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經(jīng)典柱色譜技術(shù)
——凝膠柱色譜法基礎(chǔ)知識(shí)江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院動(dòng)物藥學(xué)院儀器分析技術(shù)主要內(nèi)容凝膠柱色譜法定義12分離原理儀器分析技術(shù)4流動(dòng)相固定相3一、凝膠柱色譜法定義
也稱(chēng)空間排阻色譜、分子排阻色譜,是按分子尺寸的差異進(jìn)行分離的一種液相色譜方法。凝膠色譜柱儀器分析技術(shù)二、分離原理
凝膠的孔穴大小與被分離組分大小相當(dāng),尺寸大的組分分子可以滲入到凝膠的大孔內(nèi),但進(jìn)不了小孔,甚至于完全被排斥先流出色譜柱。尺寸小的組分分子,大孔小孔都可以滲進(jìn)去,最后流出。
儀器分析技術(shù)三、固定相1、無(wú)機(jī)凝膠(硬質(zhì)凝膠)——多孔硅膠、多孔玻璃珠性能:化學(xué)惰性、穩(wěn)定性及機(jī)械強(qiáng)度均好,耐高溫,使用壽命長(zhǎng),但裝柱時(shí)易碎,不易裝緊,柱分離效能較低。2、有機(jī)凝膠(半硬質(zhì)凝膠)——聚苯乙烯凝膠
性能:能耐較高壓力,適用于有機(jī)溶劑作流動(dòng)相,有一定可壓縮性,可填得緊密,柱分離效能較高。但在有機(jī)溶劑中有輕度膨脹。3、新型凝膠---葡聚糖凝膠
性能:粒度細(xì),機(jī)械強(qiáng)度高,分離速度快。儀器分析技術(shù)四、流動(dòng)相1、要求流動(dòng)相必須與凝膠本身非常相似,能溶解樣品,浸潤(rùn)凝膠,且具有較低的黏度,有利于大分子的擴(kuò)散。2、選用方法水溶性樣品——水溶液為流動(dòng)相非水溶性樣品——有機(jī)溶劑為流動(dòng)相3、常用的流動(dòng)相四氫呋喃、甲苯、N,N-二
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