高中生物2.2.2動物細(xì)胞融合技術(shù)與單克鹿體知識梳理新人教版選擇性必修3

2.2.2動物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體知識梳理（一）動物細(xì)胞融合技術(shù)1.概念：使_______兩個_______或_______多個_______動物細(xì)胞結(jié)合形成_______一個_______細(xì)胞的技術(shù)。2.結(jié)果：形成的_______雜交細(xì)胞______________具有______________原來兩個或多個細(xì)胞的遺傳信息_______。3.原理：_______細(xì)胞膜具有一定的流動性______________。4.意義：______________突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能______________。5.誘導(dǎo)融合的常用方法：______________電融合法______________、_______聚乙二醇PEG融合法______________和______________滅活病毒誘導(dǎo)法______________。6.融合實(shí)質(zhì)及完成的標(biāo)志：_______細(xì)胞核的融合_____________________。7.過程：動物細(xì)胞融合的過程包括細(xì)胞膜融合、細(xì)胞質(zhì)融合和細(xì)胞核融合。其中細(xì)胞膜融合是細(xì)胞融合的先導(dǎo)，在細(xì)胞膜融合中體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有一定的流動性，細(xì)胞融合的實(shí)質(zhì)是核融合。動物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是兩個或多個細(xì)胞核融合為一個細(xì)胞核。如下圖（以滅活的病毒誘導(dǎo)為例）：8.應(yīng)用：①細(xì)胞融合技術(shù)已經(jīng)成為研究______________培育生物新品種_______、_______細(xì)胞遺傳______________、_______細(xì)胞免疫_(dá)______和______________腫瘤_______等的重要手段。②利用動物細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來的______________雜交瘤技術(shù)______________，為______________制造單克隆抗體_______開辟了新途徑。9.動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜具有____一定的流動性__植物細(xì)胞的____全能性___細(xì)胞膜具有一定的流動性細(xì)胞融合前的處理方法用果膠酶和纖維素酶去除細(xì)胞壁用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散成單個細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法____________電融合法、離心法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法__________________PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法______細(xì)胞融合成功的標(biāo)志再生出細(xì)胞壁____細(xì)胞核__的融合主要用途獲得完整的雜種植株主要用于制造___單克隆抗體_________意義打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育______植物新品種______突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能（二）單克隆抗體的制備1.制備過程2.突出優(yōu)點(diǎn)：______特異性強(qiáng)、靈敏度高_(dá)_____，可大量制備。3.制備單克隆抗體過程中的兩次篩選項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞有很多種，形成的雜交瘤細(xì)胞也有很多種篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選目的得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞4.單克隆抗體制備過程的關(guān)鍵分析（1）對動物免疫的原因：B淋巴細(xì)胞要經(jīng)過免疫過程，即接觸抗原，增殖分化為有特異性免疫功能的B淋巴細(xì)胞，才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，所以，與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞實(shí)際上是漿細(xì)胞。（2）雜交瘤細(xì)胞具備雙親的遺傳物質(zhì)，不僅具有漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的能力，還具有骨髓瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的能力，從而可以克服單純B淋巴細(xì)胞不能無限增殖的缺點(diǎn)，而大量生產(chǎn)單克隆抗體。5.實(shí)際應(yīng)用：（1）作為______診斷試劑______；①多種疾病的診斷；②病原體的鑒定；③其他類型診斷。（2）用于治療疾病和______運(yùn)載藥物______：與藥物結(jié)合，制成______________抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）______________，殺傷癌細(xì)胞；ADC通常由__