸酯的測定

氣相色譜-質(zhì)譜法

Determinationofphthalateestersinaquaculturewater

Gaschromatography-massspectrum

2016-09-20發(fā)布2016-11-20實施

江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

DB32/T2958-2016

養(yǎng)殖水體中鄰苯二甲酸酯的測定氣相色譜-質(zhì)譜法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定養(yǎng)殖水體中鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸丁酯苯甲酯（BBP）、鄰苯二

甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二正辛酯（DNOP）、鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）、鄰

苯二甲酸二異癸酯（DIDP）6種鄰苯二甲酸酯類（PAEs）化合物的氣相色譜—質(zhì)譜法（GC—MS）。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于養(yǎng)殖水體中6種鄰苯二甲酸酯的測定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法。

3方法原理

采用二氯甲烷對水樣中PAEs進(jìn)行液液萃取，萃取液經(jīng)無水硫酸鈉脫水濃縮器濃縮后，用氣相色譜

-質(zhì)譜法（GC-MS）分析。根據(jù)色譜峰保留時間和目標(biāo)化合物的特征離子定性，內(nèi)標(biāo)法定量。

4試劑與材料

4.1除非另有說明，所用有機(jī)試劑均為色譜純，有機(jī)溶劑濃縮300倍不得檢出PAEs。本法中實驗室用

水應(yīng)符合GB/T6682中規(guī)定的一級水規(guī)格，且其PAEs的含量應(yīng)用本方法應(yīng)不得檢出。實驗室應(yīng)使用全

玻璃儀器，嚴(yán)禁使用塑料制器皿。

4.2溶劑

二氯甲烷（CH2Cl2）；

正己烷（H3C(CH2)4CH3）；

乙醚(CH3CH2OCH2CH3)。

4.3無水硫酸鈉（Na2SO4）

分析純，500℃烘4h，冷卻后裝瓶，干燥器中密封保存。

4.4中性氧化鋁（Al2O3）

層析純，100目～200目，550℃烘8h，在封口的玻璃瓶中冷卻至室溫；100.0g氧化鋁中加3.0mL

水，振蕩或搖動10min，置于干燥器中2h后使用。

4.5鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)貯存溶液(100.0mg/L)

購置商品化鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液或者標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用正己烷作溶劑配置鄰苯二甲酸酯100.0mg/L標(biāo)

準(zhǔn)貯存溶液（貯存溶液濃度可以適當(dāng)微調(diào)），4℃冰箱中避光保存，保質(zhì)期6個月。

4.6鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（10.0mg/L）

使用正己烷稀釋鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)貯存溶液制成。

4.7內(nèi)標(biāo)貯存溶液（100.0mg/L）

氘代鄰苯二甲酸二戊酯（DIPP-d4），用正己烷稀釋商品化進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液（2000.0mg/L)制成（或

1

DB32/T2958-2016

也可以使用純品配制），4℃冰箱中避光保存，保質(zhì)期6個月。

4.8進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)使用液（10.0mg/L）：使用正己烷稀釋進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)貯存溶液制成。

5儀器與設(shè)備

5.1氣相色譜/質(zhì)譜儀（配有EI電子轟擊電離源）。

5.2玻璃層析柱:內(nèi)徑10mm，長400mm。

5.3馬弗爐。

5.4氮吹儀。

5.5旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

6分析步驟

6.1水樣pH調(diào)節(jié)

測定水樣的pH值，若pH值不是中性，用1mol/L鹽酸（或1mol/L氫氧化鈉溶液）調(diào)至中性。

6.2樣品提取

將pH調(diào)至中性的1L待測水樣（清潔水中鄰苯二甲酸酯類的測定，可增大取樣體積）倒入分液漏斗

中，再加入50mL二氯甲烷，充分振蕩10min，靜置分層，將萃取液轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶；再向分液漏斗

中加入30mL二氯甲烷，重復(fù)萃取二次，合并萃取液（萃取過程中出現(xiàn)乳化時可加入氯化鈉或采用離心

法破乳）。萃取液加入20g無水硫酸鈉，振蕩1min，將萃取液全量轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶，濃縮至約2mL，

加入10ml正己烷，濃縮至2mL。

6.3樣品凈化

在玻璃層析柱中加入適量正己烷，加入6.0g中性氧化鋁，上層加入3.0g無水硫酸鈉，將液面調(diào)整

至與無水硫酸鈉頂端持平。將6.2中的2mL濃縮液全量轉(zhuǎn)入層析柱中，用35mL正己烷淋洗，棄去淋洗

液。用100mL乙醚-正己烷（20/80，V/V）混合淋洗液洗脫，洗脫液全量轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶，用旋轉(zhuǎn)蒸

發(fā)器濃縮至2mL左右，再加入5mL正己烷，濃縮至2mL左右。將濃縮液全量轉(zhuǎn)移至氮吹管中，氮吹至

1mL左右。將濃縮液轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶，添加進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)20μL（4.8），待測。

6.4校準(zhǔn)曲線

在6個10mL容量瓶中，分別加入0.000mL、0.100mL、0.200mL、0.300mL、0.400mL和0.500mL6

組份PAEs標(biāo)準(zhǔn)使用液（4.6），分別加入200μL進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)（4.8），用正己烷定容，混勻，作為校準(zhǔn)曲線

系列溶液。由此得到的PAEs校準(zhǔn)曲線系列濃度分別為：0.000mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L、0.300mg/L、

0.400mg/L和0.500mg/L，溶液中的內(nèi)標(biāo)物濃度皆為0.20mg/L，待測。

6.5GC-MS測定

6.5.1色譜條件

毛細(xì)管柱（5%苯基+95%聚二甲基硅氧烷）或等效GC-MS用色譜柱，內(nèi)徑0.25mm，長30m，固定

相液膜厚度0.25μm。

進(jìn)樣量：1.0μL。

進(jìn)樣方式：無分流進(jìn)樣，分流閥開啟時間0.75min。

載氣：高純氦氣（99.999％）。

流速：1.0mL/min。

升溫程序：從60℃升至200℃（15℃/min），保持1min，從200℃升至260℃（15℃/min），保持1min，

2

DB32/T2958-2016

從260℃升至280℃（20℃/min），保持5min。

6.5.2質(zhì)譜條件

離子源溫度：230℃。

掃描模式：選擇離子掃描（SIM），表1為鄰苯二甲酸酯的定量離子及特征離子。

進(jìn)樣口溫度：280℃。

接口溫度：290℃。

溶劑延遲：3.0min。

表1鄰苯二甲酸酯的定量離子和特征離子

序號名稱CAS定量離子特征離子

1鄰苯二甲酸二丁酯84-74-2149150、104

2氘代鄰苯二甲酸二戊酯*358730-89-915343

3鄰苯二甲酸丁酯苯甲酯85-68-714991、206

4鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯117-81-7149167、279

5鄰苯二甲酸二正辛酯117-84-0149150、279

6鄰苯二甲酸二異壬酯20548-62-314957、71

7鄰苯二甲酸二異癸酯26761-40-0149141、289

注：標(biāo)“*”的為內(nèi)標(biāo)。

6.5.3測定

在相同的GC/MS測定條件下，分別注入1.0μL待測樣品，測得各組分的保留時間、峰面積或峰高

值，進(jìn)行定性與定量分析。

6.5.4定性

在GC-MS全掃描（SCAN）模式下，利用標(biāo)準(zhǔn)品與樣品的保留時間、特征離子以及與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比對

特征離子比例進(jìn)行分析。

6.5.5選擇離子檢測定量分析

定量分析采用選擇離子檢測模式（SIM）進(jìn)行掃描，按照特征定量離子的響應(yīng)值進(jìn)行定量計算。

7樣品空白

除將實際樣品用實驗室純水替代外,其余樣品處理步驟同于水樣pH調(diào)節(jié)（6.1）至樣品凈化（6.3）過

程。

8定量計算

8.1內(nèi)標(biāo)法定量

根據(jù)公式（1）計算標(biāo)準(zhǔn)溶液中的目標(biāo)化合物與進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)的相對響應(yīng)因子。

3

DB32/T2958-2016

式中：――目標(biāo)化合物與進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)的相對響應(yīng)因子；

――標(biāo)準(zhǔn)溶液中目標(biāo)化合物的峰面積；

――標(biāo)準(zhǔn)溶液中進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)的峰面積；

――標(biāo)準(zhǔn)溶液中進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)的量，μg；

――標(biāo)準(zhǔn)溶液中目標(biāo)化合物的量，μg。

根據(jù)公式（2）計算樣品中目標(biāo)化合物的濃度。

式中：――樣品中目標(biāo)化合物的濃度，μg/L；

――樣品中目標(biāo)化合物的峰面積；

――空白樣品中目標(biāo)化合物的峰面積；

――樣品中進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)的峰面積；

――樣品中進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)的加入量，μg；

――取樣量，L。

8.2準(zhǔn)確度和精密度

本標(biāo)準(zhǔn)方法在0.1μg/L～0.5μg/L添加水平范圍內(nèi)方法回收率為70%～110%，精密度≤15%。

9檢出限

本方法鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸丁酯苯甲酯、鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯、鄰苯二甲酸

二正辛酯、鄰苯二甲酸二異壬酯、鄰苯二甲酸二異癸酯的最低方法檢出限依次為15ng/L、15ng/L、

16ng/L、18ng/L、20ng/L、20ng/L。

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AA

附錄A

（資料性附錄）

鄰苯二甲酸酯的總離子流圖

圖A.1為鄰苯二甲酸酯的總離子流圖，圖中各峰上的數(shù)字依次代表：1鄰苯二甲酸二丁酯、2氘代

鄰苯二甲酸二戊酯（內(nèi)標(biāo)）、3鄰苯二甲酸丁酯苯甲酯、4鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯、5鄰苯二甲

酸二正辛酯、6鄰苯二甲酸二異壬酯、7鄰苯二甲酸二異癸酯。

圖A.1鄰苯二甲酸酯的氣相色譜/質(zhì)譜譜圖

_________________________________

5

DB32/T2958-2016

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按GB/T1.1—2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》、GB/T20001.4—2001

《標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則第4部分：化學(xué)分析方法》編寫。

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇省海洋與漁業(yè)局提出。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：江蘇省漁業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測站。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：樊祥科、張永江、鄒勇、黃春貴、鄭浩、張莉、楊振、張智敏。

I

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養(yǎng)殖水體中鄰苯二甲酸酯的測定氣相色譜-質(zhì)譜法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定養(yǎng)殖水體中鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸丁酯苯甲酯（BBP）、鄰苯二

甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二正辛酯（DNOP）、鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）、鄰

苯二甲酸二異癸酯（DIDP）6種鄰苯二甲酸酯類（PAEs）化合物的氣相色譜—質(zhì)譜法（GC—MS）。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于養(yǎng)殖水體中6種鄰苯二甲酸酯的測定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法。

3方法原理

采用二氯甲烷對水樣中PAEs進(jìn)行液液萃取，萃取液經(jīng)無水硫酸鈉脫水濃縮器濃縮后，用氣相色譜

-質(zhì)譜法（GC-MS）分析。根據(jù)色譜峰保留時間和目標(biāo)化合物的特征離子定性，內(nèi)標(biāo)法定量。

4試劑與材料

4.1除非另有說明，所用有機(jī)試劑均為色譜純，有機(jī)溶劑濃縮300倍不得檢出PAEs。本法中實驗室用

水應(yīng)符合GB/T6682中規(guī)定的一級水規(guī)格，且其PAEs的含量應(yīng)用本方法應(yīng)不得檢出。實驗室應(yīng)使用全

玻璃儀器，嚴(yán)禁使用塑料制器皿。

4.2溶劑

二氯甲烷（CH2Cl2）；

正己烷（H3C(CH2)4CH3）；

乙醚(CH3CH2OCH2CH3)。

4.3無水硫酸鈉（Na2SO4）

分析純，500℃烘4h，冷卻后裝瓶，干燥器中密封保存。

4.4中性氧化鋁（Al2O3）

層析純，100目～200目，550℃烘8h，在封口的玻璃瓶中冷卻至室溫；100.0g氧化鋁中加3.0mL

水，振蕩或搖動10min，置于干燥器中2h后使用。

4.5鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)貯存溶液(100.0mg/L)

購置商品化鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液或者標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用正己烷作溶劑配置鄰苯二甲酸酯100.0mg/L標(biāo)

準(zhǔn)貯存溶液（貯存溶液濃度可以適當(dāng)微調(diào)），4℃冰箱中避光保存，保質(zhì)期6個月。

4.6鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（10.0mg/L）

使用正己烷稀釋鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)貯存溶液制成。

4.7內(nèi)標(biāo)貯存溶液（100.0mg/L）

氘代鄰苯二甲酸二戊酯（DIPP-d4），用正己烷稀釋商品化進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液（2000.0mg/L)制成（或

1

DB32/T2958-2016

也可以使用純品配制），4℃冰箱中避光保存，保質(zhì)期6個月。

4.8進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)使用液（10.0mg/L）：使用正己烷稀釋進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)貯存溶液制成。

5儀器與設(shè)備

5.1氣相色譜/質(zhì)譜儀（配有EI電子轟擊電離源）。

5.2玻璃層析柱:內(nèi)徑10mm，長400mm。

5.3馬弗爐。

5.4氮吹儀。

5.5旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

6分析步驟

6.1水樣pH調(diào)節(jié)

測定水樣的pH值，若pH值不是中性，用1mol/L鹽酸（或1mol/L氫氧化鈉溶液）調(diào)至中性。

6.2樣品提取

將pH調(diào)至中性的1L待測水樣（清潔水中鄰苯二甲酸酯類的測定，可增大取樣體積）倒入分液漏斗

中，再加入50mL二氯甲烷，充分振蕩10min，靜置分層，將萃取液轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶；再向分液漏斗

中加入30mL二氯甲烷，重復(fù)萃取二次，合并萃取液（萃取過程中出現(xiàn)乳化時可加入氯化鈉或采用離心

法破乳）。萃取液加入20g無水硫酸鈉，振蕩1min，將萃取液全量轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶，濃縮至約2mL，

加入10ml正己烷，濃縮至2mL。

6.3樣品凈化

在玻璃層析柱中加入適量正己烷，加入6.0g中性氧化鋁，上層加入3.0g無水硫酸鈉，將液面調(diào)整

至與無水硫酸鈉頂端持平。將6.2中的2mL濃縮液全量轉(zhuǎn)入層析柱中，用35mL正己烷淋洗，棄去淋洗

液。用100mL乙醚-正己烷（20/80，V/V）混合淋洗液洗脫，洗脫液全量轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶，用旋轉(zhuǎn)蒸

發(fā)器濃縮至2mL左右，再加入5mL正己烷，濃縮至2mL左右。將濃縮液全量轉(zhuǎn)移至氮吹管中，氮吹至

1mL左右。將濃縮液轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶，添加進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)20μL（4.8），待測。

6.4校準(zhǔn)曲線

在6個10mL容量瓶中，分別加入0.000mL、0.100mL、0.200mL、0.300mL、0.400mL和0.500mL6

組份PAEs標(biāo)準(zhǔn)使用液（4.6），分別加入200μL進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)（4.8），用正己烷定容，混勻，作為校準(zhǔn)曲線

系列溶液。由此得到的PAEs校準(zhǔn)曲線系列濃度分別為：0.000mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L、0.300mg/L、

0.400mg/L和0.500mg/L，溶液中的內(nèi)標(biāo)物濃度皆為0.20mg/L，待測。

6.5GC-MS測定

6.5.1色譜條件

毛細(xì)管柱（5%苯基+95%聚二甲基硅氧烷）或等效GC-MS用色譜柱，內(nèi)徑0.25mm，長30m，固定

相液膜厚度0.25μm。

進(jìn)樣量：1.0μL。

進(jìn)樣方式：無分流進(jìn)樣，分流閥開啟時間0.75min。

載氣：高純氦氣（99.999％）。

流速：1.0mL/min。

升溫程序：從60℃升至200℃（15℃/min），保持1min，從200℃升至260℃（15℃/min），保持1min，

2

DB32/T2958-2016

從260℃升至280℃（20℃/min），保持5min。

6.5.2質(zhì)譜條件

離子源溫度：230℃。

掃描模式：選擇離子掃描（SIM），表1為鄰苯二甲酸酯的定量離子及特征離子。

進(jìn)樣口溫度：280℃。

接口溫度：290℃。

溶劑延遲：3.0min。

表1鄰苯二甲酸酯的定量離子和特征離子

序號名稱CAS定量離子特征離子

1鄰苯二甲酸二丁酯84-74-2149150、104

2氘代鄰苯二甲酸二戊酯*358730-89-915343

3鄰苯二甲酸丁酯苯甲酯85-68-714991、206

4鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯117-81-7149167、279

5鄰苯二甲酸二正辛酯117-84-0149150、279

6鄰苯二甲酸二異壬酯20548-62-314957、71

7鄰苯二甲酸二異癸酯26761-40-0149141、289

注：標(biāo)“*”的為內(nèi)標(biāo)。

6.5.3測定

在相同的GC/MS測定條件下，分別注入1.0μL待測