山東省煙臺市招遠市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月月考生物試題（解析版）

高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1山東省煙臺市招遠市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月月考試題注意事項：1．答題前，考生務(wù)必將自己的姓名、考生號等填寫在答題卡和試卷指定位置。2．回答選擇題時，選出每小題〖答案〗后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的〖答案〗標號涂黑。如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他〖答案〗標號?；卮鸱沁x擇題時，將〖答案〗寫在答題卡上。寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題只有一個選項符合題目要求。1.關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述錯誤的是（）A.在制作果醋時，如果條件適宜，醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成乙酸B.發(fā)酵工程的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身C.泡菜的制作前期需要通入氧氣，后期應(yīng)嚴格保持無氧條件D.在啤酒生產(chǎn)中，使用基因工程改造的啤酒酵母，可以加速發(fā)酵過程，縮短生產(chǎn)周期〖答案〗C〖祥解〗1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?、泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸?！驹斘觥緼、在制作果醋時，當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，A正確；B、發(fā)酵工程的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身，不同的產(chǎn)物所需的分離技術(shù)不同，B正確；C、參與泡菜制作的乳酸菌是厭氧菌，因此泡菜制作全過程都需要嚴格厭氧，C錯誤；D、啤酒生產(chǎn)需要篩選產(chǎn)酒精量高的酵母菌，因此使用基因工程改造的啤酒酵母，使之產(chǎn)酒精量較高，可以加速發(fā)酵過程，縮短生產(chǎn)周期，D正確。故選C。2.下列關(guān)于微生物的選擇、純化及計數(shù)的表述正確的是（）A.平板涂布時涂布器使用前必須進行消毒B.平板劃線法要求多次劃線，稀釋涂布平板法中菌液要充分地稀釋C.對細菌進行計數(shù)能采用稀釋涂布平板法，也能用平板劃線法D.剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物，所以可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌〖答案〗B〖祥解〗1、培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。2、按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長，促進所需要的微生物的生長。3、消毒和滅菌是兩個不同的概念，消毒是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物的方法殺死物體表面或內(nèi)部的一部分微生物。滅菌則是指使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子?！驹斘觥緼、平板涂布時涂布器使用前必須浸在酒精中，然后在火焰上灼燒滅菌，這種操作屬于滅菌，不屬于消毒，A錯誤;B、平板劃線法要求多次劃線，稀釋涂布平板法中菌液要充分地稀釋，才能將目的菌分開，培養(yǎng)得到單菌落，B正確；C、平板劃線法不能用于計數(shù)，C錯誤；D、剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色的復(fù)合物，纖維素分解菌可以產(chǎn)生纖維素酶將纖維素分解為葡萄糖，因此在纖維素分解菌的菌落周圍，由于缺少纖維素而出現(xiàn)透明圈，D錯誤。故選B。3.以下是以泡菜壇為容器制作泡菜時的4個處理：①沸鹽水冷卻后再倒入壇中；②蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水；③鹽水需要浸沒全部菜料；④檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量。下列說法錯誤的是（）A.①主要是為了防止菜料表面的乳酸桿菌被殺死B.②是為了使氣體只能進入泡菜壇而不能排出C.③的主要目的是提供無氧環(huán)境D.④可檢測到完整發(fā)酵過程中亞硝酸鹽含量先升高后降低〖答案〗B〖祥解〗泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。（1）泡菜的制作流程是：選擇原料、配置鹽水、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵。（2）選用火候好、無裂紋、無砂眼、壇沿深、蓋子吻合好的泡菜壇。（3）原料加工：將新鮮蔬菜修整、洗滌、晾曬、切分成條狀或片狀。（4）配制鹽水：按照比例配制鹽水，并煮沸冷卻。原因是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響。（5）泡菜的制作：將經(jīng)過預(yù)處理的新鮮蔬菜混合均勻，裝入泡菜壇內(nèi)，裝至半壇時，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，繼續(xù)裝至八成滿，再徐徐注入配制好的鹽水，使鹽水沒過全部菜料，蓋好壇蓋。在壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。在發(fā)酵過程中要注意經(jīng)常補充水槽中的水?！驹斘觥緼、①鹽水煮沸是為了殺滅水中的雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響，A正確；B、②蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，是排氣減壓、隔絕空氣、防止雜菌污染等，氣體只能從泡菜壇排出而不能進入，B錯誤；C、③鹽水需要浸沒全部菜料，造成無氧環(huán)境，有利于乳酸菌無氧呼吸，C正確；D、④檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量，腌制泡菜過程中亞硝酸鹽的含量升高后降低，D正確。故選B。4.芘（C16H10）是一種高分子多環(huán)芳烴（PAH），普遍存在于污染的環(huán)境中，其分子結(jié)構(gòu)是強致癌物質(zhì)苯并芘的基礎(chǔ)。研究人員從海洋濕地中分離了一株芘降解菌（DFA1），并研究其降解效率。已知含芘的培養(yǎng)基不透明，該培養(yǎng)基上形成的單菌落大小基本一致，下列敘述錯誤的是（）A.富集培養(yǎng)DFA1的培養(yǎng)基中應(yīng)加入適量的芘和瓊脂B.DFA1降解芘能力的強弱可以用透明圈的大小來表示C.與顯微鏡直接計數(shù)法相比，稀釋涂布平板法更適合統(tǒng)計活菌數(shù)D.應(yīng)選擇菌落數(shù)在30~300之間的平板對DFA1菌落計數(shù)〖答案〗A〖祥解〗測定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目，可采用顯微鏡直接計數(shù)(或血細胞計數(shù)板計數(shù))法對培養(yǎng)液中的微生物直接計數(shù)，也可用稀釋涂布平板法將微生物接種于滅菌后的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，通過計數(shù)菌落數(shù)目計算培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目。由于采用第一種方法計數(shù)時不能剔除死菌，采用第二種方法計數(shù)時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以第一種方法統(tǒng)計的數(shù)目比實際活菌數(shù)目高，第二種方法統(tǒng)計的數(shù)目比實際活菌數(shù)目低?！驹斘觥緼、富集培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基中要加入芘作為唯一的碳源，但是不能加入瓊脂，A錯誤；B、由于該培養(yǎng)基上形成的單菌落大小基本一致，所以DFA1降解芘能力的強弱可以用透明圈的大小來表示，透明圈越大，則降解能力越強，B正確；C、顯微鏡直接計數(shù)法統(tǒng)計的是活菌和死菌的總數(shù)，一般稀釋涂布平板法適合用于統(tǒng)計活菌數(shù)，C正確；D、一般來說，稀釋涂布平板法應(yīng)選擇菌落數(shù)在30~300之間的平板進行計數(shù)，D正確。故選A。5.花椰菜（2n=18）種植時容易遭受病菌侵害形成病斑，紫羅蘭（2n=14）具有一定的抗病性?？蒲腥藛T利用植物體細胞雜交技術(shù)培育具有抗病性狀的花椰菜新品種如圖1所示。通過蛋白質(zhì)電泳技術(shù)分析了親本及待測植株中某些特異性蛋白，結(jié)果圖2所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.圖1培育雜種植株所用的技術(shù)體現(xiàn)了植物細胞全能性和細胞膜流動性原理B.圖1過程①是在無菌水中進行，過程②是在固體培養(yǎng)基中進行C.圖2中屬于雜種植株的是4和5，1可能是花椰菜D.病菌懸浮液均勻噴施于雜種植株葉片上，一段時間后，測定病斑面積占葉片總面積的百分比，可篩選抗病性強的雜種植株〖答案〗B〖祥解〗1、植物體細胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術(shù)。植物體細胞雜交的終點是培育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結(jié)束；雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)；植物體細胞雜交克服了遠緣雜交不親和的障礙。2、根據(jù)圖譜分析，4號和5號個體含有紫羅蘭和花椰菜兩種類型的蛋白質(zhì)，說明是雜種細胞，而1、2、3號個體只有紫羅蘭中的蛋白質(zhì)，說明不是雜種細胞?！驹斘觥緼、植物體細胞雜交技術(shù)將雜種細胞培養(yǎng)成完整植株，體現(xiàn)了植物細胞全能性；兩個物種細胞的融合體現(xiàn)了細胞膜流動性原理，A正確；B、圖一過程中①是在等滲或高滲溶液中進行，而不是在無菌水中，B錯誤；C、根據(jù)圖譜分析4號和5號個體含有兩種類型的蛋白質(zhì)是雜種細胞，而1號個體只有1種蛋白質(zhì)可能是花椰菜，C正確；D、可將病菌懸浮液均勻噴施于雜種植株葉片上，一段時間后，測定病斑面積占葉片總面積的百分比，篩選出抗病性強的雜種植株，D正確。故選B。6.辣椒的辣椒素是食品調(diào)味料的重要成分之一，辣椒素可通過下圖途徑獲得，下列敘述正確的是（）A.①過程需對外植體進行滅菌以防止后續(xù)培養(yǎng)過程中雜菌污染，且有利于獲得脫毒苗B.圖中所示的愈傷組織是未分化的有固定形態(tài)的薄壁組織團塊，具備較強的分裂分化能力C.若在細胞分離過程中使用鹽酸進行解離，則植物細胞繼續(xù)增殖前需再生細胞壁D.在脫分化過程中一般不需要光照，在再分化過程中光照可誘導(dǎo)植物形態(tài)建成〖答案〗D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術(shù)是指將離體的植物器官、組織或細胞等，在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。其具體流程為：接種外植體→誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→誘導(dǎo)生根→移栽成活。在一定的激素和營養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，外植體可脫分化形成愈傷組織。愈傷組織能重新分化成芽、根等器官，該過程稱為再分化?！驹斘觥緼、①過程需對外植體進行消毒以防止后續(xù)培養(yǎng)過程中雜菌污染，且有利于獲得脫毒苗，A錯誤；B、愈傷組織是一團沒有特定結(jié)構(gòu)和功能，排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁組織團塊。愈傷組織是由外植體脫分化形成，它要經(jīng)過再分化形成植物個體，因此愈傷組織是未分化的，具有分裂分化能力，B錯誤。C、鹽酸會殺死細胞，不能用鹽酸分離細胞，C錯誤；D、在脫分化過程中一般不需要光照，利于形成愈傷組織，再分化過程中光可誘導(dǎo)葉綠素的合成，可誘導(dǎo)植物形態(tài)建成，D正確。故選D。7.中藥藿香長期種植會出現(xiàn)種質(zhì)退化、易感染病蟲害等問題。為解決這些問題，研究者對組織培養(yǎng)過程中不同階段的藿香進行了輻射處理（如圖），以期獲得性狀優(yōu)良的突變株。下列敘述正確的是（）A.組織培養(yǎng)過程中細胞分裂旺盛，輻射處理易發(fā)生定向突變B.過程①在接種前，外植體常用無水乙醇和次氯酸鈉溶液消毒C.②③④過程添加的植物激素種類、濃度和比例均不相同D.篩選出目標突變株后可利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)藥用成分〖答案〗D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)，主要包括脫分化和再分化兩個步驟?！驹斘觥緼、植物組織培養(yǎng)過程中細胞分裂旺盛，輻射處理易發(fā)生突變，但突變是不定向的，A錯誤；B、消毒通常使用體積分數(shù)為70%的酒精，不用無水乙醇，B錯誤；C、②③④過程添加的植物激素種類相同，但濃度和比例不同，C錯誤；D、篩選出目標突變株后可利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進行細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，培養(yǎng)生產(chǎn)藥用成分，D正確。故選D。8.為了檢測藥物X、Y和Z的抗癌效果，采用細胞培養(yǎng)板添加溶于DMSO溶劑的三種藥物培養(yǎng)肺癌細胞，培養(yǎng)過程及結(jié)果如圖所示。下列說法正確的是（）A.細胞培養(yǎng)液中通常需要加入一定量的血清和抗生素，防止病毒污染B.對照組中應(yīng)加入等體積的生理鹽水在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)肺癌細胞C.起始肺癌細胞數(shù)量應(yīng)保持一致，計數(shù)時應(yīng)用胃蛋白酶處理貼壁細胞D.根據(jù)實驗結(jié)果，藥物X的抗癌效果比Y好，藥物Z沒有抗癌作用〖答案〗D〖祥解〗1、分析題意可知：該實驗?zāi)康氖菣z測藥物X、Y和Z的抗癌效果，自變量是檢測藥物X、Y和Z，因變量是檢測細胞數(shù)量。2、動物細胞培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和pH。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH）?！驹斘觥緼、抗生素具有殺菌（不是殺病毒）作用，為防止培養(yǎng)液被污染，可在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，A錯誤；B、由題干信息可知，三種藥物是溶于DMSO溶劑的，則對照組中應(yīng)加入等體積的DMSO溶劑，以排除體積和溶劑等無關(guān)因素的影響，B錯誤；C、遵循實驗的單一變量原則，無關(guān)變量起始肺癌細胞數(shù)量應(yīng)保持一致，計數(shù)時要使貼壁細胞從瓶壁上分離下來，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，C錯誤；D、分析實驗結(jié)果，加入X的癌細胞個數(shù)是6.7×104，加入Y的癌細胞個數(shù)是5.3×105，說明藥物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌細胞個數(shù)是8.0×106，與空白對照相比，藥物Z無抗癌作用，D正確。故選D。9.華蟾素注射液是我國經(jīng)典抗腫瘤藥物，研究人員為探尋華蟾素注射液抗肝癌HepG-2細胞的作用機理，用華蟾素注射液和肝癌HepG-2細胞進行了一系列實驗，結(jié)果如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A.為防止細胞培養(yǎng)過程發(fā)生污染，培養(yǎng)液中要加入抗生素B.每隔一段時間需更換1次培養(yǎng)液，目的是防止代謝物積累對細胞自身造成危害C.據(jù)圖甲可知，華蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2細胞增殖，且只與濃度呈正相關(guān)D.圖乙的結(jié)果進一步表明，華蟾素的作用機理可能是抑制肝癌HepG-2細胞的DNA分子復(fù)制〖答案〗C〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)的條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和PH：36.5℃+0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）?！驹斘觥緼、動物細胞培養(yǎng)時，為防止培養(yǎng)過程發(fā)生污染要加入抗生素，A正確；

B、每隔一段時間更換1次培養(yǎng)液，目的是防止代謝物積累對細胞自身造成危害（補充細胞所需營養(yǎng)物質(zhì)），B正確；C、據(jù)圖甲可知，華蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2細胞增殖，與濃度和作用時間都呈正相關(guān)，C錯誤；D、圖乙的結(jié)果進一步表明，隨著華蟾素濃度的增加，處于間期的細胞增多，則華蟾素的作用機理可能是抑制肝癌HepG-2細胞進入分裂期，可能是抑制肝癌HepG-2細胞的DNA分子復(fù)制，D正確。故選C。10.2017年，我國科學(xué)家首次培育了體細胞克隆猴，這一成果在科學(xué)界引起了轟動。培育克隆猴的流程圖如圖所示。下列說法正確的是（）A.體細胞克隆猴的線粒體DNA都來自去核的卵母細胞B.體細胞克隆猴的培育成功體現(xiàn)了動物體細胞的全能性C.組蛋白的甲基化水平降低和乙酰化水平升高可提高重構(gòu)胚的發(fā)育率D.圖中采集的卵母細胞應(yīng)在獲能液中培養(yǎng)至減數(shù)分裂Ⅱ中期（ＭⅡ期）〖答案〗C〖祥解〗圖示過程為體細胞克隆猴培育過程，該過程應(yīng)用了動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合（去核卵母細胞與體細胞融合）和胚胎移植等技術(shù)。體細胞核移植過程中獲得的重構(gòu)胚需要激活才能完成細胞的分裂和發(fā)育進程?！驹斘觥緼、圖中為兩個細胞相融合，克隆猴的線粒體來自胎猴的體細胞和去核的卵母細胞，A錯誤；B、體細胞克隆猴培育成功體現(xiàn)了動物體細胞核的全能性，B錯誤；C、去乙酰酶抑制劑的作用是抑制去乙?；?，則乙?；缴呖商岣咧貥?gòu)胚發(fā)育率，C正確；D、圖中采集的卵母細胞應(yīng)培養(yǎng)至減數(shù)分裂Ⅱ中期（MⅡ期），但不應(yīng)在獲能液中培養(yǎng)，D錯誤。故選C。11.2022年3月，中科院宣布了一項重量級世界首創(chuàng)研究，將人的多能干細胞轉(zhuǎn)化為全能性的8細胞期胚胎樣細胞（8CLC），即相當于受精卵發(fā)育3天狀態(tài)的全能干細胞。該研究成果可使個體化器官再生成為現(xiàn)實。下列敘述錯誤的是（）A.8CLC與胚胎卵裂期細胞發(fā)育狀態(tài)相似，體外培養(yǎng)發(fā)育至囊胚期開始分化B.上述轉(zhuǎn)化過程僅發(fā)生了細胞分化，但未表現(xiàn)出動物細胞的全能性C.8CLC能夠分裂分化形成將來發(fā)育為胎盤和胎膜的滋養(yǎng)層細胞D.細胞具有全能性的根本原因是含有個體發(fā)育的全部或全套基因〖答案〗B〖祥解〗細胞的全能性是指已經(jīng)分化的細胞仍然具有發(fā)育成完整個體或分化成其他各種細胞的潛能和特性?！驹斘觥緼、體外培養(yǎng)發(fā)育至囊胚期開始分化，出現(xiàn)囊胚腔，A正確；B、將人的多能干細胞轉(zhuǎn)化為全能性的8細胞期胚胎樣細胞（8CLC）的過程未表現(xiàn)出動物細胞的全能性，還發(fā)生了細胞分裂，B錯誤；C、8CLC相當于受精卵發(fā)育3天狀態(tài)的全能干細胞，能夠分裂分化形成將來發(fā)育為胎盤和胎膜的滋養(yǎng)層細胞以及內(nèi)細胞團細胞，C正確；D、細胞內(nèi)含有個體發(fā)育所需的全部或全套基因是細胞具有全能性的內(nèi)在因素，D正確。故選B。12.某實驗室通過提高小鼠胚胎干細胞pSTAT3基因的表達水平，體外制備出桑葚胚樣全潛能細胞。該細胞在分子水平及發(fā)育潛能上均具有自然胚胎桑葚期細胞特性，并在體外成功模擬了小鼠胚胎發(fā)育至原腸胚階段。根據(jù)該研究，下列敘述錯誤的是（）注：pSTAT3是調(diào)控胚胎發(fā)育的關(guān)鍵基因A.桑葚胚樣細胞可誘導(dǎo)發(fā)育至囊胚期B.誘導(dǎo)桑葚胚樣細胞時，基因的堿基序列和表達的情況都發(fā)生改變C.囊胚期細胞重置至桑葚樣細胞的過程類似于脫分化D.據(jù)圖推測，桑葚胚發(fā)育成囊胚的過程中，pSTAT3的表達下降〖答案〗B〖祥解〗胚胎發(fā)育過程:(1)卵裂期:細胞進行有絲分裂，數(shù)量增加，胚胎總體積不增加;(2)桑葚胚:32個細胞左右的胚胎，之前所有細胞都有發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細胞;(3)囊胚:細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織;而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤;胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔。注:囊胚的擴大會導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化;(4)原腸胚:內(nèi)細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔?！驹斘觥緼、胚胎發(fā)育的過程為受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體，因此桑葚胚樣細胞可誘導(dǎo)發(fā)育至囊胚期，A正確；B、誘導(dǎo)桑葚胚樣細胞時，基因的堿基序列并未發(fā)生改變，B錯誤；C、胚胎發(fā)育至囊胚期即開始了細胞分化，因此囊胚期細胞重置至桑葚樣細胞的過程類似于脫分化，C正確；D、具體分析通過提高小鼠胚胎干細胞pSTAT3基因的表達水平，體外制備出桑葚胚樣全潛能細胞，因此推斷桑葚胚發(fā)育成囊胚的過程中，pSTAT3的表達下降，D正確。故選B。13.通過生物技術(shù)與工程可以按照人們預(yù)先設(shè)計的生物藍圖改造或重新創(chuàng)造設(shè)計細胞的遺傳物質(zhì)，培育出新品種，以工業(yè)規(guī)模制造產(chǎn)品。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.在植物體細胞雜交中，可采用質(zhì)壁分離實驗檢測制備的原生質(zhì)體的活性情況B.在生產(chǎn)單克隆抗體的過程中，獲得的雜交瘤細胞能產(chǎn)生多種針對同一抗原的抗體C.利用動物體細胞核移植的方法得到克隆動物是培育新物種的一種方式D.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M生產(chǎn)低乳糖牛奶，涉及基因工程、胚胎工程技術(shù)〖答案〗D〖祥解〗植物體細胞雜交的原理是細胞膜具有流動性和植物細胞具有全能性，動物細胞融合的原理是細胞膜具有流動性，動物體細胞核移植技術(shù)的原理是動物細胞核的全能性?！驹斘觥緼、在植物體細胞雜交中，需要去除細胞壁才能讓原生質(zhì)體融合，此時的細胞不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象，A錯誤；B、生產(chǎn)單克隆抗體過程中，由于用一種抗原刺激小鼠，抗原和抗體特異性結(jié)合的原因，獲得的雜交瘤細胞能夠產(chǎn)生針對抗原的一種抗體，B錯誤；C、動物體細胞核移植技術(shù)利用動物細胞核的全能性，屬于無性繁殖，獲得的動物不屬于新物種，沒有存在生殖隔離，C錯誤；D、將腸乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M生產(chǎn)低乳糖牛奶，涉及目的基因?qū)胧荏w細胞等基因工程步驟，同時獲得的受精卵需要通過胚胎工程培育長大，D正確。故選D。14.下列關(guān)于生物工程和技術(shù)的表述正確的是（）A.雜交瘤細胞制備過程中，可用減毒的病毒誘導(dǎo)細胞融合B.胚胎移植中，供體和受體相當于雙親中的父本和母本C.PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，需要加指示劑且要在紫外燈下觀察D.用PCR技術(shù)擴增目的基因時，為保證準確復(fù)制需要提前知道基因的全部序列〖答案〗A〖祥解〗1、多聚酶鏈式反應(yīng)（PCR）是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)，它能以極少量的DNA為模板，在幾小時內(nèi)復(fù)制出，上百萬份的DNA拷貝。2、利用PCR可以在體外進行DNA片段的擴增。PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。PCR儀實質(zhì)上就是一臺能夠自動調(diào)控溫度的儀器，一次PCR一般要經(jīng)歷30次循環(huán)?！驹斘觥緼、雜交瘤細胞制備過程中，用滅活的病毒誘導(dǎo)細胞融合，也可用減毒的病毒誘導(dǎo)，A正確；B、胚胎移植中，供體雄性個體和供體雌性個體相當于雙親中的父本和母本，受體并沒有為其提供遺傳物質(zhì)，B錯誤；C、瓊脂糖凝膠電泳中的緩沖液中不含指示劑，不能在紫外燈下被檢測出來，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，C錯誤；D、用PCR方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列，只需要知道一段已知目的基因的核苷酸序列，從而根據(jù)這段序列合成引物，D錯誤。故選A。15.CBF基因控制合成的轉(zhuǎn)錄因子能夠特異性結(jié)合抗凍基因的啟動子區(qū)，從而激活抗凍基因的表達，以提高植物的抗寒性。現(xiàn)需要將CBF基因與抗凍基因表達載體連接后導(dǎo)入植物細胞，已知Klenow酶具有DNA聚合酶活性，可以將黏性末端補平。CBF基因和抗凍基因表達載體上的酶切位點以及相關(guān)限制酶識別序列及切割位點如圖所示，則在載體構(gòu)建過程中需要的酶的種類至少有（）A.4種 B.5種 C.6種 D.7種〖答案〗C〖祥解〗構(gòu)建表達載體時需考慮目的基因和載體能產(chǎn)生相同的黏性末端，同時應(yīng)避免酶切后的片段自身環(huán)化。用DNA連接酶將目的基因與載體連接構(gòu)建表達載體?！驹斘觥緼BCD、由圖可知獲取目的基因CBF需用MunⅠ和Xbal兩種限制酶，抗凍基因表達載體上有兩個酶切位點ApoⅠ和SamⅠ，其中ApoⅠ切載體得的黏性末端可與MunⅠ切CBF獲得的黏性末端連接，但SamⅠ切載體得的為平末端，與Xbal切CBF得的黏性末端不能連接，需在Xbal切割CBF基因后利用Klenow酶將黏性末端補平后再與SamI酶切割后平末端連接，連接過程還需DNA連接酶，故該表達載體構(gòu)建過程中至少需要MunⅠ和Xbal用于獲取目的基因、ApoⅠ和SamⅠ用于切割載體、Klenow酶用于補平黏性末端，DNA連接酶用于連接目的基因和載體，共6種酶，ABD錯誤，C正確。故選C。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題有一個或多個選項符合題目要求，全部選對得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分。16.小米具有豐富的營養(yǎng)價值，某工廠的技術(shù)人員欲利用乳酸菌和酵母菌進行發(fā)酵，開發(fā)一款特殊風味的飲品。下圖為不同溫度及不同乳酸菌與酵母菌比例下發(fā)酵實驗測得的相關(guān)結(jié)果。下列敘述正確的是（）A.通過圖1測得的酒精含量變化，可推測發(fā)酵過程中酵母菌的種群數(shù)量先升高后降低B.將發(fā)酵溫度控制在34℃可縮短生產(chǎn)周期，乳酸菌和酵母菌在該溫度繁殖速度均較快C.生產(chǎn)上可將乳酸菌和酵母菌按照2∶1比例接種，可溶性固形物含量較低、口感較好D.兩種菌的細胞結(jié)構(gòu)有較大差異，代謝類型也不同，發(fā)酵過程中需持續(xù)通入無菌空氣〖答案〗BC〖祥解〗果酒制作的原理是利用酵母菌在無氧條件下才能進行酒精發(fā)酵產(chǎn)生酒精，若是在有氧條件下則進行有氧呼吸而大量繁殖。乳酸菌為厭氧生物，在無氧條件下，將糖分解為乳酸。【詳析】A、圖1是在不同溫度下測得，并非隨時間變化酒精含量的變化，因此不能推測出發(fā)酵過程中酵母菌的種群數(shù)量先升高后降低，A錯誤；B、酒精含量的變化可反應(yīng)酵母菌數(shù)量，pH大小可反應(yīng)乳酸菌數(shù)量，圖1顯示乳酸菌和酵母菌在34°C繁殖速度均較快，因此將發(fā)酵溫度控制在該溫度可縮短生產(chǎn)周期，B正確；C、圖2顯示乳酸菌和酵母菌按照2∶1比例接種，可溶性固形物含量較低、口感較好，生產(chǎn)上可按該比例接種，C正確；D、乳酸菌為原核生物，酵母菌為真核生物，二者基本結(jié)構(gòu)差異較大；乳酸菌為厭氧生物，酵母菌為兼性厭氧生物，二者代謝類型也不同，但發(fā)酵過程中需保持無氧環(huán)境，D錯誤。故選BC。17.蘇云金桿菌是殺滅玉米螟的重要生物，滅蚊球孢菌具有殺滅蚊子的效能，某人將這兩種菌的原生質(zhì)體融合獲得既能殺蚊又能殺螟的新菌株，過程見下圖。微生物原生質(zhì)體的獲得等過程和植物的類似。下列敘述錯誤的是（）A.①試管中加入PEG的目的是誘導(dǎo)A、B原生質(zhì)體融合及細胞壁再生B.圖中過程與植物體細胞雜交過程相比，去壁方法、誘導(dǎo)融合的方法、所依據(jù)的原理均完全相同C.離心洗滌后向培養(yǎng)液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解細菌的細胞壁以獲得原生質(zhì)體D.圖中的甲實驗和乙實驗是指滅蚊實驗和殺滅玉米螟實驗，獲得的融合株染色體數(shù)目加倍〖答案〗ABD〖祥解〗植物體細胞雜交是指將不同來源的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新植物體的技術(shù)。這種技術(shù)在打破生殖隔離，實現(xiàn)遠緣雜交育種，培育植物新品種等方面具有獨特的優(yōu)勢?！驹斘觥緼、①試管中加入PEG的目的是誘導(dǎo)A、B原生質(zhì)體融合，PEG不具有誘導(dǎo)細胞壁再生的作用，A錯誤；B、去除細菌細胞壁和植物細胞的細胞壁都可以用酶解法，但所用酶的種類不同；圖中為細菌細胞的雜交過程，與植物體細胞雜交過程相比，誘導(dǎo)融合的方法不完全相同；圖中過程與植物體細胞雜交所依據(jù)的原理均有細胞膜具有一定的流動性，但植物體細胞雜交還利用了植物細胞具有全能性的原理，將雜種細胞培育為雜種植物，B錯誤；C、溶菌酶可以溶解細菌的細胞壁。離心洗滌后向培養(yǎng)液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解細菌的細胞壁以獲得原生質(zhì)體，C正確；D、篩選到的融合株，還要從個體生物學(xué)水平檢測其是否具有殺滅玉米螟和殺滅蚊子的能力，所以圖中的甲實驗和乙實驗是指滅蚊實驗和殺滅玉米螟實驗，獲得的融合株既有蘇云金桿菌的基因，又有滅蚊球孢菌的基因，但這兩種生物是原核生物，不含染色體，D錯誤。故選ABD。18.中國科學(xué)院團隊在豬體內(nèi)培育人源中期腎臟，人源細胞高達70%，驗證動物體內(nèi)再造人體器官可行性。該過程通過構(gòu)建的高分化潛能、強增殖及抗凋亡能力的多能干細胞移植到腎臟缺陷豬模型中，最終成功在嵌合體豬體內(nèi)再生了人源中腎（如圖所示）。下列說法錯誤的是（）A.過程①中，需提高MYCN和BCL2的表達量B.過程②需要將抗凋亡的人源iPS細胞植入囊胚并放在充滿CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)C.移植后胚胎的發(fā)育受母體激素影響，但不會影響母體激素分泌D.最終獲得的嵌合體豬各體細胞的基因型一般不相同〖答案〗BC〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)條件：（1）無菌無毒環(huán)境：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理；在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對自身造成危害。（2）營養(yǎng)：成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4；（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。O2是細胞代謝所必需的；CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH?！驹斘觥緼、分析題意可知：過程通過構(gòu)建的高分化潛能、強增殖及抗凋亡能力的多能干細胞移植到腎臟缺陷豬模型中，所以過程①中，需提高MYCN和BCL2的表達量，A正確；B、抗凋亡的人源iPS細胞植入囊胚并放在含有95%空氣和5%CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，B錯誤；C、移植后胚胎的發(fā)育受母體激素影響，同時也會影響母體激素分泌，C錯誤；D、嵌合體豬是將高分化潛能、強增殖及抗凋亡能力的人多能干細胞移植到腎臟缺陷豬模型中，最終獲得的嵌合體豬各體細胞的基因型不相同，D正確。故選BC。19.為了制備鵝細小病毒VP2蛋白的特異性單克隆抗體，科研人員構(gòu)建了含有融合基因（VP2基因與一段引導(dǎo)序列NES）的大腸桿菌表達載體，受體細胞經(jīng)過誘導(dǎo)后能表達VP2蛋白并將其分泌到細胞外。利用純化的VP2蛋白兔疫小鼠，采用雜交瘤技術(shù)制備了3株可穩(wěn)定分泌VP2蛋白的單克隆抗體（VP2單抗）的雜交瘤細胞株。下列敘述錯誤的是（）A.引導(dǎo)序列NES的作用可能是介導(dǎo)VP2蛋白分泌到細胞外B.VP2單抗的制備利用了重組DNA技術(shù)、細胞融合等技術(shù)C.體外培養(yǎng)該免疫小鼠的單個B淋巴細胞也能得到VP2單抗D.VP2單抗可用于鵝細小病毒病的診斷和治療〖答案〗C〖祥解〗1、單克隆抗體：由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體，具有特異性強、靈敏度高，并可大量制備的特點。2、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：最廣泛的用途，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。②用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”?！驹斘觥緼、引導(dǎo)序列NES具有引導(dǎo)作用，其引導(dǎo)作用可能是介導(dǎo)VP2蛋白分泌到細胞外，A正確；B、VP2單抗的制備過程涉及構(gòu)建基因表達載體以及B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的融合，因此VP2單抗的制備利用了重組DNA技術(shù)、細胞融合等技術(shù)，B正確；C、體外培養(yǎng)該免疫小鼠的單個B淋巴細胞會得到抗體，不能得到VP2單抗，C錯誤；D、VP2單抗具有特異性強、靈敏度高、可大量制備等優(yōu)點，可用于鵝細小病毒病的診斷和治療，D正確。故選C。20.為了獲得抗蚜蟲棉花新品種，研究人員將雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗莧凝集素基因（ACA）與載體（pBI121）結(jié)合，然后導(dǎo)入棉花細胞。下列操作與實驗?zāi)康南喾氖牵ǎ〢.用限制酶BsaBI和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA—ACA融合基因B.與只用KpnI相比，KpnI和XhoI處理融合基因和載體可保證基因轉(zhuǎn)錄方向正確C.將棉花細胞接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉(zhuǎn)基因細胞D.用PCR技術(shù)可檢測GNA和ACA基因否導(dǎo)入棉花細胞中〖答案〗ABD〖祥解〗1、基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計的藍圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品?；蚬こ碳夹g(shù)為基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究提供了有力的手段。2、基因工程的基本操作程序：目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測和表達?！驹斘觥緼、雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗莧凝集素基因（ACA）均有BsaBI酶切位點，所以用限制酶BsaBI和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因，A正確；B、圖中質(zhì)粒與ACA-GNA上都含有KpnⅠ和XhoⅠ的酶切位點，與只用KpnI相比，KpnI和XhoⅠ處理融合基因和載體可保證基因轉(zhuǎn)錄方向正確，B正確；C、由于重組質(zhì)粒含有卡那霉素的抗性基因，故將棉花細胞接種在含卡那霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉(zhuǎn)基因細胞，C錯誤；D、根據(jù)GNA-ACA融合基因的兩端序列設(shè)計合適的引物，可以利用PCR技術(shù)檢測GNA和ACA基因是否導(dǎo)入棉花細胞中，D正確。故選ABD。三、非選擇題：本題共5小題，共55分。21.科研人員按照如圖所示流程從鹽湖土壤中分離篩選出了一株高產(chǎn)α-淀粉酶的耐鹽性菌株NWU-8，并通過He-Ne激光照射提高該菌株產(chǎn)α-淀粉酶的能力，實驗中需要a、b兩種培養(yǎng)基，a的組分為牛肉膏、蛋白胨、高濃度NaCl、水，相比培養(yǎng)基a，培養(yǎng)基b的組分增加了可溶性淀粉?；卮鹣铝袉栴}。（1）配制好的培養(yǎng)基通常采用的滅菌方法是____________。實驗小組為獲得耐鹽純培養(yǎng)物，使用的培養(yǎng)基應(yīng)是____________（選填“普通培養(yǎng)基”或“選擇培養(yǎng)基”），使用的接種方法是____________。（2）為獲得純培養(yǎng)物的耐鹽基因X，實驗小組應(yīng)用純培養(yǎng)物提取了DNA，檢測DNA所用的試劑及原理是____________。獲得PCR產(chǎn)物后，用瓊脂糖凝膠電泳對PCR產(chǎn)物進行鑒定，影響DNA分子遷移速率的主要因素有______________（答出兩點即可）。（3）要在培養(yǎng)基上形成菌落，a、b培養(yǎng)基中均還應(yīng)加入____________，挑取a培養(yǎng)基平板上的菌落進一步劃線純化時，下列圖示中正確的操作示意圖為____________。（4）培養(yǎng)基a的作用是_____________，b培養(yǎng)基平板滴加碘液后，部分菌落周圍出現(xiàn)透明圈，根據(jù)菌落直徑和透明圈大小，____________的菌落初步判斷為產(chǎn)酶能力較高的菌株。（5）He-Ne激光照射誘導(dǎo)后的菌種需要對耐鹽性和產(chǎn)酶能力等進行檢測和篩選，因為He-Ne激光照射引起的變異具有不定向的特征。最后獲得的純凈高產(chǎn)菌種進行液體搖瓶發(fā)酵，搖瓶培養(yǎng)的目的是_____________，發(fā)酵過程中可通過____________法檢測活菌的數(shù)量?！即鸢浮剑?）①.高壓蒸汽滅菌法②.選擇培養(yǎng)基③.稀釋涂布平板法（2）①.二苯胺試劑，在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，②.DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠濃度（3）①.瓊脂

②.A（4）①.分離出耐鹽微生物（耐鹽菌）②.透明圈直徑與菌落直徑的比值大

（5）①.增大培養(yǎng)液的溶氧量，利于微生物和培養(yǎng)液充分接觸

②.稀釋涂布平板

〖祥解〗實驗室中目的菌株的篩選：①原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。②從土壤中分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。③培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，富集培養(yǎng)可以使用液體培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。（1）為了不破壞培養(yǎng)基的成分，通常采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法；根據(jù)圖中，鹽湖土壤中分離篩選出了一株高產(chǎn)α-淀粉酶的耐鹽性菌株NWU-8，使用的培養(yǎng)基應(yīng)是選擇培養(yǎng)基，題圖中顯示是平板涂布分離，故使用的接種方法是稀釋涂布平板法。（2）在DNA粗提取和鑒定的實驗中，檢測DNA所用的試劑是二苯胺，在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。獲得PCR產(chǎn)物后，用瓊脂糖凝膠電泳對PCR產(chǎn)物進行鑒定，待測樣品中DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠濃度等都會影響DNA在電泳中的遷移速率。（3）要在培養(yǎng)基上形成菌落，a、b培養(yǎng)基中均還應(yīng)加入瓊脂，制備固體培養(yǎng)基，便于菌落生長和觀察，平板劃線時，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作，作第三、四、五次劃線，注意不要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連，故選A。（4）從題中給出的操作流程圖來看，培養(yǎng)基a的作用是分離出耐鹽微生物（耐鹽菌），b培養(yǎng)基平板滴加碘液后，部分菌落周圍出現(xiàn)透明圈，根據(jù)菌落直徑和透明圈大小，透明圈直徑與菌落直徑的比值大的菌落初步判斷為產(chǎn)酶能力較高的菌株。（5）變異是不定向的，故He-Ne激光照射誘導(dǎo)后的菌種需要對耐鹽性和產(chǎn)酶能力等進行檢測和篩選。最后獲得的純凈高產(chǎn)菌種進行液體搖瓶發(fā)酵，搖瓶培養(yǎng)的目的是增大培養(yǎng)液的溶氧量，利于微生物和培養(yǎng)液充分接觸，利于其繁殖，發(fā)酵過程中可通過稀釋涂布平板檢測活菌的數(shù)量。22.苜蓿是廣泛應(yīng)用的豆科牧草，其葉片中的水溶性蛋白質(zhì)會導(dǎo)致反芻動物患臌脹病。百脈根的葉片富含單寧，能防止反芻動物臓脹病的發(fā)生?？蒲腥藛T用紫花苜蓿和百脈根培育抗臌脹病的新型牧草，育種流程如圖所示。已知R-6G可阻止線粒體的功能，IOA能抑制細胞分裂。回答下列問題：（1）為獲得原生質(zhì)體，常用__________處理植物細胞以去除細胞壁。獲得的兩種原生質(zhì)體要在_________(填“清水”或“等滲溶液”)中進行融合。（2）獲得的原生質(zhì)體分別用IOA和R6G處理后進行融合，培養(yǎng)后，只有__________細胞才能生長出愈傷組織，原因是__________。（3）過程①可用_________法誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合。過程②③使用的培養(yǎng)基的區(qū)別主要是植物激素中__________不同。（4）由雜種細胞團經(jīng)過過程②③的培育得到幼苗，依據(jù)的生物學(xué)原理是__________。圖示培育新型牧草所運用的生物技術(shù)的主要優(yōu)點是__________?！即鸢浮剑?）①.纖維素酶和果膠酶②.等滲溶液（2）①.融合的雜種②.融合的雜種細胞生理互補，細胞代謝正常，能正常分裂（3）①.PEG（或電激）②.細胞分裂素與生長素的比例（4）①.植物細胞的全能性②.克服遠緣雜交不親和的障礙〖祥解〗分析題圖：圖示為植物體細胞雜交過程示意圖，其中①表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；②表示脫分化過程；③表示再分化過程。（1）據(jù)圖可知，本研究主要利用植物體細胞雜交技術(shù)，由于植物細胞的細胞壁主要由纖維素和果膠組成，去除細胞壁可用酶解法，故圖中要獲得原生質(zhì)體需要用纖維素酶和果膠酶處理原材料。獲得的兩種原生質(zhì)體要在等滲溶液中進行融合，防止原生質(zhì)體過度吸水或者失水。（2）融合的雜種細胞生理互補，細胞代謝正常，能正常分裂，因此獲得的原生質(zhì)體分別用IOA和R6G處理后進行融合，培養(yǎng)后，只有融合的雜種細胞才能生長出愈傷組織。（3）圖中①表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合過程可使用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑或者電擊的方法。脫分化和再分化過程中所使用的培養(yǎng)基中的細胞分裂素與生長素的比例不同。（4）圖中③過程愈傷組織經(jīng)過再分化形成再生植株，這一過程利用的細胞原理是：植物細胞的全能性。物體細胞雜交技術(shù)的優(yōu)點有：克服遠緣雜交不親和的障礙。23.2018年1月25日報道，兩只克隆獼猴“中中”和“華華”在中國誕生，突破了現(xiàn)有技術(shù)無法克隆靈長類動物的世界難題，將為阿爾茨海默癥、自閉癥等腦疾病帶來前所未有的光明前景，圖為過程流程圖，請回答下列有關(guān)問題：（1）動物細胞培養(yǎng)一般分為_____________和傳代培養(yǎng)兩個階段過程。在前一階段，貼壁的細胞會出現(xiàn)_____________象，所以要進行傳代培養(yǎng)。（2）①表示去除細胞核，該過程一般要在卵母細胞培養(yǎng)至______________時期再進行，目前使用的去核方法是_____________。②表示______________。（3）回答下列關(guān)于利用單克隆抗體技術(shù)制備單克隆抗體的相關(guān)問題：①B淋巴細胞不能直接用于抗體大規(guī)模生產(chǎn)，原因是_____________，將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞混合；通過______________（答三種）等方式誘導(dǎo)細胞融合，可以獲得雜交瘤細胞。②體外培養(yǎng)雜交瘤細胞時，除了無菌、營養(yǎng)條件、適宜的溫度和pH，還需要保證氣體環(huán)境，其中需要的氣體主要有O2和CO2，培養(yǎng)箱中CO2濃度為5%其作用是_____________。（4）常見的病毒疫苗有滅活疫苗、蛋白疫苗和重組疫苗等。已知某種病毒的特異性蛋白S（具有抗原性）的編碼序列（目的基因）。為了制備蛋白疫苗，可以通過基因工程技術(shù)獲得大量蛋白S。該基因工程的基本操作流程是_____________?！即鸢浮剑?）①.原代培養(yǎng)

②.接觸抑制（2）①.MⅡ（減數(shù)第二次分裂中）②.顯微操作去核法③.胚胎移植（3）①.B淋巴細胞不能無限增殖

②.聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒、電激

③.維持培養(yǎng)液的pH

（4）獲取目的基因→基因表達載體的構(gòu)建(基因工程的核心)→將目的基因?qū)胧荏w細胞→目的基因的檢測與鑒定?！枷榻狻?、克隆動物的概念：動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體，用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。2、分析題圖：①表示去除細胞核；A為重組細胞，②代表胚胎移植。（1）動物細胞培養(yǎng)過程分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩個階段，原代培養(yǎng)是指從供體獲取組織或細胞后的初次培養(yǎng)，將原代培養(yǎng)的細胞分離稀釋后轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)，原代培養(yǎng)貼壁的細胞會出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象，所以要進行傳代培養(yǎng)。（2）過程①表示去除細胞核，該過程一般要在卵母細胞培養(yǎng)至MII(減數(shù)第二次分裂中)時期再進行。目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作去核法，還有人采用其他方法，如梯度離心，紫外光短時間照射，化學(xué)物質(zhì)處理等；②表示胚胎移植。（3）①B淋巴細胞不能直接用于抗體的大規(guī)模生產(chǎn)，原因是B淋巴細胞不能無限增殖，將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞混合；通過聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒、電激等方式誘導(dǎo)細胞融合，可以獲得雜交瘤細胞。②體外培養(yǎng)雜交瘤細胞時，除了無菌、營養(yǎng)條件、適宜的溫度和pH，還需要保證氣體環(huán)境，其中需要的氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。（4）基因工程的基本操作流程是:獲取目的基因→基因表達載體的構(gòu)建(基因工程的核心)→將目的基因?qū)胧荏w細胞→目的基因的檢測與鑒定。24.青島業(yè)大學(xué)科研人員從一只成年雌性森林貓皮膚組織中分離培養(yǎng)得到成纖維細胞，將該細胞的細胞核移入中華田園貓卵子，經(jīng)人工激活后獲得多枚體細胞克隆胚胎。將克隆胚胎移植到受體母貓中，經(jīng)過62天孕育，成功得到一只森林貓體細胞克隆后代。請回答下列相關(guān)問題：（1）從成年雌性森林貓皮膚組織中分離成纖維細胞，需在皮膚組織中添加_____________酶。作為細胞核受體的卵子應(yīng)是_______________，去核的“核”實質(zhì)上是_______________，用顯微注射法將供體細胞核導(dǎo)入該細胞后形成重組細胞，由此培育成的森林貓體細胞克隆后代的性別是______________。哺乳動物體細胞核移植的難度大于胚胎細胞核移植，原因是_____________。（2）貓泛白細胞減少癥也叫貓瘟熱，該病是由貓泛白細胞減少癥病毒引起的貓（特別是幼齡貓）的一種發(fā)熱性高度接觸性、致死性傳染病，而抗貓泛白細胞減少癥病毒單克隆抗體的應(yīng)用會大大降低該病毒引起的死亡率。下圖為用小鼠制備該單克隆抗體的簡圖，若甲細胞為小鼠骨髓瘤細胞，則乙細胞為_______________。與植物細胞融合相比，圖示甲、乙細胞融合的過程中特有的誘導(dǎo)劑是_______________。①②篩選的目的分別是_____________?！即鸢浮剑?）①.胰蛋白（或膠原蛋白）②.去核的MⅡ中期卵母細胞③.紡錘體-染色體的復(fù)合物④.雌性⑤.動物體細胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難（2）①.已免疫小鼠的B淋巴細胞②.滅活的病毒③.通過①篩選獲得雜交瘤細胞，通過②篩選獲得能產(chǎn)生特異性（專一性）抗體的雜交瘤細胞〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。用核移植的