育苗室管理-細(xì)菌與真菌的防治方法（植物組織培養(yǎng)技術(shù)課件）

細(xì)菌與真菌污染的識別及引起的可能原因

一、細(xì)菌污染的識別一、細(xì)菌污染的識別一、細(xì)菌污染的識別細(xì)菌污染是附著在培養(yǎng)基表面或者在植物的根部散發(fā)出來，細(xì)菌污染的特點是呈粘液狀附著在培養(yǎng)基表面，或者是植物基部呈云霧狀散發(fā)出來，表現(xiàn)形式不明顯，細(xì)菌污染是不會隨風(fēng)飄揚。一、細(xì)菌污染的識別及特點以這瓶瓶苗為例，大家看到這瓶組培苗，看上去植物生長良好，但是仔細(xì)觀察就會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面有一層白色的粘液狀物質(zhì)，這種就是細(xì)菌污染。一、細(xì)菌污染的識別-實例介紹以這瓶瓶苗為例，大家看到這瓶組培苗，看上去植物生長良好，但是仔細(xì)觀察就會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面有一層白色的粘液狀物質(zhì)，這種就是細(xì)菌污染。一、細(xì)菌污染的識別-實例介紹一、細(xì)菌污染的識別-實例介紹又比如這瓶瓶苗，表面看上去沒有任何問題，從底部就會觀察到，植物的基部有云霧狀的物質(zhì)出現(xiàn)，這個也是細(xì)菌污染。一、細(xì)菌污染的識別-實例介紹二、真菌污染的識別二、真菌污染的識別二、真菌污染的識別二、真菌污染的識別真菌污染是在培養(yǎng)基表面有毛狀的菌絲狀物附著在培養(yǎng)基表面，表現(xiàn)為白色、黑色、灰色等不同顏色，表現(xiàn)形式明顯，真菌污染的孢子菌會隨風(fēng)飄揚，所以在組培室中如果有真菌污染是不能打開瓶蓋的，以免影響環(huán)境。二、真菌污染的識別及特點下面我們來看這瓶蝴蝶蘭瓶苗，表面有明顯的白色毛狀物出現(xiàn)，這種就是真菌污染，這種孢子菌已經(jīng)充滿了整個組培瓶，會隨風(fēng)飄揚，所以這種污染在培養(yǎng)室或者接種室是不能打開的二、真菌污染的識別-實例介紹這瓶蝴蝶蘭瓶苗，被黑色的孢子菌充滿了整個瓶內(nèi)，瓶內(nèi)大部分蝴蝶蘭小苗由于養(yǎng)分喪失而死亡。二、真菌污染的識別-實例介紹三、細(xì)菌污染引起的可能原因1、接種工具消毒不徹底或者在操作時與接觸到細(xì)菌源的工具交叉感染。三、引起原因細(xì)菌污染引起的可能原因2、滅菌后的培養(yǎng)基存放的地方環(huán)境差，在培養(yǎng)基冷卻的過程中感染細(xì)菌三、引起原因細(xì)菌污染引起的可能原因3、母瓶帶菌或者植物消毒不徹底會導(dǎo)致子瓶全部細(xì)菌感染四、引起真菌污染的可能原因首先我們要考慮培養(yǎng)基的制備和儲存是否合適，如果我們的培養(yǎng)基消毒沒有過關(guān)，也就是沒有在121℃溫度下消毒20分鐘，會帶來大量的真菌污染。四、引起真菌污染的可能原因或者在培養(yǎng)基制備完成后存放的地點沒有按照冷凝室的標(biāo)準(zhǔn)：濕度太大或者環(huán)境衛(wèi)生太差，也會帶來大量的真菌污染。引起真菌污染的可能原因其次我們要考慮環(huán)境問題，環(huán)境問題包括這樣兩個方面：第一，環(huán)境衛(wèi)生是否干凈，如果我們的環(huán)境太臟，灰塵太多就會加大我們組培苗的污染概率，因為我們的真菌是以灰塵為載體進(jìn)入到培養(yǎng)基里面，從而導(dǎo)致污染的。引起真菌污染的可能原因第二個環(huán)境問題是如果我們組培室濕度很大也導(dǎo)致污染率急劇增加，因為濕度大灰塵的穿透力會更強(qiáng)，灰塵會從棉花或者瓶沿進(jìn)入到培養(yǎng)瓶中，從而導(dǎo)致污染，這是環(huán)境可能導(dǎo)致污染的兩個方面。引起真菌污染的可能原因第二個方面是操作人員在操作過程中沒有按照我們的無菌操作步驟來進(jìn)行操作，導(dǎo)致污染。引起真菌污染的可能原因第三個會導(dǎo)致污染率上升的原因是操作人員人為因素，主要是兩個方面：一是準(zhǔn)備工作做得不夠好，導(dǎo)致從外界帶入污染源，比如衣物不整潔，留長指甲，進(jìn)入組培室前沒有洗手，或者操作時沒有穿白大褂、沒有帶帽等。引起真菌污染的可能原因第四個重要的原因是我們的母瓶帶入污染，在組培過程中如果我們的母瓶有污染，再去操作，其接種的子瓶會全部污染。引起真菌污染的可能原因最后還有一點是接種工具交叉污染也是污染的一個重要原因，如果接種工具或者接種盤污染了，所接觸到的瓶苗會全部污染細(xì)菌與真菌污染的防治方法及對策首先，我們必須要嚴(yán)格把控好培養(yǎng)基制作的過程和質(zhì)量，培養(yǎng)基消毒要徹底。一、細(xì)菌與真菌污染的防治方法消毒好的培養(yǎng)基要存放到指定的房間，并對房間定期消毒處理，控制房間內(nèi)的濕度不要過大，這樣才能保證我們培養(yǎng)基的安全。一、細(xì)菌與真菌污染的防治方法第二，我們要對操作人員進(jìn)行嚴(yán)格培訓(xùn)，人員培訓(xùn)包括這樣兩個方面：首先是對人員的準(zhǔn)備工作進(jìn)行培訓(xùn)，在進(jìn)入到組培室前要洗手、要更衣，平時要勤剪指甲，勤洗頭等。一、細(xì)菌與真菌污染的防治方法其次要培訓(xùn)她們的無菌意識，就是在整個操作過程中都要嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，這樣才能有效降低污染。這是對人員操作的兩點要求。一、細(xì)菌與真菌污染的防治方法第三，對我們的環(huán)境要嚴(yán)格把控：我們的環(huán)境主要從以下三個方面來加強(qiáng):首先是衛(wèi)生環(huán)境要干凈，我們的育苗室和組培室要盡可能少雜物、少灰塵，定期清掃，另外，不要帶入有異味的食品或物品，這樣就能降低我們的污染概率。一、細(xì)菌與真菌污染的防治方法其次是控制好育苗室和接種室的空氣濕度，控制在一定范圍內(nèi)，一般不要超過60%，這樣能很好的控制污染率。一、細(xì)菌與真菌污染的防治方法同時要對我們的環(huán)境定期消毒，消毒的方法有多種：甲醛消毒、硫磺粉熏蒸，臭氧消毒、75%酒精消毒。但是甲醛消毒和硫磺粉熏蒸會給操作人員帶來傷害，我們建議用臭氧熏蒸結(jié)合75%酒精消毒有很好的效果。這樣既達(dá)到消毒目的，又對人員不會有傷害。一、細(xì)菌與真菌污染的防治方法第四，嚴(yán)格控制母瓶，污染的母瓶一定不可直接操作，帶菌的母瓶直接操作會給子瓶帶來感染。一、細(xì)菌與真菌污染的防治方法污染的母瓶要及時清理開，母瓶污染主要分為真菌和細(xì)菌兩種，對于真菌污染，通常比較好發(fā)現(xiàn)，而對于細(xì)菌污染，有時候比較隱蔽，對于不易觀察的細(xì)菌污染我們可以對著燈光觀察瓶的底部，看是否有粘液狀的物質(zhì)會云霧狀的物質(zhì)附著在表面。一、細(xì)菌與真菌污染的防治方法二、細(xì)菌和真菌污染采取的對策-真菌污染一、操作過程中：在操作過程中如果是真菌污染，我們需要馬上將瓶蓋蓋回去，我們所有的工具需要重新消毒，機(jī)臺要重新擦拭，才能繼續(xù)下面的操作。二、細(xì)菌和真菌污染采取的對策-細(xì)菌污染操作過程中：如果是細(xì)菌污染，只需要蓋回瓶蓋，工具重新消毒就可以繼續(xù)操作了。二、細(xì)菌和真菌污染采取的對策-真菌污染二、操作完成后：對于真菌污染有兩種方式，將污染苗在無菌水中浸泡后再接種到新的培養(yǎng)基中，這種方法適合于剛剛發(fā)現(xiàn)污染情況，感染程度輕，這種方法只能一段時間緩解，不能徹底根除，需要及時轉(zhuǎn)接。二、細(xì)菌和真菌污染采取的對策-真菌污染二、操作完成后：第二種方式就是對污染進(jìn)行重新消毒處理，只是處理的時間要把控好，處理輕了達(dá)不到消毒的目的，處理重了會傷害小苗。二、細(xì)菌和真菌污染采取的對策-細(xì)菌污染操作完成后：對于細(xì)菌污染，我們目前使用較為有效的方法是使用抗生素抑制，這種方法能夠?qū)?xì)菌污染起到一定的抑制作用。二、細(xì)菌和真菌污染采取的對策-細(xì)菌污染操作完成后：但是這種方法的特點是種苗對抗生素會有依賴性